Композиция для восстановления нормальной ткани из фиброзной ткани

Композиция для восстановления нормальной ткани из фиброзной ткани

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Область техники

Настоящее изобретение касается композиции и способа для восстановления нормальной ткани из фиброзной ткани.

Уровень техники

Фиброз ткани вызывается чрезмерным продуцированием и накоплением в ткани внеклеточного матрикса, который представляет собой, главным образом, коллаген. Когда ткань повреждается стимулом, таким как оксидантный стресс, гипоксия, воспаление или апоптоз, поврежденная ткань восстанавливается посредством замены внеклеточным матриксом, но в случае повреждения, являющимся серьезным или в случае такой стимуляции, которая становится хронической, накопление внеклеточного матрикса становится чрезмерным, и ткань не может выполнять свою функцию в достаточной степени. Фиброз наблюдается в различных типах органов, таких как печень, поджелудочная железа, легкое, почка, костный мозг и сердце, и считается, что продуцирующие коллаген клетки, такие как миофибробласты связаны с болезненным состоянием. Традиционно считается, что фиброз является необратимым явлением, и после того как ткань стала фиброзной, она не возвращается к ее исходному состоянию, но недавно появились сообщения, предполагающие, что фиброз является обратимым процессом, и что, когда вышеупомянутый фиброзный стимул исчезает, внеклеточный матрикс, аккумулированный в ткани, уменьшается (см. непатентные документы 1-3).

Однако не было никаких подробных отчетов относительно того, что специфически происходит в ткани после того, как патологические накопления внеклеточного матрикса уменьшаются, и было абсолютно неизвестно до сих пор, происходит ли восстановление нормальной ткани или является ли восстановление нормальной ткани возможной.

Кроме того, фиброз ткани не только включает фиброзы, для которых причина болезни ясна и может быть уничтожена, такие как фиброз, полученный вследствие вирусной инфекции, потребления спирта, лекарственных препаратов и т.д., но также и включает фиброзы, для которых непосредственная причина болезни неясна, такие как, например, криптогенный цирроз печени, идиопатический легочный фиброз, или идиопатический миелофиброз и те, для которых известна непосредственная причина болезни, но происхождение причины болезни является неясным или является трудным для элиминирования, такие как, например, первичный желчный цирроз печени, цирроз печени вследствие неалкогольного стеатогепатита (НАСГ) и первичный склерозирующий холангит. Ткань с присутствием такого фиброза, для которого трудно уничтожить причину болезни, находится в состоянии, в котором она всегда подвергается фиброзному стимулу, но было абсолютно неизвестно до сих пор, что патологическое накопление внеклеточного матрикса в такой фиброзной ткани может быть восстановлено, и естественно не было известно, что ткань может быть регенерирована.

Документы известного уровня техники

Непатентные документы

Непатентный документ 1 Issa et al. Gastroenterology. 2004; 126(7):1795-808

Непатентный документ 2 Iredale, J Clin Invest. 2007; 117(3):539-48

Непатентный документ 3 Sato et al. Nat Biotechnol. 2008; 26(4):431-42

Краткое изложение сущности изобретения

Проблемы, решаемые изобретением

Задачей настоящего изобретения является композиция и способ для терапевтической восстановления ткани, в которой присутствует фиброз, в нормальную ткань.

Средства для решения проблем

В то время как осуществлялись интенсивные исследования для решения вышеупомянутых проблем, изобретатели настоящего патента нашли, что даже в фиброзной ткани, которая непрерывно получает фиброзный стимул, коллаген, накопленный в ткани, может быть восстановлен и, кроме того, нормальная ткань может быть регенерирована из фиброзной ткани посредством удаления коллагена, накопленного в ткани, что гарантирует, что существует пространство, в котором стволовые клетки могут расти и дифференцироваться, и таким образом было сделано настоящее изобретение. Как описано выше, хотя известно, что когда фиброзный стимул исчезает, внеклеточный матрикс, накопленный в ткани, может уменьшиться, до сих пор абсолютно неизвестно, что в фиброзной ткани, которая непрерывно получает фиброзный стимул, коллаген, накопленный в ткани, может редуцироваться, и что нормальная ткань может быть регенерирована из фиброзной ткани, посредством активного удаления коллагена, накопленного в ткани, и это является неожиданными результатами.

Таким образом, настоящее изобретение касается следующего.

(1) Фармацевтическая композиция для восстановления нормальной ткани из фиброзной ткани, содержащая вещество, уменьшающее коллаген.

(2) Фармацевтическая композиция по п. (1), приведенному выше, в которой вещество, уменьшающее коллаген, выбирается из группы, состоящей из супрессора продуцирования коллагена продуцирующими коллаген клетками, стимулятора разложения коллагена и супрессора ингибитора разложения коллагена.

