Композиции, содержащие циклические пептиды, и способы их применения

Композиции, содержащие циклические пептиды, и способы их применения

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Изобретение в общем случае относится к циклическим пептидам и их применению в композициях, в частности, композициях для местного, косметического применения и/или личной гигиены, и композициям, содержащим указанные циклические пептиды.

Разнообразные природные и синтетические пептиды нашли широкое применение в косметических композициях. Типично, пептиды включаются в косметические средства благодаря их функциональным характеристикам, таким, как ингибирование ферментов, противовирусная и противобактериальная активности.

Общие примеры применения пептидов для косметических применений являются известными в литературе, например, WO 2007/100874 и литература, которая там упоминается.

Все публикации, включая патенты и патентные заявки, которые упоминаются в данной заявке, введены сюда как ссылки в своей целостности.

Несмотря на желательность введения пептидов в косметические средства, существуют некоторые недостатки, ассоциированные с их применением. Например, активные пептидные агенты могут страдать от слабой эффективности применения по причине, например, их конформационной гибкости и/или легкости переваривания пептидов протеазами в сайтах предполагаемого воздействия. Кроме того, эффективность может блокироваться по причине^сложности, с которой пептиды транспортируются через оболочки, такие, как кожа, и по причине их слабой растворимости во многих косметических носителях. Кроме того, риск возникновения иммуногенной реакции на пептиды также представляет собой проблему в косметических композициях.

Таким образом, задача изобретения заключается в том, чтобы обеспечить полезные пептиды для косметического применения, обладающие повышенной эффективностью, обеспечить подходящие пептиды для косметического применения, которые, среди прочих, обладают высокой резистентностью к протеолитической деградации, и/или обеспечить выгодные пептиды для косметического применения, которые снижают риск возникновения иммуногенной реакции. Кроме того, задача настоящего изобретения заключается в том, чтобы обеспечить новые и преимущественно улучшенные композиции, которые предпочтительно обладают лучшим профилем действия, лучшим профилем побочных эффектов и/или улучшенной способностью к обработке.

Таким образом, предпочтительная задача изобретения заключается в том, чтобы обеспечить новые композиции, предпочтительно косметические композиции и/или композиции личной гигиены, включающие указанные полезные пептиды. Новые композиции демонстрируют выгодные свойства, предпочтительно выбранные из группы, состоящей из улучшенной эффективности, более высокой стабильности и/или сниженных иммуногенных реакций.

Циклические пептиды, как описывается в данной заявке, и композиции, содержащие их, являются предпочтительно выгодными или преимущественными в отношении применения в косметике и средствах личной гигиены, а также медицинских продуктах, предпочтительно в косметике и средствах личной гигиены, в частности, тогда, когда они применяются местно. Местно в этом отношении предпочтительно означает то, что циклические пептиды и композиции, содержащие их, в общем случае применяются к поверхности тела человека или животного. Поверхность тела в этой связи предпочтительно включает кожу, волосы, предпочтительно включает корни волосы, и/или слизистые оболочки, предпочтительно, глаза и уши, более предпочтительно кожу и/или волосы. В соответствии с этим, применение композиций для местного использования на коже и/или волосах тела человека или животного, предпочтительно тела человека, является в общем случае предпочтительным. Преимущественно местное применение к определенному участку кожи предполагает воздействие только или в основном на участок, который обрабатывается. Таким образом, местно предпочтительно означает применение, противоположное системному.

Настоящее изобретение, таким образом, относится к композиции, включающей один или более циклических пептидов, предпочтительно один или более циклических пептидов, как описано выше, к получению и применению ее для ухода, сохранения или улучшения общего состояния кожи или волос и для профилактики индуцированных временем и/или светом процессов старения человеческой кожи или волос человека, а также для профилактики и/или лечения кожных заболеваний. Изобретение также относится к композиции, обладающей эффективным содержанием указанного одного или более циклических пептидов. Предпочтительно, изобретение также относится к применению одного или более циклических пептидов для профилактики и/или лечения заболеваний кожи, воспалений, аллергий, раздражений и/или улучшения заживания ран кожи. Предпочтительно, когда циклические пептиды для применения в соответствии с изобретением обладают свойствами модулирования интегрина, более предпочтительно, либо интегриновой антагонистической активностью (то есть, предпочтительно активностью ингибирования интегрина), либо интегриновой агонистической активностью (то есть, предпочтительно активностью стимуляции интегрина) и, в частности, интегриновой антагонистической активностью (то есть, предпочтительно активностью ингибирования интегрина), а также интегриновой агонистической активностью (то есть, предпочтительно активностью стимуляции интегрина). Соответствующий вид модулирующей интегрин активности может предпочтительно подвергаться контролю с помощью соответствующего применяемого циклического пептида и/или его используемого количества/концентрации. Может быть продемонстрировано, что циклические пептиды, предпочтительно циклические пептиды в соответствии с изобретением, демонстрируют интегриновую антагонистическую активность в одном интервале концентрации, предпочтительно в интервале высокой концентрации, и демонстрируют интегриновую антагонистическую активность в другом интервале концентраций, предпочтительно в интервале низких концентраций, например, в соответствии со способом, описанным у Legler и др. J Cell Sci. 2001 Apr;114 (Pt 8): 1545-53) или аналогичными ему способами. Более предпочтительно, когда циклические пептиды в соответствии с изобретением представляют собой лиганды интегринов, выбранных из группы, состоящей из αvβ3, αvβ5, αvβ1, αvβ6, αvβ8 и α2β3 интегринов, и, в частности, выбранных из группы, состоящей из αvβ3 и αvβ5 интегринов. Эти активности могут быть продемонстрированы, например, в соответствии со способом, описанным у J.W.Smith и др. J.Biol. Chem. 265, 12 до 67-1 до 271 (1990), или аналогичным ему способом.

