Антисмысловая регуляция экспрессии gcgr

Антисмысловая регуляция экспрессии gcgr

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Перечень последовательностей

Настоящая заявка подана вместе с перечнем последовательностей в электронном формате. Перечень последовательностей представлен в виде файла с именем BIOL0161USSEQ.txt, созданного 19 сентября 2012 г., размером 60 кБ. Информация о перечне последовательностей в электронном формате полностью включена сюда посредством ссылки во всей своей полноте.

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Здесь представлены способы, соединения и композиции для снижения экспрессии GCGR мРНК и белка в организме животного. Такие способы, соединения и композиции можно применять, например, для лечения, профилактики, задержки или ослабления заболеваний, связанных с нарушениями обмена веществ, в частности, с нарушениями, связанными с диабетом.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Инсулин и глюкагон представляют собой два гормона поджелудочной железы, участвующие в регуляции гомеостаза и метаболизма глюкозы. Глюкагон секретируется си-клетками островков поджелудочной железы и регулирует гомеостаз глюкозы путем регуляции продукции глюкозы в печени (Quesada et al., J. Endocrinol. 2008. 199: 5-19). Основной функцией глюкагона является противодействие действию инсулина.

Нарушение регуляции метаболизма глюкозы может быть вызвано либо дефектной секрецией и/или действием инсулина, либо нарушением супрессии глюкагона после приема пищи (Shah et al., Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 1999. 277: E283-E290). Показано, что ингибирование секреции глюкагона после приема пищи у пациентов с диабетом значительно снижает уровень глюкозы в крови, что указывает на значительный вклад глюкагона в гипергликемию у пациентов с сахарным диабетом 2 типа (Shah et al., J. Clin. Endocrinol. Metab. 2000. 85: 4053-4059).

Диабет 2 типа характеризуется нарушением секреции и/или действия инсулина, и также для многих субъектов характерны неадекватные уровни циркулирующего глюкагона натощак и после приема пищи. Увеличение коэффициента глюкагон/инсулин, вероятно, является важным фактором, определяющим гипергликемию у пациентов с сахарным диабетом 2 типа (Baron et al., Diabetes. 1987. 36: 274-283). Отсутствие подавления секреции глюкагона после приема пищи у пациентов с СД 2 типа также играет важную роль в патогенезе гипергликемии после приема пищи (Henkel et al., Metabolism. 2005. 54: 1168-1173).

Глюкагон оказывает действие на ткани-мишени посредством активации его рецептора GCGR. Рецептор глюкагон является 62 кДа белком, который является членом класса В семейства рецепторов, сопряженных с G-белком (Brubaker et al., Recept. Channels. 2002. 8: 179-88). Активация GCGR приводит к передаче сигнала G-белками (G_sα и _Gq), причем G_sα активирует аденилатциклазу, вызывая продукцию цАМФ, что приводит к увеличению уровней протеинкиназы А. Сигнальный путь GCGR в печени приводит к увеличению продукции глюкозы в печени путем индукции гликогенолиза и глюконеогенеза наряду с ингибированием гликогенеза (Jiang and Zhang. Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 2003. 284: E671-E678). GCGR экспрессируется также во внепеченочных тканях, которые включают сердце, гладкие мышцы кишечника, почки, головной мозг и жировую ткань (Hansen et al., Peptides. 1995. 16: 1163-1166).

Антисмысловое ингибирование GCGR обеспечивает уникальное преимущество по сравнению с традиционными низкомолекулярными ингибиторами, заключающееся в том, что антисмысловые ингибиторы не основаны на конкурентном связывании соединения с белком и ингибируют активность непосредственно за счет снижения экспрессии GCGR. Типичным патентом США, описывающим антисмысловые ингибиторы GCGR, является патент США №7750142, полностью включенный в настоящий документ посредством ссылки. Антисмысловая технология становится эффективным средством снижения экспрессии определенных генных продуктов и, следовательно, может оказаться исключительно полезной в ряде терапевтических, диагностических и исследовательских вариантах применения для регуляции GCGR.

В настоящее время отсутствуют приемлемые варианты лечения расстройств обмена веществ. Соответственно, цель настоящей заявки заключается в обеспечении соединений и способов для лечения таких заболеваний и расстройств. Настоящее изобретение относится к обнаружению новых, сильнодействующих ингибиторов экспрессии гена GCGR.

