Конъюгаты антагонистов интегрина для нацеленной доставки к клеткам, экспрессирующим vla-4

Конъюгаты антагонистов интегрина для нацеленной доставки к клеткам, экспрессирующим vla-4

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Настоящее изобретение относится к синтезу и взаимодействию эффективных и селективных низкомолекулярных антагонистов интегрина, содержащих подходящие линкеры и функциональные группы для химической реакции с другими молекулами, содержащими реакционно-способные нуклеофильные группы, например тиольные группы, для образования ковалентной связи между молекулой, которую нужно конъюгировать, и нацеливающим фрагментом. Низкомолекулярные нацеливающие антагонисты связываются с распознаваемыми ими системами рецепторов, как, например, антагонисты VLA-4 с димером VLA-4 (как антагонисты α4β1 с интегрином α4β1, известным также как димерный белок Very Late Antigen-4). Ковалентно связанный радикал включает низкомолекулярные терапевтические вещества, полимеры, пептиды и олигонуклеотиды. Сюда входят 5'-тиосодержащие олигонуклеотиды для получения производных 5'-тио-миРНК в качестве средств для обеспечения нацеленной доставки указанных миРНК. Такие дериватизированные миРНК в составе конъюгата с подходящими агентами для трансфекции способствуют селективной доставке миРНК в клетки, экспрессирующие такие рецепторы интегрина, таким образом предотвращая экспрессию целевых генов за счет РНК-интерференции (РНКи).

VLA-4 (Very Late Antigen-4, называемый также α4β1) представляет собой димерный интегрин. Он составлен из двух субъединиц, состоящих из CD49d (альфа) и CD29 (бета). VLA-4 экспрессируется на плазменных мембранах. лейкоцитов, которые связываются с VCAM-1 на стенках кровеносных сосудов (после активации цитокинами), способствуя адгезии лейкоцитов на эндотелии сосудов (что вносит свой вклад в развитие атеросклероза и других воспалительных заболеваний). Раковые клетки определенных типов также могут экспрессировать VLA-4, который связывается с VCAM-1, вызывая адгезию таких клеток на эндотелии (что повышает риск метастаза). Таким образом, соединения, которые связываются с VLA-4, могут блокировать взаимодействие с VCAM-1, что потенциально предотвращает или лечит заболевания, опосредованные таким взаимодействием. Или же соединения, связывающиеся с VLA-4, можно применять в фармацевтических композициях для доставки лекарственных веществ, нуклеиновых кислот или других терапевтических соединений к тканям или клеткам, экспрессирующим VLA-4, для лечения или профилактики заболевания.

РНК-интерференция - хорошо известный процесс, при котором трансляция информационной РНК (иРНК) в белок затруднена за счет ассоциации или связывания комплементарных или частично комплементарных олигонуклеотидов, таких как малая интерферирующая РНК (миРНК), короткая шпилечная РНК (кшРНК), микро-РНК (миРНК) или антисмысловые олигонуклеотиды. Молекулы миРНК представляют собой двуспиральные молекулы РНК, длиной обычно в интервале 19-25 нуклеотидов, которые образуют ассоциаты с рядом белков в цитоплазме, известных как RISC (индуцированный РНК комплекс сайленсинга). В конечном итоге RISC разделяет двуспиральную миРНК, давая возможность одной цепи связаться или образовать ассоциат с комплементарным или частично комплементарным участком молекулы иРНК, после чего иРНК разрушается под действием RISC, или ее трансляция предупреждается иным путем, вследствие чего подавляется экспрессия кодируемого белка или продукта гена.

