Препарат в виде твердых частиц дисперсной фазы, содержащий безводную кристаллическую 2-о-α-d-глюкозил-l-аскорбиновую кислоту, способ его производства и его применения

Препарат в виде твердых частиц дисперсной фазы, содержащий безводную кристаллическую 2-о-α-d-глюкозил-l-аскорбиновую кислоту, способ его производства и его применения

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Область техники

Настоящее изобретение относится к дисперсной композиции (препарату в виде твердых частиц дисперсной фазы), содержащей безводную кристаллическую 2-O-α-D-глюкозил-L-аскорбиновую кислоту, способу ее производства и ее применениям, конкретнее, к почти не способной твердеть дисперсной композиции, содержащей безводную кристаллическую 2-O-α-D-глюкозил-L-аскорбиновую кислоту, способу ее производства и ее применениям в качестве материала для пищевых продуктов, косметических средств, лечебно-профилактической косметики и лекарственных препаратов.

Известный уровень техники

Вследствие своих полезных физиологических активностей и антиоксидантного действия L-аскорбиновую кислоту использовали для различных целей, в том числе для пищевых продуктов и косметических средств. Однако L-аскорбиновая кислота является неустойчивой из-за ее способности к прямому восстановлению, и она подвержена окислительной деградации и утрате своей физиологической активности в качестве крупного недостатка. Для преодоления этого недостатка заявитель настоящего изобретения, в качестве одного из созаявителей патентной литературы 1, описал 2-O-α-D-глюкозил-L-аскорбиновую кислоту, которая состоит из одной молекулы D-глюкозы, связанной с гидроксильной группой в положении C-2 L-аскорбиновой кислоты (в дальнейшем на всем протяжении описания сокращенно «2-глюкозид аскорбиновой кислоты»). В качестве характерных особенностей, 2-глюкозид аскорбиновой кислоты не проявляет способность к прямому восстановлению, а характеризуется удовлетворительной устойчивостью, и он проявляет физиологические активности, присущие L-аскорбиновой кислоте, после распада в живых организмах на L-аскорбиновую кислоту и D-глюкозу под действием in vivo фермента, внутренне существующему в живых организмах. В соответствии со способом, описанным в патентной литературе 1, 2-глюкозид аскорбиновой кислоты образуется в результате обеспечения действия переносящего сахарид фермента, такого как цикломальтодекстрин-глюканотрансфераза (в дальнейшем сокращенно «CGTase») или α-глюкозидаза, на раствор, содержащий L-аскорбиновую кислоту и соединение в виде α-глюкозилсахарида.

В патентной литературе 2 заявителю настоящего изобретения удалось кристаллизовать 2-глюкозид аскорбиновой кислоты из насыщенного раствора 2-глюкозида аскорбиновой кислоты, и он описал кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты и содержащую его дисперсную композицию. До сих пор было известно, что кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты существует лишь в безводной кристаллической форме. В патентной литературе 1 и 2 опубликованы данные рентгеноструктурного анализа кристаллического 2-глюкозида аскорбиновой кислоты.

В патентной литературе 3 и 4 тот же заявитель, что и заявитель настоящего изобретения, описал способ получения фракции с высоким содержанием 2-глюкозида аскорбиновой кислоты, включающий подвергание раствора, содержащего 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, образованный в результате ферментативной реакции, хроматографии на колонке с сильнокислотным катионитом и сбор фракции. В патентной литературе 5 тот же самый заявитель описал способ получения продукта с высоким содержанием 2-глюкозида аскорбиновой кислоты, включающий подвергание раствора, содержащего 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, образованный в результате ферментативной реакции, электродиализу, используя анионообменную мембрану, для удаления примесей, таких как L-аскорбиновая кислота и сахариды, из этого раствора; а в патентной литературе 6 тот же самый заявитель описал способ получения продукта с высоким содержанием 2-глюкозида аскорбиновой кислоты, включающий подвергание раствора, содержащего 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, хроматографии на анионообменной смоле и выборочное десорбирование ингредиентов, адсорбированных на смоле, для получения фракции, обогащенной 2-глюкозидом аскорбиновой кислоты.