(3) Фармацевтическая композиция по п. (1) или (2), приведенных выше, в которой она дополнительно содержит нацеливающее вещество для продуцирующих коллаген клеток в фиброзной ткани.

(4) Фармацевтическая композиция по п. (3), приведенному выше, в которой нацеливающий агент является ретиноидом.

(5) Фармацевтическая композиция по любому из пп. (1)-(4), приведенных выше, в которой фиброзная ткань непрерывно получает фиброзный стимул.

(6) Фармацевтическая композиция по любому из пп. (1)-(5), приведенных выше, предназначенная для восстановления нормальной ткани из фиброзной ткани в пространстве для роста и дифференцировки стволовых клеток, причем пространство формируется посредством уменьшения коллагена, накопленного в фиброзной ткани.

(7) Фармацевтическая композиция по любому из пп. (2)-(6), приведенных выше, в которой супрессор продуцирования коллагена продуцирующими коллаген клетками выбирается из группы, состоящей из ингибитора TGFβ, HGF или вещества, способствующего продуцированию вышеперечисленного, лиганда PPARγ, ингибитора ангиотензина, ингибитора PDGF, релаксина или вещества, способствующего продуцированию вышеперечисленного, вещества, которое ингибирует продуцирование и секрецию компонента внеклеточного матрикса, супрессора клеточной активности, супрессора роста клеток, и вещества, индуцирующего апоптоз.

(8) Фармацевтическая композиция по любому из пп. (2)-(6), приведенных выше, в которой стимулятором разложения коллагена является коллагеназа или стимулятор продуцирования коллагеназы.

(9) Фармацевтическая композиция по любому из пп. (2)-(6), приведенных выше, в которой супрессором ингибитора разложения коллагена является ингибитор TIMP.

Эффекты изобретения

В соответствии с настоящим изобретением, становится очевидным, что нормальная ткань может быть регенерирована из фиброзной ткани, причем до сих пор считалось, что восстановление нормальной ткани из нее произойти не может. Это позволяет нормальной ткани быть терапевтически регенерированной из фиброзной ткани, и становится возможной новая регенеративная терапия для фиброзной болезни.

Кроме того, в соответствии с настоящим изобретением, становится возможным лечить фиброзную ткань, которая непрерывно подвергается фиброзному стимулу, и так как лечение реализуется для всех типов фиброзных болезней, включая фиброзную болезнь, для которой не существует никакой обычной эффективной терапии, и фиброзной болезни, для которой существует только лечение, включающее трансплантацию органа, может ожидаться огромный вклад в медицинское и ветеринарное лечение.

Краткое описание чертежей

Фиг. 1 является фотографической диаграммой, показывающей общий внешний вид печени, полученной от подопытных крыс и окрашенных азаном изображений их репрезентативных срезов.

Фиг. 2 является фотографической диаграммой, показывающей локализацию α-SMA в репрезентативных срезах печени, полученных от подопытных крыс.

Фиг. 3 является флуоресцентным изображением, показывающим локализацию DAPI и GFP в местах трансплантации стволовых клеток печени.

Фиг. 4 показывает светлопольные изображения и флуоресцентные изображения GFP в местах трансплантации стволовых клеток печени.

Фиг. 5A является фотографической диаграммой, сравнивающей флуоресцентные изображения DAPI и GFP и изображение, флуоресцентно окрашенное с помощью антитела GFAP в группе, обработанной VA-lip миPHKgp46 (200× увеличение).

Фиг. 5B является фотографической диаграммой, сравнивающей флуоресцентные изображения DAPI и GFP и изображение, флуоресцентно окрашенное антителом GFAP в группе, обработанной VA-lip миPHKgp46 (400× увеличение).

Фиг. 6 является фотографической диаграммой с 200× увеличением, сравнивающая флуоресцентные изображения DAPI и GFP и изображение, флуоресцентно окрашенное α-SMA антителом в группе, обработанной VA-lip миPHKgp46.

Фиг. 7 является фотографической диаграммой с 200× увеличением, сравнивающая флуоресцентные изображения DAPI и GFP и изображение, флуоресцентно окрашенное альбуминовым антителом в группе, обработанной VA-lip миPHKgp46.

Фиг. 8 представляет собой фотографическую диаграмму с 200× увеличением, сравнивающую флуоресцентные изображения DAPI и GFP и изображение, флуоресцентно окрашенное антителом СК19 в группе, обработанной VA-lip миPHKgp46.