Интегрины представляют собой гетеродимерные трансмембранные рецепторы для внеклеточного матрикса, состоящие из альфа и бета субъединиц. Природные лиганды интегрина включают ламинин, фибронектин и витронектин, но они также включают фибриноген и фибрин, тромбоспондин, ММР-2 и фактор роста фибробластов 2. Интегрины связывают лиганды путем узнавания коротких аминокислотных остатков на наружных незащищенных петлях, в частности, последовательности аргинин-глицин-аспарагиновая кислота (ROD). При лигировании интегрины опосредуют комплекс сигнальных событий, самостоятельно или в комбинации с рецепторами фактора роста, регулируя клеточную адгезию, пролиферацию, выживание и миграцию путем активирования канонических путей, таких, как связанная с интегрином киназа (ILK), протеинкиназа В (PKB/Akt), активированная митогеном протеинкиназа (МАРК), Rac или ядерный фактор каппа В (NF-кВ). В находящихся в состоянии покоя сосудах интегрины взаимодействуют с базальной мембраной, поддерживая, таким образом, состояние покоя сосудов. [Stupp и Ruegg, Journal of Clinical Oncology, том 25, №13 (May 1), 2007: стр.1637-1638].

av интегрины связывают лиганды во внеклеточном матриксе (ЕСМ). Эти лиганды включают коллаген, фибронектин, витронектин, ламинин, тромбоспондин и остеопонтин. Коллагены представляют собой семейство нитчатых белков, и как основной компонент кожи и костей они являются наиболее избыточными белками у млекопитающих. Коллагены служат в качестве противодействующих рецепторов для некоторых (31 и (33 интегринов. Фибриноген, который представляет собой димерный растворимый белок плазмы крови, обладающий важным значением в процессе сворачивания крови, при заживлении ран и воспалении, представляет собой лиганд для интегринов, включающих Мас-1, αXβ2, αllbβ3, и αvβ3 (Berman и др., 2003; Springer и Wang, 2004).

Зависимость развития ангиогенеза от взаимодействия между васкулярными интегринами и белками внеклеточного матрикса является описанной Р.С.Brooks, R.A.Clark и D.A.Cheresh, Science 264. 569-71 (1994).

Возможность ингибирования этого взаимодействия и ассоциированной с этим инициации апоптоза (запрограммированная смерть клеток) ангиогенных васкулярных клеток с помощью циклического пептида является описанной Р.С.Brooks, A.M.Montgomery, M.Rosenfeld, R.A.Reisfeld, T.-Hu, G.Klier и D.A.Cheresh, Cell 79, 1157-64 (1994).

Связывающие ROD интегрины представляют собой необходимые латентные TGF-P1 активаторы в процессе развития и в иммунной системе (Yang, Zhiwei; Mu, Zhenyu; Dabovic, Branka; Jurukovski, Vladimir; Yu, Dawen; Sung, Joanne;

Xiong, Xiaozhong; Munger, John S. Journal of Cell Biology (2007), 176 (6), 787-793 Трансформирующий фактор роста (TGF)-p индуцирует процесс сокращение фибробластов, который является втянутым в заживление ран и образование келоида. Предполагается, что ингибитор активности TGF-P типа I рецепторной киназы может обладать терапевтическим потенциалом для чрезмерного стягивания кожи, как наблюдается при образовании келоида (Hasegawa, Toshio;

Nakao, Atsuhito; Sumiyoshi, Koji; Tsuchihashi, Hitoshi; Ogawa, Hideoki, Journal of Dermatological Science (2005), 39 (1), 33-38.). Таким образом, ингибиторы интегринов связывающих RGD приводят к получению менее активного TGF-β1.