Все документы или части документов, цитируемые в настоящей заявке, включая патенты, патентные заявки, статьи, книги и монографии, но не ограничиваясь ими, включены в настоящую заявку посредством ссылок в виде частей обсуждаемых здесь документов, а также во всей своей полноте.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Здесь представлены способы, соединения и композиции для регуляции экспрессии GCGR и лечения, профилактики, задержки или ослабления заболеваний, связанных с нарушениями обмена веществ, в частности, нарушениями, связанными с диабетом, и/или их симптомом.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

Следует понимать, что как предшествующее общее описание, так и последующее подробное описание являются лишь иллюстративными и пояснительными и не ограничивают приведенного здесь описания, указанного в формуле изобретения. Использование единственного числа здесь включает множественное число, если иное не указано определенным образом. При использовании здесь, союз "или" означает "и/или", если не указано иное. Кроме того, использование термина "включая", а также других форм, таких как "включает" и "включенный", не является ограничивающим. Кроме того, такие термины как "элемент" или "компонент" охватывают как элементы и компоненты, содержащие один блок, так и элементы и компоненты, которые включают более чем одну субъединицу, если иное не указано определенным образом.

Заголовки разделов, использованные здесь, предназначены только для организационных целей и не должны рассматриваться как ограничивающие описанный объект изобретения. Все документы или части документов, цитируемые в настоящей заявке, включая патенты, патентные заявки, статьи, книги и монографии, но не ограничиваясь ими, включены в настоящую заявку посредством ссылок как в виде частей обсуждаемых здесь документов, так и полностью.

Определения

Если не представлены конкретные определения, номенклатура, используемая в этой связи, а также процедуры и методики аналитической химии, химии органического синтеза и медицинской и фармацевтической химии, описанные здесь, являются хорошо известными методикам и обычно используются в данной области техники. Для химического синтеза и химического анализа можно использовать стандартные методики. В допустимых случаях все документы или части документов, цитируемые в настоящей заявке, включая, но не ограничиваясь этим, патенты, заявки, опубликованные заявки и другие журнальные публикации, учетные номера GENBANK и связанная с ними информация о последовательностях, получаемая из таких баз данных как Национальный центр биотехнологической информации (NCBI), и другие данные, цитируемые в настоящей заявке, включены в настоящую заявку посредством ссылок как в виде частей обсуждаемых документов, так и полностью.

Если не указано иное, то следующие термины имеют следующие значения:

"2′-O-метоксиэтил" (также 2′-МОЕ и 2′-O(СН₂)₂-ОСН₃) относится к O-метоксиэтильной модификации 2′-положения фурозильного кольца. 2′-O-метоксиэтил-модифицированная сахароза является модифицированной сахарозой.

"2′-O-метоксиэтилнуклеотид" означает нуклеотид, содержащий 2′-O-метоксиэтил-модифицированную группу сахарозы.

"3′-сайт-мишень" относится к нуклеотиду нуклеиновой кислоты-мишени, комплементарному 3′-концевому нуклеотиду конкретного антисмыслового соединения.

"5′-сайт-мишень" относится к нуклеотиду нуклеиновой кислоты-мишени, комплементарному 5′-концевому нуклеотиду конкретного антисмыслового соединения.

"5-метилцитозин" означает цитозин, модифицированный метильной группой, присоединенной в 5′-положении. 5′-метилцитозин является модифицированным нуклеиновым основанием.

"Приблизительно" означает в пределах ±10% от указанного значения. Например, если указано, что "маркер может быть повышен приблизительно на 50%", подразумевается, что маркер может быть повышен на 45-55%.

"Активный фармацевтический агент" означает вещество или вещества в составе фармацевтической композиции, которые обеспечивают терапевтически благоприятный эффект при введении субъекту. Например, в некоторых вариантах воплощения антисмысловой олигонуклеотид, мишенью которого является GCGR, является активным фармацевтическим агентом.

"Активная область-мишень" или "область-мишень" означает область, являющуюся мишенью одного или более активных антисмысловых соединений. "Активные антисмысловые соединения" означают антисмысловые соединения, которые снижают уровни целевой нуклеиновой кислоты или белка-мишени.

