Синтетические пептидные амиды

Синтетические пептидные амиды

Иллюстрации

Показать все

Реферат

СВЯЗАННЫЕ ЗАЯВКИ

[0001] Данная заявка претендует на приоритет временной заявки США, серийный номер 60/858,109, поданной 10 ноября 2006 г., и временной заявки США, серийный номер 60/928,550, поданной 10 мая, 2007 г., каждая из которых явно включена в данное описание путем ссылки во всей ее полноте.

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0002] Изобретение относится к синтетическим пептидным амидам, в пептидную цепь которых инкорпорированы D-аминокислоты и, более конкретно, к таким синтетическим пептидным амидам, которые являются агонистами каппа-опиатного рецептора и к способам их применения в качестве профилактических и терапевтических агентов.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0003] Каппа-опиатные рецепторы предложены в качестве мишеней для вмешательства с целью лечения или предотвращения широкого спектра заболеваний и состояний введением агонистов каппа-опиатного рецептора. См., например, Jolivalt et al., Diabetologia, 49(11):2775-85; Epub Aug. 19, 2006), где описана эффективность азимадолина, агониста рецептора каппа при диабетической невропатии у грызунов; и Bileviciute-Ljungar et al., Eur. J. Pharm. 494:139-46 (2004), где описана эффективность агониста каппа U-50,488 на модели невропатической боли в результате хронического ограничения у крыс (CCI) и блокирование его воздействия опиатным антагонистом налоксоном. Эти наблюдения поддерживают применение агонистов каппа-опиатного рецептора для лечения диабетической, вирусной и индуцированной химиотерапией невропатической боли. Также рассмотрено применение агонистов рецепторов каппа для лечения или предотвращения висцеральной боли, включая гинекологические нарушения, например, спазмы в связи с дисменореей и эндометриоз. См., например, Riviere, Br. J. Pharmacol. 141:1331-4 (2004).

[0004] Агонисты каппа-опиатного рецептора также предложены для лечения боли, в том числе гипералгезии. Считается, что гипералгезию вызывают изменения в среде периферического сенсорного окончания, вторичные к местному повреждению ткани. Повреждение ткани (например, ссадины, ожоги) и воспаление может значительно повышать возбудимость полимодальных ноцицепторов (волокна С) и механических рецепторов с высоким порогом (Handworker et al. (1991) Proceeding of the VI^th World Congress on Pain, Bond et al., eds., Elsevier Science Publishers BV, pp.59-70; Schaible et al. (1993) Pain 55:5-54). Считается, что такое повышение возбудимости и чрезмерно усиленные реакции чувствительных афферентных окончаний лежит в основе гипералгезии, где реакция боли является результатом чрезмерно усиленной реакции на стимул. Значение гипералгезического состояния в состоянии боли после повреждения повторно продемонстрировано и, по-видимому, ответственно за основную часть состояния боли после повреждения/при воспалении. Woold et al. (1993) Anesthesia and Analgesia 77:362-79; Dubner et al. (1994) в Textbook of Pain, Melzack et al., eds., Churchill-Livingstone, London, pp.225-242.

[0005] Каппа-опиатные рецепторы предложены в качестве мишеней для предотвращения и лечения сердечнососудистых заболеваний. См., например, Wu et al. "Cardioprotection of Preconditioning by Metabolic Inhibition in the Rat Ventricular Myocyte - Involvement of kappa Opioid Receptor" (1999) Circulation Res vol.84: pp.1388-1395. См. также Yu et al. «Anti-Arrythmic Effect of kappa Opioid Receptor Stimulation in the Perfused Rat Heart: Involvement of cAMP-Dependent Pathway" (1999) J Mol Cell Cardiol. vol. 31(10): pp.1809-1819.

[0006] Также было обнаружено, что развитие или прогрессирование таких заболеваний и состояний, в которые вовлечены нейродегенерация или гибель клеток нейронов, может быть предупреждено или как минимум замедлено лечением агонистами каппа-опиатного рецептора. Считается, что улучшенный результат - это следствие нейропротекции агонистами каппа-опиатного рецептора. См., например, Kaushik et al. "Neuroprotection in Glaucoma" (2003) J. Postgraduate Medicine vol. 49 (I): pp.90-95.

[0007] Присутствие каппа-опиатных рецепторов на иммунных клетках (Bidlak et al., (2000) CIjin. Diag. Lab. Immunol. 7 (5):719-723) вовлечено в ингибирующее воздействии агониста каппа-опиатного рецептора, который доказанно подавляет экспрессию ВИЧ-1. См. Peterson РК et al., Biochem Pharmacol. 2001, 61(19):1145-51.

[0008] Walker, Adv. Exp.Med. Biol. 521:148-60 (2003) оценивал противовоспалительные свойства агонистов каппа для лечения остеоартрита, ревматоидного артрита, воспалительного заболевания кишечника и экземы. Bileviciute-Ljungar et al., Rheumatology 45:295-302 (2006) описывают уменьшение боли и дегенерации при индуцированном адъювантом Фрейнда с помощью агониста каппа U-50,488.

[0009] Wikstrom et al., J. Am. Soc. Nephrol. 16:3742-7 (2005) описывают применение агониста каппа, TRK-820 для лечения уремического и индуцированного опиоидами зуда и Ко et al., J. Pharmacol. Exp.Ther. 305:173-9 (2003) описывают эффективность U-50,488 при индуцированном морфином зуде у обезьян.