Okigami сообщалось об использовании тамоксифена и кверцетина для местного лечения морщин кожи. При концентрациях 0,1-5% они предотвращают развитие морщин путем ингибирования фибронектина, TGF-, и IGF-I (Okigami, Henry; Okigami, Paulo Takao. Braz. Pedido PI (2006), 9 стр.)

Накопленные подтверждения указывают на то, что интегрины эндотелиальных клеток, которые связываются матриксными белками, ассоциированными с воспалением и заживлением ран, являются вовлеченными в процессы ангиогенеза. Интегрины, содержащие av субъединицу, оказались особенно важными. Для изучения вовлечения этих рецепторов в ангиогенез человека разработана модель ассоциированного с раной ангиогенеза человека при трансплантации кожи человека мышам с тяжелым сочетанным иммунодефицитом (SCID). При использовании этой модели изучалась экспрессия некоторых av интегринов и исследовалась гипотеза о том, что αvβ3 интегрин будет ингибировать ангиогенез у человека во время заживания ран. Эти исследования выявили, что αvβ3, αvβ5 и avp6 интегрины в течение короткого периода времени стимулируются во время раневого ангиогенеза с помощью различных моделей экспрессии и что ингибирование αvβ3 интегрина блокирует образование новых сосудов в процессе заживления ран у человека (Christofidou-Solomidou, Melpo; Bridges, Mark; Murphy, George F.; Albelda, Steven M; Delisser, Horace M. Pulmonary and Critical Care Division, Department of Medicine and Department of Dermatology, University of Pennsylvania Medical Center, Philadelphia, PA, USA. American Journal of Pathology (1997), 151 (4), 975-983.)

Повреждение кожи, например, острое индуцированное УФ повреждение кожи;

может снижаться у субъекта путем введения субъекту, имеющему острое индуцированное УФ повреждение кожи или имеющему риск возникновения такового, агента, который ингибирует VEGF передачу сигнала (WO 2005/097187).

VEGF представляет собой важный фактор роста для микровасклярных и макроваскулярных эндотелиальных клеток, которые включают артерии, вены лимфатические сосуды по всему организму (Leung DW и др., Science 1989; 246:

1306-9). VEGF продуцируется широким разнообразием типов клеток. В коже кератиноциты являются основным источником VEGF (Ballaun С и др., J Invest Dermatol 1995; 104:7-10).

Кожа человека подвергается определенным процессам старения, некоторые из которых являются обусловленными внутренними процессами (хронологическое старение), а некоторые из которых являются обусловленными экзогенными факторами (окружающей средой, например, фотостарение). Кроме того, могут возникать временные или даже длительные изменения картины кожи, такие, как акне, жирная или сухая кожа, кератозы, розовые или красные угри, чувствительность к свету, воспалительные, эритематозные, аллергические или аутоиммунно реактивные реакции, такие, как дерматоз или фотодерматоз.

Экзогенные факторы включают, в частности, солнечный свет или источники искусственной радиации, имеющие сравнимый спектр, а соединения, которые могут образовываться при воздействии радиации, такие, как неопределенные реактивные фотопродукты, которые могут также представлять собой свободные радикалы или ионы. Такие факторы также включают дым сигарет и реактивные соединения, присутствующие в нем, такие, как озон, свободные радикалы, например, свободный радикал гидроксила, атомарный кислород и другие реактивные соединения кислорода или азота, которые приносят вред естественной физиологии и морфологии кожи.

Влияние этих факторов может приводить, среди прочего, к непосредственному повреждению ДНК клеток кожи и коллагена, эластина или молекул глюкозаминогликана внеклеточного матрикса, которые являются ответственными за силу кожи. Кроме того, могут поражаться цепи сигнальной трансдукции, которые прерываются путем активации ферментов, разлагающих матрикс.Важные представители этих ферментов представляют собой металлопротеиназы (ММР, например, коллагеназы, желатиназы и стромелизины), активность которых дополнительно регулируется с помощью ТIМР (тканевые ингибиторы матриксных металлопротеиназ).

Последствия указанных выше процессов старения представляют собой истончение кожи, более слабое сплетение эпидермиса и дермы, а также снижение количества клеток и снабжающих их кровеносных сосудов. Это приводит к образованию мелких и тонких морщинок и морщин, кожа становится жесткой, и могут возникать дефекты пигментов.

Такие же факторы также воздействуют на волосы, где также может возникать повреждение. Волосы становятся ломкими, менее эластичными и тусклыми. Повреждается поверхностная структура волос.