"Ожирение" или "тучность" относится к состоянию ожирения или чрезмерно высокому количеству жира или жировой ткани по отношению к мышечной массе тела. Количество жира включает как аспекты распределения жира в организме, так и размер и массу отложений жировой ткани. Распределение жира в организме можно оценить путем измерений кожных складок, соотношений окружности талии и бедер или таких методик как УЗИ, компьютерная томография или магнитно-резонансная томография. По данным Центра по контролю и профилактике заболеваний люди с индексом массы тела (ИМТ) от 30 и более считаются тучными. Термин "ожирение", при использовании здесь, включает состояния, при которых увеличение жира в организме выходит за пределы физических потребностей в результате чрезмерного накопления жировой ткани в организме. Термин "ожирение" включает следующие состояния: ожирение с началом заболевания во взрослом возрасте; алиментарное ожирение; эндогенное или воспалительное ожирение; эндокринное ожирение; семейное ожирение; гиперинсулиновое ожирение; гиперпластическо-гипертрофическое ожирение; ожирение при гипогонадизме; ожирение при гипотиреозе; пожизненное ожирение; патологическое ожирение и экзогенное ожирение, но не ограничивается ими.

"Сопутствующее введение" означает совместное введение двух агентов любым способом, при котором фармакологические эффекты обоих агентов проявляются у пациента одновременно. Сопутствующее введение не требует введения обоих агентов в составе одной фармацевтической композиции, в одной и той же лекарственной форме или одним и тем же путем введения. Эффекты обоих препаратов не обязательно проявляются сами по себе в одно и то же время. Указанные эффекты должны лишь взаимно перекрываться в течение некоторого периода времени, и их продолжительность не обязательно должна быть одинакова.

"Введение" означает предоставление агента животному и включает, не ограничиваясь этим, введение медицинским работником и самостоятельное введение.

"Агент" означает активное вещество, которое может обеспечить терапевтический благоприятный эффект при введении в организм животного. "Первый агент" означает терапевтическое соединение, представленное здесь. Например, первый агент может являться антисмысловым олигонуклеотидом, мишенью которого является GCGR. "Второй агент" означает второе терапевтическое соединение, описанное здесь (например, второй антисмысловой олигонуклеотид, мишенью которого является GCGR), и/или терапевтическое соединение для воздействия на мишени, отличающиеся от GCGR.

"Облегчение" относится к уменьшению по меньшей мере одного показателя, признака или симптома ассоциированного заболевания, расстройства или состояния. Степень тяжести показателей можно определить с помощью субъективных или объективных средств, известных специалистам в данной области техники.

"Животное" относится к человеку или животному, не являющемуся человеком, включая, но не ограничиваясь этим, мышей, крыс, кроликов, собак, кошек, свиней и не являющихся человеком приматов, в том числе обезьян и шимпанзе, но не ограничиваясь ими.

"Антисмысловая активность" означает любую обнаруживаемую или измеримую активность, относящуюся к гибридизации антисмыслового соединения с нуклеиновой кислотой-мишенью. В некоторых вариантах воплощения антисмысловая активность является уменьшением количества или экспрессии нуклеиновой кислоты-мишени или белка, кодируемого такой нуклеиновой кислотой-мишенью.

"Антисмысловое соединение" означает олигомерное соединение, способное подвергаться гибридизации с нуклеиновой кислотой-мишенью за счет водородных связей.

"Антисмысловое ингибирование" означает снижение уровней нуклеиновой кислоты-мишени или уровней белка-мишени в присутствии антисмыслового соединения, комплементарного нуклеиновой кислоте-мишени, по сравнению с уровнями нуклеиновой кислоты-мишени или уровнями белка-мишени в отсутствие антисмыслового соединения.

"Антисмысловой олигонуклеотид" означает одноцепочечный олигонуклеотид, обладающий последовательностью нуклеиновых оснований, дающей возможность гибридизации с соответствующей областью или сегментом нуклеиновой кислоты-мишени.

"Бициклическая сахароза" означает фурозильное кольцо, модифицированное путем образования мостика между двумя негеминальными кольцевьми атомами. Бициклическая сахароза является модифицированной сахарозой.

"Бициклическая нуклеиновая кислота" или "БНА" относится к нуклеозиду или нуклеотиду, в котором фуранозная часть нуклеозида или нуклеотида включает мостик, соединяющий два атома углерода в фуранозном кольце, тем самым образуя бициклическую кольцевую систему.

"Кэп-структура" или "концевая кэп-группа" означает химическую модификацию, внедренную на любом конце антисмыслового соединения.