[0010] Также внимательно рассматривалось применение опиоидов периферического действия, включая применение агонистов каппа, для лечения желудочно-кишечных заболеваний. См., например, Lembo, Diges. Dis. 24:91-8 (2006) для обсуждения применения опиоидов в лечении расстройств пищеварительного тракта, в том числе синдром раздраженного кишечника (IBS), непроходимость кишечника и функциональная диспепсия.

[0011] Также показана возможность применения каппа-опиоидов при расстройствах глаз, в том числе воспалении глаз и глаукоме. См. Potter efc al., J. Pharmacol. Exp.Ther. 309:548-53 (2004), где описана роль высоко активного агониста каппа-опиатного рецептора, бремазоцина в уменьшении внутриглазного давления и блокирование данного эффекта норбиналторфимином (norBNI), составляющим прототип антагонистом каппа-опиатного рецептора; и Dortch-Carnes et al., CNS Drug Rev. 11(2) - .195-212 (2005). В патенте США 6,191,126, выданном Gamache, раскрыто применение каппа-опиатных агонистов для лечения глазной боли. Также показано, что боль в ушах поддается лечению введением каппа-опиатных агонистов. См. патент США 6,174,878, также выданный Gamache.

[0012] Каппа-опиатные агонисты увеличивают экскрецию воды почками и уменьшают выделение натрия с мочой (т.е., вызывают селективный диурез воды, также известный как акварез). Многие, но не все исследователи относят данный эффект на счет подавлению секреции вазопрессина гипофизом. Исследования, в которых сравнивали опиоиды центрального действия и предположительно периферически селективные каппа-опиоиды, привели к выводу о том, что каппа-опиатные рецепторы в пределах гематоэнцефалического барьера ответственны за опосредование такого эффекта. Другие исследователи предложили лечить гипонатриемию ноцицептиновыми пептидами или заряженными конъюгатами пептидов, которые воздействуют периферически на рецепторы ноцицептина, что представляет собой родственный, но отличный от каппа-опиатных рецепторов механизм. (D.R.Kapusta, Life Sci., 60:15-21, 1997; патент США 5,840,696, патентная заявка США 20060052284.)

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0013] В настоящем изобретении предлагаются синтетические пептидные амиды формулы I ниже и стереоизомеры, смеси стереоизомеров, пролекарства, фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, гидраты солей кислот, N-оксиды и изоморфные кристаллические формы синтетических пептидных амидов формулы I:

[0014] В формуле I Xaa₁ представляет N-концевую аминокислоту, которая может представлять собой любой из (A)(A')D-Phe, (A) (A') (α-Me)D-Phe, D-Tyr, D-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновой кислоты, D-грет-лейцина, D-неопентилглицина, D-фенилглицина, D-гомофенилаланина или β(E)D-Ala, где каждый (А) и каждый (А') представляет собой заместитель в фенильном кольце, выбранный из -Н, -F, -Cl, -NO₂, -СН₃, -CF₃, -CN и -CONH₂, и где каждый (Е) независимо выбран из следующих заместителей: циклобутил, циклопентил, циклогексил, пиридил, тиенил и тиазолил.

[0015] Хаа₂ представляет собой вторую аминокислоту, которая может быть любой из (А)(А')D-Phe, 3,4-дихлор-0-Phe, (A)(A')(α-Ме)D-Phe, D-1-нафтилаланина, D-2-нафтилаланина, D-Tyr, (E)D-Ala или D-Trp; где каждый из (А), (А') и (Е) независимо выбран из заместителей, перечисленных выше для каждого из (А), (А') и (Е).

[0016] Хаа₃ представляет собой третью аминокислоту, которая может быть любой из D-норлейцина, D-Phe, (E)D-Ala, D-Leu, (α-Ме)D-Leu, D-гомолейцина, D-Val или D-Met, где (Е) независимо выбран из заместителей, перечисленных выше (Е).

[0017] Хаа₄ представляет собой четвертую аминокислоту, которая может быть любой из (B)₂D-arginine, (В)₂D-нораргинина, (В)₂D-гомоarginine, ζ-(B)D-гомолизина, D-2,3-диаминопропионовой кислота, ε-(B)D-Lys, ε-(В)₂-D-Lys, D-аминометилфенилаланина, амидино-D-аминометил-фенилаланина, γ-(В)₂D-γ-Диаминомасляной кислоты, δ-(В)2α-(В')D-Orn, D-2-амино-3(4-пиперидил)пропионовой кислоты, D-2-амино-3(2-аминопирролидил)пропионовой кислоты, D-α-амино-β-амидинопропионовой кислоты, α-амино-4-пиперидинуксусной кислоты, цис-α,4-диаминоциклогексануксусной кислоты, транс-α,4-диаминоциклогексануксусной кислоты, цис-α-амино-4-метиламиноциклогексануксусной кислоты, транс-α-амино-4-метиламиноциклогексануксусной кислоты, α-амино-1-амидино-4-пиперидинуксусной кислоты, цис-α-амино-4-гуанидиноциклогексануксусной кислоты или транс-α-амино-4-гуанидино-циклогексануксусной кислоты, где каждый (В) независимо представляет собой -Н или C₁-C₄ алкил, и (В') представляет собой - Н или (α-Me).