Косметические и дерматологические продукты ухода, которые обладают заявляемыми свойствами для противодействия описанным процессам или сравнимым с ними процессам, или снижают, или вызывают обратное развитие вредных последствий этого, часто отличаются следующими свойствами:

удаление свободных радикалов, антиокислительное воздействие, свойства ингибирования воспаления или увлажнения кожи. Они предотвращают или снижают, среди прочих, активность ферментов, разрушающих матрикс, или регулируют новый синтез коллагена, эластина или протеогликанов. Упомянутые выше процессы старения приводят к истончению кожи, уменьшению сцепления между эпидермисом и дермой, снижению количества клеток, а также к снижению обеспечения кровеносными сосудами. Эти процессы сопровождаются образованием мелких и тонких морщинок и морщин, кожа сморщивается и/или демонстрирует дефекты пигментации.

Эти факторы также влияют на состояние волос, что также имеет результатом повреждение волос, в частности, повреждение поверхности волос, что приводит к ломкости и потере эластичности и блеска волос.

Продукты по уходу и/или косметические продукты со свойствами, которые будут противодействовать описанным или подобным процессам, и/или которые будут вызывать обратное развитие результатов повреждения, часто обеспечивают одно или более из следующих свойств: удаление свободных радикалов, антиокислительное воздействие, противовоспалительное и/или увлажняющее действие. Предпочтительно, они блокируют или снижают активность ферментов, разрушающих матрикс или контролируют de novo синтез коллагена, эластина и/или протеогликанов.

Применение антиоксидантов или агентов, удаляющих свободные радикалы, в косметических композициях является известным как таковое. Так, применение антиокислительного витамина Е в солнцезащитных композициях является привычным. Тем не менее, достигаемый эффект даже в этом случае является более коротким, чем ожидаемый эффект.

Витамин А и производные витамина А, такие, как ретиноевая кислота, ретинол и эстеры ретинола, влияют на дифференциацию эпителиальных клеток и, таким образом, используются для профилактики и лечения многочисленных явлений, которые повреждают состояние кожи, например, было описано его применение против акне, псориаза, старческого кератоза, нарушения окраски кожи и морщин (смотри, например, WO 93/19743 и WO 02/02074).

Однако эффект раздражения кожи ретинолом и его производными также является описанным в литературе (например, WO 94/07462). Эти побочные эффекты ограничивают применение ретинола до узко ограниченных областей, при этом является важным избежать передозировки. Таким образом, существует потребность в активных ингредиентах, которые обладают подобным ретинолу спектром действия, но не имеют описанных побочных эффектов или, по крайней мере, обладают ими в уменьшенной форме.

Благодаря постоянно увеличивающейся потребности в активных ингредиентах для превентивного лечения кожи и волос человека от процессов старения и вредных влияний окружающей среды, задача данного изобретения заключалась в обеспечении новых активных ингредиентов, которые демонстрируют уже упомянутые эффекты изначально, являются в достаточной мере стабильными в отношении окисления и воздействия света и могут быть легко рецептированы. Композиции, полученные с такими веществами, будут также в максимально возможной степени обладать низким раздражающим потенциалом для кожи, в максимально возможной степени обладать позитивным влиянием на связывание воды в коже, сохранять или повышать эластичность кожи и, таким образом, способствовать разглаживанию кожи. Кроме того, они должны предпочтительно создавать приятное кожное ощущение при применении к коже. Предпочтительно, когда активные ингредиенты преимущественно демонстрируют одно или более свойств, выбранных из группы, состоящей из омолаживающих, противовоспалительных, предотвращающих образование морщин свойств и свойства заживления ран. Предпочтительно, они могут использоваться в продуктах для лечения и/или профилактики ломкости капилляров, продуктах для лечения и/или профилактики инфильтрации, продуктах для лечения и/или профилактики псориаза, продуктах для лечения и/или профилактики целлюлита, и/или продуктах для лечения и/или профилактики седых волос.

Циклические пептиды для применения в соответствии с настоящим изобретением представляю собой новые активные ингредиенты. Предпочтительно, циклические пептиды для применения в соответствии с изобретением обладают выгодными свойствами, такими, как улучшенные свойства обработки, свойства улучшенной стабильности и/или предпочтительная активность модуляции интегрина.

Линейные пептиды из экстрактов, полученных из природных источников, или полученных путем синтеза, являются известными как добавки/ингредиенты/ инципиенты в косметических средствах, например, из журнала Brewster Cosmetics&Toiletries 121(11) 20-24 (2006), W007/113356, W007/100874, W007/093839, W007/068998, W005/025505, Huang US 2005226839, US 2005050656 и DE 102006046076.

Однако остов и концевая часть, гетеродетические (пептиды, обладающий, по крайней мере, одной связью между аминокислотами, которая является отличной от эупептидной) и гомодетические (пептиды, у которых все связи между аминокислотами являются пептидными связями) пептиды, циклизация линейных пептидов могут улучшить их стабильность в отношении деградации, действия пептидаз и метаболизма (Bogdanowich-Knipp и др. J Pept Res. 1999 May; 53 (5): 530-41, Li и др. Current Topics in Medicinal Chemistry 2002, 2, 325-341, Hess J. Med. Chem. 2007, 50, 6201-6211, Matsoukas и др. J Med Chem. 2005 Mar 10; 48 (5): 1470-80). В некоторых случаях физико-химическая стабильность даже позволяет осуществлять сублимацию циклического пентапептида (Bodanszky Int J Pept Protein Res. 1983 Nov; 22 (5): 590-6).

