Производные доластатина 10 и ауристатинов

Производные доластатина 10 и ауристатинов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Объект настоящего изобретения относится к новым производным доластатина 10 и ауристатинов, к способам их получения, к содержащим их фармацевтическим композициям и к их применению в качестве лекарственного препарата, в частности, при лечении рака.

Доластатин 10 (D10) представляет собой производное цитотоксического пептида, выделенного из морского моллюска (Dolabella auricularia), абсолютная конфигурация которого была определена и впоследствии подтверждена после полного синтеза продукта (Pettit G.R.J. Am. Chem. Soc. 1987, 109, 6883; Pettit G.R.J. Am. Chem. Soc. 1987, 109, 7581; Pettit, G.R. Heterocycles 1989, 28, 553; Pettit, G.R.J. Am. Chem. Soc. 1989, 111, 5015; Pettit G.R.J. Am. Chem. Soc. 1991, 113, 6692). D10 образован из 5 звеньев, называемых долавалином (Dov), валином (Val), долаизолейцином (Dil), долапроином (Dap) и долафенином (Doe). Несколько аналогов этого соединения синтезировано путем модификации природы составляющих его аминокислот (Pettit G.R.J. Med. Chem. 1990, 33, 3133; Miyazaki K. Peptide Chemistry 1993, 31, 85; Miyazaki K. Chem. Pham. Bull. 1995, 43, 1706). Произведены также модификации его С-концевой части (правого конца), которые привели к различным производным, включающим ауристатин Е или F (Pettit G.R. Anticancer Drug Design, 1998, 13, 243; Pettit G.R. Antimicrobial Agents And Chemotherapy, 1998, 2961).

Настоящее изобретение сосредоточено на модификации N-концевой части (левого конца) производных доластатина 10 и ауристатинов Е и F. Несколько примеров, опубликованных в литературе, по модификациям, произведенным в этом положении, привело к потере активности (Miyazaki K. Chem. Pham. Bull. 1995, 43, 1706). Соединения, раскрытые в настоящем изобретении, отличаются от предшествующего уровня техники за счет их оригинальных химических структур, а также за счет их примечательного биологического свойства, которое оказалось абсолютно неожиданным с учетом элементов, опубликованных в литературе. Результат этих примечательных активностей делает эти соединения подходящими для применения при лечении рака.

Кроме того, эти соединения обладают преимуществом в том, что они являются и активными в качестве цитотоксических агентов, и более растворимыми, чем исходные соединения.

Таким образом, объектом настоящего изобретения является соединение приведенной ниже формулы (I):

где:

- R₁ представляет собой Н или ОН,

- R₂ представляет собой группу: (С₁-C₆)алкил (например, метил), СООН, СОО-((С₁-С₆)алкил) (такой как СООМе) или тиазолил (такой как тиазол-2-ил),

- R₃ представляет собой Н или (С₁-С₆)алкильную группу (такую как метил), в частности, (С₁-С₆)алкильную группу, и

- R₄ представляет собой:

арил-(С₁-С₈)алкильную группу, замещенную одной или более групп (в частности, одной, предпочтительно на арильной части), выбранных из групп ОН и NR₉R₁₀, где R₉ и R₁₀, каждый независимо от другого, представляет собой Н или (C₁-С₆)алкильную группу (такую как метил),

или его фармацевтически приемлемая соль, гидрат или сольват.

Радикалы R₂-R₄ и, в частности, R₄, могут представлять собой хиральные группы, и могут находиться в форме их различных стереоизомеров и необязательно в форме смеси стереоизомеров.

Под «стереоизомером» в значении настоящего изобретения подразумевают геометрический изомер или оптический изомер.

Геометрические изомеры являются результатом различного положения заместителей на двойной связи, которая может, таким образом, иметь Z или Е конфигурацию.

Оптические изомеры являются результатом, в частности, различного положения в пространстве заместителей на атоме углерода, содержащем 4 различных заместителя. В этом случае атом углерода образует хиральный или асимметрический центр. Оптические изомеры включают диастереоизомеры и энантиомеры. Оптические изомеры, являющиеся отображениями друг друга в зеркале, но которые не могут налагаться друг на друга, называют «энантиомерами». Оптические изомеры, не являющиеся налагаемыми отображениями друг друга в зеркале, называют «диастереоизомерами».

Смесь, содержащую равные количества двух индивидуальных энантиомерных форм противоположной хиральности, называют «рацемической смесью».

В настоящем изобретении под «фармацевтически приемлемым» подразумевают то, что можно применять при получении фармацевтической композиции, является по существу безопасным, нетоксичным и ни биологически, ни иначе нежелательным и приемлемым как для ветеринарного применения, так и для медицинского фармацевтического применения.

Под «фармацевтически приемлемой солью, гидратом или сольватом» соединения подразумевают соль, гидрат или сольват, которые являются фармацевтически приемлемыми, как определено в данном документе, и которые обладают желаемой фармакологической активностью исходного соединения.

Фармацевтически приемлемые соли, в частности, включают в себя:

(1) соли присоединения фармацевтически приемлемой кислоты, образованные с фармацевтически приемлемыми неорганическими кислотами, такими как соляная, бромисто-водородная, фосфорная, серная и подобные кислоты; или образованные с фармацевтически приемлемыми органическими кислотами, такими как уксусная, трифторуксусная, пропионовая, янтарная, фумаровая, яблочная, винная, лимонная, аскорбиновая, малеиновая, глутаминовая, бензойная, салициловая, толуолсульфоновая, метансульфоновая, стеариновая, молочная и подобные кислоты; и

(2) соли присоединения фармацевтически приемлемого основания, которые образуются, когда протон кислоты, присутствующий в исходном соединении, либо замещается ионом металла, например, ионом щелочного металла, ионом щелочноземельного металла или ионом алюминия; либо координируется с фармацевтически приемлемым органическим основанием, таким как лизин, аргинин и тому подобное; либо с фармацевтически приемлемым неорганическим основанием, таким как гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид кальция и тому подобное.