Фиг. 9A является фотографической диаграммой, сравнивающей флуоресцентные изображения DAPI и GFP и изображение, флуоресцентно окрашенное антителом ve-CAD в группе, обработанной VA-lip миPHKgp46 (200× увеличение).

Фиг. 9B является фотографической диаграммой, сравнивающей флуоресцентные изображения DAPI и GFP и изображение, флуоресцентно окрашенное антителом ve-CAD в группе, обработанной VA-lip миPHKgp46 (400× увеличение).

Фиг. 10 является фотографической диаграммой с 200× увеличением, сравнивающая флуоресцентные изображения DAPI и GFP и изображение, флуоресцентно окрашенное альбуминовым антителом в месте группы, обработанной VA-lip миPHKgp46, куда стволовые клетки печени не трансплантировали.

Фиг. 11 является флуоресцентным изображением, показывающим внутриклеточное распределение миРНК, меченной FAM, в звездчатых клетках крысиной поджелудочной железы.

Фиг. 12 является графиком, показывающим результат FACS-анализа относительно миРНК, включенной в звездчатые клетки поджелудочной железы крысы. Соответственно показанные в последовательности сверху являются результатами необработанной группы, группы, обработанной Lip siRNAgp46-FAM, группы, обработанной VA-lip siRNAgp46-FAM, группы, обработанной VA-lip siRNAgp46-FAM + RBP антитела, и группы, обработанной Lip siRNAgp46-FAM + RBP антитела.

Фиг. 13 является изображением Вестерн-блоттинга, показывающим супрессию экспрессии gp46 в звездчатых клетках крысиной поджелудочной железы посредством миPHKgp46. А показывает различие в эффекте подавления в зависимости от концентрации VA-lip siRNAgp46 и В показывает продолжительность эффекта подавления.

Фиг. 14 является графиком, показывающим количественные величины коллагена, продуцированного через 72 часа необработанными клетками, и клетками, обработанными каждой из VA-lip миPHKgp46 и VA-lip миРНК случайным образом.

Фиг. 15 является фотографической диаграммой, показывающей специфическую доставку VA-lip миPHKgp46 к звездчатым клеткам поджелудочной железы у DBTC-обработанных крыс. А и В являются изображениями иммуноокрашенных посредством анти-/U03B1/SMA антитела и анти-FITC антитела срезов поджелудочной железы крысы, которые обрабатывали три раза через день VA-lip миPHKgp46-FITC и Lip миPHKgp46-FITC соответственно. Окрашенные изображения а-d справа является увеличенными изображениями областей, обозначенных соответствующими символами на окрашенном изображении слева. С показывает изображения, окрашенные посредством окрашивания по Azan-Mallory, посредством окрашивания анти-/U03B1/SMA антителом и посредством окрашивания анти-FITC антителом срезов печени крысы, которые обрабатывали три раза через день VA-lip миPHKgp46-FITC. D-F являются окрашенными изображениями посредством окрашивания антителом анти-CD68 и антителом анти-FITC легкого крысы, селезенки и сетчатки спустя 24 часа после внутривенного введения VA-lip миPHKgp46-FITC.

Фиг. 16 является диаграммой, показывающей экспрессию белка gp46 в поджелудочной железе спустя 0, 1, 2, 3 и 4 дня после введения VA-lip миPHKgp46 крысам, в которые ввели VA-lip миPHKgp46 (миРНК 0,75 мг/кг) на 14-ый день после обработки DBTC. А показывает результат Вестерн-блоттинга клеточного дебриса поджелудочной железы, и В показывает результат количественного концентрационного анализа с использованием β-актина для нормирования.

Фиг. 17 является диаграммой, показывающей эффект VA-lip миPHKgp46 при DBTC-вызванном фиброзе поджелудочной железы. А показывает изображения, окрашенные по Azan-Mallory, срезов поджелудочной железы крысы, обработанной DBTC, в которую вводили 10 раз каждого из VA-lip миPHKgp46, Lip миPHKgp46 и PBS. В является графиком, показывающим количественное определение с помощью компьютерного анализа изображения областей, которые показали положительное окрашивание по Azan-Mallory изображения А. Данные были вычислены от 6 областей, случайным образом выбранных от шести крыс каждой группы, и выражены как средние значения ± стандартные отклонения. С является графиком, показывающим содержание гидроксипролина в поджелудочной железе. Данные выражены как средние значения ± стандартные отклонения.

Фиг. 18 является диаграммой, показывающей эффект VA-lip миPHKgp46 при DBTC-вызванном фиброзе поджелудочной железы. А показывает изображения α-SMA окрашивания поджелудочной железы DBTC-обработанных крыс после обработки VA-lip миPHKgp46. В является графиком, показывающим количественное определение посредством компьютерного анализа изображения α-SMA-позитивных областей в А. Данные были вычислены от 6 областей, случайным образом выбранных от шести крыс каждой группы, и выражены как средние значения ± стандартные отклонения.