В патентной литературе 7 тот же заявитель, что и заявитель настоящего изобретения, описал способ получения 2-глюкозида аскорбиновой кислоты, включающий допуск действия образующего α-изомальтозилглюкосахарид фермента или образующего α- изомальтозилглюкосахарид фермента в комбинации с цикломальтодекстрин-глюканотрансферазой на раствор, содержащий L-аскорбиновую кислоту и соединение в виде α-глюкозилсахарида, для образования 2-глюкозида аскорбиновой кислоты. В патентной литературе 8 и 9, поданной тем же заявителем, что и заявитель настоящего изобретения, описывается, что образующий α-изомальтозилглюкосахарид фермент и переносящий α-изомальтозил фермент катализируют перенос сахарида на L-аскорбиновую кислоту с образованием 2-глюкозида аскорбиновой кислоты.

В отношении применений 2-глюкозида аскорбиновой кислоты было сделано множество предложений, как указано, например, в патентной литературе 10-29. В зависимости от своих полезных свойств 2-глюкозид аскорбиновой кислоты обычно использовался в качестве материала для пищевых продуктов, косметических средств, лечебно-профилактической косметики или лекарственных препаратов; и он широко использовался в случае других применений, при которых L-аскорбиновая кислота не могла использоваться вследствие своей неустойчивости, не говоря уже о традиционных применениях L-аскорбиновой кислоты.

Как описано выше, 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, как известно в настоящее время, получают посредством использования L-аскорбиновой кислоты и крахмальных веществ в качестве материалов и различных переносящих сахариды ферментов. Согласно данным, уже полученным заявителем настоящего изобретения до сих пор, способ обеспечения действия цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы в качестве переносящего сахарид фермента на раствор, содержащий L-аскорбиновую кислоту и крахмальное вещество, является эффективным в промышленном масштабе способом из-за самого высокого выхода при его использовании продукции - 2-глюкозида аскорбиновой кислоты. На основе этих данных заявитель настоящего изобретения изготовил дисперсные композиции, содержащие безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, с помощью способа обеспечения действия цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы на раствор, содержащий L-аскорбиновую кислоту и крахмальное вещество, и превратил в источник прибыли дисперсные композиции в качестве материалов для косметических средств/лечебно-профилактической косметики и пищевых продуктов, которые запущены в серийное производство под названием продуктов таких дисперсных композиций, соответственно, «AA2G» и «ASCOFRESH» Hayashibara Biochemical Laboratories, Inc., Okayama, Япония, и Hayashibara Shoji Inc., Okayama, Япония, соответственно (в дальнейшем используют сокращение для этих традиционных дисперсных композиций, содержащих безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, которые были превращены в источник прибыли в качестве материалов для косметических средств/лечебно-профилактической косметики и пищевых продуктов, - «порошки с подходящим для лечебно-профилактической косметики качеством).

Хотя порошки с подходящим для лечебно-профилактической косметики качеством характеризуются, в качестве уровня качества, относительно высокой степенью чистоты вплоть до 98,0% в весовом отношении или более по показателю степени чистоты 2-глюкозида аскорбиновой кислоты и сохраняют удовлетворительное свойство сыпучести порошка (на протяжении всего описания «порошок (порошки)» значит «дисперсная композиция(и)», кроме особо оговоренных случаев) сразу после получения, они имеют недостаток, состоящий в том, что они могут твердеть вследствие их собственного веса или поглощения влаги, при допуске нахождения при относительно высокой температуре и во влажных условиях в течение относительно длительного периода времени. Учитывая такой недостаток, в серийное производство были запущены традиционные порошки с подходящим для лечебно-профилактической косметики качеством, которые по частям, каждая составляющая 10 кг, упаковывали в полиэтиленовые мешки, и их помещали, вместе с десикантами, в стальные тары с крышками. Даже несмотря на такую форму продукта, с порошками с подходящим для лечебно-профилактической косметики качеством, однако, все еще существует проблема, связанная с возможностью их твердения время от времени и потери их применимости в качестве порошков после хранения в течение относительно длительного периода времени. Твердение дисперсных композиций, которые содержат безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, используемых в качестве материала для косметических средств, лечебно-профилактической косметики или пищевых продуктов, может обычно вызывать трудность на этапах, например, транспортировки, просеивания или смешивания материалов, когда промышленное предприятие спроектировано на исходных условиях использования материалов с удовлетворительным свойством сыпучести.

