Препарат и способ его применения при эндометритах у коров

Препарат и способ его применения при эндометритах у коров

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к препаратам и способам для лечения эндометритов у коров, и может быть использовано как на крупных животноводческих комплексах, так и в фермерских и личных хозяйствах.

Для лечения послеродовых болезней у коров применяют препараты антимикробного действия, включающие антибиотики, сульфаниламидные, нитрофурановые, препараты хиноксалинового ряда, фторхинолоны и другие средства. Но не все они дают ожидаемый эффект. Это, прежде всего, объясняется снижением чувствительности микрофлоры матки к препаратам. В связи с этим возникает необходимость создания новых ротационных комплексных препаратов.

Известен препарат «Диометр» производства ЗАО НПП «Агрофарм» для профилактики и лечения послеродовых гинекологических заболеваний у коров и свиноматок. Это комплексный препарат, содержащий диоксидин, канамицин, диметилсульфоксид и дистиллированную воду. Препарат вводят коровам внутриматочно с помощью шприца Жанэ с лечебной целью - по 100 мл каждые 48 часов до клинического выздоровления, но не более 5 раз. Основными недостатками Диометра являются: недостаточно высокая терапевтическая эффективность в связи с тем, что в его состав входят только 2 антимикробных средства - диоксидин и канамицин; быстрое снижение чувствительности микрофлоры к канамицину, высокая терапевтическая доза; высокая стоимость препарата из-за большой концентрации диметилсульфоксида.

Известен также препарат Стрептофур (список Б) для профилактики и лечения острых и хронических эндометритов сельскохозяйственных животных. Стрептофур - комплексный антибактериальный препарат, содержащий фурагин, стрептоцид, диметилсульфоксид и дистиллированную воду. Препарат, подогретый до 36-37°С, вводят коровам внутриматочно с помощью шприца Жанэ в дозе 0,5 мл/кг (но не более 200 мл) каждые 48 часов до клинического выздоровления, но не более 5 раз. Основными недостатками Стрептофура являются: недостаточно высокая терапевтическая эффективность в связи с тем, что в его состав входят только 2 антимикробных средства - фурагин и стрептоцид; высокая терапевтическая доза; высокая стоимость препарата из-за большой концентрации диметилсульфоксида, при этом диметилсульфоксид (ДМСО), повышающий всасываемость препарата, имеет некоторую токсичность и неприятный запах, что может вызвать аллергические реакции у животных и обслуживающего персонала.

Известно также «Средство и способ лечения эндометрита у коров» (патент РФ №2404756 A61K 31/02, опубликовано 21.11.2010 г.), включающее пефлоксацин, метронидазол, хлоргексидин биглюконат как действующие вещества и водорастворимое кремнийорганическое соединение - производное глицерина формулы (СН₃)₂Si(С₃Н₇О₃)₂·С₃Н₈О₃, как основу.

При широком спектре действия использование средства требует разведения его перед применением, что несколько затрудняет и замедляет процесс лечения.

Задачей изобретения является разработка препарата и способа его применения для лечения эндометритов у коров для повышения эффективности, расширения спектра действия и усиления антимикробной активности создаваемого нового препарата при повышении проникающей способности без использования ДМСО при повышенной адгезии к тканям животного, обеспечивающего в процессе комплексной терапии пролонгированное действие при более высоком качестве лечения и низких затратах на изготовление и применение при расширении ассортимента препаратов и средств для лечения эндометритов.

Задача решается созданием и применением комплексного препарата, состоящего из окситетрациклина гидрохлорида, стрептоцида, фурацилина, как действующего вещества, диметилглицеролатов кремния, глицеролатов кремния (патент РФ №2282046 C07F 7/18, A61K 31/695; опубликовано 20.02.2010 г.) как основы, ксантановой смолы как стабилизатора и дистиллированной воды как растворителя, при этом препарат состоит из компонентов при соотношении, масс.%:

окситетрациклина гидрохлорид (95%) - 4,77-5,83;

стрептоцид - 0,416-0,508;

фурацилин - 0,166-0,204;

диметилглицеролаты кремния (СН₃)₂Si(С₃Н₇О₃)₂·С₃Н₈О₃ - 2,25-2,75;

глицеролаты кремния Si(C₃H₇O₃)₄·6C₃H₈O₃ - 2,25-2,75;

ксантановая смола - 0,225-0,275;

дистиллированная вода - остальное.

Препарат применяют для лечения эндометритов у коров путем введения его в полость матки в дозе 30,0-60,0 мл 3-5 раз с интервалом 48 часов, причем, препарат вводят в матку с помощью одноразовой пипетки, на фоне общестимулирующей и этиотропной терапии.