Одна из проблем в использовании нуклеиновых кислот, таких как миРНК, в терапевтических целях (в частности, для систематического введения у человека) заключается в доставке нуклеиновых кислот: (1) к конкретной целевой ткани или типам клеток и (2) к цитоплазме указанных клеток (т.е. туда, где указанная иРНК присутствует и транслируется в белок). Проблема доставки частично обусловлена тем фактом, что нуклеиновые кислоты отрицательно заряжены и легко разрушаются (особенно, если они не модифицированы), эффективно фильтруются почками, и их нельзя как таковые легко транспортировать в цитоплазму. Таким образом, основная масса исследований сфокусирована на разрешении проблемы доставки с помощью различных носителей и композиций, включая лизосомы, мицеллы, пептиды, полимеры, конъюгаты и аптамеры. См., например: Ling et al, Advances in Systemic siRNA Delivery, Drugs Future 34(9): 721 (September 2009). Некоторые более перспективные средства доставки включают применение липидных систем, включая липидные наночастицы. См., например: Wu et al., Lipidic Systems for In Vivo siRNA Delivery, AAPS J. 11(4): 639-652 (December 2009); Международная Заявка на патент № WO 2010/042877, Норе et al ("Improved Amino Lipids And Methods For the Delivery of Nucleic Acids"). Тем не менее, сохраняется необходимость в дальнейшем улучшении нацеленной доставки миРНК; а также в других веществах, таких как низкомолекулярные соединения, пептиды, другие нуклеиновые кислоты, флуоресцирующие молекулы и полимеры, для конкретных целевых клеток и цитоплазмы таких клеток.

Настоящее изобретение относится к соединениям формулы I:

где R1, R2 и n определены в подробном описании и формуле изобретения. В частности, настоящее изобретение относится к соединениям формулы I для улучшенной доставки конъюгированных молекул, таких как низкомолекулярные вещества, пептиды, нуклеиновые кислоты, флуоресцирующие молекулы и полимеры, к клеткам-мишеням, экспрессирующим димер интегрина α4β1 (Very Late Antigen-4) для различных терапевтических целей и других видов применения. Настоящее изобретение относится также к способам изготовления и применения таких соединений.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР

В Табл. 1 представлен состав конкретных дериватизированных по 5'-концу одинарных и двойных цепей миРНК.

В Табл. 2 представлены данные анализа для низкомолекулярных конъюгатов миРНК.

В Табл. 3 представлены последовательности миРНК, в которых 5'-антисмысловая цепь была дериватизирована с помощью Nu547.

В Табл. 4 представлены активности низкомолекулярных конъюгатов миРНК в анализах антагонистов интегрина и данные по KD для миРНК.

В Табл. 5 представлены идентичность, характеристика и связывающая активность меченых изомером FITC реагентов.

На Фиг. 1 представлена гистограмма ("В": Дуплекс-27 500 нМ и соединение из Примера 140, 10 мкМ; "А": Дуплекс-27).

На Фиг. 2 представлен пример отображения захвата миРНК (Дуплекс-27 (500 нМ).

На Фиг. 3 представлены изображения клеток Jurkat с FITC, конъюгированным с соединением из Примера FITC-5 (LFA-1 антагонист-меченый FITC) при концентрации 10 мкМ.

На Фиг. 4 представлены изображения клеток Jurkat с FITC, конъюгированным с соединением из Примера FITC-14 (VLA-4 антагонист-меченный FITC) в концентрации 10 мкМ. На гистограмме показан сдвиг в присутствии дуплекса миРНК с элементом, нацеливающим на VLA-4. В присутствии антагониста VLA-4 из примера 140, указанный сдвиг оказывается сжатым.

На Фиг. 5 показано снижение экспрессии АНА1 в клетках Н1299 при их обработке дуплексами миРНК, которые были дериватизированы по 5'-смысловой цепи с помощью низкомолекулярного соединения, нацеливающего к интегрину. Y-ось отображает наблюдаемый уровень экспрессии АНА1. Более низкий столбик отражает более высокую степень выключения (более высокую степень трансфекции миРНК); высокий столбик - более низкую степень выключения (т.е. более низкую степень трансфекции миРНК). Дуплексы голубого цвета включают нацеливающую модификацию на 5'-конце смысловой цепи; дуплексы розового цвета содержат нацеливающую модификацию на 5'-конце смысловой цепи, а также флюорофор Nu547, присоединенный по 5'-концу антисмысловой цепи.

На Фиг. 6 показаны уровни экспрессии GAPDH иРНК, маркера здоровья клеток. Идентичность уровней экспрессии для тех клеток, которые были обработаны дериватизированной миРНК, по сравнению обработанными холостым образцом и необработанными клетками, говорит об отсутствии токсичности для клеток при используемых концентрациях и длительности обработки.

