Применение нового натурального агента в косметических композициях

Применение нового натурального агента в косметических композициях

Реферат

Область техники

Объектом настоящего изобретения является применение нового натурального агента в косметических композициях, а также в дерматологических композициях.

Уровень техники

Маннопротеины представляют собой маннаны, связанные с белками, которые содержатся, в частности, в стенке дрожжей, где они выполняют структурную и/или антигенную функцию.

Маннопротеины широко используются в энологии, в частности, для стабилизации вина (см., например, документы WO 96/013571, WO 01/046380 и WO 06/067147). Применение маннопротеинов для уменьшения мутности алкогольных напитков описано в заявке WO 07/034986.

В заявке на патент ЕР 0790316 маннопротеины используются в качестве эмульгатора в напитках и пищевых продуктах.

В заявке на патент WO 01/066574 маннопротеины cryptococcus neoformans используются для получения лекарственного средства, предназначенного для лечения воспалительных или инфекционных заболеваний путем систематического применения. В этом случае маннопротеины тормозят миграцию нейтрофилов.

Кроме того, маннопротеины описаны как добавки к активным веществам, т.е. в качестве соединения, позволяющего улучшать или усиливать лечебный эффект активных веществ.

Так в международной заявке US 2005/0226822 маннопротеины используются в качестве добавки к овомуцину в композициях для ухода за полостью рта.

В международной заявке WO 06/036817 описано применение маннопротеинов в качестве добавки в фармацевтической композиции, содержащей клетки или экстракты клеток генномодифицированного грибка для получения по меньшей мере одного измененного филаментарного свойства. Иммуногенные свойства маннопротеинов используются для улучшения иммунного ответа композиции. Эта заявка основывается на принципе вакцинации против грибковых инфекций, вызываемых, в частности, грибками рода candida.

В заявке на патент US 2005/0191268 маннопротеины используются в качестве добавки к полифенолам в косметических составах, содержащих экстракт остатка при производстве вина и одну или несколько косметических добавок или вспомогательных средств. Этот остаток представляет собой осадок, остающийся на дне чанов после откачки вина по окончании брожения. Этот экстракт остатка содержит один или несколько полифенолов и один или несколько белков, например, маннопротеины, в качестве ассоциированного комплекса.

В области косметики целесообразно использование многофункциональных агентов, позволяющих, в частности, уменьшать многообразие сырья, необходимого для получения разных косметических композиций и/или упрощения способа получения косметических продуктов.

К тому же потребители предпочитают натуральные косметические продукты, содержащие компоненты природного происхождения. Таким образом, целесообразным является использование натуральных функциональных агентов для получения косметических продуктов.

Краткое описание изобретения

Объектом настоящего изобретения является получение нового натурального многофункционального агента, пригодного для использования в области косметики и дерматологии.

Объектом изобретения являются также новые косметические или дерматологические композиции.

Другой объект изобретения относится к способу косметической или дерматологической обработки кожи и/или придатков кожи.

Объектом настоящего изобретения является косметическая или дерматологическая композиция, содержащая маннопротеины в качестве активного вещества и/или в качестве добавки.

Изобретение основано на том, что было обнаружено, что маннопротеины являются на самом деле активными веществами как таковыми, при этом нет необходимости ассоциировать их с другими компонентами, в частности, при топическом нанесении в косметических и/или дерматологических композициях.

Изобретение также основано на том, что было обнаружено, что в этих косметических и/или дерматологических композициях маннопротеины обладают также текстурирующим эффектом, что может преимущественно использоваться.

Подробное описание вариантов осуществления

Объектом настоящего изобретения, в частности, является косметическая или дерматологическая композиция, содержащая маннопротеины в качестве активного вещества и/или в качестве добавки, отличающаяся тем, что она не содержит полифенолов.

Объектом настоящего изобретения, в частности, является композиция, такая как определено выше, отличающаяся тем, что маннопротеины происходят из дрожжей, в частности, дрожжей рода Saccharomyces, Kluyveromyces, Torula или Candida, предпочтительно Saccharomyces.

Объектом настоящего изобретения, в частности, является композиция, такая как определено выше, отличающаяся тем, что маннопротеины происходят из Saccharomyces cerevisae.