Относящаяся к известному уровню техники литература

i) Патентная литература

[Патентная литература 1] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 139288/91

[Патентная литература 2] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 135992/91

[Патентная литература 3] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 183492/91

[Патентная литература 4] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 117290/93

[Патентная литература 5] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 208991/93

[Патентная литература 6] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 2002-088095

[Патентная литература 7] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 2004-065098

[Патентная литература 8] публикация международной заявки на патент с № WO 02010361

[Патентная литература 9] публикация международной заявки на патент с № WO 01090338

[Патентная литература 10] публикация международной заявки на патент с № WO 05087182

[Патентная литература 11] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 046112/92

[Патентная литература 12] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 182412/92

[Патентная литература 13] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 182413/92

[Патентная литература 14] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 182419/92

[Патентная литература 15] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 182415/92

[Патентная литература 16] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 182414/92

[Патентная литература 17] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 333260/96

[Патентная литература 18] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 2005-239653

[Патентная литература 19] публикация международной заявки на патент с № WO 06033412

[Патентная литература 20] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 2002-326924

[Патентная литература 21] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 2003-171290

[Патентная литература 22] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 2004-217597

[Патентная литература 23] публикация международной заявки на патент с № WO 05034938

[Патентная литература 24] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 2006-225327

[Патентная литература 25] публикация международной заявки на патент с № WO 06137129

[Патентная литература 26] публикация международной заявки на патент с № WO 06022174

[Патентная литература 27] не прошедшая экспертизу заявка на патент Японии с № 2007-063177

[Патентная литература 28] публикация международной заявки на патент с № WO 06132310

[Патентная литература 29] публикация международной заявки на патент с № WO 07086327

ii) Непатентная литература

[Непатентная литература 1] Carbohydrate Research, Takahiko MANDAI et al., Vol. 232, pp. 197-205, 1992

[Непатентная литература 2] International Journal of Pharmaceutics, Yutaka INOUE et al., Vol. 331, pp. 38-45, 2007

РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Задача настоящего изобретения

Настоящее изобретение, которое было сделано для разрешения вышеуказанного недостатка, нацелено на обеспечение дисперсной композиции, содержащей безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, которая значительно менее способна твердеть, чем традиционные дисперсные композиции, содержащие безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, с качеством, подходящим для применения в лечебно-профилактической косметике, и на обеспечение способа ее производства и ее применений.