[0018] Линкерный фрагмент W может представлять собой любую из следующих трех альтернатив: (i) нуль, при условии, что если W равен 0, Y представляет собой N и присоединен к С-концу Хаа₄, чтобы образовать амид; (ii) -NH-(CH₂)_b-, где b равно 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6; или (iii) -NH-(CH₂)_c-O-, где с равно 2 или 3, при условии, что Y представляет собой С. В каждой из вышеизложенных альтернатив, (ii) и (iii) атом азота W присоединен к С-концу Хаа₄ с образованием амида.

[0019] Фрагмент

в формуле I представляет собой необязательно замещенный 4-8-членный гетероциклический кольцевой фрагмент, где все гетероатомы кольца в кольцевом фрагменте представляют собой N, и где каждый из Y и Z независимо представляет собой С или N. Однако, если данный гетероциклический кольцевой фрагмент представляет собой 6-, 7- или 8-членное кольцо, Y и Z должны быть разделены как минимум двумя атомами кольца. В дальнейшем, если данный гетероциклический кольцевой фрагмент содержит один гетероатом в кольце, который представляет собой N, то кольцевой фрагмент является неароматическим.

[0020] Фрагмент V в формуле I представляет собой -C₁-С₆ алкил. Оператор е равен 0 или 1, таким образом, что если е равно 0, то V равен 0, и R₁ и R₂ непосредственно присоединены к одному и тому же или различным атомам кольца.

[0021] В первом из четырех альтернативных вариантов, фрагмент R₁ в формуле I может быть любой из следующих групп: -Н, -ОН, галоген, -CF₃, -NH₂, -СООН, C₁-C₆ алкил, амидино, C₁-С₆ алкилзамещенный амидино, арил, необязательно замещенный гетероциклил, Pro-амид, Pro, Gly, Ala, Val, Leu, He, Lys, Arg, Orn, Ser, Thr, CN, CONH₂, COR', SO₂R', CONR'R'', NHCOR', OR' или SO₂NR'R''; где необязательно замещенный гетероциклил необязательно содержит 1 или 2 заместителя, независимо выбранные из C₁-С₆ алкила, C₁-С₆ алкокси, оксо, -ОН, -Cl, -F, -NH₂, -NO₂, -CN, -СООН и амидино. Каждый из фрагментов R' и R'' независимо представляет собой Н, C₁-C₈ алкил, арил или гетероциклил. Альтернативно, R' и R'' могут вместе образовывать 4-8-членное кольцо, которое необязательно содержит 1 или 2 заместителя, независимо выбранные из C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ алкокси, -ОН, -Cl, -F, -NH₂, -NO₂, -CN, -СООН и амидино. Фрагмент R₂ может быть любым из -Н, амидино, амидино, замещенного одным или двумя C₁-С₆ алкилом, -CN, -CONH₂, -CONR'R'', -NHCOR', -SO₂NR'R'' или -СООН.

[0022] Во втором альтернативном варианте, фрагменты R₁ и R₂ вместе могут образовывать необязательно замещенный 4-9-членный гетероциклический моноциклический или бициклический кольцевой фрагмент, который присоединен к одному атому кольца Y- и Z-содержащего кольцевого фрагмента.

[0023] В третьем альтернативном варианте, фрагменты R₁ и R₂ вместе с одним атомом кольца Y- и Z-содержащего кольцевого фрагмента могут образовывать необязательно замещенный 4-8-членный гетероциклический кольцевой фрагмент с образованием спироструктуры.

[0024] В четвертом альтернативном варианте, фрагменты R₁ и R₂ вместе с двумя или больше соседными атомами кольца Y- и Z-содержащего кольцевого фрагмента могут образовывать необязательно замещенный 4-9-членный гетероциклический моноциклический или бициклический кольцевой фрагмент, конденсированный с Y- и Z-содержащим кольцевым фрагментом.

[0025] В формуле I, каждый из необязательно замещенных 4-, 5-, 6-, 7-, 8- и 9-членных гетероциклических кольцевых фрагментов, содержащих R₁ и R₂, может содержать 1 или 2 заместителя, независимо выбранные из C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ алкокси, необязательно замещенного фенила, оксо, -ОН, -Cl, -F, -NH₂, -NO₂, -CN, -СООН и амидино. В дальнейшем, если Y- и Z-содержащий кольцевой фрагмент формулы I представляет собой 6- или 7-членное кольцо, которое содержит один гетероатом в кольце, и е равно 0, то R₁ не может быть -ОН, и R₁ и R₂ оба не являются -Н.

[0026] Если Y- и Z-содержащий кольцевой фрагмент в формуле I представляет собой 6-членное кольцо, в котором присутствует два гетероатома в кольце, где как Y, так и Z представляет собой N, и W равен 0, то фрагмент -(V)_eR₁R₂ присоединен к атому кольца, отличному от Z. Кроме того, при вышеуказанных условиях, если е равно 0, то R₁ и R₂ оба не могут быть - Н. Наконец, если Хааз представляет собой D-Nle, то Хаа₄ не может быть (B)₂D-Arg; и если Хаа₃ представляет собой D-Leu или (αMe)D-Leu, то Хаа₄ не может быть δ-(В)₂α-(В')D-Orn.

[0027] Изобретение также предлагает селективный агонист каппа-опиатного рецептора (в данном описании также называется агонистом или просто агонистом каппа), который является синтетическим пептидным амидом по изобретению, как изложено выше.