"Химически различная область" относится к области антисмыслового соединения, которая некоторым образом химически отличается от другой области того же антисмыслового соединения. Например, область, содержащая 2′-O-метоксиэтилнуклеотиды, химически отличается от области, содержащей нуклеотиды без 2′-O-метоксиэтильных модификаций.

"Химерное антисмысловое соединение" означает антисмысловое соединение, которое имеет по меньшей мере две химически различные области.

"Совместное введение" означает введение двух или более агентов субъекту. Указанные два или более агентов могут находиться в составе одной фармацевтической композиции или могут находиться в раздельных фармацевтических композициях. Каждый из указанных двух или более агентов можно вводить одинаковым путем или различными путями введения. Совместное введение охватывает параллельное или последовательное введение.

"Холестерин" является стериновой молекулой, присутствующей в клеточных мембранах всех животных тканей. Холестерин должен транспортироваться в плазме крови животных липопротеинами, включающими липопротеины очень низкой плотности (ЛПОНП), липопротеины промежуточной плотности (ЛППП), липопротеины низкой плотности (ЛПНП) и липопротеины высокой плотности (ЛПВП). "Холестерин плазмы" относится к сумме всех липопротеинов (ЛПОНП, ЛППП, ЛПНП, ЛПВП), этерифицированному и/или неэтерифицированному холестерину, присутствующему в плазме или сыворотке.

"Комплементарность" означает способность к спариванию между нуклеиновыми основаниями первой нуклеиновой кислоты и второй нуклеиновой кислоты.

"Смежные нуклеиновые основания" означает нуклеиновые основания, непосредственно примыкающие друг к другу.

"Дезоксирибонуклеотид" означает нуклеотид, имеющий атом водорода по 2′-положению сахарозной части нуклеотида. Дезоксирибонуклеотиды могут быть модифицированы любым из множества заместителей.

"Сахарный диабет" или "диабет" является синдромом, характеризующимся расстройством метаболизма и аномально высоким уровнем сахара в крови (гипергликемией) в результате недостаточного уровня инсулина или снижения чувствительности к инсулину. Характерными симптомами являются избыточный диурез (полиурия) из-за высокого уровня глюкозы в крови, избыточная жажда и повышенное потребление жидкости (полидипсия) для компенсации повышенного мочеиспускания, затуманенное зрение из-за влияния высокого уровня глюкозы в крови на оптическую систему глаза, необъяснимая потеря веса и вялость.

"Диабетическая дислипидемия" или "сахарный диабет 2 типа с дислипидемией" означает состояние, характеризующееся сахарным диабетом 2 типа, пониженным ЛПВП-X, повышенным уровнем триглицеридов и повышенным уровнем небольших плотных частиц ЛПНП.

"Разбавитель" означает ингредиент композиции, не обладающий фармакологической активностью, но являющийся фармацевтически необходимым или желательным. Например, разбавитель в композиции для инъекций может являться жидкостью, например, физиологическим раствором.

"Дислипидемия" относится к расстройству метаболизма липидов и/или липопротеинов, в том числе избыточной продукции или недостаточности липидов и/или липопротеинов. Дислипидемии могут проявляться повышением уровня липидов, например, холестерина и триглицеридов, а также липопротеинов, например, холестерина липопротеинов низкой плотности (ЛПНП).

"Дозированная форма" означает форму, в которой представлен фармацевтический агент, например, пилюлю, таблетку или другую дозированную форму, известную в данной области техники. В некоторых вариантах воплощения дозированная форма представляет собой флакон, содержащий лиофилизированный антисмысловой олигонуклеотид. В некоторых вариантах воплощения дозированная форма представляет собой флакон, содержащий восстановленный антисмысловой олигонуклеотид.

"Доза" означает определенное количество фармацевтического агента, вводимое при однократном приеме или в течение определенного периода времени. В некоторых вариантах воплощения дозу можно вводить в одном, двух или более болюсах, таблетках или инъекциях. Например, в некоторых вариантах воплощения, где желательно подкожное введение, для желательной дозы необходим объем, с трудом вводимый путем однократной инъекции; таким образом, для достижения желательной дозы можно использовать две или более инъекции. В некоторых вариантах воплощения фармацевтический агент вводят путем вливания, выполняемого в течение длительного периода времени или непрерывно. Дозы можно определять как количество фармацевтического агента в час, день, неделю или месяц.