Кроме того, циклизация RGD пептидов может разрабатываться для улучшения связывающей аффинности с определенной мишенью, такой, как интегрин, и для достижения селективности для группы мишеней, предпочтительно группы интегринов (Samanen и др. J Med Chem. 1991 Oct; 34 (10): 3114-25, Dechantsreiter и др. J Med Chem. 1999 Aug 12; 42 (16); 3033-40, Heckmann и др. Methods Enzymol. 2007; 426: 463-503).

Интегрины представляют собой суперсемейство, состоящее более чем из 20 гетеродимерных охватывающих клеточные мембраны рецепторов клеточной адгезии, которые связываются с ЕСМ лигандами, лигандами поверхности клеток и растворимыми лигандами (Takada и др. Genome Biol. 2007; 8 (5): 215, Ffrench-Constant и др. Trends Cell Biol. 14 (12) 678-686 (2004), Akiyama Hum Cell. 1996 Sep; 9(3): 181-6).

Зависимый от RGD-лиганда интегрин αvβ3 является известным как такой, который является вовлеченным в несколько патологий, подобных развитию опухоли, ангиогенезу, рестенозу, остеопорозу и воспалительным заболеваниям, сходных с артритом (Le Tourneau Oncology (Williston Park). 2007 Aug; 21 (9 SuppI 3): 21-4, Ellis Am Surg. 2003 Jan; 69 (1): 3-10, Moussa и др. Curr Opin Investig Drugs. 2002 Aug; 3 (8): 1191-5, Hartmann и др. Ехр. Opin. Invest. Drugs 9 (6) 1281-1291 (2000), Tweti и др. Calcif Tissue Int. 2002 Oct; 71 (4): 293-9, Wilder Ann Rheum Dis. 2002 Nov; 61 SuppI 2: ii96-9).

Ингибиторы интегрина αvβ3, известные из клинических исследований, представляют собой антитело BHTaKCHH/MEDI-522 и циклический пентапептид циленгитид (Cai и др. Hum Cell. 1996 Sep; 9 (З): 181-6, Tucker Curr. Opin. Invest. Drugs 4 (6) 722-731 (2003), Nemeth, и др. Cancer Investigation (2007), 25 (7), 632-646).

Структура и функция интегрина αvβ3 является известной более подробно (Arnaout Annual Review of Cell and Developmental Biology 21: 381-410, 2005, J Cell Biol. 2005 Mar 28; 168 (7): 1109-18, Xiong и др. Science. 2002 Apr 5; 296 (5565): 151-5)

Существует несколько растворимых и связанных с матриксом природных лигандов, связывающихся с av-интегринами. Фибриноген, витронектин, фибронектин, остеопонтин и денатурированный коллаген представляют собой примеры таковых (Ruoslahti и др. Cell 44, 517-518 (1986), Hynes Cell 69, 11-25 (1992), Lin и др. J Biol Chem. 1997 Sep 19; 272 (38): 23912-20). Было получено много синтетических лигандов (Cacciary и др. Curr. Med. Chem. 12, 51-70 (2005), Duggan Ехр. Opin. Ther. Patents 10 (9) 1367-1383 (2000))

Один из существующих в природе RGD лигандов для av-интегринов представляет собой LAP, лигирующую часть латентного трансформирующего фактора роста LAP-TGFR. Была описана его роль в активации и высвобождении активного TGFβ (Sheppard Cancer и Metastasis Reviews 24: 395-402, 2005). Кратко, предполагается, что TGFβ должен быть активирован для того, чтобы обладать плейотропной активностью. Активация происходит в результате расщепления LAP пептида, которое локально запускается интегринами, включая αvβ3 и/или αvβ6. Кроме того, αvβ3 взаимодействует с другими рецепторами, такими, как рецепторы факторов роста (например, рецептор VEGF, рецептор PDGF и/или рецептор IGF1). Поскольку TGFβ ассоциируется с фиброзом, предполагается, что фибротические расстройства и/или симптомы фибротических расстройств кожи могут ослабляться с помощью активных модуляторов интегринов αvβ3 и/или αvβ6, предпочтительно, ингибиторов интегринов.