Фиг. 19 является диаграммой, показывающей восстановление нормальной ткани из фиброзной ткани поджелудочной железы с помощью VA-lip миPHKgp46. А показывает окрашенные гематоксилином-эозином изображения поджелудочной железы DBTC-обработанных крыс, в которые VA-lip миPHKgp46 (справа) и Lip миPHKgp46 (слева) были введены 10 раз. Нижние диаграммы являются увеличенными диаграммами каждой области а и b верхних диаграмм. В является графиком, показывающим массу поджелудочной железы DBTC-обработанных крыс.

Фиг. 20 является графиком, показывающим эффект на дифференцировку стволовых клеток в присутствии или отсутствии пространства вокруг стволовых клеток. Ордината показывает альбумин-положительную область колонии.

Фиг. 21 является графиком, показывающим эффект на дифференцировку стволовых клеток в присутствии или отсутствии пространства вокруг стволовых клеток. Ордината показывает индекс скорости роста стволовых клеток.

Способы выполнения изобретения

Настоящее изобретение касается композиций, содержащих вещество, уменьшающее коллаген, для восстановления нормальной ткани из фиброзной ткани.

В настоящем изобретении «вещество, уменьшающее коллаген» означает любое вещество, которое может уменьшить количество коллагена, накопленного в ткани. Хотя не подразумевается, что нижесказанное связано с конкретной теорией, так как считается, что одной из причин накопления коллагена в фиброзной ткани, является изменение баланса между продуцированием и разложением коллагена в сторону продуцирования, вещество, уменьшающее коллаген, может включать не только супрессор продуцирования коллагена, но также и стимулятор разложения коллагена и супрессор ингибитора стимулятора разложения коллагена. Поэтому примеры вещества, уменьшающего коллаген, включают, но не ограничиваются этим: супрессор продуцирования коллагена продуцирующими коллаген клетками, стимулятор разложения коллагена и супрессор ингибитора разложения коллагена. Хотя не существует никакого особого ограничения, коллаген в настоящем изобретении предпочтительно является коллагеном, вовлеченным в фиброз, таким как коллаген типа I, III или V, и особенно предпочтительно коллаген типа I, который присутствует в фиброзной ткани в наибольшем количестве.

В настоящем изобретении продуцирующие коллаген клетки означают любые клетки, которые продуцируют коллаген в фиброзной ткани, и примеры включают, но не ограничиваются этим: активированные звездчатые клетки и миофибробласты. Считается, что активированные звездчатые клетки и миофибробласты являются главными источниками, продуцирующие коллаген в фиброзной ткани, и они характеризуются экспрессией α-SMA (гладкомышечного α-актина). Поэтому активированные звездчатые клетки и миофибробласты в настоящем изобретении идентифицируются посредством иммуноокрашивания и т.д. с использованием анти-/U03B1/SMA антитела, которое является детектируемо меченным.

Супрессор продуцирования коллагена продуцирующими коллаген клетками включает любой препарат, который прямо или косвенно подавляет физические, химические и/или физиологические и т.п. действия тех же самых клеток, вовлеченных в накопление коллагена в фиброзной ткани, и примеры этого включают, но не ограничиваются этим: ингибитор TGFβ (трансформирующий фактора роста-бета), HGF (фактор роста гепатоцитов) или вещество, способствующее продуцированию вышеперечисленного, лиганд PPARγ (гамма рецептор, активируемый пролифератором пероксисом), ингибитор ангиотензина, ингибитор PDGF (фактора роста тромбоцитов), релаксин или вещество, способствующее продуцированию вышеперечисленного, вещество, которое ингибирует продуцирование и секрецию компонента внеклеточного матрикса, супрессор клеточной активности, супрессор роста клеток и вещество, индуцирующее апоптоз.

Примеры ингибитора TGFP включают, но не ограничиваются этим: усеченный рецептор типа II TGFp (Qi et al., Proc Natl Acad Sci USA. 1999; 96 (5):2345-9), растворимый рецептор типа IITGFP ((George et al., Proc Natl Acad Sci USA. 1999; 96 (22):12719-24), ингибитор активности TGFβ, такой как анти-TGFβ антитело, ингибитор продуцирования TGFβ, такой как молекула РНКи, рибозим или антисмысловая нуклеиновая кислота, комплементарная к TGFβ, векторы, экспрессирующие их, и клетки, трансформированные ими. В одном варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор TGFβ ингибирует активность и/или продуцирование TGFβ1.