Под «косметической композицией» понимают композицию, предназначенную для достижения косметического эффекта в рамках топического нанесения.

Под «дерматологической композицией» понимают композицию, предназначенную для достижения лечебного топического эффекта.

В обоих случаях композиция содержит, кроме того, воду и маннопротеины, совокупность соединений (в частности, эксципиентов и добавок), необходимых для косметического или дерматологического использования, так что специалист сможет это оценить.

Термин «топический» указывает на то, что композиция является активной в месте, на которое ее наносят: на коже, придатках кожи или на слизистых оболочках. Композиция по изобретению может одновременно воздействовать на поверхностные слои эпидермиса, на эпидермис и/или дерму.

Объектом настоящего изобретения, в частности, является косметическая или дерматологическая композиция, такая, как указано выше, предназначенная для нанесения на кожу и/или на придатки кожи, за исключением слизистых.

Термин «придатки кожи» обозначает главным образом все, что покрывает тело и, в частности, волосы, ногти, волосы на теле, ресницы.

Термин «кожа» охватывает кожу головы.

Маннопротеины по изобретению получают традиционными способами, хорошо известными специалисту.

В частности, маннопротеины экстрагируют из стенки клеток грибов, в частности, из клеточной стенки дрожжей.

Маннопротеины можно экстрагировать из клеточной стенки путем селективного растворения маннопротеинов посредством гидролиза химическим, ферментативным или физико-химическим путем. Предпочтительно селективное растворение происходит под действием температуры.

Нерастворимую фракцию удаляют, а растворенную фракцию, содержащую маннопротеины, извлекают. Затем маннопротеины растворимой фракции можно осаждать или концентрировать и возможно сушить.

Предпочтительно стадию очистки маннопротеинов проводят после отделения нерастворимой фракции.

Способ получения растворимых маннопротеинов описан, например, в заявке на патент EP 1094117 на имя заявителя или в WO-A-96/13571 и WO-A-97/49794.

Можно использовать исходный продукт любого типа и, в частности, штаммы дрожжей. В частности, маннопротеины происходят из Saccharomyces, Kluyveromyces, Torula или Candida. Предпочтительным является Saccharomyces, в частности, cerevisiae.

Более конкретно объектом настоящего изобретения является косметическая или дерматологическая композиция, такая как определено выше, в которой маннопротеины экстрагируют из клеточной стенки дрожжей, причем указанные дрожжи не имели никакого применения до указанного экстрагирования маннопротеинов.

Косметические или дерматологические композиции по изобретению можно получать с использованием маннопротеинов в сухом виде, в частности, в виде порошка или в виде раствора, например, водного раствора.

Косметическая или дерматологическая композиция по изобретению содержит по меньшей мере одно соединение в качестве активного вещества, по меньшей мере одно соединение в качестве добавки и по меньшей мере одно соединение в качестве эксципиента, причем одно и то же соединение может иметь несколько применений.

«Активное вещество» или «активное начало» или «действующее вещество» здесь означает вещество, ответственное за косметический эффект в случае косметической композиции или ответственное за лечебный эффект в случае дерматологической композиции.

«Добавка» означает агент, который играет в косметической или дерматологической композиции роль консерванта, хелатоообразователя, красителя, УФ-фильтра (обеспечивающего защиту сырья), регулятора pH (кислый или щелочной), текстурирующего агента, отдушки и/или окислителя.

«Защищаемое сырье» означает любой компонент косметической или дерматологической композиции, способный разлагаться на свету.

«Эксципиент» означает гидрофильные соединения, образующие водную фазу, гидрофобные соединения, образующие жирную фазу, или поверхностно-активные вещества.

Гидрофильные соединения водной фазы выбирают, в частности, из воды, спиртов и многоатомных спиртов.

Гидрофобные соединения жирной фазы выбирают, в частности, из углеводородов, жирных кислот, сложных эфиров, глицеридов, церидов, фосфатидов и силиконов.

Поверхностно-активные вещества представляют собой амфифильные молекулы, способные удерживать вместе две обычно несмешиваемые между собой среды, понижая межфазное напряжение. Поверхностно-активные вещества являются ионными (анионными, катионными или амфотерными) или неионными.