В дополнение к своей ингибиторной активности при достаточно высокой концентрации, RGD лиганды при низкой концентрации были продемонстрированы как такие, которые являются способными активировать интегрины (Legler и др. J Cell Sci. 2001 Apr; 114 (Pt 8): 1545-53). Таким образом, активация зависимых от av-интегрина клеточных процессов с помощью RGD лигандов, предпочтительно выбранных из циклических пептидов в соответствии с изобретением, более предпочтительно циклических пептидов в соответствии с настоящим изобретением, которые включают Arg-Gly-Asp последовательность (также называются как "циклические RGD пептиды" или "cRGD пептиды") при низкой концентрации является возможной. Например, cRGD пептиды, рецептированные для местного применения, могут подвергаться доводке концентрации и дозы для модулирования ангиогенез, или активации TGFβ из его предшественника, облегчая, таким образом, процессы образования рубцов, ран, воспалительные процессы, старение и/или образование морщин.

TGFβ представляет собой плейотропный цитокин и фактор роста, многократно вовлеченный в физиологические и патологические процессы, который передает сигналы через свои рецепторы, TGFβ рецепторные тирозинкиназы и их субстрат, Smad. (Pennington Curr Opin Oncol. 2007 Nov; 19 (6): 579-85). Он играет важную роль в супрессии иммунной системы на периферии для предотвращения иммунного ответа. Семейство TGFp представляет собой регуляторные молекулы с многочисленными влияниями на клеточную пролиферацию, дифференциацию, миграцию и выживание для воздействия на многочисленные биологические процессы, подобные развитию, онкогенезу, фиброзу, заживлению ран, иммунному ответу.

Уменьшение кожного рубцевания было продемонстрировано при использовании нейтрализующего антитела к TGFp (Shah и др. J Cell Sci. 1994 May; 107 (Pt5): 1137-57), J Cell Sci. 1995 Mar; 108 (Pt 3): 985-1002).

Роль TGFβ в заживлении ран является известной (Martin Science. 1997 Apr4; 276(5309): 75-81).

Кроме того, TGFβ является известным по своей функции в цикле волос человека путем супрессии пролиферации эпителиальных клеток и стимуляции синтеза каспаз, и, таким образом, является включенным в катагенный каскад в модели облысения у мужчин. Модуляция TGFβ может, таким образом, отсрочить преждевременное вступление роста волос у мужчин в катагенную фазу (Hibino и др. J Dermatol Sci. 2004 Jun; 35 (1): 9-18).

Ангиогенез, образование сосудистой системы из существующих кровеносных сосудов, описывается десятилетиями (Folkman Nat Rev Drug Discov. 2007 Apr; 6 (4); 273-86, Annu Rev Med. 2006; 57: 1-18, Curr Mol Med. 2003 Nov; 3(7): 643-51, Semin Oncol. 2001 Dec;28 (6): 536-42, Alghisi Endothelium. 2006 Mar-Apr; 13 (2): 113-35, Stupack и др. Curr Top Dev Biol. 2004; 64: 207-38,).

Он представляет собой высоко динамичный и сложный процесс, зависимый от рецепторов фактора роста и рецепторов адгезии. Интегрины представляют собой основные рецепторы адгезии на эндотелиальных клетках, предназначенные для взаимодействия с их внеклеточным окружением. Ингибирование αvβ3 и αvβ5-интегринов было показана как такое, которое нарушает ангиогенез (Eliceiri и др. Curr Opin Cell Biol. 2001 Oct; 13 (5): 563-8, Nisato и др. Angiogenesis. 2003; 6 (2): 105-19, Eliceiri и др. Cancer J. 2000 May; 6 SuppI 3: S245-9).

В коже αv-интегрины также играют важную роль в ангиогенезе (Perruzzi и др. J Invest Dermatol. 2003 Jun; 120 (6): 1100-9).

Кроме того, было продемонстрировано, что некоторые патогены, подобные вирусам, могут использовать взаимодействие с интегринами для размножения клеток. Таким образом, является вероятным, что ингибиторы интегринов могут предотвращать инфекции патогенами через повреждения кожи, когда применяются в композициях для местного применения. Stewart, Phoebe L; Nemerow, Glen R. Cell integrins: commonly used receptors for diverse viral pathogens.

Trends in Microbiology (2007), 15 (11), 500-507. Например, гликопротеин В оболочки вируса герпеса 8 опосредует клеточную адгезию с помощью своей RGD последовательности (Wang и др. J Virol. 2003 Mar; 77 (5): 3131-47). Другие примеры представляют собой: цитомегаловирус человека (Wang и др. Nat Med. 2005 May; 11 (5):515-21), и хантавирус (Gavrilovskaya и др. Nat Med. 2005 May; 11 (5); 515-21).

