Способ получения модуляторов регулятора трансмембранной проводимости кистозного фиброза

Способ получения модуляторов регулятора трансмембранной проводимости кистозного фиброза

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Перекрестная ссылка на родственные заявки

[0001] Настоящая заявка заявляет приоритет относительно временной заявки США, серийный № 61/254634, поданной 23 октября 2009 года, содержание которой включено в настоящую заявку посредством ссылки во всей ее полноте.

Область техники, к которой относится настоящее изобретение

[0001] Настоящее изобретение относится к способу получения модуляторов регулятора трансмембранной проводимости кистозного фиброза ("CFTR").

Предпосылки создания изобретения

[0002] Кистозный фиброз (CF) представляет собой рецессивное генетическое заболевание, которое поражает приблизительно 30000 детей и взрослых в США и приблизительно 30000 детей и взрослых в Европе. Несмотря на прогресс в лечении CF метод его лечения отсутствует.

[0003] CF вызывается мутациями в гене регулятора трансмембранной проводимости кистозного фиброза (CFTR), который кодирует эпителиальный хлорный ионный канал, отвечающий за помощь в регуляции солевой и водной абсорбции и секреции в различных тканях. Лекарственные средства на основе малых молекул, известные как потенцирующие средства, которые повышают вероятность открытия CFTR канала, представляют собой одну потенциальную терапевтическую стратегию для лечения CF.

[0004] В частности, CFTR представляет собой cAMP/ATP-опосредованный анионный канал, который экспрессируется в различных типах клеток, включая абсорбтивные и секреторные эпителиальные клетки, где он регулирует приток анионов через мембрану, а также активность других ионных каналов и белков. В эпителиальных клетках нормальное функционирование CFTR является критическим для поддержания транспорта электролитов в организме, включая респираторную и пищеварительную ткани. CFTR состоит приблизительно из 1480 аминокислот, которые кодируют белок, состоящий из тандемного повтора трансмембранных доменов, каждый из которых содержит шесть трансмембранных двойных спиралей и нуклеотид-связывающий домен. Эти два трансмембранных домена связаны между собой большим полярным регуляторным (R)-доменом с множественными сайтами фосфорилирования, которые регулируют активность канала и клеточный трафик.

[0005] Ген, кодирующий CFTR, был идентифицирован и секвенирован (см. Gregory, R. J. et al. (1990) Nature 347:382-386; Rich, D. P. et al. (1990) Nature 347:358-362), (Riordan, J. R. et al. (1989) Science 245:1066-1073). Дефект в этом гене вызывает мутации в CFTR, приводящие к кистозному фиброзу ("CF"), наиболее распространенному фатальному генетическому заболеванию у людей. Кистозный фиброз поражает приблизительно одного из каждых 2500 детей раннего возраста в США. Из населения США в целом до 10 миллионов людей имеют одну копию дефектного гена без явно выраженных эффектов заболевания. В отличие от этого субъекты с двумя копиями CF-ассоциированного гена страдают от изнурительных и фатальных эффектов CF, включая хроническое легочное заболевание.

[0006] У пациентов с CF мутации в CFTR, эндогенно экспрессируемые в респираторном эпителии, приводят к уменьшенной апикальной анионной секреции, вызывая дисбаланс в транспорте ионов и жидкостей. Полученное в результате снижение анионного транспорта способствует повышенной аккумуляции слизи в легких с сопутствующими микробными инфекциями, которые в конечном счете приводят к смерти CF пациентов. Помимо респираторного заболевания CF пациенты типично страдают от желудочно-кишечных проблем и недостаточной функции поджелудочной железы, что, если это не лечить, приводит к смерти. Кроме того, большинство мужчин с кистозным фиброзом являются бесплодными, и фертильность снижена у женщин с кистозным фиброзом. В отличие от тяжелых эффектов двух копий CF-ассоциированного гена субъекты с одной копией CF-ассоциированного гена демонстрируют повышенную резистентность к холере и к обезвоживанию в результате диареи, возможно, объясняющую относительно высокую распространенность CF гена среди населения.

[0007] Анализ последовательности CFTR гена CF хромосом выявил ряд различных заболеваний, вызывающих мутации (Cutting, G. R. et al. (1990) Nature 346:366-369; Dean, M. et al. (1990) Cell 61:863:870; and Kerem, B-S. et al. (1989) Science 245:1073-1080; Kerem, B-S. et al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:8447-8451). В настоящее время идентифицировано более чем 1000 заболеваний, вызывающих мутации в CF гене (http://www.genet.sickkids.on.ca/cftr/app). Наиболее распространенной мутацией является делеция фенилаланина в положении 508 аминокислотной последовательности CFTR, и ее обычно указывают как ΔF508-CFTR. Эта мутация возникает приблизительно в 70% случаев кистозного фиброза, и она ассоциируется с тяжелым заболеванием.