Примеры веществ, способствующих продуцированию HGF или релаксина, включают, но не ограничиваются этим: нуклеиновая кислота, кодирующая HGF или релаксин, экспрессионная конструкция, содержащая вышеперечисленное, экспрессионные векторы, содержащие их, и клетки, трансформированные посредством их.

Примеры лиганда PPARγ включают, но не ограничиваются этим: эндогенный лиганд, такой как 15-дезокси-Δ12, 14 простагландин 32, нитролинолевая кислота, окисленные ЛПНП (липопротеины низкой плотности), длиноцепочечная жирная кислота, или эйкозаноид и экзогенный лиганд, такой как тиазолидиндион, лекарственный препарат, такой как троглитазон, пиоглитазон, росиглитазон, балаглитазон или ривоглитазон или нестероидный противовоспалительный препарат.

Примеры ингибитора ангиотензина включают, но не ограничиваются этим: антагонист рецептора ангиотензина, такой как телмисартан, лосартан, валсартан, кандесартан цилексетил, олмесартан медоксомил или ирбесартан. Ангиотензин включает ангиотензины I, II, III и IV. Кроме того, примеры рецептора ангиотензина включают, но не ограничиваются этим рецептор типа 1 ангиотензина (AT1).

Примеры ингибитора PDGF включают, но не ограничиваются этим: ингибитор активности PDGF, такой как анти-PDGF антитело, ингибитор продуцирования PDGF, такой как молекула РНКи, рибозим или антисмысловая нуклеиновая кислота, комплементарная PDGF, векторы, экспрессирующие их, и клетки, трансформированные посредством их.

Примеры вещества, которое ингибирует продуцирование и секрецию компонента внеклеточного матрикса, включают, но не ограничиваются этим: вещество, такое как молекула РНКи, рибозим или антисмысловая нуклеиновая кислота, которые подавляет экспрессию компонента внеклеточного матрикса, такого как коллаген, протеогликан, тенасцин, фибронектин, тромбоспондин, остеопонтин, остеонектин или эластин, вещество, имеющее доминирующий отрицательный эффект, такой как доминирующий отрицательный мутант, векторы, экспрессирующие их, и клетки, трансформированные посредством их. Примеры лекарственных препаратов, которые ингибируют продуцирование и секрецию коллагена, включают, но не ограничиваются этим: ингибиторы HSP (белок теплового шока) 47, который является специфическим для коллагена молекулярным шапероном, важным для внутриклеточного транспорта и молекулярного созревания, характерных для синтетических процессов для различных типов коллагена, например ингибиторы экспрессии HSP47, такие как молекула РНКи, рибозим или антисмысловая нуклеиновая кислота, комплементарная HSP47, вещество, имеющее доминирующий отрицательный эффект, такой как доминирующий отрицательный мутант HSP47, векторы, экспрессирующие их, и клетки, трансформированные посредством их.

Примеры супрессора роста клеток включают, но не ограничиваются этим: алкилирующий агент (например, ифосамид, нимустин, циклофосфамид, дакарбазин, мелфалан, ранимустин и т.д.), противоопухолевый антибиотик (например, идарубицин, эпирубицин, даунорубицин, доксорубицин, пирарубицин, блеомицин, пепломицин, митоксантрон, митомицин С и т.д.), антагонист метаболизма (например, гемцитабин, эноцитабин, цитабин, тегафур-урацил, комбинированный лекарственный препарат тегафур-гимерацил-отерацил калия, доксифлуридин, гидроксикарбамид, фтороурацил, метотрексат, меркаптопурин и т.д.), алкалоид, такой как этопозид, иринотекан, винорелбин, доцетаксел, паклитаксел, винкристин, виндезин или винбластин, платиновый комплекс, такой как карбоплатин, цисплатин, или недаплатин и статин, такой как ловастин или симвастатин.

Примеры супрессора клеточной активности включают, но не ограничиваются этим: ингибитор натриевого канала.

Примеры вызывающего апоптоз вещества включают, но не ограничиваются этим: соединение 861, глиотоксин, и аторвастатин.

Примеры стимулятора разложения коллагена включают, но не ограничиваются этим: различные типы коллагеназы и вещества, способствующего ее продуцированию. Примеры коллагеназы включают, но не ограничиваются этим: семейство ММР, такая как ММР (матричная металлопротеиназа) 1, 2, 3, 9, 13 и 14. Примеры стимулятора продуцирования коллагеназы включают, но не ограничиваются этим: нуклеиновая кислота, кодирующая коллагеназу, экспрессионная конструкция, содержащая ее, экспрессионные векторы, содержащие их, и клетки, трансформированные посредством их.