Средства для решения поставленной задачи

Чтобы решить вышеуказанные задачи, авторы настоящего изобретения продолжили изучение твердения дисперсной композиции, содержащей безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, и установили, что «ASCORBIC ACID 2-GLUCOSIDE 999», название продукта в виде дисперсной композиции, содержащей безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, для применения в качестве стандартного реагента для анализа, кодовый № AG124, превращенной в источник прибыли Hayashibara Biochemical Laboratories Inc., Okayama, Япония (в дальнейшем сокращенно «порошок с качеством реагента»), не твердеет даже в условиях, при которых действительно твердеет порошок с подходящим для лечебно-профилактической косметики качеством, и сохраняет свойства порошка. Подобно порошку с подходящим для лечебно-профилактической косметики качеством, вышеуказанный порошок качества реагента представляет собой порошок, полученный посредством очистки раствора, содержащего 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, полученный благодаря стадии обеспечения действия цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы на раствор, содержащий L-аскорбиновую кислоту и крахмальное вещество, концентрирования очищенного раствора и кристаллизации 2-глюкозида аскорбиновой кислоты с получением безводного кристаллического 2-глюкозида аскорбиновой кислоты. Однако вышеуказанный порошок качества реагента отличается от порошка с подходящим для лечебно-профилактической косметики качеством тем, что, помимо обычных стадий производства, в его случае требуется стадия рекристаллизации - растворения некогда полученных кристаллов, а затем опять его кристаллизация и стадия промывки - повторные промывки рекристаллизованных кристаллов водой высокого качества, и т.д., для увеличения степени чистоты 2-глюкозида аскорбиновой кислоты до степени, составляющей 99,9% в весовом отношении или более. Таким образом, даже порошок с подходящим для лечебно-профилактической косметики качеством можно превратить в почти не способную твердеть дисперсную композицию, содержащую безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, когда степень чистоты можно увеличить до 99,9% в весовом отношении или более.

Однако для увеличения степени чистоты безводного кристаллического 2-глюкозида аскорбиновой кислоты до более высокой степени чистоты вплоть до по меньшей мере 99,9% в весовом отношении, отмеченной выше, помимо обычных стадий производства потребуются необязательные стадии: стадия рекристаллизации и стадия промывки водой высокого качества, приводящие к нежелательному увеличению времени и работы, требуемых для его производства, вызывающие потерю 2-глюкозида аскорбиновой кислоты на стадиях рекристаллизации и промывки, понижающие выход продукции и значительно увеличивающие производственные затраты. Следовательно, просто увеличение чистоты 2-глюкозида аскорбиновой кислоты до степени, составляющей 99,9% в весовом отношении или более, для получения менее способной твердеть дисперсной композиции, содержащей безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, чем порошок с подходящим для лечебно-профилактической косметики качеством, не является практичным вариантом выбора.

Авторы настоящего изобретения продолжили изучение твердения дисперсной композиции, содержащей безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, и осуществили неоднократные исследования методом проб и ошибок, и они установили, что, по сравнению с традиционными порошками с подходящим для лечебно-профилактической косметики качеством, значительно менее способная твердеть дисперсная композиция, содержащая безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, является композицией, которая имеет либо увеличенную степень кристалличности, составляющую 90% или более для безводного кристаллического 2-глюкозида аскорбиновой кислоты, или уменьшенный уровень динамического поглощения паров для дисперсной композиции, составляющий 0,01% в весовом отношении или менее, даже если дисперсная композиция имеет ту же степень чистоты 2-глюкозида аскорбиновой кислоты, что и традиционные порошки с подходящим для лечебно-профилактической косметики качеством, или имеет степень чистоты, меньшую таковой в порошке качества реагента.

Авторы настоящего изобретения, кроме того, продолжили изучение способа производства в промышленном масштабе дисперсной композиции, содержащей безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты с определенной выше степенью кристалличности и характеризующейся определенным выше уровнем динамического поглощения паров, при установлении, что дисперсную композицию, содержащую безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, приготовленный с помощью следующих стадий, можно относительно легко приготовить посредством превращения порошка, содержащего безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, кристаллизованного из следующего раствора, в дисперсную композицию со степенью кристалличности, составляющей 90% или более для безводного кристаллического 2-глюкозида аскорбиновой кислоты, и уровнем динамического поглощения паров для дисперсной композиции, составляющим 0,01% в весовом отношении или менее, а именно стадии обеспечения действия цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы и глюкоамилазы в этом порядке на раствор, содержащий L-аскорбиновую кислоту и крахмальное вещество, для образования 2-глюкозида аскорбиновой кислоты с высоким выходом продукции, составляющим 35% в весовом отношении или более, стадии очистки результирующего раствора для увеличения содержания 2-глюкозида аскорбиновой кислоты вплоть до более 86% в весовом отношении, на основе сухого остатка.