[0008] Делеция остатка 508 в ΔF508-CFTR препятствует правильной укладке зарождающегося белка. Это приводит к неспособности мутантного белка выходить из ER и перемещаться к плазменной мембране. В результате количество каналов, присутствующих в мембране, намного меньше, чем наблюдается в клетках, экспрессирующих CFTR дикого типа. Помимо нарушенного трафика такая мутация приводит к дефекту воротного механизма канала. Все вместе, уменьшенное количество каналов в мембране и дефект воротного механизма, приводят к снижению анионного транспорта через эпителий, приводя к нарушенному транспорту ионов и жидкостей. (Quinton, P. M. (1990), FASEB J. 4:2709-2727). Исследования, однако, показали, что уменьшенные количества ΔF508-CFTR в мембране являются функциональными, хотя меньше, чем CFTR дикого типа. (Dalemans et al. (1991), Nature Lond. 354:526-528; Denning et al., выше; Pasyk and Foskett (1995), J. Cell. Biochem. 270:12347-50). Помимо ΔF508-CFTR другие вызывающие заболевания мутации в CFTR, которые приводят к нарушению трафика, синтеза и/или воротного механизма канала, можно было бы регулировать либо путем активации, либо даун-регуляции для изменения анионной секреции и модификации прогрессирования и/или тяжести заболевания.

[0009] Хотя CFTR транспортирует различные молекулы помимо анионов, ясно, что эта роль (транспорт анионов) представляет собой один элемент в важном механизме транспорта ионов и воды через эпителий. Другие элементы включают эпителиальный Na⁺ канал, ENaC, Na⁺/2C1^-/K⁺ ко-транспортер, Na⁺-K⁺-ATPазный насос и базолатеральные мембранные K⁺ каналы, которые отвечают за поглощение хлора в клетке.

[0010] Эти элементы работают вместе для достижения направленного транспорта через эпителий через их селективную экспрессию и локализацию в клетке. Абсорбция хлора происходит в результате скоординированной активности ENaC и CFTR, присутствующих на апикальной мембране, и Na⁺-K⁺-ATPазного насоса и Cl ионных каналов, экспрессируемых на базолатеральной поверхности клетки. Вторичный активный транспорт хлора с люминальной стороны приводит к аккумуляции внутриклеточного хлора, который затем пассивно покидает клетку через Cl^- каналы, приводя к векторному транспорту. Расположение Na⁺/2C1^-/K⁺ ко-транспортера, Na⁺-K⁺-ATPазного насоса и базолатеральных мембранных K⁺ каналов на базолатеральной поверхности и CFTR на люминальной стороне координирует секрецию хлора через CFTR на люминальной стороне. Поскольку вода, вероятно, никогда сама активно не транспортируется, ее протекание через эпителий зависит от очень малых трансэпителиальных осмотических градиентов, создаваемых объемным потоком натрия и хлора.

[0011] Как обсуждалось выше, считается, что делеция остатка 508 в ΔF508-CFTR препятствует правильной укладке зарождающегося белка, что приводит к неспособности мутантного белка выходить из ER и перемещаться к плазменной мембране. В результате на плазменной мембране присутствуют недостаточные количества зрелого белка и транспорт хлора в эпителиальных тканях существенно снижен. Действительно, было показано, что этот клеточный феномен дефектного ER процессинга ABC транспортеров при помощи ER механизма лежит в основе не только CF заболевания, но также широкого ряда других отдельных и наследственных заболеваний.

[0012] Соответственно, существует потребность в сильных и селективных модуляторах дикого типа и мутантных форм человеческого CFTR. Эти мутантные формы CFTR включают, но не ограничиваются этим, ΔF508del, G551D, R117H, 2789+5G→A.

[0013] Также существует потребность в модуляторах CFTR активности и их композициях, которые можно использовать для модулирования CFTR активности в клеточной мембране млекопитающего.

[0014] Существует потребность в способах лечения заболеваний, вызванных мутацией в CFTR, с использованием таких модуляторов CFTR активности.

[0015] Существует также потребность в способах модулирования CFTR активности в ex vivo клеточной мембране млекопитающего.

[0016] Кроме того, существует потребность в стабильных твердых формах указанного соединения, которые можно легко использовать в фармацевтических композициях, подходящих для применения в качестве терапевтических средств.

Краткое описание изобретения

[0017] Настоящее изобретение относится к способам синтеза соединений, полезных в качестве модуляторов CFTR.