[0028] Изобретение также предлагает фармацевтическую композицию, которая содержит синтетические пептидные амиды по изобретению и фармацевтически приемлемый разбавитель, вспомогательное вещество или носитель.

[0029] Также предлагается способ лечения или предупреждения связанного с каппа-опиатными рецепторами заболевания или состояния у млекопитающего. Способ включает введение млекопитающему композиции, которая содержит эффективное количество синтетического пептидного амида по изобретению. Изобретение также предлагает применение синтетических пептидных амидов по изобретению для приготовления лекарственных средств и фармацевтических композиций, пригодных для лечения связанного с каппа-опиатными рецепторами заболевания или состояния у млекопитающего.

[0030] Изобретение предлагает также способ лечения или предупреждения связанного с каппа-опиатными рецепторами заболевания или состояния у млекопитающего, где синтетические пептидные амиды по изобретению вводят совместно с уменьшенной дозой анальгетика мю-опиатного агониста, для достижения терапевтического анальгетического эффекта, причем болеутоляющее соединение мю-опиатный агонист вызывает сопутствующий побочный эффект (особенно, угнетения дыхания, седацию, эйфорию, антидиуретический эффект, тошноту, рвоту, запор и физическое привыкание, зависимость и пристрастие). Уменьшенная доза анальгетика мю-опиатного агониста, которую вводят в соответствии с данным способом, вызывает менее выраженные сопутствующие побочные эффекты, чем побочные эффекты, связанные с дозой анальгетического соединения опиатного агониста мю, необходимой, чтобы достичь такого же терапевтического болеутоляющего эффекта при монотерапии.

[0031] Изобретение также предлагает способ лечения или предупреждения периферической гипералгезии, где способ включает местное нанесение или введение млекопитающему, нуждающемуся в лечении, эффективного количества композиции, которая содержит эффективное против гипералгезии количество синтетических пептидных амидов по изобретению в носителе, предназначенном для местного нанесения или введения.

[0032] Изобретение также предлагает способ лечения или предупреждения гипонатриемии или гипокалиемии и, таким образом, лечения или предупреждения заболевания или состояния, связанного с гипонатриемией или гипокалиемией, такого как застойная сердечная недостаточность, цирроз печени, нефротический синдром, гипертензия или отек и, предпочтительно, где повышенная секреция вазопрессина связана с указанным заболеванием или расстройством, причем способ включает введение млекопитающему акваретически эффективного количества синтетических пептидных амидов по изобретению в фармацевтически приемлемом разбавителе, вспомогательном веществе или носителе.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР

[0033] Фигура 1 показывает общую схему, используемую в синтезе соединений (1), (6), (7), (10) и (11). Стадии a-s осуществляют с применением следующих реагентов или условий: а) гомопиперазин, ДХМ; b) Fmoc-D-Dap(ivDde)-OH или Fmoc-D-Dab(ivDde)-ОН или Fmoc-D-Orn(Aloc)-OH или Fmoc-D-Orn(Cbz)-ОН или Fmoc-D-Lys(Dde)-OH или Fmoc-D-Arg(Pbf)-ОН, DIC, HOBt, ДМФА; с) 25% пиперидина в ДМФА; d) Fmoc-D-Leu-OH или Fmoc-D-Nle-ОН, DIC, HOBt, ДМФА; е) Fmoc-D-Phe-OH, DIC, HOBt, ДМФА; f) Cbz-D-Phe-OH, DIC, HOBt, ДМФА; g) 4% гидразина в ДМФА; h) Pd(PPh₃)₄, CHCl₃/AcOH/NMM; i) O-NBS-Cl, коллидин, NMP; 3) диметилсульфат, DBU, NMP; k) меркаптоэтанол, DBU, NMP; 1) Cbz-OSu, ДМФА; m) ацетон, AcOH, NaBH(OAc)3, TMOF; n) 1Н-пиразол-1-карбоксамидин, ДИЭА, ДМФА; о) 50% ТФУ/ДХМ; р) S-метил-N-метилизотио-мочевины гидройодид, ДИЭА, ДМФА; q) 2-метилтио-2-имидазолина гидройодид, ДИЭА, ДМФА; r) йодэтан, ДИЭА, ДМФА; с) TMCOTf/ТФУ/м-крезол.

[0034] Фигура 2 - общая схема, используемая в синтезе соединений (2)-(5), (8), (9) и (12)-(14). Стадии a-k осуществляют с применением следующих реагентов или условий: а) N-(1-Fmoc-пиперидин-4-ил)-L-пролин, ДИЭА, ДХМ; b) 25% пиперидина/ДМФА; с) Fmoc-D-Lys(Dde)-ОН, DIC, HOBt, ДМФА; d) Fmoc-D-Leu-OH, DIC, HOBt, ДМФА; е) Fmoc-D-Phe-OH, DIC, HOBt, ДМФА; f) Boc-D-Phe-OH, DIC, HOBt, ДМФА; g) 4% гидразина в ДМФА; h) o-NBS-Cl, коллидин, NMP; i) диметилсульфат, DBU, NMP;]) меркаптоэтанол, DBU, NMP; k) ТФУ/TIS/Н₂О.