Если не указано иное, следующие специфические термины и выражения, используемые в описании и формуле изобретения, имеют приведенные ниже определения.

Термин "радикал" обозначает атом или группу химически связанных атомов, которые присоединены к другому атому или молекуле посредством одной или более химических связей, составляя таким образом часть молекулы. Например, переменные R1 и R2 формулы I обозначают радикалы, которые присоединены к структуре, изображенной на формуле I, посредством ковалентной связи, где это указано.

Термин "конъюгированный фрагмент" обозначает структуру, представляющую собой терапевтическое средство или полезное соединение, пептид, полимер, низкомолекулярное вещество, флюоресцирующую молекулу, олигонуклеотид или нуклеиновую кислоту. Примерами являются лекарственные вещества, терапевтические пептиды, антисмысловые олигонуклеотиды, миРНК и флюоресцеинизотиоцианат (FITC).

Если не указано иное, термин "водород" или "гидро" обозначает радикал, состоящий из атома водорода (-Н), а не Н2.

Термин "галоген" обозначает радикал фтора, хлора, бром или иода.

Термин "алкил" обозначает алифатический насыщенный углеводородный радикал с линейной или разветвленной цепью, включающий от 1 до 25 атомов углерода.

Термин "TFA" обозначает трифторуксусную кислоту.

Если не указано иное, термин "соединение формулы" или "соединения формулы" обозначает любое соединение, выбранное из рода соединений, охватываемых указанной формулой (включая любые фармацевтически приемлемые соль или эфир любого такого соединения, если не указано иное).

Термин "фармацевтически приемлемые соли" обозначает такие соли, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства свободных оснований или свободных кислот, которые не являются нежелательными с биологической или иной точки зрения. Такие соли могут быть образованы неорганическими кислотами, такими как хлороводородная кислота, бромоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п., предпочтительно хлороводородная кислота, и органическими кислотами, такими как уксусная кислота, пропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, малеиновая кислота, малоновая кислота, салициловая кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, п-толуолсульфоновая кислота, N-ацетилцистеин и т.п. Кроме того, соли можно получать добавлением неорганического основания или органического основания к свободной кислоте. Соли, образованные неорганическим основанием, включают, без ограничения, соли натрия, калия, лития, аммония, кальция и магния и т.п. Соли, образованные органическими основаниями, включают, без ограничения, соли первичных, вторичных и третичных аминов, замещенных аминов, включая природные замещенные амины, циклические амины и основные ионообменные смолы, такие как изопропиламин, триметиламин, диэтиламин, триэтиламин, трипропиламин, этаноламин, лизин, аргинин, N-этилпиперидин, пиперидин, полиаминовые смолы и т.п. В зависимости от природы заместителей, соединения по настоящему изобретению могут существовать также в форме цвиттер-ионов.

Соединения по настоящему изобретению могут присутствовать в форме фармацевтически приемлемых солей. Соединения по настоящему изобретению могут также присутствовать в форме фармацевтически приемлемых эфиров (т.е., метиловых и этиловых эфиров кислот формулы I для применения в качестве пролекарств). Соединения по настоящему изобретению можно также сольватировать, т.е. гидратировать. Сольватацию можно осуществлять в ходе процесса получения или она может протекать как следствие гигроскопических свойств изначально безводного соединения формулы I (гидратация).

Соединения, которые имеют одинаковую молекулярную формулу, но различаются по природе или последовательности связей составляющих атомов или расположения атомов в пространстве носят название "изомеры". Изомеры, которые различаются по расположению атомов в пространстве, называются "стереоизомеры". Диастереомеры представляют собой стереоизомеры с противоположной конфигурацией при одном или более хиральных центров, которые не являются энантиомерами. Стереоизомеры, включающие один или более асимметрических центров, представляющие собой несовместимые друг с другом зеркальные отображения друг друга, носят название "энантиомеры". Если соединение содержит асимметрический центр, например, если атом углерода связан с четырьмя различными группами, возможна пара энантиомеров. Энантиомер можно охарактеризовать по абсолютной конфигурации его асимметрического центра или центров, и она описывается правилами для определения R- и S-конфигурации Канна, Ингольда и Прелонга, или же исходя из того, каким образом данная молекула вращает плоскость поляризованного света, и обозначается как правовращающий или левовращающий (т.е. как (+) или (-)-изомеры, соответственно). Хиральное соединение может существовать как в виде индивидуального энантиомера, так и в виде их смеси. Смесь, содержащая равные части энантиомеров, называется "рацемическая смесь".