[0018] В одном аспекте изобретение обеспечивает способ получения кристаллической формы соединения 1:

включающий

(а) взаимодействие соединения 2 с соединением 3 в присутствии связующего вещества:

где связующее вещество выбрано из группы, включающей тетрафторборат 2-хлор-1,3-диметил-2-имидазолия, HBTU, HCTU, 2-хлор-4,6-диметокси-1,3,5-триазин, HATU, HOBT/EDC, и T3P®.

[0019] Соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые композиции являются полезными для лечения или ослабления тяжести ряда заболеваний, расстройств или состояний, включающих, но не ограничивающихся этим, кистозный фиброз, астму, вызванное курением COPD (хроническое обструктивное легочное заболевание), хронический бронхит, риносинусит, запор, панкреатит, недостаточность функции поджелудочной железы, мужское бесплодие, вызванное врожденным двусторонним отсутствием семявыносящих протоков (CBAVD), неосложненную форму легочного заболевания, идиопатический панкреатит, аллергический бронхолегочный аспергиллез (ABPA), заболевание печени, наследственную эмфизему, наследственный гемохроматоз, коагуляционно-фибринолизные недостаточности, такие как дефицит белка С, наследственный ангионевротический отек типа 1, нарушения липидного процессинга, такие как семейная гиперхолестеринемия, хиломикронемия типа 1, абеталипопротеинемия, лизосомальные болезни накопления, такие как болезнь клеточных включений/болезнь Дери, мукополисахаридоз, Sandhof/Tay-Sachs, болезнь Криглера-Найяра типа II, полиэндокринопатию/гиперинсулемию, сахарный диабет, карликовость Ларона, миелопероксидазную недостаточность, первичный гипопаратиреоз, меланому, гликаноз CDG типа 1, врожденный тиреотоксикоз, несовершенный остеогенез, наследственную гипофибриногенемию, недостаточное активированное время свертывания крови (АСТ), несахарный диабет (НД), несахарный нейрофизарный диабет, нефрогенный несахарный диабет, мышечную атрофию Шарко-Мари-Тута, болезнь Перлизауса-Мерцбахера, нейродегенеративные заболевания, такие как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, боковой амиотрофический склероз, прогрессирующий супрануклеарный паралич, атрофия Пика, некоторые полиглутаминовые неврологические расстройства, такие как болезнь Гентингтона, спинально-церебеллярную атаксию типа I, спинальную и бульбарную мышечную атрофию, dentatorubal pallidoluysian и миотоническую дистрофию, а также губчатые энцефалопатии, такие как наследственная болезнь Крейтцфельдта-Якоба (из-за дефекта процессинга прионного белка), болезнь Фабри, синдром Штросслера-Шейнкера, COPD, синдром сухих глаз или болезнь Шегрена, остеопороз, остеопению, заживление костей и рост костей (включая восстановление кости, регенерацию костной ткани, снижение резорбции костной ткани и увеличение костных отложений), синдром Горема, хлоридные каналопатии, такие как врожденная миотония (формы Томсона и Бекера), синдром Барттера типа III, болезнь Дента, гиперэкплексию, эпилепсию, гиперэкплексию, лизосомную болезнь накопления, синдром Ангельмана и первичную цилиарную дискинезию (PCD), термин для наследственных нарушений структуры и/или функции реснитчатых структур, включая PCD с транспозицией внутренних органов (также известный как синдром Картагенера), PCD без транспозиции внутренних органов и цилиарную аплазию.

[0020] В одном аспекте соединение 1 присутствует в кристаллической форме, которая указана как форма A.

[0021] В другом аспекте соединение 1 присутствует в кристаллической форме, которая указана как форма B.

[0022] В следующем аспекте соединение 1 присутствует в кристаллической форме, которая указана как форма A-HCl.

[0023] В дополнительном аспекте соединение 1 присутствует в кристаллической форме, которая указана как форма B-HCl.

[0024] Способы, описанные в настоящей заявке, можно использовать для получения композиций по настоящему изобретению, включающих форму A, форму A-HCl, форму B, форму B-HCl или любое сочетание этих форм.

Краткое описание фигур

[0025] Фиг.1 представляет рентгеновскую порошковую дифрактограмму репрезентативного образца соединения 1 формы A.

[0026] Фиг.2 представляет FTBR спектр репрезентативного образца соединения 1 формы A.

[0027] Фиг.3 иллюстрирует конформационную структуру соединения 1 формы А на основании одного рентгеновского анализа.

[0028] Фиг.4 представляет рентгеновскую порошковую дифрактограмму иллюстративного образца соединения 1 формы A-HCl.

[0029] Фиг.5 представляет DSC кривую для репрезентативного образца соединения 1 формы A-HCl.