Препарат условно назван «Энфуролат».

Новизной препарата является то, что в лекарственной форме одновременно сочетаются три подобранных и лабораторно обоснованных бактерицидных агента, что обеспечивает синергидный эффект за счет того, что компоненты имеют разный и перекрестный механизм действия на микробную клетку.

Основной целью сочетанного применения окситетрациклина гидрохлорида, фурацилина и стрептоцида является расширение спектра антибактериального действия, восполнение пробелов в спектре каждого из компонентов комбинации и предупреждение формирования устойчивости микроорганизмов, что обеспечивает повышение эффективности лечения эндометритов у коров, быстрое выздоровление больных животных, снижение затрат на лечение животных.

Окситетрациклина гидрохлорид - антибиотик тетрациклиновой группы, продуцируемый Streptomyces rimosus. Обладает широким спектром антибактериального действия. Механизм антибактериального действия окситетрациклина гидрохлорида основан на подавлении белкового синтеза микробной клетки (блокада функции рибосом) и блокаде синтеза РЖ.

Стрептоцид - сульфаниламидное соединение обладает химиотерапевтической активностью при инфекциях, вызванных грамположительными и грамотрицательными микроорганизмами, некоторыми простейшими. Его действие связано, главным образом, с нарушением образования микроорганизмами необходимых для развития ростовых факторов - фолиевой и дигидрофолиевой кислот и других веществ, в молекулу которых входит пара-аминобензойная кислота.

Фурацилин - антибактериальное и противопротозойное средство, относящееся к нитрофуранам. В отличие от других антимикробных химиотерапевтических средств, фурацилин обладает иным механизмом действия и образует высокореактивные аминопроизводные, вызывающие конформационные изменения белков макромолекул, что приводит к гибели клеток. Фурацилин в ряде случаев задерживает рост микроорганизмов, устойчивых к сульфаниламидам и антибиотикам.

Диметилглицеролаты кремния (СН₃)2Si(С₃Н₇О₃)₂·C₃H₈O₃ синтезированы в 1-мольном избытке глицерина. Наличие диметилглицеролатов кремния в композиции с содержанием 2,5 масс.% оказывает не только репаративное и регенерирующее действие, но и позволяет вследствие транкутанной активности снизить в них дозу активных действующих веществ при сохранении высокой эффективности действия, заменяя диметилсульфоксид.

Глицеролаты кремния Si(С₃Н₇О₃)₄·6C₃H₈O₃ синтезированы в 6-мольном избытке глицерина. Наличие глицеролатов кремния в композиции с содержанием 2,5 масс.% также оказывает репаративное, регенерирующее действие и позволяет снизить в них дозу активных действующих веществ при сохранении высокой эффективности действия, заменяя ДМСО (см. Патент РФ №2255939, C07F 7/04, A61K 47/30, Опубл. 10.07.2005 г. Бюл. №19).

Ксантановая смола (камедь) - природное химическое соединение (C₃₅H₄₉O₂₉)_n относится к группе стабилизаторов. Благодаря своим свойствам формирует хорошую структуру комплексных средств, долгосрочно стабилизирует и удлиняет сроки хранения композиций.

Готовый препарат представляет собой непрозрачную суспензию от желтоватого до светло-коричневого цвета (допускается осадок) со слабым специфическим запахом.

После приготовления были проведены испытания на стабильность заявляемого препарата по показателям качества и безопасности в течение срока хранения - 1 год.

Было проверено три экспериментальные серии препарата.

От каждой серии отбирали пробы в количестве 5 стеклянных флаконов вместимостью 50 см³, закрытых резиновыми пробками и обкатанных алюминиевыми колпачками, помещали в опечатываемый шкаф в складском помещении и хранили в закрытой упаковке при температуре от +2°С до +25°С.

Исследования показателей качества и безопасности каждой серии препарата проводились по указанным в лабораторном регламенте методикам сразу после изготовления серии и далее в течение 12 месяцев - один раз в 3 месяца.

На основании анализа полученных данных был сделан вывод о стабильности и качестве препарата для лечения эндометритов у коров в течение гарантийного срока хранения (12 месяцев с даты изготовления), при условии соблюдения рекомендаций по хранению.

Таким образом, испытаниями установлено, что предложенный препарат для лечения эндометритов у коров сохраняет стабильность и соответствует заявленному по показателям качества и безопасности в течение двенадцати месяцев со дня изготовления при соблюдении условий хранения.

Далее были проведены испытания токсикологической безопасности препарата для лечения эндометритов у коров.