[0035] Фигура 3 - общая схема, используемая в синтезе соединений (15)-(24). Стадии а-n осуществляют с применением следующих реагентов или условий: а) 35% пиперидина, ДМФА; b) 1-Вос-4-N-Fmoc-амино-пиперидин-4-карбоновая кислота, РуВОР, ДИЭА, ДМФА; с) (i) 35% пиперидина, ДМФА; (ii) O-NBS-Cl, коллидин, NMP; d) 30% ТФУ в ДХМ; е) Boc-D-Dap(Fmoc)-OH или Boc-D-Dab(Fmoc)-ОН или Boc-D-Orn(Fmoc)-OH, РуВОР, ДИЭА, ДМФА; f) Boc-D-Leu-OH, РуВОР, ДИЭА, ДМФА; g) Boc-D-Phe-OH, РуВОР, ДИЭА, ДМФА; h) Boc-D-PHE-OH, РуВОР, ДИЭА, ДМФА; i) 2% DBU/ДМФА;]) 1Н-пиразол-1-карбоксамидин, ДИЭА, ДМФА; k) (i) ацетон, TMOF, (ii) NaBH(ОАс)₃, ДМФА; 1) меркаптоэтанол, DBU, NMP; m) Cu(OAc)₂, пиридин, DBU, ДМФА/H₂O; n) 95% ТФУ/H₂O.

[0036] Фигура 4 - общая схема используемая в синтезе соединений (25)-(37). Стадии а-h осуществляют с применением следующих реагентов или условий: a) EDCI, HOBt, ДИЭА, ТГФ; b) ТФУ, ДХМ; с) Boc-D-Phe-OH, EDCI, HOBt, ДИЭА; d) H₂, Pd/C; e) D-Lys(Вое)-ОА11, TBTU, ДИЭА, ДМФА; f) Pd(PPh3)₄, пирролидин; g) HNRaRb, HBTU; h) HCl, диоксан.

[0037] Фигура 5 - концентрация, обнаруженная в плазме и мозге крыс после введения 3 мг/кг соединения (2) в виде инфузии длительностью 5 минут через катетер шейной вены. Концентрация соединения (2) в нг/мл: открытые круги: плазма, закрашенные круги: мозг.

[0038] Фигура 6 - концентрация в плазме соединения (6) после подкожного введения одного болюса 1 мг/кг соединения мышам ICR. ОБразцы плазмы отбирали в точках 5, 10, 15, 20, 30 60, 90 120 и 180 минут после инъекции.

[0039] Фигура 7 - концентрация в плазме соединения (3) после внутривенного введения одного болюса 0,56 мг/кг соединения яванским макакам. Образцы плазмы отбирали в точках 2, 5, 10, 15, 30, 60, 120 и 240 минут после инъекции.

[0040] Фигура 8 - кривые «доза-реакция» для соединения (3) у мышей ICR на модели индуцированных уксусной кислотой корчей (закрашенные круги) и в испытании перемещения (закрашенные квадраты).

[0041] Фигура 9 - зависимость «доза-реакция» для опосредованного соединением (2) угнетения индуцированных уксусной кислотой корчей у мышей при внутривенном введении.

[0042] Фигура 10 - влияние соединения (2) на механическую гиперчувствительность, индуцированную перевязкой спинного нервна L5/L6 у крыс. Открытые круги - только растворитель; закрашенные круги - соединение (2) в дозе 0,1 мг/кг; открытые квадраты - соединение (2) в 0,3 мг/кг; закрашенные квадраты - соединение (2) в дозе 1,0 мг/кг. ** обозначает p<0,01; *** обозначает p<0,001 против растворителя (2-сторонний ANOVA, Бонферрони).

[0043] Фигура 11 - влияние соединения (2) в различных концентрациях на индуцированную панкреатитом чрезмерную чувствительность брюшины у крыс.Дибутилина дихлорид или только растворитель вводили внутривенно, и гиперчувствительность оценивали зондированием брюшины с помощью нити вон Фрея с интервалом 30 минут. Гиперчувствительность выражали как количество отдергиваний от десяти попыток зондирования. Открытые круги - только растворитель; закрашенные круги - соединение (2) в дозе 0,1 мг/кг; открытые квадраты - соединение (2) в дозе 0,3 мг/кг; закрашенные квадраты - соединение (2) в дозе 1,0 мг/кг. ** обозначает р<0,01; *** обозначает p<0,001 против растворителя (2-сторонний ANOVA, Бонферрони).

[0044] Фигура 12 - блокирование влияния соединения (2) на индуцированную панкреатитом гиперчувствительность брюшины nor-BNI и налоксона метйодидом у крыс.Открытый столбик - только растворитель, закрашенный столбик - соединение (2) в дозе 1 мг/кг с налоксона метйодидом или norBNI, как показано. *** обозначает p<0,001 против растворителя + растворитель (2-сторонний ANOVA, Бонферрони).