[0030] Фиг.6 представляет кривую, полученную при помощи термогравиметрического анализа репрезентативного образца соединения 1 формы A-HCl, которая представляет массу образца как функцию температуры.

[0031] Фиг.7 представляет FTIR спектр репрезентативного образца соединения 1 формы A-HCl.

[0032] Фиг.8 представляет твердофазный ¹³C ЯМР спектр репрезентативного образца соединения 1 формы A-HCl.

[0033] Фиг.9 представляет твердофазный ¹⁹F ЯМР спектр репрезентативного образца соединения 1 формы A-HCl.

[0034] Фиг.10A представляет рентгеновскую порошковую дифрактограмму для репрезентативного образца соединения 1 формы B, полученную при помощи инструмента 1.

[0035] Фиг.10B представляет рентгеновскую порошковую дифрактограмму для репрезентативного образца соединения 1 формы B, полученную при помощи инструмента 2.

[0036] Фиг.11 представляет DSC кривую для репрезентативного образца соединения 1 формы B.

[0037] Фиг.12 представляет кривую, полученную при помощи термогравиметрического анализа репрезентативного образца соединения 1 формы B, которая представляет массу образца как функцию температуры.

[0038] Фиг.13 представляет FTIR спектр репрезентативного образца соединения 1 формы B.

[0039] Фиг.14 представляет твердофазный ^l3C ЯМР спектр репрезентативного образца соединения 1 формы B.

[0040] Фиг.15 представляет твердофазный ^l9F ЯМР спектр репрезентативного образца соединения 1 формы B.

[0041] Фиг.16 представляет рентгеновскую порошковую дифрактограмму соединения 1 формы B-HCl.

[0042] Фиг.17 представляет DSC кривую для репрезентативного образца соединения 1 формы B-HCl.

[0043] Фиг.18 представляет кривую, полученную при помощи термогравиметрического анализа репрезентативного образца соединения 1 формы B-HCl, которая представляет массу образца как функцию температуры.

[0044] Фиг.19 представляет FTIR спектр репрезентативного образца соединения 1 формы B-HCl.

[0045] Фиг.20 представляет твердофазный ¹³C ЯМР спектр репрезентативного образца соединения 1 формы B-HCl.

[0046] Фиг.21 представляет твердофазный ¹⁹F ЯМР спектр репрезентативного образца соединения 1 формы B-HCl.

Подробное описание изобретения

Определения

[0047] Как это используется в настоящей заявке, следующие определения являются применимыми, если не указано иное.

[0048] Термин "ABC-транспортер", как он используется в настоящей заявке, означает ABC-транспортерный белок или его фрагмент, содержащий по меньшей мере один связывающий домен, где указанный белок или его фрагмент присутствует in vivo или in vitro. Термин "связывающий домен", как он используется в настоящей заявке, означает домен на ABC-транспортере, который может связываться с модулятором. См., например, Hwang, T. C. et al., J. Gen. Physiol. (1998): 111(3), 477-90.

[0049] Термин "CFTR", как он используется в настоящей заявке, означает регулятор трансмембранной проводимости кистозного фиброза или его мутацию, обладающую способностью регулятора активности, включая, но не ограничиваясь этим, ΔF508 CFTR, R117H CFTR и G551D CFTR (см., например, http://www.genet.sickkids.on.ca/cftr/, для CFTR мутаций).

[0050] Термин "модулирующий", как он используется в настоящей заявке, означает увеличение или уменьшение на количество, которое можно измерить.

[0051] Термин "нормальный CFTR" или "нормальная CFTR функция", как он используется в настоящей заявке, означает CFTR, подобный дикому типу, без какого-либо повреждения из-за влияния факторов окружающей среды, таких как курение, загрязнение или что-либо, вызывающее воспаление в легких.

[0052] Термин "уменьшенный CFTR" или "пониженная функция CFTR", как он используется в настоящей заявке, означает меньше, чем нормальный CFTR или меньше, чем нормальная функция CFTR.

[0053] Термин "кристаллический" относится к соединениям или композициям, где структурные единицы расположены так, что образуют постоянные геометрические структуры или решетки, таким образом, кристаллические твердые вещества имеют жесткий дальний порядок структуры. Структурные единицы, которые образуют кристаллическую структуру, могут представлять собой атомы, молекулы или ионы. Кристаллические твердые вещества показывают определенные точки плавления.

[0054] Термин "по существу кристаллический" относится к твердому веществу, которое преимущественно имеет структуру в виде постоянных геометрических форм или решеток, которые имеют жесткий дальний порядок. Например, по существу кристаллические вещества имеют более чем около 85% кристалличности (например, более чем около 90% кристалличности, более чем около 95% кристалличности или более чем около 99% кристалличности). Также следует отметить, что термин «по существу кристаллический» включает ключевое слово 'кристаллический', которое определено в предыдущем абзаце.