Маннопротеины являются, таким образом, новым природным многофункциональным агентом, особенно пригодным для получения косметических или дерматологических композиций.

Косметическая или дерматологическая композиция по изобретению не содержит полифенола. В частности, композиция по изобретению не содержит дигидроксибензола, пирогаллола, флороглуцинола, антоцианидина, проантоцианидина, флавона, катехина, танина.

Объектом настоящего изобретения также является косметическая или дерматологическая композиция, такая, как определено выше, отличающаяся тем, что она не содержит овомуцина.

Косметическая или дерматологическая композиция по изобретению может содержать кроме маннопротеинов, таких как определено выше, другие компоненты дрожжей.

Объектом настоящего изобретения также является косметическая или дерматологическая композиция, такая, как определено выше, отличающаяся тем, что она не содержит филаментарных грибков, обладающих измененным филаментарным свойством, в частности, в следствии изменения гена, кодирующего белок CRV1, ни клеточного экстракта указанных филаментарных грибков.

В другом предпочтительном варианте осуществления объектом настоящего изобретения является косметическая или дерматологическая композиция, такая, как определено выше, отличающаяся тем, что она не содержит никакого компонента, экстрагированного из грибковых клеток, кроме маннопротеинов.

В частности, объектом настоящего изобретения является косметическая или дерматологическая композиция, такая, как определено выше, в которой указанное активное вещество имеет увлажняющий эффект, и/или эффект придания упругости, и/или эффект против старения, и/или противосеборейный эффект, и/или эффект против угрей, и/или эффект восстановления волос, и/или придает блеск и/или мягкость, и/или способствует росту волос.

Выражение «увлажняющий эффект» означает уменьшение испарения с кожи посредством феномена окклюзии или фиксации воды активным веществом, увлажняющий или гигроскопический эффект активного вещества и/или свойство фиксировать жирные тела межклеточным цементом.

Увлажняющий эффект композиции по изобретению является результатом, в частности на уровне эпидермиса, активации липидного синтеза, в частности, фосфолипидов и нейтральных липидов и синтеза гиалуроновой кислоты.

Увлажняющий эффект композиции по изобретению можно выявить in vitro путем изучения липидного синтеза и синтеза гиалуроновой кислоты кераноцитами, как описано в Примере 1.

Увлажняющий эффект композиции по изобретению выражается также в действии против перхоти при применении на коже головы.

Эффект против перхоти можно определить по уменьшению количества перхоти у пациента, применяющего композицию по изобретению, например, как описано в Примере 3.

Выражение «эффект придания упругости» означает, что кожа имеет гладкий и подтянутый вид в результате ее механической поддержки, в частности, волокнами коллагена и эластина.

Композиция по изобретению позволяет, в частности, улучшать сокращение коллагенового каркаса, активизировать синтез эластина и созревание коллагена.

Коллагеновый каркас представляет собой переплетение волокон или волоконец коллагена.

Эффект придания упругости композиции по изобретению можно выявить in vitro, как описано в примере 1.

Выражение «эффект против старения» или «антивозрастной эффект» означат одновременно предупредительный эффект для замедления появления признаков старения кожи и немедленный эффект для уменьшения признаков старения. Композиция по изобретению обладает, в частности, эффектом против старения, связанного с возрастом, но может также действовать против фотоиндуцированного старения.

Видимыми признаками старения кожи, связанными с возрастом, являются сухость кожи, появление мелких морщин, морщин, истончение кожи, а также потеря эластичности кожи.

Старение кожи, связанное с возрастом, также выражается уменьшением количества коллагена, его растворимости и его синтеза, уменьшением количества эластина и микроволокон, уменьшением гликозаминогликанов и инактивацией фибробластов.

Эффект против старения композиции по изобретению, является в частности, результатом повышения пролиферации фибробластов дермы и их активности в отношении синтеза коллагена и гликозаминогликанов.

Эффект против старения, связанного с возрастом, можно выявить in vitro путем усиления синтеза коллагена и гликозаминогликанов фибробластами дермы, как описано в примере 1.

Признаками фотоиндуцированного старения кожи является, в частности, появление глубоких морщин, плотной и шершавой кожи.