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

[0045] В данном описании термин "синтетические пептидные амиды" обозначает соединение по изобретению, соответствующее формуле I или его стереоизомер, смесь стереоизомеров, пролекарство, фармацевтически приемлемую соль, гидрат, сольват, гидрат соли кислоты, N-оксид или изоморфную кристаллическую форму. Если Xaa₁, Хаа₂, Хаа₃ и Хаа₄ представляют D-аминоки слоты в соединениях по изобретению, стереоизомеры соединений по изобретению, соответствующие формуле I, ограничиваются соединениями, содержащими аминокислоты в D-конфигурации, где это указано в Формуле I. Стереоизомеры соединений по изобретению включают соединения, с D- или L-конфигурацией хиральных центров, кроме альфа-атомов углерода четырех аминокислот в положениях Xaa₁, Хаа₂, Хаа₃ и Хаа₄. Термин «смеси стереоизомеров» обозначает смеси таких стереоизомеров по изобретению. В данном описании термин «рацематы» обозначает смеси стереоизомеров, содержащие равные пропорции соединений с D- и L-конфигурацией одного или больше хиральных центров, кроме альфа-атомов углерода Xaa₁, Xaa₂, Хаа₃ и Хаа₄, без изменения хиральности альфа-атомов углерода Xaa₁, Хаа₂, Хаа₃ и Хаа₄.

[0046] Номенклатура, используемая для определения пептидов в данном описании, описана Schroder & Lubke, The Peptides, Academic Press, 1965, где, в соответствии с обычным представлением, N-конец размещается слева, и С-конец справа. Если остаток аминокислоты присутствует в изомерных формах, L-изомерная форма, так и D-изомерная форма аминокислоты включены, если не указано иное. Аминокислоты в данном описании обычно идентифицированы стандартным трехбуквенным кодом. D-изомер аминокислоты указан приставкой "D-", например, в "D-Phe", что обозначает D-фенилаланин, D-изомер фенилаланина. Также, L-изомер указан приставкой "L-", например, в "L-Phe". Пептиды в данном описании представлены согласно традиционной договоренности, как последовательности аминокислот слева направо: от N-конца к С-концу, если не указано иное.

[0047] В данном описании, D-Arg представляет D-аргинин, D-Har представляет D-гомоаргинин, который содержит боковую цепь на одну метиленовую группу длиннее, чем D-Arg, и D-Nar представляет D-нораргинин, который содержит боковую цепь на одну метиленовую группу короче, чем D-Arg. Подобным образом, D-Leu обозначает D-лейцин, D-NIe обозначает D-норлейцин, и D-Н1е представляет D-гомолейцин. D-Ala обозначает D-аланин, D-Tyr обозначает D-тирозин, D-Trp обозначает D-триптофан, и d-tic обозначает D-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновую кислоту. D-Val кислоту D-валин, и D-Met кислоту D-метионин. D-Pro обозначает D-пролин, Pro-амид обозначает D- или L-форму амида пролина. D-Pro-амид представляет D-пролин с амидной группой, образованной на карбоксильном фрагменте, где амидный азот может представлять собой замещенный алкил, как в случае -NR_aR_b, где каждый из R_a и R_b независимо представляет собой C₁-С₆ алкильную группу, или один из R_a и R_b представляет собой -Н. Gly обозначает глицин, D-Ile обозначает D-изолейцин, D-Ser обозначает D-серин, и D-Thr обозначает D-треонин. (E)D-Ala обозначает D-изомер аланина, содержащий заместитель (Е) при β-углероде. Примеры таких групп заместителя (Е) включают циклобутил, циклопентил, циклогексил, пиридил, тиенил и тиазолил. Таким образом, циклопентил-D-Ala обозначает D-изомер аланина, замещенный циклопентилом при β-атоме углерода. Подобным образом, D-Ala(2-тиенил) и (2-тиенил)D-Ala взаимозаменяемы, и оба обозначают D-изомер аланина, замещенный при β-атоме углерода тиенилом, который присоединен в положении 2 кольца.

[0048] В данном описании D-Nal обозначает D-изомер аланина, замещенный нафтилом при β-атоме углерода. D-2Nal обозначает замещенный нафтилом D-аланин, где нафтален присоединен в положении 2 кольцевой структуры, и D-lNal обозначает замещенный нафтилом D-аланин, где нафтален присоединен в положении 1 кольцевой структуры.

(A)(A')D-Phe обозначает D-фенилаланин, замещенный на фенильном кольце 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из галогена, нитро, метила, галогенметила (например, такого как трифторметил), пергалогенметила, циано и карбоксамида. D-(4-F)Phe обозначает D-фенилаланин, замещенный фтором в положении 4 фенильного кольца. D-(2-F)Phe обозначает D-фенилаланин, замещенный фтором в положении 2 фенильного кольца. D-(4-Cl)Phe обозначает D-фенилаланин, замещенный хлором в положении 4 фенильного кольца. (α-Me)D-Phe обозначает D-фенилаланин, замещенный метилом при альфа-атоме углерода. (αMe)D-Leu обозначает D-лейцин, замещенный метилом при альфа-атоме углерода.

[0049] Обозначения (B)₂D-Arg, (B)₂D-Nar и (B)₂D-Har представляют D-аргинин и D-нораргинин, D-гомоаргинин, соответственно, каждый из которых содержит две группы заместителя (В) в боковой цепи. D-Lys обозначает D-лизин, и D-Hlys обозначает D-гомолизин. ζ-(В)D-Hlys, ε-(B)D-Lys и ε-(B)₂-D-Lys представляют D-гомолизин и D-лизин, каждый из которых содержит в боковой цепи аминогруппу, замещенную 1 или 2 группами заместителя (В), как показано. D-Orn обозначает D-орнитин, и δ-(В)α-(В')D-Orn обозначает D-орнитин, замещенный (В') при альфа-атоме углерода, и замещенный (В) в боковой цепи δ-аминогруппы.