[0055] Для целей настоящего изобретения химические элементы обозначаются в соответствии с Периодической таблицей элементов, CAS version, Handbook of Chemistry and Physics, 75^th Ed. Кроме того, общие принципы органической химии описаны в "Organic Chemistry", Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999, и в "March's Advanced Organic Chemistry", 5^th Ed., Ed.: Smith, M. B. and March, J., John Wiley & Sons, New York: 2001, полное содержание которых включено в настоящую заявку посредством ссылки.

[0056] Термин "стабильный", как он используется в настоящей заявке, относится к соединениям, которые, по существу, не изменяются, будучи подверженными условиям, которые делают возможным их получение, детекцию и, предпочтительно, их выделение, очистку и использование по одному или нескольким назначениям, раскрытым в настоящей заявке. В некоторых вариантах воплощения стабильное соединение или химически достижимое соединение представляет собой такое, которое, по существу, не изменяется при выдерживании при температуре 40°C или ниже в отсутствие влаги или в других химически реакционных условиях в течение по меньшей мере недели.

[0057] Примеры подходящих растворителей, которые можно использовать в настоящем изобретении, включают, но не ограничиваются этим, воду, метанол, дихлорметан (ДСМ, DCM), ацетонитрил, диметилформамид (ДМФ, DMF), метилацетат (MeOAc), этилацетат (EtOAc), изопропилацетат (IPAc), трет-бутилацетат (t-BuOAc), изопропиловый спирт (IPA), тетрагидрофуран (ТГФ), метилэтилкетон (MEK), трет-бутанол, диэтиловый эфир (Et₂O), метил-трет-бутиловый эфир (МТБЭ, MTBE), 1,4-диоксан и N-метилпирролидон (NMP).

[0058] Примеры подходящих связующих веществ, которые можно использовать в настоящем изобретении, включают, но не ограничиваются этим, гидрохлорид 1-(3-(диметиламино)пропил)-3-этилкарбодиимида (EDCI), гексафторфосфат 2-(1H-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония (HBTU), 1-гидроксибензотриазол (HOBT), гексафторфосфат 2-(1H-7-азабензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония (HATU), тетрафторборат 2-хлор-1,3-диметил-2-имидазолия, 1-H-бензотриазолий-1-[бис(диметиламино)метилен]-5-хлоргексафторфосфат (HCTU), 2-хлор-4,6-диметокси-1,3,5-триазин и 2-пропанфосфоновый ангидрид (T3P®).

[0059] Примеры подходящих оснований, которые можно использовать в настоящем изобретении, включают, но не ограничиваются этим, карбонат калия (K₂CO₃), N-метилморфолин (NMM), триэтиламин (Et₃N; TEA), диизопропилэтиламин (i-Pr₂EtN; DIEA), пиридин, гидроксид калия (KOH), гидроксид натрия (NaOH) и метоксид натрия (NaOMe; NaOCH₃).

[0060] Кроме того, также подразумевается, если не указано иное, что структуры, представленные в настоящей заявке, включают соединения, которые отличаются только присутствием одного или нескольких изотопно-обогащенных атомов. Например, соединения, имеющие представленные структуры за исключением замены водорода дейтерием или тритием или замены углерода углеродом ¹³C или ¹⁴C, включены в объем настоящего изобретения. Такие соединения являются полезными, например, в качестве аналитических инструментов, зондов в биологических анализах.

Способы по настоящему изобретению

[0061] В основном, изобретение обеспечивает способы синтеза соединений, полезных в качестве модуляторов CFTR.

Получение соединения 1

[0062] В некоторых вариантах воплощения изобретение обеспечивает способ получения кристаллической формы соединения 1:

включающий

(а) взаимодействие соединения 2 с соединением 3 в присутствии связующего вещества

где связующее вещество выбрано из группы, включающей тетрафторборат 2-хлор-1,3-диметил-2-имидазолия, HBTU, HCTU, 2-хлор-4,6-диметокси-1,3,5-триазин, HATU, HOBT/EDC и T3P®.

[0063] В другом аспекте этого варианта воплощения соединение 3 может представлять собой соль HCl.

[0064] В одном аспекте этого варианта воплощения связывание соединения 2 и соединения 3 осуществляют в присутствии основания, такого как K₂CO₃, Et₃N, N-метилморфолин (NMM), пиридин или диизопропилэтиламин (DIEA).

[0065] В другом аспекте этого варианта воплощения связывание соединения 2 и соединения 3 осуществляют в присутствии пиридина или DIEA.