Фотоиндуцированное старение кожи выражается, в частности, в уменьшении количества и растворимости коллагена, увеличении количества эластина и микроволокон, увеличении количества гликоаминогликанов, увеличении количества воспаленных клеток.

Объектом настоящего изобретения также является косметическая или дерматологическая композиция, такая, как определено выше, отличающаяся тем, что активное вещество обладает эффектом рубцевания, особенно пригодным для заживления ран и/или ожогов. Эффект рубцевания маннопротеинов связан, в частности, с активацией синтеза гиалуроновой кислоты.

Выражение «противосеборейный эффект» означает эффект регуляции секреции сальных желез, регуляции адсорбции кожного сала и/или стягивающее действие, позволяющее сужать поры кожи.

Композиция по изобретению позволяет уменьшать секрецию кожного сала.

Композиция по изобретению позволяет, в частности, регулировать абсорбцию кожного сала путем липидной абсорбции.

Композиция по изобретению, таким образом, особенно пригодна в рамках гиперсебореи лица и/или гиперсебореи кожи головы, выражающейся в так называемых «жирных» волосах.

Косметическая композиция по изобретению имеет антисеборейный эффект, пригодный в отношении жирной и/или имеющей тенденцию к образованию угрей кожи.

Выражение «эффект против угрей» означает благоприятное действие в отношении угрей.

В частности, благоприятное действие в отношении угрей дерматологической композиции по изобретению связано с регуляцией секреции сальных желез.

«Восстанавливающий эффект» означает получение гладкого вида волос. Внешний слой волоса, называемый кутикулой, состоит из чешуек, которые перекрывают друг друга. Восстанавливающий эффект выражается в гладком рельефе кутикулы, тогда как поврежденные волосы имеют неровный рельеф.

Композиция по изобретению создает, в частности, эффект покрытия волоса оболочкой.

Эффект восстановления волос можно определить измерением топографии волос, как описано в примере 3.

«Эффект блеска» означает способность волос отражать свет и придавать волосам светящийся вид.

«Эффект придания мягкости» означает ощущение мягкости волос при прикосновении.

«Эффект, способствующий росту волос» означает повышение кинетики роста волос.

Эффект, способствующий росту волос, можно выявить при помощи теста на измерение кинетики роста волос, такого как описан в примере 3.

Более конкретно объектом изобретения является косметическая или дерматологическая композиция, такая как определена выше, в которой указанная добавка имеет текстурирующий эффект.

«Текстурирующий агент» означает агент, способный повышать вязкость водных фаз, в которых он диспергирован, при этом повышение является существенным.

Текстурирующий агент в зависимости от применения может быть загустителем и/или гелеобразующим средством.

«Загуститель» означает вещество, которое позволяет получать вязкий раствор без образования трехмерной сетки в противоположность гелеобразующим средствам.

Косметическая или дерматологическая композиция по изобретению может содержать несколько активных веществ, добавок и/или эксципиентов.

Объектом настоящего изобретения является также косметическая или дерматологическая композиция, такая как определено выше, в которой маннопротеины используются в качестве активного вещества и добавки.

В предпочтительном варианте осуществления маннопротеины одновременно дают косметический или дерматологический эффект и текстурирующий эффект.

Объектом настоящего изобретения в частности является косметическая или дерматологическая композиция, такая как определено выше, в которой маннопротеины также присутствуют в качестве поверхностно-активных веществ, более конкретно в качестве эмульгатора.

«Эмульгатор» означает поверхностно-активное вещество, которое входит в состав эмульсии, при этом указанная эмульсия также содержит липофильную фазу и гидрофильную фазу. Эмульсии представляют собой дисперсии жидкости в другой жидкости, при этом обе жидкости не смешиваются друг с другом.

Объектом настоящего изобретения является косметическая или дерматологическая композиция, такая как определено выше, содержащая маннопротеины в качестве активного вещества и в качестве эксципиента.

Объектом настоящего изобретения является косметическая или дерматологическая композиция, такая как определено выше, содержащая маннопротеины в качестве добавки и эксципиента.

Объектом настоящего изобретения также является косметическая или дерматологическая композиция, такая как определено выше, содержащая маннопротеины в качестве активного вещества, добавки и эксципиента.