Приводится специальная ссылка на Simon L.Goodman, Horst Kessler и др., J.Med. Chem. 2002, 45, 1045-1051, Martin Pfaff, Horst Kessler и др., THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, том 269, №32, издание августа 12, стр.20233-20238, 1994, Sally J.DeNardo и др., CANCER BIOTHERAPY & RADIOPHARMACEUTICALS, том 15, №1, 2000, и Wipff, P.-J., Hinz, В., Integrins and the activation of latent transforming growth factor β1-An intimate relationship, Eur. J. Cell Biol. (2008), раскрытие которых в своей полноте введено в данную заявку исключительно в качестве ссылки.

Данное изобретение предпочтительно относится к:

Композиции, предпочтительно композиции для нетерапевтического применения, включающей один или более циклических пептидов и один или более носителей.

Композиции, предпочтительно композиции для местного применения, включающей один или более циклических пептидов и один или более носителей, приемлемых для местного применения.

Понимание термина "пептид" или "пептиды" является известным в области техники. В соответствии с изобретением пептиды являются предпочтительно определяются как амиды, полученные из двух или более (одинаковых или различных) молекул аминокарбоновых кислот (то есть, аминокислот) путем образования ковалентной связи между углеродом карбониловой группы одной с атомом азота другой с формальной потерей воды. Термин обычно применяется к структурам, образованным из α-аминокислот, но он предпочтительно также включает таковые, которые получены из любой аминокарбоновой кислоты или аминокислоты.

Циклические пептиды и способы для получения циклических пептидов являются известными в области техники. В соответствии с изобретением циклические пептиды предпочтительно представляют собой пептиды, в которых мостик или связь образуется между двумя аминокислотами, которые являются частью пептида или составляют пептид. Мостик может образовываться между аминокислотами, обладающими реактивной группой (отличной от аминогруппы и карбоксильной группы, которая является существенной для соответствующей аминокислоты), предпочтительно, такой, как сульфгидрильная группа. В общем случае пептиды, включающие две или более, предпочтительно две аминокислоты, содержащие такую реактивную группу, могут быть циклизованы. Например, пептид, включающий две аминокислоты, которые имеют сульфидную группу, могут быть циклизованы при условиях, когда образуется дисульфидный мостик между сульфидными группами двух аминокислот, содержащих сульфидную группу. Примеры аминокислот, имеющих сульфидную группу и, таким образом, способных к образованию мостика, то есть, дисульфидного мостика, включают, но без ограничения, пеницилламин и цистеин. Пептиды, в которых связи, формирующее кольцо, не являются исключительно пептидными связями (или эупептидными связями в соответствии с IUPAC), предпочтительно называются гетеродетическими циклическими пептидами. В этом случае связи между реактивными группами (отличными от аминогруппы и карбоксильной группы, которые являются существенными для соответствующей аминокислоты), образующими кольцо, предпочтительно называются "мостиком". Альтернативно, пептиды, в которых связи образующие кольцо, являются исключительно пептидными связями (или эупептидными связями в соответствии с IUPAC) предпочтительно называются гомодетическими циклическими пептидами. В соответствии с изобретением могут использоваться как гетеродетические циклические пептиды, так и гомодетические циклические пептиды. В общем случае пептиды, состоящие из трех или более, предпочтительно четырех или более аминокислот, могут быть циклизованы. В принципе, количество аминокислот в циклическом пептиде не ограничивается. Однако нацеленные и специфические препараты циклических пептидов, которые состоят из 30 или более аминокислот, представляют собой комплекс. Дополнительно, во многих случаях предпочтительные свойства, которые являются присущими "меньшим" циклическим пептидам, таким, как циклические пептиды, которые состоят из 4-30 или предпочтительно, 4-20 аминокислот, имеют тенденцию исчезать с увеличением размеров кольца и, таким образом, увеличением количества аминокислот, составляющих указанные циклические пептиды.