Термин "терапевтически эффективное количество" обозначает количество соединения, которое эффективно для предотвращения, облегчения или улучшения симптомов заболевания или удлинения срока жизни субъекта, которому проводят лечение. Определение терапевтически эффективного количества находится в компетенции специалиста в данной области техники. Терапевтически эффективное количество или дозировка соединения по настоящему изобретению может изменяться в широких пределах и ее можно определять способом, известным в данной области техники. Такую дозировку следует подбирать в соответствии с индивидуальными требованиями в каждом конкретном случае, включая конкретное вводимое(ые) соединение(я), способ введения, состояние, подлежащее лечению, а также пациента, которому проводят лечение. Суточную дозу можно вводить единственной дозой или разделенными дозами, или, в случае парентерального введения, ее можно вводить путем непрерывной инфузии.

Термин "фармацевтически приемлемый носитель" включает всевозможные материалы, совместимые с фармацевтическим введением, включая растворители, дисперсионные среды, оболочки, антибактериальные и противогрибковые агенты, изотонические и агенты, замедляющие абсорбцию и другие материалы и соединения, совместимые с фармацевтическим введением. За исключением тех случаев, когда любая стандартная среда или агент не совместимы с действующим веществом, их применение в композициях по настоящему изобретению рассматривается. В композиции можно также включать дополнительные действующие вещества.

В частности, настоящее изобретение относится к соединениям формулы I:

или их фармацевтически приемлемым солям или эфирам; где n равно от 1 до 24 и где:

R1 выбран из группы, состоящей из:

(1) соединения формулы:

где m равно от 0 до 3 и G выбран из группы, состоящей из:

(2) соединения формулы:

;

где m равно от 0 до 3, R4 и R5 представляют собой независимо водород или галоген, W представляет собой О или CH₂, a G выбран из группы, состоящей из:

и

(3)соединения формулы:

R2 выбран из группы, состоящей из:

(1) соединения формулы:

;

(2) соединения формулы:

;

(3) соединения формулы:

; и

(4) соединения формулы:

где R3 представляет собой конъюгированный фрагмент, а X представляет собой либо серу, либо соединение формулы:

.

Используемый в приведенных выше структурах символ указывает на то положение, по которому данная структура или радикал присоединены к основной молекуле посредством ковалентной связи. Кроме того, фраза "к ПЭГ" или "к S" или подобное выражение, используемое в сочетании с указанным выше символом, указывает на то, в каком месте и каким образом данная структура или радикал присоединены к основной молекуле, если имеется несколько возможных положений для присоединения. Например, если R2 представляет собой соединение формулы:

,

где X представляет собой соединение формулы:

.

то структура, соответствующая формуле I, будет следующей:

где R1, R3 и n определены в формуле I.

Настоящее изобретение относится также к способам изготовления и применения соединений формулы I, а также фармацевтических композиций, содержащих такие соединения. Соединения формулы I полезны для улучшения доставки низкомолекулярных веществ, белков, нуклеиновых кислот, полимеров, флюоресцирующих маркеров и других веществ к клеткам-мишеням, экспрессирующим рецепторы VLA-4. В некоторых воплощениях настоящее изобретение относится к композициям и лекарственным формам, содержащим соединения формулы I, которые полезны для доставки миРНК в цитоплазму клеток-мишеней, экспрессирующих VLA-4 рецепторы, для ингибирования экспрессии конкретных целевых белков за счет РНК-интерференции.

В более частных воплощениях, настоящее изобретение относится к применению соединений формулы I в композициях для облегчения доставки нуклеиновых кислот, таких как миРНК, к опухолевым клеткам и клеткам других типов, экспрессирующим рецепторы VLA-4. Кроме того, частью настоящего изобретения является применение соединений формулы I в изготовлении композиций для доставки для лечения воспалительных и пролиферативных расстройств, таких как рак.