"Эффективное количество" или "терапевтически эффективное количество" означает количество активного фармацевтического агента, достаточное для осуществления желаемого физиологического результата у индивида, нуждающегося в агенте. Эффективное количество может варьироваться от индивида к индивиду в зависимости от здоровья и физического состояния индивида, подлежащего лечению, таксономической группы индивидов, подлежащих лечению, состава композиции, оценки медицинского состояния индивида и других значимых факторов.

"Полностью комплементарный" или "на 100% комплементарный" означает, что каждому нуклеиновому основанию последовательности нуклеиновых оснований первой нуклеиновой кислоты соответствует комплементарное нуклеиновое основание во второй последовательности нуклеиновых оснований второй нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах воплощения первая нуклеиновая кислота является антисмысловым соединением, а нуклеиновая кислота-мишень является второй нуклеиновой кислотой.

"Гэпмер" означает химерное антисмысловое соединение, в котором внутренняя область, имеющая множество нуклеозидов, поддерживающих расщепление РНКазой Н, расположена между внешними областями, имеющими один или более нуклеозидов, причем нуклеозиды, содержащиеся во внутренней области, химически отличаются от нуклеозида или нуклеозидов, содержащихся во внешних областях. Внутренняя область может называться "сегментом разрыва", а внешние области могут называться "сегментами крыльев".

"С расширенным разрывом" означает химерное антисмысловое соединение, имеющее сегмент разрыва из 12 или более смежных 2′-дезоксирибонуклеозидов, расположенных между и в непосредственной близости от 5′- и 3′-сегментов крыльев, имеющих от одного до шести нуклеозидов.

"Рецептор глюкагона" или "GCGR" означает любую нуклеиновую кислоту или белок GCGR.

"Экспрессия GCGR" означает уровень мРНК, транскрибируемой с гена, кодирующего GCGR, или уровень белка, транслируемого с мРНК. Экспрессию GCGR можно определять известными в данной области техники способами, например, нозерн- или вестерн-блоттингом.

"Нуклеиновая кислота GCGR" означает любую нуклеиновую кислоту, кодирующую GCGR. Например, в некоторых вариантах воплощения нуклеиновая кислота GCGR включает последовательность ДНК, кодирующую GCGR, последовательность РНК, транскрибируемую с ДНК, кодирующей GCGR (в том числе геномной ДНК, включающей интроны и экзоны), и последовательность мРНК, кодирующую GCGR. "мРНК GCGR " означает мРНК, кодирующую белок GCGR.

"Глюкоза" является моносахаридом, используемым клетками в качестве источника энергии, и интермедиатом воспаления. "Глюкоза плазмы" относится к глюкозе, присутствующей в плазме.

"Гибридизация" означает отжиг комплементарных молекул нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах воплощения комплементарные молекулы нуклеиновой кислоты включают антисмысловое соединение и нуклеиновую кислоту-мишень.

"Гиперлипидемия" или "гиперлипемия" представляет собой состояние, характеризующееся повышенным содержанием липидов в сыворотке или циркулирующих липидов (в плазме). Это состояние проявляется аномально высокой концентрацией жиров. Липидные фракции циркулирующей крови представляют собой холестерин, липопротеины низкой плотности, липопротеины очень низкой плотности и триглицериды.

"Гипертриглицеридемия" означает состояние, характеризующееся повышенными уровнями триглицеридов.

"Выявление" или "выбор животного с метаболическим расстройством" означает выявление или выбор субъекта с диагнозом метаболического заболевания или метаболического расстройства или выявление, или выбор субъекта с любым симптомом метаболического заболевания, включая метаболический синдром, гипергликемию, гипертриглицеридемию, гипертензию, повышенную инсулинорезистентность, пониженную чувствительность к инсулину, избыточную массу тела и/или избыток жира или любую комбинацию вышеперечисленного, но не ограничиваясь ими. Такое выявление можно осуществить любым способом, включая, но не ограничиваясь этим, стандартные клинические анализы или оценки, например, измерение глюкозы в сыворотке или циркулирующей глюкозы (в плазме) крови, измерение триглицеридов в сыворотке или циркулирующих триглицеридов (в плазме), измерение артериального давления, измерение жира, измерение массы тела и т.п.

"Непосредственно примыкающий" означает отсутствие промежуточных элементов между непосредственно примыкающими элементами.

"Индивид" или "субъект", или "животное" означает человека или животное, не являющееся человеком, выбранное для лечения или терапии.