[0066] В другом аспекте этого варианта воплощения связывание соединения 2 и соединения 3 осуществляют в присутствии пиридина.

[0067] В другом аспекте этого варианта воплощения связывание соединения 2 и соединения 3 осуществляют в присутствии растворителя. В одном аспекте растворитель представляет собой полярный апротонный растворитель. Например, растворитель выбран из группы, включающей этилацетат, изопропилацетат, тетрагидрофуран, метилэтилкетон, N-метил-2-пирролидон, ацетонитрил, Ν,Ν-диметилформамид или 2-метилтетрагидрофуран. Более конкретно, растворитель представляет собой 2-метилтетрагидрофуран.

[0068] В другом аспекте этого варианта воплощения связывание соединения 2 и соединения 3 осуществляют при температуре реакции, которую поддерживают в пределах от 30°C до 80°C. В следующих аспектах связывание соединения 2 и анилина формулы 3 осуществляют при температуре реакции, которую поддерживают в пределах от 30°C до 80°C (например, в пределах приблизительно от 40°C до 78°C, в пределах приблизительно от 45°C до 75°C, в пределах приблизительно от 50°C до 70°C, в пределах приблизительно от 62°C до 68°C или около 65°C). Например, связывание соединения 2 и соединения 3 осуществляют при температуре реакции, которую поддерживают при около 65°C.

[0069] В другом аспекте этого варианта воплощения соединение 1 представляет собой твердую форму A.

[0070] В другом варианте воплощения изобретение обеспечивает соединение 1, полученное способом, описанным в предыдущих параграфах.

Получение соединения 1 формы A

[0078] В другом варианте воплощения изобретение обеспечивает способ получения соединения 1, имеющего твердую форму A,

включающий взаимодействие соединения 2 с соединением 3 в присутствии связующего вещества

где связующее вещество выбрано из группы, включающей тетрафторборат 2-хлор-1,3-диметил-2-имидазолия, HBTU, HCTU, 2-хлор-4,6-диметокси-1,3,5-триазин, HATU, HOBT/EDC и T3P®.

[0079] В некоторых других аспектах этого варианта воплощения соединение 3 может представлять собой соль HCl.

[0080] В одном аспекте этого варианта воплощения связывание соединения 2 и соединения 3 осуществляют в присутствии основания, такого как K₂CO₃, Et₃N, N-метилморфолин (NMM), пиридин или диизопропилэтиламин (DIEA).

[0081] В другом аспекте этого варианта воплощения связывание соединения 2 и соединения 3 осуществляют в присутствии пиридина или DIEA.

[0082] В другом аспекте этого варианта воплощения связывание соединения 2 и соединения 3 осуществляют в присутствии пиридина.

[0083] В другом аспекте этого варианта воплощения связывание соединения 2 и соединения 3 осуществляют в присутствии полярного апротонного растворителя. Например, полярный апротонный растворитель выбран из группы, включающей этилацетат, изопропилацетат, тетрагидрофуран, метилэтилкетон, N-метил-2-пирролидон, ацетонитрил, Ν,Ν-диметилформамид или 2-метилтетрагидрофуран. Более конкретно, связывание соединения 2 и соединения 3 осуществляют в присутствии 2-метилтетрагидрофурана.

[0084] В другом аспекте этого варианта воплощения связывание соединения 2 и соединения 3 осуществляют при температуре реакции, которую поддерживают в пределах от 30°C до 80°C. В следующих аспектах связывание соединения 2 и анилина формулы 3 осуществляют при температуре реакции, которую поддерживают в пределах от 30°C до 80°C (например, в пределах приблизительно от 40°C до 78°C, в пределах приблизительно от 45°C до 75°C, в пределах приблизительно от 50°C до 70°C, в пределах приблизительно от 62°C до 68°C или около 65°C). Например, связывание соединения 2 и соединения 3 осуществляют при температуре реакции, которую поддерживают при около 65°C.

[0085] В другом варианте воплощения изобретение обеспечивает соединение 1 формы A, полученное способом, описанным в предыдущих параграфах.

[0086] В одном варианте воплощения изобретение обеспечивает способ получения соединения 1 формы A, включающий взаимодействие соединения 2 с соединением 3 в присутствии T3P® и пиридина, при температуре около 65°C, в течение около 10 часов, в растворителе 2-MeTГФ.

Получение соединения 1 формы B

[0087] В другом варианте воплощения изобретение обеспечивает способ получения соединения 1, имеющего твердую форму B:

включающий

(a) взаимодействие соединения 2 с гидрохлоридной солью соединения 3 (3-HCl) в присутствии связующего вещества, выбранного из группы, включающей тетрафторборат 2-хлор-1,3-диметил-2-имидазолия, HBTU, HCTU, 2-хлор-4,6-диметокси-1,3,5-триазин, HATU, HOBT/EDC и T3P®.