[0050] D-Dap обозначает D-2,3-диаминопропионовую кислоту. D-Dbu представляет D-изомер альфа,гамма-диаминомасляной кислоты, и (B)₂D-Dbu представляет альфа,гамма-диаминомасляную кислоту, замещенную двумя группами заместителя (В) в гамма-аминогруппе. Если не указано иное, каждая из (В) групп таких дважды замещенных остатков независимо выбрана из Н- и C₁-C₄-алкила. В данном описании, D-Amf обозначает D-(NH₂CH₂)Phe, т.е. D-изомер фенилаланина, замещенный аминометилом в фенильном кольце, и D-4Amf представляет конкретный D-Amf, в котором аминометил присоединен в положении 4 кольца. D-Gmf обозначает D-Amf(амидино), который представляет D-Phe, где фенильное кольцо замещено -CH₂NHC(NH)NH₂. Amd представляет амидино, C(NH)NH₂, и обозначения (Amd) D-Amf и D-Amf(Amd) также равнозначно применяются для D-Gmf. Обозначения Ilу и lor, соответственно, применяются для обозначения Lys изопропила и Оrn изопропила, где аминогруппа боковой цепи алкилирована изопропильной группой.

[0051] Алкил обозначает радикал алкана, который может представлять собой разветвленную, неразветвленную и циклическую алкильную группу, такую как, не ограничиваясь ими, метил, этил, пропил, изопропил, циклопропил, бутил, грег-бутил, вгор-бутил, пентил, циклопентил, гексил, циклогексил, циклогексилэтил. C₁-C₈ алкил обозначает алкильные группы, содержащие от 1 до 8 атомов углерода. Подобным образом, C₁-С₆ алкил обозначает алкильные группы, содержащие от 1 до 6 атомов углерода. Также, C₁-C₄ алкил обозначает алкильные группы, содержащие от 1 до 4 атомов углерода. Низший алкил обозначает C₁-C₆ алкил. Me, Et, Pr, Ipr, Bu и Pn равнозначно используются для представления распространенных алкильных групп: метил, этил, пропил, изопропил, бутил и пентил, соответственно. Хотя соединение для алкильной группы находится обычно на одном конце алкильной цепи, соединение может быть расположено где-либо в другом месте цепи, например 3-пентил, который может также быть обозначен как этилпропил или 1-этилпроп-1-ил. Алкилзамещенный, например, C₁-C₆ алкилзамещенный амидино, показывает, что соответствующий фрагмент замещен 1 или больше алкильных групп.

[0052] Если указанный фрагмент равен 0, такой фрагмент отсутствует, и если указано, что такой фрагмент присоединен к двум другим фрагментам, такие два других фрагмента соединены одной ковалентной связью. Если соединительный фрагмент показан в данном описании как присоединенный к кольцу в каком-либо положении кольца и присоединен к двум другим фрагментам, таким как R₁ и R₂, в случае, когда указано, что соединительный фрагмент равен 0, каждый из фрагментов R₁ и R₂ может быть независимо присоединен в каком-либо положении на кольце.

[0053] Термины "гетероцикл", "гетероциклическое кольцо" и "гетероциклил" применяются равнозначно в данном описании и обозначают кольцо или кольцевой фрагмент, содержащий как минимум один не углеродный атом в кольце, который также называют гетероатомом, и который может представлять собой атом азота, серы или кислорода. Если указано, что в кольце присутствует определенное количество членов, количество определяет число атомов в кольце без обозначения каких-либо заместителей или атомов водорода, присоединенных к атомам кольца. Гетероциклы, гетероциклические кольца и гетероциклильные фрагменты могут содержать несколько гетероатомов, независимо выбранных из атома азота, серы или кислорода в кольце. Кольца могут содержать заместители в каком-либо доступном положении. Например, не ограничиваясь ими, 6- и 7-членные кольца часто содержат заместители в положении 4 кольца, и 5-членные кольца обычно содержат заместители в положении 3, где кольцо присоединено к цепи пептидного амида в положении 1 кольца.

[0054] Термин «насыщенный» обозначает отсутствие двойных или тройных связей, и применение термина в связи с кольцами обозначает кольца, не содержащие двойных или тройных связей в пределах кольца, но не обозначает отсутствия двойных или тройных связей в заместителях, присоединенных к кольцу. Термин "неароматический" употребляется в контексте конкретного кольца для обозначения отсутствия ароматичности в таком кольце, но не обозначает отсутствия двойных связей в пределах кольца, в том числе двойных связей, которые являются частью ароматического кольца, конденсированного с указанным кольцом. Также не запрещается присутствие двойной связи между атомом кольца насыщенного гетероциклического кольцевого фрагмента и атомом за пределами кольца, например, атом серы в кольце связан двойной связью с атомом кислорода заместителя. В данном описании, гетероциклы, гетероциклические кольца и гетероциклильные фрагменты также включают насыщенные, частично ненасыщенные и гетероароматические кольца, а также конденсированные бициклические структуры колец, если не определено иное. Гетероцикл, гетероциклическое кольцо или гетероциклильный фрагмент может быть конденсирован со вторым кольцом, которое может быть насыщенным, частично ненасыщенным или ароматическим кольцом, которое может представлять собой гетероцикл или углеродный цикл. Если указано, два заместителя могут необязательно вместе образовывать дополнительное кольцо. Кольца могут быть замещены в каком-либо доступном положении. Гетероцикл, гетероциклическое кольцо и гетероциклильный фрагмент может, если это указано, быть необязательно замещенным в одном или больше положений кольца одним или больше независимо выбранных заместителей, таких как, например, C₁-С₆ алкил, С₃-С₈ циклоалкил, C₁-C₆ алкокси, галоген C₁-C₆ алкил, необязательно замещенный фенил, арил, гетероциклил, оксо, -ОН, -Cl, -F, -NH₂, -NO₂, -CN, -СООН и амидино. Подходящие необязательные заместители фенила включают, например, не ограничиваясь ими, одну или больше групп, выбранных из C₁-С₃ алкила, C₁-С₃ алкокси, галогена C₁-С₃ алкила, оксо, -ОН, -Cl, -F, -NH₂, -NO₂, -CN, -СООН и амидино.