Примеры ингибитора стимулятора разложения коллагена включают, но не ограничиваются этим: TIMP (тканевый ингибитор металлопротеиназы, TIMP1 и TIMP2 и т.д.). Исходя из вышеизложенного, примеры супрессора вышеупомянутого ингибитора включают, но не ограничиваются этим: ингибитор активности TIMP, такой как антитело против TIMP, ингибитор продуцирования TIMP, такой как молекула РНКи, рибозим или антисмысловая нуклеиновая кислота, комплементарная TIMP, векторы, экспрессирующие их, и клетки, трансформированные посредством их.

Молекула РНКи в настоящем изобретении включает РНК, такую как миРНК (малая интерферирующая РНК), miRNA (микро РНК), кшРНК (короткая шпилечная РНК), ddRNA (ДНК, направляемая РНК), piRNA (РНК, взаимодействующие по piwi-типу), rasiRNA (ассоциированная с повторами миРНК) и их модификации. Кроме того, нуклеиновая кислота в настоящем изобретении включает РНК, ДНК, ПНК и композиции вышеперечисленного.

В настоящем изобретении, «фиброзная ткань» означает ткань, в которой внеклеточный матрикс, главным образом коллаген, накопился в количестве, большем, чем в норме. В дополнение к коллагену примеры внеклеточного матрикса включают, но не ограничиваются этим: протеогликан, тенасцин, фибронектин, тромбоспондин, остеопонтин, остеонектин и эластин. Количество коллагена, накопленного в ткани, может быть определено количественно, например, на основе количества гидроксипролина в ткани как индикатора или посредством окрашивания коллагена ткани (например, окраска трихром по Массону, окраска азаном, окраска sirius red, окрашивание эластических волокон по ВанГизону и т.д.) и посредством осуществления анализа изображения. Количество внеклеточного матрикса в фиброзной ткани в настоящем изобретении может составлять по меньшей мере 5%, по меньшей мере 10%, по меньшей мере 25%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 100%, по меньшей мере 200%, по меньшей мере 300%, по меньшей мере 400% или по меньшей мере 500% по сравнению с количеством в нормальной ткани. Так как считается, что продуцирование коллагена активированными звездчатыми клетками и/или миофибробластами способствует фиброзу ткани, фиброзная ткань в настоящем изобретении, как правило, содержит активированные звездчатые клетки и/или миофибробласты. Фиброзная ткань может быть любой тканью в организме, пока у нее есть вышеупомянутые особенности, и примеры этого включают, но не ограничиваются этим: печень, поджелудочная железа, легкое, почка, костный мозг, голосовые связки, гортань, ротовая полость, сердце, селезенка, средостение, ретроперитонеальное пространство, матка, кожа, грудная железа и кишечный тракт.

Исходя из вышеизложенного, фиброзная ткань может быть зоной поражения в фиброзах различных органов. Примеры фиброзов органов включают, но не ограничиваются этим: фиброз печени, цирроз печени, образование рубцов на голосовых связках, фиброз слизистой оболочки голосовых связок, ларингеальный фиброз, легочный фиброз, фиброз поджелудочной железы, миелофиброз, инфаркт миокарда, фиброз миокарда, следующий за инфарктом миокарда, миокардиальный фиброз, эндомиокардиальный фиброз, фиброз селезенки, средостеночный фиброз, подслизистый фиброз полости рта, фиброз кишечника (например, фиброз, ассоциированный с воспалительным заболеванием кишечника и т.д.), ретроперитонеальный фиброз, фиброз матки, склеродерма и фиброзное заболевание молочной железы.

Фиброз печени и цирроз печени в настоящем изобретении включают не только вызванные вирусной инфекцией вирусами гепатита В или С, употребление спирта, жировой метаморфоз печени, паразитарную инфекцию, врожденное метаболическое нарушение, гепатотоксическое соединение и т.д., но также и такие, для которых не определена причина. Исходя из вышеизложенного, примеры цирроза печени в настоящем изобретении включают, но не ограничиваются этим: цирроз печени Чаркота, цирроз печени Тодда, первичный желчный цирроз печени, однодолевой цирроз печени, вторичный желчный цирроз печени, обструктивный цирроз печени, холестатический цирроз печени, желчный цирроз печени, атрофический цирроз печени, алиментарный цирроз печени, постнекротический цирроз печени, постгепатитный цирроз печени, узловой цирроз печени, смешанный цирроз печени, микроузловой цирроз печени, компенсированный цирроз печени, макроузловой цирроз печени, септальный цирроз печени, криптогенный цирроз печени, декомпенсированный цирроз печени, перипортальный цирроз печени, портальный цирроз печени и алкогольный цирроз печени.