Авторы настоящего изобретения установили, что дисперсная композиция, имеющая степень кристалличности, составляющую 90% или более для безводного кристаллического 2-глюкозида аскорбиновой кислоты, или характеризующаяся уровнем динамического поглощения паров, составляющим 0,01% в весовом отношении или менее, значительно менее способна твердеть по сравнению с традиционными порошками с подходящим для лечебно-профилактической косметики качеством; в качестве материала для пищевых продуктов, косметических средств, лечебно-профилактической косметики и лекарственных препаратов ею легко манипулировать; и она имеет исключительное значение и ценность. Таким образом, они завершили это изобретение.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ПРИЛАГАЕМЫХ ЧЕРТЕЖЕЙ

Фиг.1 представляет собой пример дифракционной картины рентгеновских лучей, полученной с использованием характеристического рентгеновского излучения, для порошка в виде дисперсной композиции, содержащей безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, которая по существу состоит из безводного кристаллического 2-глюкозида аскорбиновой кислоты.

Фиг.2 представляет собой пример дифракционной картины рентгеновских лучей, полученной с использованием характеристического рентгеновского излучения, для порошка в виде дисперсной композиции, содержащей 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, которая по существу состоит из аморфного 2-глюкозида аскорбиновой кислоты.

Фиг.3 представляет собой пример дифракционной картины рентгеновских лучей, полученной с использованием синхротронного излучения, для порошка в виде дисперсной композиции, содержащей безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, которая по существу состоит из безводного кристаллического 2-глюкозида аскорбиновой кислоты.

Фиг.4 представляет собой пример дифракционной картины рентгеновских лучей, полученной с использованием синхротронного излучения, для порошка в виде дисперсной композиции, содержащей 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, которая по существу состоит из аморфного 2-глюкозида аскорбиновой кислоты.

Фиг.5 является схематическим представлением структуры высшего порядка цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы, происходящей из микроорганизма рода Geobacillus.

Фиг.6 является схематическим представлением остатков, формирующих каталитический участок, и консервативных районов цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы, происходящей из микроорганизма рода Geobacillus.

Фиг.7 является изображением структуры и распознаваемых рестрикционными ферментами сайтов рекомбинантной ДНК «pRSET-iBTC12», содержащей ген цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы (CGTase), происходящий из микроорганизма рода Geobacillus, используемый в настоящем изобретении.

Трактовка обозначений

На фиг.5 и 6 обозначения «A»-«D» означают домен A цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы, домен В цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы, домен C цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы и домен D цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы, соответственно.

На фиг.5 «спираль» означает α-спиральную структуру; "пластинчатая стрелка" - структуру β-складчатого листа; и «тонкая нить» - петлеобразную структуру.

На фиг.6 обозначения [1]-[4] означают консервативные районы 1-4, обычно присутствующие в семействе α-амилаз, соответственно; обозначение «●» - формирующий каталитический участок остаток; «D225» - остаток аспарагиновой кислоты в положении 225 в качестве одного из остатков, формирующих каталитический участок цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы; «D253» - остаток глютаминовой кислоты в положении 253 в качестве одного из остатков, формирующих каталитический участок цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы; и «D324» - остаток аспарагиновой кислоты в положении 324 в качестве одного из остатков, формирующих каталитический участок цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы.

На фиг.7, обозначение «pUC ori» означает начало репликации плазмиды pUC; «T7» - промотор T7; «белая стрелка (Amp)» - ген устойчивости к ампициллину; и «черная стрелка» - ген цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение решает вышеуказанные задачи в результате обеспечения дисперсной композиции, которая содержит 2-глюкозид аскорбиновой кислоты в количестве, которое больше 98,0% в весовом отношении, но меньше 99,9% в весовом отношении, на основе сухого остатка, и имеет степень кристалличности, составляющую 90% или более для безводного кристаллического 2-глюкозида аскорбиновой кислоты, при расчете на основе дифракционной картины рентгеновских лучей для порошка - дисперсной композиции.