Проведено экспериментальное доклиническое изучение общей фармакологической активности и токсикологических свойств препарата для лечения эндометритов у коров на лабораторных животных.

При проведении исследований использовали фармакологические, токсикологические, биохимические, патоморфологические методы исследования, применяемые для изучения лекарственных средств, получившие апробацию в научно-исследовательской практике.

Установлено, что препарат для лечения эндометритов у коров не токсичен для лабораторных животных при однократном пероральном введении. По показателям острой токсичности он относится к веществам малоопасным - 4 класс опасности по ГОСТ 12.01.007-76. Во всех испытанных дозах препарат для лечения эндометритов у коров не оказывает существенного влияния на поведение и общее состояние животных, интенсивность роста и вегетативные функции. При хроническом подкожном введении препарат для лечения эндометритов у коров не вызывает изменений поведения и общего состояния животных, отклонений в скорости роста, нарушений гемопоэза, функций печени, почек. Препарат не влияет на биохимические показатели крови, характеризующие функциональное состояние внутренних органов, не вызывает изменений метаболических процессов в печени и нарушений ее обезвреживающей функции. Препарат для лечения и профилактики послеродового эндометрита у коров не оказывает местно-раздражающего действия на слизистые оболочки и кожные покровы. Препарат в исследованных дозах не обладает аллергизирующими свойствами.

Научно-производственный опыт по изучению лечебной эффективности препарата «Энфуролат» был проведен в двух племенных заводах Свердловской области: ОАО «Птицефабрика «Свердловская» отделение "Сосновское" Каменского района и СПХК «Первоуральский» Первоуральского района. Среднегодовая молочная продуктивность коров в обеих организациях более 8000 кг. Хозяйства с равной устойчивой кормовой базой, идентичной круглогодовой технологией кормления монокормами и привязной системой содержания. Доля кровности по голштинской породе всех животных была более 80%. На период эксперимента среднесуточный удой коров был более 40 л (Таблица 1).

Для чистоты эксперимента на основании результатов клинико-гинекологического и ультразвукового исследования (УЗ-исследования) в каждой сельскохозяйственной организации были набраны 40 коров с диагнозом хронический (клинический) эндометрит. Всех коров разделили по принципу пар-аналогов по 20 животных.

Всем коровам (контрольные и опытные группы) была назначена схема лечения с использованием средств этиотропной и общестимулирующей терапии. Дополнительно коровам контрольных групп с помощью одноразовой полистироловой пипетки 4 раза через каждые 48 часов внутриматочно вводили известный промышленный препарат «Эндометромаг-Т» ЗАО Мосагрен, по принятой в хозяйствах схеме, опытным группам коров заявляемый препарат - лекарственное средство «Энфуролат» в те же сроки (4 раза через 48 часов) в дозе 40 мл (Таблица 2).

В СПХК «Первоуральский» перед началом лечения и после его окончания были отобраны 15 проб маточного содержимого для бактериологического и ПЦР-исследования. В ОАО «Птицефабрика «Свердловская» от коров обеих групп была отобрана кровь перед началом лечения, через 15 дней и 30 дней после его окончания для иммунологического исследования.

После окончания лечения вели наблюдения за животными, учитывали сроки восстановления половой цикличности. После осеменения животных и установления беременности анализировали количественные показатели репродуктивной функции: оплодотворяемость, индекс оплодотворения, период от начала лечения до восстановления половой цикличности, от начала лечения до оплодотворения, сервис-период.

Результатами бактериологического и ПЦР-исследования маточного содержимого от больных коров показали, что после применения препарата «Энфуролат», произошло существенное сокращение высеваемости Е.coli, Str. epidermalis, Pr. vulgaris, St. aureus, выделения в ПЦР CI. abortus (Таблицы 3, 4).

Установлено, что сочетанное применение препарата «Энфуролат» в ОАО «Птицефабрика «Свердловская» коровам способствует повышению показателей неспецифической резистентности - абсолютное количество лимфоцитов возрастает на 30,4% по сравнению с контрольной группой. Повышается содержание иммунокомпетентных клеток - Т-лимфоцитов на 12,3%, В-лимфоцитов - на 19,4%. Отмечено повышение показателей бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови, что свидетельствует о стимуляции гуморального иммунитета. Фагоцитарная активность нейтрофилов у коров опытной группы по сравнению с интактной через 15 дней была достоверно выше в 2 раза, через 30 дней в 1,60 раза (Таблицы 5, 6).

При анализе количественных показателей воспроизводительной функции установлено, что в ОАО «Свердловская «Птицефабрика» Свердловской области у коров опытной группы произошло достоверное сокращение периода от начала лечения до восстановления половой цикличности на 7 дней, периода от родов до оплодотворения (сервис-период) на 29 дней, индекса оплодотворения в 1,47 раза.