В компетенции специалиста в данной области техники является получить циклические пептиды, в равной степени как циклические пептиды, которые исключительно состоят из существующих в природе аминокислот, так и циклические пептиды, включающие неприродные аминокислоты. Например, может использоваться традиционная защита и активация химических групп. Типично, аминогруппа первой аминокислоты защищается с помощью способной к удалению защитной группы для аминогруппы, а карбоксильная группа второй аминокислоты защищается с помощью способной к удалению защитной группы для карбоксильной группы. Приемлемые группы для защиты амина включают, без ограничения, бензоилоксикарбонил (Cbz), трет-бутоксикарбонил (t-Boc), и 9-флуоренилметилоксикарбонил (FMOC). Карбоксильная группа может быть защищена путем образования неустойчивого к кислоте и неустойчивого к основанию эстера, такого, как метиловый, этиловый, бензиловый или триметилсилиловый эстеры. После защиты аминокислот первая и вторая аминокислоты реагируют в приемлемом растворителе, таком, как вода или ДМФ в присутствии in situ активирующего агента, такого, как N.N'-дициклогексилкарбодиимид (DCCI), диизопропилкарбодиимид (DIPCDI) или 1-этил-3-(3'-диметиламинопропил)карбодиимид (EDCI) для осуществления образования пептидной связи. Реактивные остатки боковых цепей любой аминокислоты защищают с помощью защитных групп, таких, как teff-бутил или бензил для ОН и SH; метил, этил, трет-бутил или бензил для карбоксильных групп, 2,2,5,7,8-пентаметилхроман-6-сульфонил для -NHC(NH₂)=NH группы Агд и тритил для имидазольной группы His. После реакции слияния осуществляют селективное снятие защиты с аминогруппы первой аминокислоты при использовании кислотного гидролиза, при условиях, которые не удаляют защиту с карбоксильной группы второй аминокислоты. Процедуру повторяют с дополнительными аминозащищенными аминокислотами. Твердофазный синтез, такой, как, хорошо известный способ Меррифильда, является особенно полезным для синтеза пептидов в соответствии с изобретением. В общем случае синтез циклических пептидов осуществляют сначала с помощью синтеза линейного пептида с желаемой последовательностью, например, так, как описано выше, после чего осуществляют этап циклизации. Приемлемые способы и условия циклизации линейного пептида в циклический пептид являются известными в области техники.

Введение неприродных аминокислот в пептиды описывается у Hohsaka Т, Sisido M "Введение неприродных аминокислот в белки" Curr. Opin. Chem. Biol. 6: 809-815 (2002); Noren CJ и др. "Общий метод для сайт-специфического введения неприродных аминокислот в белки " Science 244: 182-188 (1989); и Hodgson, David R.W., Sanderson, John M., "Синтез пептидов и белков, содержащих неприродные аминокислоты", Chem. Soc. Rev., 2004, 33, 422-430, раскрытие которых введено в данную заявку в качестве ссылки.

Настоящее изобретение предпочтительно относится к:

Композиции, как описано выше/ниже, где указанный циклический пептид представляет собой гомодетический циклический пептид. Понимание терминов "гомодетический" и "гомодетический циклический пептид" является известным в области техники. В соответствии с изобретение гомодетический циклический пептид предпочтительно представляет собой циклический пептид, в котором кольцо (или остов циклического пептида) состоит только из аминокислотных остатков в пептидной связи (или в эупептидной связи в соответствии с номенклатурой IUPAC).

Композиции, как описано выше/ниже, где указанный циклический пептид состоит из 4-30 аминокислот, предпочтительно 4-20 аминокислот, более предпочтительно 4-15 аминокислот, даже более предпочтительно 4-12 и, в частности, 4-10 аминокислот, выбранных из группы, состоящей из существующих в природе аминокислот и несуществующих в природе аминокислот. Примеры предпочтительных циклических пептидов, предпочтительно гомодетических циклических пептидов, состоят из 4 аминокислот, 5 аминокислот, 6 аминокислот, 7 аминокислот, 8 аминокислот, 9 аминокислот, 10 аминокислот или 12 аминокислот, выбранных из группы, состоящей из существующих в природе аминокислот и несуществующих в природе аминокислот. Примеры существующих в природе аминокислот и несуществующих в природе аминокислот являются приведенными ниже.

Композиции, как описано выше/ниже, где указанный циклический пептид включает одну или более несуществующих в природе аминокислот.

Композиции в соответствии с одним из пунктов 1-4, где указанный циклический пептид включает последовательность Arg-Gly-Asp (или RGD последовательность в однобуквенном коде для аминокислот). В соответствии с изобретением последовательность Arg-Gly-Asp предпочтительно исключительно состоит из соответствующих L-аминокислот, то есть, состоит из L-Arg, L-Gly и L-Asp.

Как используется в данной заявке, термин "аминокислота" предпочтительно предназначен для включения существующих в природе аминокислот, а также несуществующих в природе аминокислот, и предпочтительно также включает любую малую молекулу, имеющую, по крайней мере, одну карбоксильную группу и, по крайней мере, одну первичную или вторичную аминогруппу, способную к образованию пептидной связи. Термин пептид" является предпочтительно предназначенным для включения любой молекулы, содержащей, по крайней мере, одну пептидную связь. Термин "пептид" предпочтительно также охватывает структуры, как определено выше, имеющие один или более линкеров, спейсеров, терминальных групп или групп боковых цепей, которые не являются аминокислотами.

Термины "существующие в природе аминокислоты" и "несуществующие в природе аминокислоты" являются хорошо понятными в области техники.

Однако неисчерпывающий список несуществующих в природе аминокислот, а также существующих в природе аминокислот, может быть предпочтительно найден в "The Peptides", том 5 (1983), Academic Press, Глава VI, под ред. D. С.Roberts и F. Vellacio.

В соответствии с изобретением существующие в природе аминокислоты являются предпочтительно выб