В соответствии с другим вариантом осуществления изобретения маннопротеины не являются экципиентом в косметической или дерматологической композиции. В частности объектом настоящего изобретения является косметическая или дерматологическая композиция, такая как определено выше, в которой маннопротеины не являются поверхностно-активными веществами и в частности не являются эмульгатором.

Объектом настоящего изобретения также является косметическая или дерматологическая композиция, такая как определено выше, в виде раствора (фаза), дисперсии (в частности, эмульсия, суспензия, пена или аэрозоль), геля, масла, карандаша, порошка, подъязычных таблеток или пластыря.

«Эмульсия» означает любой тип эмульсии и, в частности, макро-эмульсию, микро-эмульсию, нано-эмульсию, простую эмульсию, сложную эмульсию.

Эмульсии представляют собой дисперсии одной жидкости в другой жидкости, причем обе жидкости являются несмешиваемыми. Эмульсии содержат липофильную, гидрофильную фазу и эмульгатор.

Из эмульсий можно, в частности, назвать молоко, лосьоны, кремы и т.д.

Нано-эмульсии представляют собой дисперсии, размер диспергированных частиц которых меньше 1000 нм в диаметре, в частности от 10 нм до 100 нм.

Микро-эмульсии представляют собой дисперсии, размер диспергированных частиц которых меньше 1000 мкм в диаметре, в частности от 10 мкм до 100 мкм.

Нано-эмульсии и микро-эмульсии образуют прозрачные среды.

Косметическая или дерматологическая композиция по изобретению является, в частности, пригодной для нанесения на кожу или волосы.

Композиция по изобретению для нанесения на волосы представляет собой, в частности, шампуни, лосьоны, маски, спреи.

Объектом настоящего изобретения является композиция, такая как определено выше, содержащая от 0,01% до 20% маннопротеинов, в частности, от 0,01% до 15% маннопротеинов, в частности от 0,01% до 10% маннопротеинов, более конкретно от 0,01% до 3% маннопротеинов.

Проценты выражены в мас/мас.

Объектом настоящего изобретения является композиция, такая как определена выше, содержащая от 0,01% до 3% маннопротеинов, в частности от 0,01% до 2% маннопротеинов в качестве активного вещества.

Объектом настоящего изобретения является композиция, такая как определена выше, содержащая от 0,01% до 20% маннопротеинов, в частности, от 1% до 20% маннопротеинов, в частности от 10% до 20% маннопротеинов, более конкретно от 15% до 20% маннопротеинов в качестве добавки.

Объектом настоящего изобретения также является способ получения косметической или дерматологической композиции, такой как определена выше, содержащий стадию смешивания маннопротеинов с приемлемым косметическим или дерматологическим наполнителем.

Приемлемый косметический или дерматологический наполнитель в частности выбирают из добавок и/или эксципиентов, указанных выше.

Объектом настоящего изобретения также является способ получения косметической или дерматологической композиции, такой как определена выше, включающий стадию смешивания маннопротеинов с приемлемым косметическим или дерматологическим наполнителем и по меньшей мере с одним активным веществом, не являющимся маннопротеином.

Объектом настоящего изобретения является способ косметической обработки, включающий стадию приведения в контакт с кожей и/или придатками кожи косметической композиции, такой как определена выше, или такой, которую получают способом, определенным выше.

Далее в тексте «приведение в контакт» называется также «нанесением».

Способ обработки может включать от одного до нескольких нанесений в день, предпочтительно от одного до трех нанесений в день.

Частота нанесений косметической композиции может сокращаться в процессе обработки.

Способ косметической обработки может заключаться в кратковременной обработке, от одной до нескольких недель, или долговременной обработке в течение нескольких лет. Способ обработки может также представлять собой курсы лечения, повторяемые каждый год или несколько раз в год.

Объектом настоящего изобретения является способ косметической обработки, такой как определен выше, предназначенный для увлажнения эпидермиса, придания упругости дерме, борьбы со старением кожи, регуляции секреции кожного сала, восстановления волос и/или усиления роста волос.