Оплодотворяемость от первого осеменения и общая оплодотворяемость были выше у опытных животных - на 20% и 5% соответственно, чем в контроле.

В СПХК «Первоуральский» у коров опытной группы достоверно сократился период от начала лечения до восстановления стадии возбуждения полового цикла на 5 дней, период от родов до плодотворного осеменения -на 26 дней. Индекс оплодотворения превышал нормативные значения в обеих группах, однако в опытной группе данный показатель в сравнении с контролем был меньше в 0,85 раза. Отмечены также более высокие показатели оплодотворяемости. Кроме того, у коров контрольной группы зарегистрировано 3 случая (15,0%) эмбриональной смертности, чего не наблюдается в опытных группах, показывая эффективность предложенного препарата и способа лечения (Таблицы 7, 8).

Таким образом, применение предложенного препарата «Энфуролат» по заявленному способу способствует нормализации показателей воспроизводства, что позволяет более полно реализовать генетический потенциал племенных животных, при получении дополнительных телят за счет снижения абортов и мертворожденных (Таблица 9).

Таким образом, проведенные испытания препарата для лечения эндометритов у коров показали, что он обладает широким спектром антимикробного действия, выраженным лечебным действием и эффективнее прототипа, является малотоксичным. Применение препарата, условно названного «Энфуролат», технологично и экономически выгодно.

Неочевидным эффектом предложенного комплексного препарата и способа его применения является повышение выхода здоровых телят при простоте использования препарата и осуществлении способа.

Расчет эффективности применения лекарственного средства «Энфуролат» проводили по предотвращенному ущербу за счет сокращения количества дней бесплодия по формулам:

У₀=У₁+У₂,

где У₀ - общий ущерб,

У₁ - ущерб от недополучения молока, руб.,

У₂ - ущерб от недополучения приплода,

У₁=0,1%П·Тб·Ц,

Где 0,1% - коэффициент недополучения молока на 1 день бесплодия,

П - продуктивность на одну фуражную корову в год, кг,

Тб - количество дней бесплодия (сервис-период - 30),

Ц - закупочная цена 1 ц молока, руб.,

У₂=0,003·Тб·С,

где 0,003 - коэффициент недополучения телят на 1 день бесплодия,

С=3,61×Ц,

Пу=У₀(контроль)-У₀(опыт),

Где Пу - предотвращенный ущерб, руб.,

Эв=Пу-Зв, где

Эв - экономическая эффективность на 1 голову, руб.,

Зв - дополнительные затраты, руб.,

Эв×М - экономический эффект на группу животных, руб., М - количество животных в группе,

Эр=Эв:Зв,

Где Эр - экономический эффект на рубль затрат.

Данные для расчета экономической эффективности применения «Эндометромага» (контроль) и «Энфуролата» (предложенный) и результаты расчета представлены таблицах 10-13.

Таким образом, проведенные испытания препарата для лечения эндометритов у коров показали, что он обладает широким спектром антимикробного действия, выраженным лечебным действием и эффективнее прототипа, является малотоксичным. Применение препарата, условно названного «Энфуролат», технологично и экономически выгодно.

1. Препарат для лечения эндометритов у коров, включающий действующее вещество, разбавитель, стабилизатор и основу, отличающийся тем, что в качестве действующего вещества используют окситетрациклин гидрохлорид, стрептоцид, фурацилин, в качестве основы диметилглицеролат кремния, глицеролаты кремния, ксантановую смолу как стабилизатор и дистиллированную воду как растворитель, при этом препарат состоит из компонентов при соотношении, масс. %:

окситетрациклина гидрохлорид (95%)	4,77-5,83;
стрептоцид	0,416-0,508;
фурацилин	0,166-0,204;
диметилглицеролаты кремния (CH3)2Si(С3Н7О3)2·C3H8O3	2,25-2,75;
глицеролаты кремния Si(C3H7O3)4·6C3H8O3	2,25-2,75;
ксантановая смола	0,225-0,275;
дистиллированная вода	остальное

2. Способ применения препарата по п. 1, отличающийся тем, что препарат применяют для лечения эндометритов у коров путем введения его в полость матки в дозе 30,0-60,0 мл 3-5 раз с интервалом 48 часов, причем, препарат вводят в матку с помощью одноразовой пипетки на фоне общестимулирующей и этиотропной терапии, включающей биостимульгин подкожно, 30 мл, 1,7 дни лечения, тривитамин, внутримышечно, 20 мл, 1,7 дни.