Легочный фиброз в настоящем изобретении включает не только легочный фиброз в строгом смысле, но также и легочный фиброз в широком смысле, включая сосуществование с интерстициальной пневмонией. Легочный фиброз в настоящем изобретении может быть вызван любой интерстициальной пневмонией такой как, например, инфекционная интерстициальная пневмония, ассоциированная с вирусной пневмонией, грибковой пневмонией, микоплазменной пневмонией и т.д. интерстициальная пневмония, ассоциированная с коллагеновой болезнью, такой как ревматоидный артрит, системная склеродерма, дерматомиозит, полимиозит, смешанный коллагеноз (MCTD, смешанная болезнь соединительной ткани), интерстициальная пневмония, ассоциированная с радиоактивным облучением, интерстициальная пневмония, вызванная препаратом, таким как противоопухолевый препарат, такой как блеомицин, китайское растительное лекарственное средство, такое как Sho-saiko-to, интерферон, антибиотик или Паракват или идиопатическая интерстициальная пневмония, такая как идиопатический легочный фиброз, неспецифическая интерстициальная пневмония, острая интерстициальная пневмония, криптогенная организующаяся пневмония, респираторная, ассоциированная с бронхиолитом интерстициальная легочная болезнь, шелушащаяся интерстициальная пневмония или лимфоцитарная интерстициальная пневмония и легочный фиброз в настоящем изобретении, поэтому, включает такие формы, в которых вышеупомянутая интерстициальная пневмония стала хронической.

Миелофиброз в настоящем изобретении включает не только первичный миелофиброз, но также и вторичный миелофиброз. Примеры вторичного миелофиброза включают, но не ограничиваются этим: миелофиброзы, которые являются вторичными к болезни, такой как острая миелоидная лейкемия, острая лимфообластная лейкемия, хроническая миелоидная лейкемия, истинная полицитемия, первичная тромбоцитемия, миелодиспластический синдром, множественная миелома, злокачественная лимфома, карцинома, системная красная волчанка или прогрессирующий системный склероз или радиоактивное облучение.

Фиброз почек в настоящем изобретении может быть вызван любым интерстициальным нефритом, таким как, например, инфекционный интерстициальный нефрит, ассоциированный со стрептококковым нефритом, стафилококковым нефритом, пневмококковым нефритом, вирусный нефритом, ассоциированный с ветряной оспой, гепатитом В, гепатитом С, ВИЧ и т.д., нефритом вследствие паразитарной инфекции, такой как малярия, грибковый нефритом, микоплазменным нефритом и т.д., интерстициальный нефрит, ассоциированный с коллагеновой болезнью, такой как системная красная волчанка (волчаночный нефрит), системная склеродерма (коллагеновая болезнь почек), или синдром Сьегрена, нефритом, ассоциированным с кровеносным сосудом, иммунная болезнь, такая как нефрит пурпура, полиартериит, быстро прогрессирующий гломерулонефрит и т.д., интерстициальный нефрит, ассоциированный с радиоактивным облучением, интерстициальный нефрит, вызванный лекарственным препаратом, такими как препараты золота, НПВП, пеницилламином, противоопухолевым препаратом, таким как блеомицин, антибиотик или Паракват и т.д., аллергическим нефритом вследствие укуса насекомым, вызванном пыльцой или растением семейства Anacardiaceae, амилоидным нефрозом, диабетическая нефропатия, хронический гломерулонефрит, нефритом, ассоциированный со злокачественным нефросклерозом или поликистозной болезнью почек, тубулоинтерстициальным нефритом, нефритом, ассоциированным с гестационным токсикозом или раком, мембранопролиферативным гломерулонефритом, нефритом IgA-нефропатии, смешанным криоглобулинемическим нефритом, нефритом синдрома Гудпасчера, нефритом грануломатоза Вегенера или идиопатическим интерстициальным нефритом, таким как острый интерстициальный нефрит и т.д., и фиброзом почек в настоящем изобретении поэтому включает такие формы, в которых вышеупомянутый интерстициальный нефрит стал хроническим.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения фиброзной тканью является такая, которая непрерывно получает фиброзный стимул. В настоящем изобретении фиброзный стимул означает любой стимул, который вызывает фиброз, и примеры включают, но не ограничиваются этим: окислительный стресс, гипоксия, воспаление и апоптоз (см. Ghiassi-Nejad et al. Expert Rev Gastroenterol Hepatol. 2008; 2(6):803-16). Примеры такой ткани включают фиброзную ткань, которая испытывает хроническое воспаление и ткань, которая непрерывно подвергается воздействию цитостатического вещества (например, ткань печени, в которой холестаз вызван заболеванием желчного протока и т.д.). Кроме того, такая ткань также включает ткань, затронутую фиброзом, для которой непосредственная причина болезни неясна, такой как, например, криптогенный цирроз печени, идиопатический легочный фиброз или идиопатический миелофиброз и т.д., или затронутый такими, для которых известна непосредственная причина болезни, но происхождение причины болезни неясно, или трудно удаляема, такие как, например, первичный желчный цирроз печени, фиброз печени, происходящий от неалкогольного стеатогепатита (НАСГ), первичный склерозирующий холангит, идиопатический легочный фиброз, идиопатический легочный фиброз, происходящий из интерстициальной пневмонии, первичный миелофиброз, идиопатический интерстициальный фиброз почек, происходящий от нефрита, воспалительное заболевание кишечника (например, болезнь Крона, язвенный колит и т.д.), или системная склеродерма и т.д.