Настоящее изобретение решает вышеуказанные задачи в результате обеспечения дисперсной композиции, содержащей 2-глюкозид аскорбиновой кислоты в количестве, которое больше 98,0% в весовом отношении, но меньше 99,9% в весовом отношении, на основе сухого остатка, и характеризуется уровнем динамического поглощения паров для дисперсной композиции, составляющим 0,01% в весовом отношении или менее, после хранения при 25ºC при относительной влажности, составляющей 35%, в течение 12 часов после удаления воды в потоке газообразного азота.

В качестве предпочтительного варианта осуществления согласно настоящему изобретению, дисперсная композиция, содержащая безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, настоящего изобретения содержит частицы с размером частиц, составляющим менее 150 мкм, в количестве, составляющем 70% в весовом отношении или более относительно всей дисперсной композиции, и частицы с размером частиц, составляющим по меньшей мере 53 мкм, но менее 150 мкм, в количестве, составляющем 40-60% в весовом отношении относительно всей дисперсной композиции. В качестве другого предпочтительного варианта осуществления дисперсная композиция, содержащая безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, настоящего изобретения содержит L-аскорбиновую кислоту и/или D-глюкозу и характеризуется восстановительной способностью всей дисперсной композиции, составляющей менее одного процента в весовом отношении. В более предпочтительном варианте осуществления дисперсная композиция, содержащая безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, настоящего изобретения содержит L-аскорбиновую кислоту в количестве, составляющем 0,1% в весовом отношении или менее, на основе сухого остатка.

Вышеупомянутая дисперсная композиция, содержащая безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, настоящего изобретения обычно представляет собой дисперсную композицию, полученную из раствора, содержащего 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, полученный благодаря стадии обеспечения действия цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы на раствор, содержащий L-аскорбиновую кислоту и крахмальное вещество.

Настоящее изобретение решает вышеуказанные задачи в результате обеспечения способа производства дисперсной композиции, содержащей безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, характеризующегося тем, что он содержит стадии обеспечения действия цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы и глюкоамилазы в этом порядке на раствор, содержащий L-аскорбиновую кислоту и крахмальное вещество, для получения раствора, содержащего 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, с выходом продукции, составляющим 35% в весовом отношении или более 2-глюкозида аскорбиновой кислоты; очистки результирующего раствора для увеличения содержания 2-глюкозида аскорбиновой кислоты до уровня, превышающего 86% в весовом отношении, на основе сухого остатка; кристаллизации безводного кристаллического 2-глюкозида аскорбиновой кислоты в очищенном растворе; сбора кристаллизованного безводного кристаллического 2-глюкозида аскорбиновой кислоты; и выдерживания и высушивания собранных кристаллов; и необязательно измельчения полученных в результате кристаллов.

Примеры цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы, используемой в способе настоящего изобретения, включают любые из встречающихся в природе ферментов цикломальтодекстрин-глюканотрансфераз и те, которые приготовлены с помощью технологии рекомбинантных ДНК, независимо от их происхождений и источников, если они образуют 2-глюкозид аскорбиновой кислоты с выходом продукции, составляющим 35% в весовом отношении или более, когда обеспечивают действие цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы и глюкоамилазы в этом порядке на раствор, содержащий L-аскорбиновую кислоту и крахмальное вещество. Однако, с учетом выхода продукции 2-глюкозида аскорбиновой кислоты, предпочтительными являются позже описываемые цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы, происходящие из штамма Tc-62 Geobacillus stearothermophilus и штамма Tc-27 Geobacillus stearothermophilus, и мутантные цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы, полученные в результате мутирования цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы, происходящей из штамма Tc-91 Geobacillus stearothermophilus, с помощью технологии рекомбинантных ДНК. Среди них цикломальтодекстрин-глюканотрансфераза из штамма Tc-62 Geobacillus stearothermophilus является наиболее предпочтительно используемой из-за относительно высокого выхода продукции ею 2-глюкозида аскорбиновой кислоты.