R1 представляет собой низкомолекулярный антагонист интегрина, который нацеливает соединения формулы I к комплексам рецепторов интегрина VLA-4, облегчая таким образом их доставку к клеткам, которые экспрессируют такие рецепторы.

В некоторых воплощениях нацеливающие фрагменты R1 низкомолекулярного антагониста интегрина присоединены по такому положению, чтобы аффинность низкомолекулярного вещества к рецептору интегрина существенно не снижалась, по сравнению со свободным низкомолекулярным антагонистом интегрина. Фрагменты R1 формулы I нацелены к димеру VLA-4 (Интегрин α4β1 или Very Late Antigen-4).

В некоторых воплощениях R1 представляет собой нацеливающий к VLA-4 фрагмент формулы:

или его фармацевтически приемлемую соль или эфир, где m равно от 0 до 3.

В других частных воплощениях R1 представляет собой нацеливающий к VLA-4 фрагмент формулы:

или его фармацевтически приемлемую соль или эфир, где m равно от 0 до 3.

В других частных воплощениях R1 представляет собой нацеливающий к VLA-4 фрагмент формулы:

или его фармацевтически приемлемую соль или эфир, где m равно от 0 до 3.

В других частных воплощениях R1 представляет собой нацеливающий к VLA-4 фрагмент формулы:

или его фармацевтически приемлемую соль или эфир, где m равно от 0 до 3.

В других воплощениях R1 представляет собой нацеливающий к VLA-4 фрагмент формулы:

или его фармацевтически приемлемую соль или эфир, где m равно от 0 до 3, R4 и R5 представляют собой водород или галоген, a W представляет собой О или CH₂.

В других частных воплощениях R1 представляет собой нацеливающий к VLA-4 фрагмент формулы:

или его фармацевтически приемлемую соль или эфир, где m равно от 0 до 3, R4 и R5 представляют собой водород или галоген, a W представляет собой О или CH₂.

В других частных воплощениях R1 представляет собой нацеливающий к VLA-4 фрагмент формулы:

или его фармацевтически приемлемую соль или эфир, где m равно от 0 до 3, R4 и R5 представляют собой водород или галоген, а W представляет собой О или CH₂.

В других частных воплощениях R1 представляет собой нацеливающий к VLA-4 фрагмент формулы:

или его фармацевтически приемлемую соль или эфир, где m равно от 0 до 3, R4 и R5 представляют собой водород или галоген и W представляет собой О или CH₂.

В других частных воплощениях R1 представляет собой нацеливающий к VLA-4 фрагмент формулы:

или его фармацевтически приемлемую соль или эфир.

R2 может представлять реакционноспособные радикалы, которые могут давать ковалентные связи с терапевтическими или иными полезными соединениями или конъюгированными фрагментами, содержащими сильные нуклеофилы, например с тиол-содержащими фрагментами. Примеры таких реакционноспособных радикалов включают радикалы, выбранные из группы, состоящей из:

Как вариант, R2 может представлять собой радикал, который уже присоединен к конъюгированному фрагменту, такому как терапевтическое или другое полезное соединение, белок или олигонуклеотид (R3). В частности, R2 может представлять радикал формулы:

где R3 представляет собой конъюгированный фрагмент, а X представляет собой либо серу, либо соединение формулы:

.

В некоторых воплощениях R3 представляет собой олигонуклеотид. В частных воплощениях R3 представляет собой 5'-конец смысловой цепи молекулы РНК, который может существовать как одинарная цепь или в дуплексе, например молекула миРНК. Такие молекулы миРНК, известные также как агенты РНКи, ингибируют экспрессию целевого гена в клетке. В частных воплощениях R3 представляет собой молекулу миРНК, которая состоит по существу из олигорибонуклеотидной цепи длиной от 15 до 30 нуклеотидов, в которой 5'-конец смысловой олигорибонуклеотидной цепи присоединен к R2, как показано в выше приведенных структурах и комплементарен по меньшей мере одной части иРНК, соответствующей целевому гену. В других воплощениях R3 представляет собой олигонуклеотид ДНК, присоединенный по своему 5'-концу. Такая дериватизированная ДНК может существовать в виде одинарной цепи или одной цепи, гибридизованной с комплементарной цепью другого олигонуклеотида. Олигонуклеотидные цепи могут быть как немодифицированными, так и модифицированными в целях метаболической стабильности. Подобные модификации включают, без ограничения, замещения в конкретных положениях по фосфатной группе (например, фосфоротиоат) и 2'-гидроксигруппе (например, 2'-O-метил и 2'-фтор).