[0088] В одном аспекте этого варианта воплощения связывание соединения 2 и гидрохлоридной соли 3-HCl осуществляют в присутствии основания, такого как K₂CO₃, Et₃N, N-метилморфолин (NMM), пиридин или DIEA.

[0089] В некоторых других аспектах этого варианта воплощения гидрохлоридная соль 3-HCl может представлять собой соединение 3.

[0090] В другом аспекте этого варианта воплощения связывание соединения 2 и гидрохлоридной соли 3-HCl осуществляют в присутствии пиридина или DIEA.

[0091] В другом аспекте этого варианта воплощения связывание соединения 2 и гидрохлоридной соли 3-HCl осуществляют в присутствии пиридина.

[0092] В другом аспекте этого варианта воплощения связывание соединения 2 и гидрохлоридной соли 3-HCl осуществляют в присутствии растворителя, такого как EtOAc, IPAc, ТГФ, MEK, NMP, ацетонитрил, DMF или 2-метилтетрагидрофуран. Более конкретно, связывание соединения 2 и гидрохлоридной соли 3-HCl осуществляют в присутствии 2-метилтетрагидрофурана.

[0093] В другом аспекте этого варианта воплощения связывание соединения 2 и гидрохлоридной соли 3-HCl осуществляют при температуре реакции, которую поддерживают в пределах от 15°C до 70°C. В следующих аспектах связывание соединения 2 и гидрохлоридной соли 3-HCl осуществляют при температуре реакции, которую поддерживают в пределах от 15°C до 70°C (например, в пределах приблизительно от 20°C до 65°C, в пределах приблизительно от 25°C до 60°C, в пределах приблизительно от 30°C до 55°C, в пределах приблизительно от 35°C до 50°C или около 45°C). В предпочтительном аспекте этого варианта воплощения связывание соединения 2 и HCl соли соединения 3 осуществляют при температуре реакции, которую поддерживают при около 45°C.

[0094] В другом аспекте реакцию связывания осуществляют при перемешивании в течение времени от около 1,5 часов до около 10 часов. В следующих аспектах реакцию связывания осуществляют при перемешивании в течение времени от около 1,5 часов до около 10 часов (например, от около 2 часов до около 7 часов, от около 3 часов до около 6 часов, от около 4 часов до около 5,5 часов или около 5 часов).

[0095] В другом варианте воплощения изобретение обеспечивает соединение 1 формы B, полученное способом, описанным в предыдущих параграфах.

[0096] В одном варианте воплощения изобретение обеспечивает способ получения соединения 1 формы B, включающий взаимодействие соединения 2 с соединением 3-HCl в присутствии T3P® и пиридина, при температуре около 45°C, в течение около 5-6 часов, в растворителе 2-MeTГФ.

Получение соединения 1 формы A-HCl

[0097] В другом варианте воплощения изобретение обеспечивает способ получения гидрохлоридной соли соединения 1, имеющего твердую форму A-HCl:

включающий

(a) взаимодействие соединения 2 с гидрохлоридной солью соединения 3 (3-HCl) в присутствии связующего вещества, выбранного из группы, включающей тетрафторборат 2-хлор-1,3-диметил-2-имидазолия, HBTU, HCTU, 2-хлор-4,6-диметокси-1,3,5-триазин, HATU, HOBT/EDC и T3P®.

и

(b) обработку смесей продукта стадии (a) при помощи HCl.

[0098] В одном аспекте этого варианта воплощения стадию (a) осуществляют в присутствии основания, такого как K₂CO₃, Et₃N, N-метилморфолин (NMM), пиридин или диизопропилэтиламин (DIEA).

[0099] В другом аспекте этого варианта воплощения стадию (a) осуществляют в присутствии пиридина или DIEA.

[00100] В другом аспекте этого варианта воплощения стадию (a) осуществляют в присутствии пиридина.

[00101] В другом аспекте этого варианта воплощения стадию (a) осуществляют в присутствии полярного апротонного растворителя. Например, полярный апротонный растворитель выбран из группы, включающей этилацетат, изопропилацетат, тетрагидрофуран, метилэтил кетон, N-метил-2-пирролидон, ацетонитрил, Ν,Ν-диметилформамид или 2-метилтетрагидрофуран. Более конкретно, связывание соединения 2 и 3-HCl осуществляют в присутствии 2-метилтетрагидрофурана.