Используемая в настоящем изобретении глюкоамилаза не должна особо ограничиваться, и любые из встречающихся в природе и рекомбинантных ферментов могут использоваться независимо от их происхождений и источников, если они образуют 2-глюкозид аскорбиновой кислоты с выходом продукции, составляющим 35% в весовом отношении или более, когда обеспечивают действие цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы и глюкоамилазы в этом порядке на раствор, содержащий L-аскорбиновую кислоту и крахмальное вещество.

С помощью изменения в зависимости от типа крахмального вещества, используемого в качестве материала при допуске действия цикломальтодекстрин-глюканотрансферазы на раствор, содержащий L-аскорбиновую кислоту и крахмальное вещество, выход продукции 2-глюкозида аскорбиновой кислоты можно увеличить с помощью обеспечения действия на раствор разветвляющего крахмал фермента, такого как изоамилаза и пуллуланаза, наряду с цикломальтодекстрин-глюканотрансферазой.

В предпочтительном варианте осуществления способа согласно настоящему изобретения, стадию очистки вышеуказанного раствора, содержащего 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, для увеличения содержания 2-глюкозида аскорбиновой кислоты до более 86% в весовом отношении, на основе сухого остатка, осуществляют посредством обеспечения контакта раствора ферментативной реакции после фильтрации и обессоливания с анионообменной смолой для адсорбции на ней 2-глюкозида аскорбиновой кислоты и L-аскорбиновой кислоты, удаления сахаридов, таких как D-глюкоза, с помощью воды высокого качества, подачи в качестве элюента водного раствора с составляющей менее 0,5 н концентрацией соляной кислоты или ее соли(ей) для элюирования 2-глюкозида аскорбиновой кислоты и L-аскорбиновой кислоты, концентрирования полученного в результате элюата, подачи сконцентрированного элюата на хроматографическую колонку с катионообменной смолой или пористой синтетической смолой и подачи элюента для осуществления элюирования. Особенно предпочтительными в качестве хроматографии на колонке с катионообменной смолой являются хроматографии системы с псевдодвижущимся слоем, используя сильнокислотный катионит в качестве наполнителя, поскольку с их помощью требуемую фракцию с составляющим более 86% в весовом отношении содержанием 2-глюкозида аскорбиновой кислоты предпочтительно получают с удовлетворительной эффективностью и выходом продукции.

Настоящее изобретение решает вышеуказанные задачи в результате обеспечения порошкового материала для пищевых продуктов, косметических средств, лечебно-профилактической косметики и лекарственных препаратов, который состоит из дисперсной композиции, содержащей безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, настоящего изобретения.

Примеры материалов для пищевых продуктов, преимущественно используемых в настоящем изобретении, включают повышающие содержание витамина C средства, усилители продукции коллагена, отбеливающие кожу средства, средства для улучшения вкуса, средства для улучшения качества, средства для предотвращения темнения, подкислители, наполнители, передающиеся организму средства и антиоксиданты. Примеры материалов для косметических средств, преимущественно используемых в настоящем изобретении, включают отбеливающие кожу средства, средства для активации клеток, усилители продукции коллагена, повышающие содержание витамина C средства, средства для улучшения вкуса, средства для улучшения качества, средства для предотвращения темнения, подкислители, наполнители, передающиеся организму средства, стабилизаторы и антиоксиданты. Примеры материалов для лечебно-профилактической косметики, преимущественно используемых в настоящем изобретении, включают отбеливающие кожу средства, средства для активации клеток, усилители продукции коллагена, повышающие содержание витамина C средства, средства для улучшения вкуса, средства для улучшения качества, средства для предотвращения темнения, подкислители, наполнители, передающиеся организму средства, стабилизаторы и антиоксиданты. Кроме того, примеры материалов для лекарственных препаратов, преимущественно используемых в настоящем изобретении, включают отбеливающие кожу средства, средства для активации клеток, усилители продукции коллагена, средства для предохранения органов, ингибирующие разрушение радикалами средства, повышающие содержание витамина C средства, средства для предотвращения темнения, наполнители, вспомогательные средства, стабилизаторы и антиоксиданты.