В некоторых воплощениях R2 формулы I представляет собой -X-S-CH₂-R3, где R3 включает смысловую цепь РНК, как показано ниже в формуле 5 (на основе формулы I):

где R1, n и X таковы, как определено в формуле I.

В других частных воплощениях смысловая цепь может быть связана с антисмысловой цепью.

В других частных воплощениях R2 представляет собой -X-S-CH₂-R3, где R3 представляет собой низкомолекулярное соединение или белок, образуя таким образом ковалентно связанную, специфически нацеленную молекулу формулы I.

В более частных воплощениях R2 представляет собой -X-S-CH₂-R3, где R3 представляет собой терапевтические низкомолекулярное соединение или белок.

В других частных воплощениях R2 представляет собой -X-S-CH₂-R3, где R3 представляет собой флюоресцирующий радикал, полезный в целях визуализации указанных связей интегринового рецептора с применением технологий клеточной микроскопии.

В других частных воплощениях R2 представляет собой -X-S-CH₂-R3, где R3 представляет собой полимер, содержащий первичные реакционноспособные сульфидные группы. Более конкретно, R3 может представлять собой катионный полимер, полезный для комплексирования и доставки миРНК к поверхностям клеток и цитоплазматическим доменам клеток.

В более частных воплощениях настоящее изобретение относится к соединениям формулы I, где R3 представляет собой один из структурных изомеров флуоресцеин изотиоцианата (FITC), показанных ниже:

.

В других более конкретных воплощениях настоящее изобретение 20 относится к соединениям формулы I, где R3 представляет собой один из структурных изомеров FITC-14, показанный ниже:

хиральный

В других воплощениях настоящее изобретение относится к соединению формулы I, где n равно от 9 до 13, предпочтительно 12.

В частных воплощениях настоящее изобретение относится к соединению формулы I, выбранному из группы, состоящей из одного из следующих соединений (или его фармацевтически приемлемой соли или эфира):

VLA-4 Лиганд - Реагент 1

(S)-3-[4-(2,6-дихлорбензоиламино)фенил]-2-[[1-[2-[3-[2-[2-[2-[2-[3-(2,5-диоксо-2,5-дигидропиррол-1-ил)пропиониламино]этокси]этокси]этокси]этокси]пропиониламино]этил]циклопентанкарбонил]амино]пропионовая кислота;

VLA-4 Лиганд - Реагент 2

(S)-3-[4-(2,6-дихлорбензоиламино)фенил]-2-[[[1-[2-[3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-(2,5-диоксо-2,5-дигидропиррол-1-ил)пропиониламино]этокси]этокси]этокси]этокси]-этокси]этокси]этокси]этокси]пропиониламино]этил]циклопентил]карбонил]амино]-пропионовая кислота;

VLA-4 Лиганд - Реагент 3

(S)-3-[4-(2,6-дихлорбензоиламино)фенил]-2-[[1-[2-[3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-(2,5-диоксо-2,5-дигидропиррол-1-ил)пропиониламино]-этокси]этокси]этокси]-этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]пропиониламино]-этил]циклопентанкарбонил]амино]пропионовая кислота;

VLA-4 Лиганд - Реагент 4

(S)-2-[[1-[2-[3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-ацетилсульфанил-этокси)этокси]этокси]-этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]пропиониламино]-этил]-циклопентанкарбонил]-амино]-3-[4-(2,6-дихлорбензоиламино)фенил]пропионовая кислота;

VLA-4 Лиганд - Реагент 5

(S)-3-[4-(2,6-дихлорбензоиламино)фенил]-2-[2,6-дихлор-4-[3-[3-[2-[2-[2-[2-[3-(2,5-диоксо-2,5-дигидропиррол-1-ил)пропиониламино]этокси]этокси]этокси]этокси]-пропиониламино]пропокси]бензоиламино]пропионовая кислота;