Увлажнение эпидермиса предназначено одновременно для восстановления качества кожного барьера, а именно непроницаемости, ограничивающей испарение воды, и обеспечения присутствия молекул, связывающих воду, в частности, гликозаминогликанов, в том числе гиалуроновой кислоты.

Способ косметической обработки по изобретению особенно пригоден для лечения и/или предупреждения сухости кожи и перхоти.

Придание упругости дерме предназначено для поддержания или усиления упругости дермы, в частности, путем активизации синтеза эластина, синтеза и созревания коллагена и сжатия коллагенового каркаса.

Борьба со старением кожи заключается в замедлении и/или уменьшении признаков старения.

В преимущественном способе осуществления изобретения обработка, предназначенная для борьбы со старением кожи, проводится совместно с увлажнением эпидермиса.

Способ косметической обработки по изобретению особенно подходит для лиц старше 20 лет, в частности, старше 30 лет, более конкретно старше 40 лет, в частности, старше 50 лет.

Регуляция секреции кожного сала предназначена в частности для уменьшения секреции кожного сала.

Способ косметической обработки по изобретению особенно пригоден для регуляции себореи жирной кожи, в частности, жирной кожи, называемой «проблемной» или «имеющей тенденцию к образованию угрей» и/или для волос, называемых «жирными».

Укрепление волос заключается в восстановлении волоса, в частности, путем придания гладкости кутикуле волоса и/или придания блеска и/или мягкости волосам.

Способ косметической обработки по изобретению в частности подходит для лиц, волосы которых повреждены, в частности, вследствие нахождения на солнце, на море, слишком частого мытья, окрашивания, прореживания волос, химических завивок и т.д.

Улучшение роста волос предназначено для усиления кинетики роста волос, называемой также ростом волос.

Способ косметической обработки по изобретению в частности подходит для лиц, кинетика роста волос которых является медленной, и/или в случае нормальной потери волос.

Потеря волос, называемая нормальной, соответствует в частности андрогеногенетической алопеции, эндокринной алопеции или алопеции, связанной с возрастом.

В предпочтительном варианте осуществления способ косметической обработки по изобретению пригоден для нанесения на лицо, в частности, вокруг глаз, нос, лоб, подбородок, на тело, в частности, на руки, ноги и спину, на волосы и/или кожу головы.

Объектом настоящего изобретения также являются применение маннопротеинов для получения дерматологической композиции, такой как определена выше или такой, как получают способом получения, указанным выше, предназначенной для лечения и/или предупреждения патологических условий для сухости кожи и/или гиперсебореи и/или угрей и/или потери волос.

Применение, такое как определено выше, предназначено для топического нанесения указанной дерматологической композиции на кожу и/или придатки кожи.

Применение, такое как определено выше, может заключаться в одном или нескольких нанесениях в день, предпочтительно от одного до трех нанесений в день.

Частота нанесений дерматологической композиции может уменьшаться по мере лечения.

Дерматологическое лечение может заключаться в лечении острого состояния от одной до нескольких недель, или в лечении хронического состояния в течение нескольких лет. Лечение может также представлять собой курсы лечения, возобновляемые каждый год или несколько раз в год.

В предпочтительном варианте осуществления дерматологическая композиция содержит маннопротеины в качестве активного вещества в ассоциации по меньшей мере с одним иным активным веществом.

Дерматологическая композиция по изобретению особенно пригодна для лечения патологической сухости кожи, называемой ксерозом, в частности, в случае ихтиоза, сухости кожи, связанной с экземой или с псориазом или патологической сухости кожи головы, связанной в частности с перхотью.

Дерматологическая композиция по изобретению также пригодна для лечения патологической гиперсебореи, в частности, связанной с гормональной дерегуляцией, более конкретно у подростков, у женщин во время беременности или в менопаузе.

Дерматологическая композиция по изобретению также пригодна для лечения патологических угрей, в частности юношеских угрей или угрей, связанных с гиперсебореей.

Дерматологическая композиция по изобретению также пригодна для лечения патологической потери волос, называемой также пеладой, в результате эмоционального стресса, дисфункции щитовидной железы и/или лечения, побочным эффектом которого является облысение (например, противораковое лечение).