"Ингибирование экспрессии или активности" относится к снижению или блокаде экспрессии или активности РНК или белка и не обязательно указывает на полную ликвидацию экспрессии или активности.

Инсулинорезистентность определяют как состояние, при котором нормального количества инсулина недостаточно для получения нормального ответа жировых, мышечных клеток и клеток печени на инсулин. Инсулинорезистентность жировых клеток приводит к гидролизу хранящихся триглицеридов, что повышает уровень свободных жирных кислот в плазме крови. Инсулинорезистентность в мышцах снижает поглощение глюкозы, в то время как инсулинорезистентность в печени снижает хранение глюкозы, причем оба указанные эффекта служат для повышения уровня глюкозы в крови. Высокие уровни инсулина и глюкозы в плазме, обусловленные инсулинорезистентностью, часто приводят к метаболическому синдрому и диабету 2 типа.

"Чувствительность к инсулину" является мерой эффективности переработки глюкозы в организме индивида. Индивид с высокой чувствительностью к инсулину эффективно перерабатывает глюкозу, в то время как индивид с низкой чувствительностью к инсулину неэффективно перерабатывает глюкозу.

"Межнуклеозидная связь" относится к химической связи между нуклеозидами.

"Внутривенное введение" означает введение в вену.

"Связанные нуклеозиды" означает соседние нуклеозиды, связанные друг с другом.

"Гиполипидемическая терапия" или "гиполипидемический агент" означает терапевтическую схему для обеспечения снижения уровня одного или более липидов у субъекта. В некоторых вариантах воплощения гиполипидемическую терапию осуществляют для снижения уровня одного или более из АроВ, общего холестерина, ЛПНП-Х, ЛПОНП-Х, ЛППП-Х, не-ЛПВП-Х, триглицеридов, мелких плотных частиц ЛПНП и Lp(a) у субъекта. Примеры гиполипидемических терапевтических средств включают статины, фибраты и ингибиторы МТР.

"Основные факторы риска" относится к факторам, способствующим высокому риску конкретного заболевания или состояния. В некоторых вариантах воплощения основные факторы риска развития коронарной болезни сердца включают, без ограничения, курение, гипертензию, низкий ЛПВП-Х, семейный анамнез коронарной болезни сердца, возраст и другие факторы, описанные здесь.

"Метаболическое заболевание" или "метаболическое расстройство" относится к состоянию, характеризующемуся изменением или нарушением метаболической функции. "Метаболический" и "метаболизм" представляют собой термины, хорошо известные в данной области техники и обычно включающие весь спектр биохимических процессов, протекающих в живом организме. Метаболические заболевания или расстройства включают ожирение, диабет, гипергликемию, преддиабет, неалкогольную жировую дистрофию печени (НАЖДП), метаболический синдром, инсулинорезистентность, диабетическую дислипидемию или гипертриглицеридемию, или их комбинацию, но не ограничиваются ими.

"Метаболический синдром" означает состояние, характеризующееся кластеризацией липидных и нелипидных факторов сердечно-сосудистого риска метаболического происхождения. В некоторых вариантах воплощения метаболический синдром выявляют по наличию любых 3-х из следующих факторов: окружность талии более 102 см у мужчин или более 88 см у женщин; уровень триглицеридов в сыворотке по меньшей мере 150 мг/дл; ЛПВП-Х менее 40 мг/дл у мужчин и менее 50 мг/дл у женщин; артериальное давление по меньшей мере 130/85 мм рт.ст.; и уровень глюкозы натощак по меньшей мере 110 мг/дл. Эти детерминанты легко измерить в клинической практике (JAMA, 2001, 285: 2486-2497).

"Несовпадение" или "некомплементарное нуклеиновое основание" относится к случаю, когда нуклеиновое основание первой нуклеиновой кислоты неспособно спариваться с соответствующим нуклеиновым основанием второй нуклеиновой кислоты или нуклеиновой кислоты-мишени.

"Смешанная дислипидемия" означает состояние, характеризующееся повышенными уровнями холестерина и триглицеридов.

"Модифицированная межнуклеозидная связь" относится к замещению или любому изменению природной межнуклеозидной связи (т.е. фосфодиэфирной межнуклеозидной связи).

"Модифицированное нуклеиновое основание" относится к любому нуклеиновому основанию, кроме аденина, цитозина, гуанина, тимидина или урацила. "Немодифицированное нуклеиновое основание" означает пуриновые основания аденин (А) и гуанин (G) и пиримидиновые основания тимин (Т), цитозин (С) и урацил (U).