VLA-4 Лиганд - Реагент 6

(S)-3-[4-(2,6-дихлорбензоиламино)фенил]-2-[2,6-дихлор-4-[3-[3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-(2,5-диоксо-2,5-дигидропиррол-1-ил)пропиониламино]этокси]этокси]-этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]пропиониламино]пропокси]-бензоиламино]пропионовая кислота;

VLA-4 Лиганд - Реагент 7

(S)-3-[4-(2,6-дихлорбензоиламино)фенил]-2-[2,6-дихлор-4-[3-[3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-(2,5-диоксо-2,5-дигидропиррол-1-ил)пропиониламино]-этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]-этокси]пропиониламино]пропокси]бензоиламино]пропионовая кислота;

VLA-4 Лиганд - Реагент 8

(S)-2-[[1-[4-[3-[2-[2-[2-[2-[3-(2,5-диоксо-2,5-дигидропиррол-1-ил)пропиониламино]этокси]этокси]этокси]этокси]пропиониламино]бутил]циклопентанкарбонил]-амино]-3-[4-(1,3,6-триметил-2,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидропиримидин-5-ил)фенил]-пропионовая кислота;

VLA-4 Лиганд - Реагент 9

(S)-2-[2,6-дихлор-4-[3-[3-[2-[2-[2-[2-[3-(2,5-диоксо-2,5-дигидропиррол-1-ил)-пропиониламино]этокси]этокси]этокси]этокси]пропиониламино]пропокси]-бензоиламино]-3-[4-(1,3,6-триметил-2,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидропиримидин-5-ил)фенил]пропионовая кислота;

VLA-4 Лиганд - Реагент 10

(S)-2-[2,6-дихлор-4-[3-[3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-(2,5-диоксо-2,5-дигидропиррол-1-ил)пропиониламино]этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]-этокси]пропиониламино]пропокси]бензоиламино]-3-[4-(1,3,6-триметил-2,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидропиримидин-5-ил)фенил]пропионовая кислота;

VLA-4 Лиганд - Реагент 11

(S)-2-[4-[(3-[2-[2-[2-[2-[3-(2,5-диоксо-2,5-дигидропиррол-1-ил)пропиониламино]этокси]этокси]этокси]этокси]пропиониламино)метил]-2,6-дифторбензоиламино]-3-[4-(1,3,6-триметил-2,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидропиримидин-5-ил)фенил]-пропионовая кислота, трифторацетатная соль;

VLA-4 Лиганд - Реагент 12

(S)-2-[4-[(3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-(2,5-диоксо-2,5-дигидропиррол-1-ил)-пропиониламино]этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]-пропиониламино)метил]-2,6-дифторбензоиламино]-3-[4-(1,3,6-триметил-2,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидропиримидин-5-ил)фенил]пропионовая кислота, трифторацетатная соль;

VLA-4 Лиганд - Реагент 13

(S)-2-[4-[[3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-ацетилсульфанил-этокси]этокси]этокси]-этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]пропиониламино]метил]-2,6-дифторбензоиламино]-3-[4-(1,3,6-триметил-2,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидропиримидин-5-ил)фенил]-пропионовая кислота; и

VLA-4 Лиганд - Реагент 14

(S)-2-[4-[[3-[3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-ацетилсульфанилэтанокси)этокси]этокси]-этокси]этокси]этокси]этокси]этокси]пропиониламино]пропионил]-[4-[(S)-1-карбокси-2-[4-[1,3,6-триметил-2,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидропиримидин-5-ил]фенил]этилкарбамоил]-3,5-дифторбензиламино]метил]-2,6-дифторбензиламино]-3-[4-[1,3,6-триметил-2,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидропиримидин-5-ил]фенил]пропионовая кислота.

Кроме того, настоящее изобретение относится к новым композициям и композициям, содержащим соединения формулы I, для создания наночастиц путем комбинирования с миРНК, с достижением улучшенной доставки нуклеиновых кислот, таких как миРНК, в цитоплазму клеток-мишеней, экспрессирующих комплексы α4β1. В некоторых воплощениях настоящее изобретение относится к композиции миРНК, включающей: (1) соединение формулы I, в котором R2 включает 5'-миРНК олигонуклеотид; и (2) поликатионный агент для трансфекции.