В предпочтительном варианте изобретения применение маннопротеинов для получения дерматологической композиции, такой, как определено выше, не предназначено для лечения заболеваний, в которых участвует миграция нейтрофилов, и в частности заболеваний, связанных с IL-8.

Объектом настоящего изобретения также является применение косметической композиции или дерматологической композиции, таких как определены выше, предназначенной для лечения побочного действия или негативных последствий других видов лечения.

Более конкретно указанное побочное действие или негативные проявления другого лечения выражаются сухостью кожи, например, связанной с экземой, гиперсебореей, потерей волос.

Лечением, в результате которого появляются указанные побочное действие или негативные проявления, является, например, лечение заболеваний, в которых участвует миграция нейтрофилов, в частности, лечение воспалительных или инфекционных заболеваний, в которых участвует регуляция IL-8 (интерлейкин 8), fMLP (N-формил-ментионил-лейцил-фенилаланин), PAF (Platelet Activating Factor), C5a (гликопротеин, образующийся при отщеплении N-терминальной части комплемента), TNFα (Tumor Necrosis Factor α), селектин-L.

Объектом настоящего изобретения также является применение маннопротеинов в качестве текстурирующего агента в косметических и/или дерматологических композициях.

Объектом настоящего изобретения также являются композиции, такие как описано выше, в которых маннопротеины присутствуют в комбинации с другим текстурирующим продуктом, в частности, ксантановой смолой. Маннопротеины способны синергически повышать текстурирующий эффект (в частности, способность повышать вязкость) других текстурирующих продуктов и в частности ксантановой смолы. Массовое отношение маннопротеинов к ксантановой смоле от 1:5 до 1:3 дает наилучший синергический эффект. Более предпочтительно это массовое соотношение составляет примерно 1:4.

Изобретение относится также к способам косметической обработки, таким как описано выше, в которых используют эти композиции.

ПРИМЕРЫ

Следующие примеры иллюстрируют изобретение, не ограничивая его.

Пример 1: Свойства маннопротеинов увлажняющие, антивозрастные и придания упругости

Оборудование и способы

(i) Маннопротеины

Маннопротеины, полученные способом, описанным в патенте ЕР 1094117, растворяют в воде и тестируют в концентрации 0,04 мг/мл, 0,08 мг/мл, 0,016 мг/мл и 0,032 мг/мл.

(ii) Увлажняющий эффект

Тесты проводят по нормальным кератиноцитам эпидермиса человека NHEK, высеянным в лунки 96-ти луночного микропланшета в среде KSFM (без сыворотки). Липидная система и система гиалуроновой кислоты оцениваются в присутствии разных концентраций маннопротеинов. По каждому условию готовят три лунки с культурой.

Кальций используют в качестве положительного контрольного образца липидного синтеза и ретиноевую кислоту в качестве положительного контрольного образца синтеза гиалуроновой кислоты.

Отрицательным контрольным образцом является только культурная среда.

Синтез гиалуроновой кислоты оценивают в супернатанте в конце инкубации (72 часа при 37°C с 5% CO₂) путем стандартного количественного анализа ELISA в соответствии с предписаниями изготовителя (R&D Systems DY3614).

Липидный синтез анализируют при помощи формирования изображения на люминисцентной фосфорной пластине (phosphorimaging), а синтез гиалуроновой кислоты оценивают при помощи измерения концентрации свободной гиалуроновой кислоты в среде.

(iii) Антивозрастной эффект

Нормальные фибробласты человеческой дермы (NHDF) и стареющие нормальные фибробласты человеческой дермы (AgNHDF) высевают в лунки 96-ти луночного микропланшета в среде DMEM + 10% SVF. Тесты проводят в среде DMEM+1% SVF. В обе среды также добавляют 2 мМ L-глютамина, 50 UI/мл пенициллина и 50 мкг/мл стрептомицина. Используют SVF (эмбриональная телячья сыворотка), L-глютамин, пенициллин и стрептомицин фирмы Invitrogen. Культуру получают при 37°C и с 5% CO₂. Нормальными фибробластами являются фибробласты пула F2 с 8 переносом, а стареющими фибробластами - фибробласты пула F2 с 18 переносом.