[0055] D-Phe и замещенный D-Phe представляют собой примеры подходящей аминокислоты для остатка Xaa₁ в Формуле I. Фенильное кольцо может быть замещено в любом из положений 2, 3 и/или 4. Конкретные примеры разрешенных замен включают, например, хлор или фтор в положении 2 или 4. Также альфа-углеродный атом может быть метилирован. Другие равноценные остатки, которые представляют консервативные замены для D-Phe, также могут использоваться. Они включают D-Ala(циклопентил), D-Ala(тиенил), D-Tyr и D-Tic. Остаток в положении 2, Xaa₂ может также представлять собой D-Phe или замещенный D-Phe с такими заменами, в том числе заместителями при атоме углерода в положении 4 фенильного кольца или как положении 3, так и положении 4. Альтернативно, Хааг может представлять собой D-Trp, D-Tyr или D-аланин, замещенный нафтилом. Остаток в положении 3, Хаа₃ может представлять собой каким-либо неполярный остаток аминокислоты, такой как D-Nle, D-Leu, (α-Me)D-Leu, D-Hie, D-Met или D-Val. Однако, D-Ala(циклопропил, циклобутил, циклопентил или циклогексил) или D-Phe может также использоваться в качестве Хаа₃. Остаток в положении 4, Хаа₄ может представлять собой какой-либо положительно заряженный остаток аминокислоты, например, D-Arg и D-Har, который может быть необязательно замещен низшими алкильными группами, такими как одна или две этильные группы. Альтернативно, могут использоваться D-Nar и любые другие равноценные остатки, такие как D-Lys или D-Orn (любой из которых может быть алкилирован ω-аминогруппой, например, метильными или изопропильными группами, или метилирован при α-атоме углерода). Кроме того, D-Dbu, D-4-Amf (который может быть необязательно замещен амидино) и D-Hlys также являются подходящими аминокислотами для данного положения.

[0056] Соединения по изобретению содержат один или больше хиральных центров, каждый из которых имеет два возможных трехмерных пространственных расположения (конфигурации) четырех заместителей вокруг центрального атома углерода. Они известны как стереоизомеры и, более специфично, как энантиомеры (все хиральные центры в обратной конфигурации) или диастереоизомеры (два или больше хиральных центров, как минимум один хиральный центр в такой же конфигурации). В конкретном варианте изобретения, указано, что аминокислоты, которые составляют основу тетрапептида, Хаа₁Хаа₂Хаа₃Хаа₄, представляют собой D-аминоаминокислоты, т.е. их конфигурация противоположна обычно присутствующей у млекопитающих. Ссылка на стереоизомеры синтетических пептидных амидов по изобретению касается хиральных центров, кроме альфа-атомов углерода D-аминокислот, которые составляют Xaa₁-Xaa₄. Таким образом, стереоизомеры синтетических пептидных амидов, которые являются вариантами изобретения, где указано, что каждый из Xaa₁-Xaa₄ представляет собой D-аминокислоту, не включают L-аминокислоты или рацемические смеси аминокислот в данных положениях. Подобным образом, ссылка на рацематы в данном описании касается центров, кроме альфа-атомов углерода D-аминокислот, которые составляют Xaa₁-Xaa₄. Хиральные центры в синтетических пептидных амидах по изобретению, для которых стереоизомер может находиться в R или S конфигурация, включают хиральные центры во фрагменте, присоединенном к С-концу Хаа₄, а также хиральным центрам в каких-либо заместителях боковой цепи аминокислот Xaa₁-Xaa₄.

[0057] Синтетические пептидные амиды по изобретению, описанные в данном описании (также равнозначно обозначаются как соединения синтетических пептидных амидов, соединения по изобретению, соединение (номер) или просто "соединения"), могут применяться или быть получены в альтернативных формах. Например, многие аминосодержащие соединения могут применяться или быть получены в виде соли с кислотой. Часто такие соли улучшают выделение и свойства соединения в процессе обращения с ним. Например, в зависимости от реактивов, условий реакции и т.п., соединения, например, синтетические пептидные амиды, описанные в данном описании, могут применяться или быть получены, например, как гидрохлоридные или тозилатные соли. Изоморфные кристаллические формы, все хиральные и рацемические формы, N-оксиды, гидраты, соль ваты и гидраты солей кислот, также находятся в пределах контекста настоящего изобретения.

[0058] Определенные кислотные или осн