"Модифицированный нуклеозид" означает нуклеозид, независимо имеющий модифицированную сахарозную группу или модифицированное нуклеиновое основание.

"Модифицированный нуклеотид" означает нуклеотид, независимо имеющий модифицированную сахарозную группу, модифицированную межнуклеозидную связь или модифицированное нуклеиновое основание. "Модифицированный нуклеозид" означает нуклеозид, независимо имеющий модифицированную сахарозную группу или модифицированное нуклеиновое основание.

"Модифицированный олигонуклеотид" означает олигонуклеотид, включающий по меньшей мере один модифицированный нуклеотид.

"Модифицированная сахароза" относится к замещению или изменению природной сахарозы.

"Мотив" означает схему химически различных областей в антисмысловом соединении.

"Природная межнуклеозидная связь" означает 3′-5′-фосфодиэфирную связь.

"Природная сахарозная группа" означает сахарозу, присутствующую в ДНК (2′-Н) или РНК (2′-ОН).

"Неалкогольная жировая дистрофия печени" или "НАЖДП" означает состояние, характеризующееся жировым воспалением печени, не обусловленным чрезмерным употреблением алкоголя (например, потреблением алкоголя свыше 20 г/сутки). В некоторых вариантах воплощения НАЖДП связана с инсулинорезистентностью и метаболическим синдромом. НАЖДП охватывает спектр заболеваний, начиная от простого накопления триглицеридов в гепатоцитах (стеатоз печени) до стеатоза печени с воспалением (стеатогепатита), фиброза и цирроза печени.

"Неалкогольный стеатогепатит" (НАСГ) происходит при прогрессировании НАЖБП за стадию отложения триглицеридов. Для развития НАСГ требуется "второй удар", способный индуцировать некроз, воспаление и фиброз. Потенциальные факторы второго удара можно разделить на широкие группы: факторы, вызывающие усиление окислительного стресса, и факторы, способствующие экспрессии провоспалительных цитокинов.

"Нуклеиновая кислота" относится к молекулам, состоящим из мономерных нуклеотидов. Нуклеиновая кислота включает рибонуклеиновые кислоты (РНК), дезоксирибонуклеиновые кислоты (ДНК), одноцепочечные нуклеиновые кислоты, двуцепочечные нуклеиновые кислоты, малые интерферирующие рибонуклеиновые кислоты (миРНК) и микроРНК. Нуклеиновая кислота может также включать комбинацию этих элементов в одной молекуле.

"Нуклеиновое основание" означает гетероциклическую группу, способную спариваться с основанием другой нуклеиновой кислоты.

"Последовательность нуклеиновых оснований" означает порядок смежных нуклеиновых оснований независимо от любой модификации сахарозы, связи или нуклеинового основания.

"Нуклеозид" означает нуклеиновое основание, связанное с сахарозой.

"Нуклеозидный миметик" включает структуры, используемые для замены сахарозы или сахарозы и основания и, необязательно, связи в одном или более положений олигомерного соединения, например, нуклеозидные миметики, имеющие морфолиновые, циклогексенильные, циклогексильные, тетрагидропиранильные, бицикло или трициклогруппы, сахарозные миметики, например, нефуранозные сахарозные единицы.

"Нуклеотид" означает нуклеозид, имеющий фосфатную группу, ковалентно присоединенную к сахарозному фрагменту нуклеозида.

"Нуклеотидный миметик" включает структуры, используемые для замены нуклеозида и связи в одном или более положений олигомерного соединения, например, пептидные нуклеиновые кислоты или морфолиногруппы (морфолиногруппы, соединенные -N(H)-C(=O)-O- или другой нефосфодиэфирной связью).

"Олигомерное соединение" или "олигомер" относится к полимерной структуре, содержащей две или более субструктур и способной к гибридизации с областью молекулы нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах воплощения олигомерные соединения являются олигонуклеозидами. В некоторых вариантах воплощения олигомерные соединения являются олигонуклеотидами. В некоторых вариантах воплощения олигомерные соединения являются антисмысловыми соединениями. В некоторых вариантах воплощения олигомерные соединения являются антисмысловыми олигонуклеотидами. В некоторых вариантах воплощения олигомерные соединения являются химерными олигонуклеотидами.