В настоящем изобретении, «регенерированная нормальная ткань из фиброзной ткани» означает регенерированную ткань, которая была денатурирована вследствие фиброза по меньшей мере до состояния, в котором фиброз имеет меньшую степень. Таким образом, в то время как фиброз прогрессирует, ткань замещается фиброзной тканью, которая является главным образом внеклеточным матриксом, и восстановление нормальной ткани из фиброзной ткани в настоящем изобретении должна полностью изменить вышеупомянутый процесс и заменить пролиферированную фиброзную ткань первоначальной нормальной тканью. Поэтому восстановление нормальной ткани из фиброзной ткани в настоящем изобретении включает не только полное восстановление фиброзной ткани к исходному состоянию, но также и частичное восстановление фиброзной ткани к исходному состоянию. Степень восстановления нормальной ткани может быть оценена с помощью гистологических исследований биопсийного образца и т.д., основанных на нормализации структуры ткани, сокращения области, занятой фиброзной тканью, увеличением области, занятой нормальной тканью и т.д., или когда наблюдается аномальность биохимического индекса вследствие фиброза перед лечением настоящей композицией, оценка может быть выполнена на основе улучшении индекса и т.д.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения восстановление нормальной ткани может быть выполнено посредством роста и дифференцировки стволовых клеток в пространстве, которое образуется вследствие уменьшения коллагена, накопленного в фиброзной ткани. Поэтому один вариант осуществления настоящего изобретения касается фармацевтической композиции, в которой для восстановления нормальной ткани из фиброзной ткани в пространстве для роста и дифференцировки стволовых клеток пространство формируется посредством уменьшения коллагена, накопленного в фиброзной ткани. В настоящем изобретении примеры стволовых клеток включают, но не ограничиваются этим: клетки, которые первоначально присутствуют в ткани, которая стала фиброзной (стволовые клетки печени, стволовые клетки поджелудочной железы, стволовые клетки легкого, стволовые клетки почки, стволовые клетки костного мозга, стволовые клетки сердца, стволовые клетки селезенки, стволовые клетки матки, стволовые клетки кожи, стволовые клетки молочной железы, стволовые клетки кишечника, мезенхимальные стволовые клетки и т.д.) клетки, которые двигаются из другого места в организме и, кроме того, клетки, которые ввели для лечения. Кроме того, «пространство» включает не только полость внутри ткани, но также и пространства с камерой, в которой клетки могут увеличиваться и растить, такой как, например, пространство, в котором давление между клетками уменьшено или пространство, имеющее пластичность.

В одном варианте осуществления композиция в соответствии с настоящим изобретением дополнительно содержит нацеливающее вещество для продуцирующих коллаген клеток в фиброзной ткани. Из-за того что содержится нацеливающее вещество, становится возможным специфически доставлять к коллаген-продуцирующим клеткам, которые являются клетками-мишенями, вещество, уменьшающее коллаген, которое является нацеливающим на продуцирующие коллаген клетки, такое как, например, помимо прочего, вещество, которое ингибирует продуцирование и секрецию компонента внеклеточного матрикса, HGF или вещество, способствующее его продуцированию, ММР или вещество, способствующее его продуцированию, ингибитору TIMP, ингибитор продуцирования TGFβ, релаксин или вещество, способствующее продуцированию вышеперечисленного и т.д., таким образом увеличивая эффект использования вещества, уменьшающего коллаген.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения нацеливающий агент для продуцирующих коллаген клеток является ретиноидом. Хотя механизм, посредством которого ретиноид осуществляет нацеливание, до сих пор остается неясным, предполагается, например, что ретиноид, связывающийся специфически с RBP (р