[00102] В другом аспекте этого варианта воплощения стадию (a) осуществляют при температуре реакции, которую поддерживают в пределах от 10°C до 80°C. В другом аспекте этого варианта воплощения стадию (a) осуществляют при температуре реакции, которую поддерживают в пределах от 15°C до 70°C. В следующих аспектах связывание соединения 2 и HCl соли соединения 3 осуществляют при температуре реакции, которую поддерживают в пределах от 15°C до 70°C (например, в пределах приблизительно от 20°C до 65°C, в пределах приблизительно от 25°C до 60°C, в пределах приблизительно от 30°C до 55°C, в пределах приблизительно от 35°C до 50°C или около 45°C). Например, связывание соединения 2 и 3-HCl осуществляют при температуре реакции, которую поддерживают при около 45°C.

[00103] В другом аспекте этого варианта воплощения время стадии (a) составляет от около 1,5 часов до около 72 часов. В следующих аспектах реакцию связывания осуществляют при перемешивании в течение времени от около 1,5 часов до около 72 часов или больше (например, от около 2 часов до около 48 часов, от около 3 часов до около 24 часов, от около 5 часов до около 20 часов или от около 12 часов до около 15 часов).

[00104] В следующем аспекте этого варианта воплощения продукт связывания стадии (a) обрабатывают хлористым водородом (HCl) на стадии (b). Например, газообразный HCl барботируют в смесь, включающую продукт реакции связывания стадии (a) и неполярный апротонный растворитель, такой как 2-метилтетрагидрофуран.

[00105] Типично по меньшей мере около 1 эквивалента газообразного HCl и вплоть до около 50 эквивалентов газообразного HCl барботируют в смесь. Более типично от около 2 эквивалентов (экв.) до около 20 эквивалентов (от около 5 экв. до около 15 экв., от около 8 экв. до около 12 экв. или около 10 экв.) газообразного HCl барботируют в реакционную смесь, включающую продукт связывания стадии (a).

[00106] Типично газообразный HCl барботируют в смесь продукта стадии (a) и растворителя, такого как апротонный растворитель, в течение времени от около 0,5 часа до около 5 часов и более типично в течение времени от около 0,5 часа до около 5 часов (например, от около 0,75 часа до около 3 часов или около 2 часов).

[00107] В другом варианте воплощения изобретение обеспечивает соединение 1 формы A-HCl, полученное способом, описанным в предыдущих параграфах.

[00108] В одном варианте воплощения изобретение обеспечивает способ получения соединения 1 формы A-HCl, включающий взаимодействие соединения 2 с соединением 3-HCl в присутствии T3P® и пиридина, при температуре около 45°C в течение около 12-15 часов, в растворителе 2-MeTГФ, с последующей обработкой газообразным HCl.

Получение соединения 1 формы B-HCl

[00109] В другом аспекте изобретение обеспечивает способ получения гидрохлоридной соли соединения 1, имеющего твердую форму - форму B-HCl:

включающий

(a) смешивание гидрохлоридной соли соединения 1 формы A-HCl, описанной в настоящей заявке, с органическим растворителем и водой с образованием смеси:

и

(b) нагревание смеси.

[00110] В одном аспекте этого варианта воплощения органический растворитель включает диметилсульфоксид, диметилформамид, диоксан, гексаметилфосфортриамид, тетрагидрофуран, EtOAc, IPAc, ТГФ, MEK, NMP, ацетонитрил, DMF, EtOH, MeOH, изопропиловый спирт или 2-метилтетрагидрофуран. Более конкретно, апротонный растворитель включает 2-метилтетрагидрофуран.

[00111] В другом аспекте смешивание на стадии (a) продолжают на стадии (b), поддерживая смесь при температуре от около 30°C до около 80°C (например, от около 40°C до около 70°C, от около 50°C до около 65°C или около 60°C). Способ по пункту 20, где смесь поддерживают при температуре от 30°C до около 80°C в течение времени от около 12 часов до около 72 часов.

[00112] В другом аспекте после нагревания на стадии (b) смесь фильтруют с образованием фильтровальной лепешки.

[00113] В другом аспекте после фильтрования осуществляют промывку фильтровальной лепешки апротонным растворителем, таким как 2-метилтетрагидрофуран.

[00114] В другом варианте воплощения изобретение обеспечивает соединение 1 формы B-HCl, полученное способом, описанным в предыдущих параграфах.

[00115] В одном варианте воплощения изобретение обеспечивает способ получения соединения 1 формы B-HCl, включающий нагревание соединения 1 формы A-HCl в смеси 2-MeTГФ и воды при температуре 60°C в течение 48 часов; охлаждение до комнатной температуры и фильтрование осажденного продукта и сушку продукта в вакууме при температуре 60°C.