Настоящее изобретение относится также к способам изготовления и применения таких соединений и композиций. Соединения формулы I полезны как компоненты композиций или лекарственные формы, которые улучшают доставку лекарственных веществ, нуклеиновых кислот или других терапевтических соединений к тканям или клеткам, экспрессирующим комплексы α4β1. В некоторых воплощениях настоящее изобретение относится к композициям, содержащим соединения формулы I, которые полезны для доставки миРНК в цитоплазму клеток-мишеней, экспрессирующих комплексы α4β1, с целью ингибирования экспрессии конкретных белков за счет РНК-интерференции. В более частных воплощениях настоящее изобретение относится к соединениям формулы I и композициям, содержащим такие соединения, которые могут эффективно доставлять миРНК к опухолевым клеткам и клеткам других типов, экспрессирующим димеры α4β1, для лечения раковых или воспалительных заболеваний. Такие соединения и композиции более эффективны и демонстрируют улучшенную выключающую способность, по сравнению с такими же композициями, не включающими соединения формулы I.

В одном воплощении предложено соединение формулы I:

или его фармацевтически приемлемая соль или эфир; где n равно от 1 до 24 и где:

R1 выбран из группы, состоящей из:

(1) соединения формулы:

где m равно от 0 до 3, a G выбран из группы, состоящей из:

(2) соединения формулы:

;

где m равно от 0 до 3, R4 и R5 представляют собой независимо водород или галоген, W представляет собой О или CH₂, a G выбран из группы, состоящей из:

и

(3) соединения формулы:

;

R2 выбран из группы, состоящей из:

(1) соединения формулы:

;

(2) соединения формулы:

;

(3) соединения формулы:

; и

(4) соединения формулы:

где R3 представляет собой конъюгированный фрагмент, а X представляет собой либо серу, либо соединение формулы:

.

В одном воплощении предложено соединение формулы I:

или его фармацевтически приемлемая соль или эфир; где n равно от 1 до 24 и где: R1 представляет собой

где m равно от 0 до 3.

R2 выбран из группы, состоящей из:

(1) соединения формулы:

;

(2) соединения формулы:

;

(3) соединения формулы:

; и

(4) соединения формулы:

где R3 представляет собой конъюгированный фрагмент, а X представляет собой либо серу, либо соединение формулы:

.

В одном воплощении предложено соединение формулы I:

или его фармацевтически приемлемая соль или эфир; где n равно от 1 до 24 и где:

R1 представляет собой соединение формулы:

где m равно от 0 до 3;

R2 выбран из группы, состоящей из:

(1) соединения формулы:

;

(2) соединения формулы:

;

(3) соединения формулы:

; и

(4) соединения формулы:

где R3 представляет собой конъюгированный фрагмент, а X представляет собой либо серу, либо соединение формулы:

.

В одном воплощении предложено соединение формулы I:

или его фармацевтически приемлемая соль или эфир; где n равно от 1 до 24 и где:

R1 представляет собой соединение формулы:

где m равно от 0 до 3.

R2 выбран из группы, состоящей из:

(1) соединения формулы:

;

(2) соединения формулы:

;

(3) соединения формулы:

; и

(4) соединения формулы:

где R3 представляет собой конъюгированный фрагмент, а X представляет собой либо серу, либо соединение формулы:

.

В одном воплощении предложено соединение формулы I:

или его фармацевтически приемлемая соль или эфир; где n равно от 1 до 24 и где:

R1 представляет собой соединение формулы:

где m равно от 0 до 3.

R2 выбран из группы, состоящей из:

(1) соединения формулы:

(2) соединения формулы:

(3) соединения формулы:

и

(4) соединения формулы:

где R3 представляет собой конъюгированный фрагмент, а X представляет собой либо серу, либо соединение формулы:

В одном воплощении предложено соединение формулы I:

или его фармацевтически приемлемая соль или эфир; где n равно от 1 до 24 и где:

R1 представляет собой соединение формулы:

где m равно от 0 до 3, R4 и R5 представляют собой водород или галоген, а W представляет собой О или CH₂.

R2 выбран из группы, состоящей из:

(1) со