"Олигонуклеотид" означает полимер из соединенных нуклеозидов, каждый из которых может быть модифицированным или немодифицированным независимо друг от Друга.

"Парентеральное введение" означает введение посредством инъекции или вливания. Парентеральное введение включает подкожное введение, внутривенное введение, внутримышечное введение, внутриартериальное введение, внутрибрюшинное введение или внутричерепное введение, например, интратекальное или интрацеребровентрикулярное введение. Введение может быть непрерывным или постоянным, или краткосрочным, или периодическим.

"Пептид" означает молекулу, образованную путем соединения по меньшей мере двух аминокислот посредством амидных связей. Пептид относится к полипептидам и белкам.

"Фармацевтический агент" означает вещество, обеспечивающее терапевтический благоприятный эффект при введении в организм индивида. Например, в некоторых вариантах воплощения антисмысловой олигонуклеотид, мишенью которого является GCGR, является фармацевтическим агентом.

"Фармацевтическая композиция" означает смесь веществ, подходящую для введения в организм индивида. Например, фармацевтическая композиция может включать один или более активных агентов и стерильный водный раствор.

"Фармацевтически приемлемый носитель" означает среду или разбавитель, который не оказывает вреда структуре олигонуклеотида. Некоторые из таких носителей обеспечивают возможность составления фармацевтических композиций в виде, например, таблеток, пилюль, драже, капсул, жидкостей, гелей, сиропов, взвесей, суспензий и пастилок, для перорального введения субъекту. Например, фармацевтически приемлемый носитель может являться стерильным водным раствором.

"Фармацевтически приемлемое производное" охватывает фармацевтически приемлемые соли, конъюгаты, пролекарства или изомеры соединений, описанных здесь.

"Фармацевтически приемлемые соли" означает физиологически и фармацевтически приемлемые соли антисмысловых соединений, т.е. соли, сохраняющие желательную биологическую активность исходного олигонуклеотида и не придающие ему нежелательного токсического действия.

"Фосфортиоатная связь" означает связь между нуклеозидами, где фосфодиэфирная связь модифицирована путем замены одного из немостиковых атомов кислорода атомом серы. Фосфортиоатная связь является модифицированной межнуклеозидной связью.

"Фрагмент" означает определенное количество смежных (т.е. соединенных) нуклеиновых оснований нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах воплощения фрагмент представляет собой определенное количество смежных нуклеиновых оснований нуклеиновой кислоты-мишени. В некоторых вариантах воплощения фрагмент представляет собой определенное количество смежных нуклеиновых оснований антисмыслового соединения.

"Предотвратить" относится к задержке или предупреждению наступления или развития заболевания, расстройства или состояния на период времени от нескольких минут до неопределенного срока. Термин "предотвратить" также означает снижение риска развития заболевания, расстройства или состояния.

"Пролекарство" означает терапевтический агент, который получают в неактивной форме, преобразующейся в активную форму в организме или его клетках под действием эндогенных ферментов или других химических веществ или условий.

"Побочные эффекты" означает физиологические реакции, относящиеся к лечению и не являющиеся желательными эффектами. В некоторых вариантах воплощения побочные эффекты включают реакции в месте инъекции, аномалии анализов функции печени, аномалии функции почек, гепатотоксичность, нефротоксичность, аномалии центральной нервной системы, миопатии и недомогание. Например, повышение уровня аминотрансфераз в сыворотке может указывать на гепатотоксичность или аномалию функции печени. Например, повышение уровня билирубина может указывать на гепатотоксичность или аномалии функции печени.

"Одноцепочечный олигонуклеотид" означает олигонуклеотид, не гибридизованный с комплементарной цепью.

"Специфически гибридизуемый" относится к антисмысловому соединению, обладающему достаточной степенью комплементарности между антисмысловым олигонуклеотидом и нуклеиновой кислотой-мишенью для получения желательного эффекта при минимальном или отсутствующем взаимодействии с нуклеиновыми кислотами, не являющимися мишенями, в условиях, когда желательно специфическое связывание, т.е. в физиологических условиях в случае анализов in vivo и при лечении.

"Статин" означает агент, ингибирующий активность ГМГ-КоА-редуктазы.

"Подкожное введение" означает введение непосредственно под кожу.

"Адресное воздействие" или "для адресного воздействия" означает процесс конструирования и выбора антисмыслового соединения, специфически гибридизующегося с нуклеиновой кислотой-мишенью