Детальными объяснениями настоящего изобретения является следующее:

Определение терминов

На протяжении всего описания следующие термины означают следующее:

«Степень кристалличности»

Термин «степень кристалличности безводного кристаллического 2-глюкозида аскорбиновой кислоты», упоминаемый в описании, означает значение, определяемое согласно следующей формуле [1].

Формула [1]:

H₁₀₀: значение степени кристалличности, определенное аналитическим способом на основе дифракционной картины рентгеновских лучей для содержащего безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты порошкообразного стандартного образца, который по существу состоит из безводного кристаллического 2-глюкозида аскорбиновой кислоты.

H₀: значение степени кристалличности, определенное аналитическим способом на основе дифракционной картины рентгеновских лучей для содержащего 2-глюкозид аскорбиновой кислоты порошкообразного стандартного образца, который по существу состоит из аморфной формы 2-глюкозида аскорбиновой кислоты.

Hs: значение степени кристалличности, определенное аналитическим способом на основе дифракционной картины рентгеновских лучей для содержащего 2-глюкозид аскорбиновой кислоты порошка в качестве исследуемого образца.

В случае формулы [1] дифракционные картины рентгеновских лучей для порошков, используемые в качестве основы для определения аналитическим способом значений H₁₀₀, H₀ и Hs, обычно определяют с помощью порошкового рентгеноструктурного анализатора, оснащенного отражательной оптической системой или оптической системой пропускающего типа. Дифракционные картины рентгеновских лучей для порошков содержат данные об углах дифракции и интенсивностях дифракции для безводного кристаллического 2-глюкозида аскорбиновой кислоты, содержащегося в исследуемом или стандартном образце. Примеры аналитических способов определения значений степени кристалличности таких образцов включают метод Харманса, Вонка и т.д. Среди них метод Харманса является предпочтительным из-за его простоты и точности. Поскольку эти аналитические способы предоставляются в настоящее время в виде компьютерных программных обеспечений, могут соответственно использоваться любые порошковые рентгеноструктурные анализаторы, оснащенные аналитическим блоком, установленным вместе с любым из вышеуказанных компьютерных программных обеспечений.

В качестве «содержащего безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты порошкообразного стандартного образца, который по существу состоит из безводного кристаллического 2-глюкозида аскорбиновой кислоты», для определения аналитическим способом значения H₁₀₀ должен использоваться безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты в форме дисперсной композиции или отдельного кристалла, которая характеризуется степенью чистоты, составляющей 99,9% в весовом отношении или более (на всем протяжении этого описания используют сокращение термина «% в весовом отношении» - «%», кроме особо оговоренных случаев, но «%», относящийся к степени кристалличности, не должен ограничиваться этим термином), демонстрирует характерные дифракционные пики, присущие безводному кристаллическому 2-глюкозиду аскорбиновой кислоты, и по существу состоит из безводного кристаллического 2-глюкозида аскорбиновой кислоты. Примеры безводного кристаллического 2-глюкозида аскорбиновой кислоты в форме дисперсной композиции или отдельного кристалла включают безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты в форме дисперсной композиции любого определенного выше порошка качества реагента, дисперсные композиции, содержащие безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, полученный в результате рекристаллизации порошка качества реагента, или безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты в форме отдельного кристалла. Для справки, после анализа с помощью компьютерного программного обеспечения для метода Харманса, на основе дифракционной картины рентгеновских лучей для определенного выше порошкообразного стандартного образца содержащей безводный кристаллический 2-глюкозид аскорбиновой кислоты дисперсной композиции, которая по существу состоит из безводного кристаллического 2-глюкозида аскорбиновой кислоты, определяют аналитическим способом значение H₁₀₀, обычно находящееся