Тест на пролиферацию фибробластов и тест на синтез гликозаминогликана и коллагена проводят в присутствии разных концентраций маннопротеинов. По каждому условию готовят три лунки с культурой.

Отрицательным контрольным образцом является только культурная среда.

Тест на пролиферацию проводят через сутки после высевания клеток. [³H]-тимидин добавляют в культурную среду. EGF используют в качестве положительного контрольного образца.

Синтез гликозаминогликана и коллагена оценивают по клеткам с 80% слияния, к которым добавляют [³H]-гликозамин и [³H]-пролин соответственно. Ретиноевую кислоту используют в качестве положительного контроля.

Через 72 часа с начала инкубации макромолекулы экстрагируют и измеряют инкорпорирование радиоактивных предшественников. В отношении инкорпорирования пролина различают инкорпорирование в супернатант (растворимая фракция) и в межклеточную отложившуюся фракцию.

(iv) Эффект придания упругости

Тесты проводят на нормальных стареющих фибробластах человеческой дермы (AgNHDF).

Синтез и созревание коллагена оценивают после предварительного культивирования клеток в металлических бутылях в течение 8 часов в присутствии разных концентраций маннопротеинов. Отрицательным контрольным образцом является только культурная среда, а положительным контрольным образцом - TGFβ и витамин С. Клетки высевают в камеру с культурой. Непосредственно перед слиянием клетки фиксируют метанолом и присутствие коллагена обнаруживают иммуногистохимией с использованием специфического антитела, направленного против коллагена I и вторичного флуоресцентного антитела. Уровень экспрессии межклеточного и внеклеточного коллагена и его локализацию вокруг матрицы анализируют под микроскопом.

Сокращение коллагенового каркаса оценивают после культивирования клеток в металлической бутыле в течение 8 дней в присутствии разных концентраций маннопротеинов. Отрицательным контрольным образцом является только культурная среда, а положительным контрольным образцом - TGFβ. Полученную клеточную суспензию затем помещают в раствор коллагена I с регулируемым pH. Через несколько часов раствор желатинизируется до получения эквивалентной дермы, контур которой четко определен. Диаметр и количество клеток каждой эквивалентной дермы измеряют в соответствии с определенной кинетикой.

Синтез эластина оценивают после культивирования клеток в металлической бутыле в течение 8 дней в присутствии разных концентраций маннопротеинов. Отрицательным контрольным образцом является только культурная среда, а положительным контрольным образцом - витамин С. Затем клетки высевают в камеру с культурой. Непосредственно перед слиянием клетки фиксируют метанолом и присутствие эластина обнаруживают иммуногистохимией с использованием специфического антитела, направленного против эластина, и вторичного флуоресцентного антитела. Уровень экспрессии эластина анализируют под микроскопом.

(v) Статистические данные

Межгрупповые сравнения проводят путем анализа разницы (ANOVA) при помощи теста на множественное сравнение Dunnett.

Результаты

i) Оценка увлажняющего эффекта на эпидермисе

В присутствии раствора маннопротеинов синтез липидов и гиалуроновой кислоты кератиноцитами активизируется по сравнению с отрицательным контрольным образцом.

В частности, если кератиноциты подвергают воздействию концентрации 0,032 мг/мл маннопротеинов, получают стимуляцию на 151% продуцирования гиалуроновой кислоты по отношению к отрицательному контрольному образцу (тест считается показательным, т.к. значение p ниже 0,05)

ii) Оценка эффекта против старения дермы

В присутствии раствора маннопротеинов наблюдают активизацию пролиферации клеток и увеличение синтеза основных компонентов внеклеточной матрицы (по отношению к отрицательному контрольному образцу).

В частности, получают результаты в отношении синтеза коллагена, представленные ниже на таблице 1.

Таблица 1Синтез коллагена, наблюдаемый в присутствии маннопротеинов (МР)
Условия проведения теста	Изменение синтеза коллагена по отношению к отрицательному контрольному образцу	Значение р
NHDF, 80 мкг/мл МР, измерение в супернатанте	+7%	<0,05
NHDF, 400 мкг/мл МР, измерение в супернатанте	+8%	<0,05
AgNHDF, 16 мкг/мл МР, измерение в супернатанте	+12%	<0,05
AgNHD