Эти соли могут быть получены из соединений по изобретению, содержащих основную или кислотную функциональную группу, и соответствующих кислот или оснований с использованием традиционных химических способов.

Соединения формулы (I) по изобретению предпочтительно находятся в солевой форме и, в частности, в форме фармацевтически приемлемой соли присоединения кислоты.

Предпочтительно соединения формулы (I) согласно настоящему изобретению находятся в форме фармацевтически приемлемой соли присоединения кислоты, где кислота, возможно, представляет собой трифторуксусную кислоту, уксусную кислоту или соляную кислоту, например, и в частности, трифторуксусную кислоту.

Сольваты включают в себя традиционные сольваты, полученные на последней стадии получения соединений по изобретению благодаря присутствию растворителя, где растворитель, возможно, представляет собой, например, этанол.

Под «алкилом» в настоящем изобретении подразумевают прямоцепочечную или разветвленную насыщенную углеводородную цепь. Например, можно упомянуть метильную, этильную, пропильную, изопропильную, бутильную, изобутильную, втор-бутильную, трет-бутильную, пентильную или гексильную группы.

Под «(С_x-С_y)алкилом» в значении настоящего изобретения подразумевают алкильную цепь, такую как определено выше, содержащую от x до y атомов углерода. Таким образом, (С₁-С₆)лкильная группа представляет собой алкильную цепь, имеющую от 1 до 6 атомов углерода.

Под «арилом» в значении настоящего изобретения подразумевают ароматическую углеводородную группу, предпочтительно имеющую от 6 до 10 атомов углерода и способную содержать одно или два конденсированных кольца. Например, можно указать фенил или нафтил. Предпочтительно эта группа представляет собой фенил.

Под «арил-(С₁-С₈)алкилом» в контексте настоящего изобретения подразумевают арильную группу, такую как определено выше, связанную с остальной частью молекулы через алкильную группу, такую как определено выше, и содержащую от 1 до 8, в частности, от 1 до 6, преимущественно от 1 до 4, предпочтительно 1 или 2 атома углерода. Арильная группировка предпочтительно представляет собой фенильную группировку. (С₁-С₈)алкильная группировка преимущественно представляет собой (С₁-С₄)алкил, предпочтительно (С₁-С₂)алкил. В частности, арил-(С₁-С₈)алкильная группа представляет собой бензильную или фенетильную группу.

Среди соединений по изобретения один особенно приемлемый класс соединений соответствует соединениям формулы (I), в которых R₁ представляет собой ОН, и R₂ представляет собой (С₁-С₆)алкильную группу, такую как метил.

Другой особенно приемлемый класс соединений соответствует соединениям формулы (I), в которых R₁ представляет собой атом водорода, и R₂ представляет собой тиазол (в частности, тиазол-2-ильную группу).

Другой класс особенно приемлемых соединений соответствует соединениям формулы (I), в которых R₁ представляет собой атом водорода, и R₂ представляет собой СОО(С₁-С₆)алкильную группу, такую как СООМе.

Другой класс особенно приемлемых соединений соответствует соединениям формулы (I), в которых R₁ представляет собой атом водорода, и R₂ представляет собой группу СООН.

Таким образом, соединения по изобретению преимущественно представляют собой соединения формулы (I), в которых:

- R₁=OH, и R₂=Me (метил) или

- R₁=H, и R₂=COOH, СООМе или тиазол-2-ил.

Согласно одному конкретному воплощению настоящего изобретения R₂ более конкретно представляет собой метильную группу, СООН, СООМе или тиазол-2-ильную группу.

Предпочтительно R₁ представляет собой Н, и R₂ представляет собой СООН или СОО(С₁-С₆)алкил, в частности, СООН или СООМе.

Согласно первому предпочтительному воплощению изобретения R₁ представляет собой Н, и R₂ представляет собой СООН.

Согласно второму предпочтительному воплощению изобретения R₁ представляет собой Н, и R₂ представляет собой СООМе.

R₃ конкретно представляет собой Н или метильную группу, преимущественно метильную группу.

R₄ преимущественно представляет собой арил-(С₁-С₈)алкильную группу, конкретно арил-(С₁-С₄)алкильную группу, такую как арил-(С₁-С₂)алкильная группа, замещенную одной группой, выбранной из ОН и NR₉R₁₀, и, в частности, представляющей собой NR₉R₁₀.

R₄ преимущественно представляет собой арил-(С₁-С₈)алкильную группу, конкретно арил-(C₁-С₄)алкильную группу, такую как арил-(С₁-С₂)алкильная группа, замещенную одной группой на арильной группировке, выбранной из ОН и NR₉R₁₀, и, в частности, представляющей собой NR₉R₁₀.

Арильная группа преимущественно представляет собой фенильную группу.

Таким образом, R₄ может, в частности, представлять собой фенил-(С₁-С₂)алкил, замещенный одной группой (предпочтительно на фенильной группировке), выбранной из ОН и NR₉R₁₀, и, в частности, представляющей собой NR₉R₁₀.

R₄ может, таким образом, иметь следующую формулу:

где Х₀ представляет собой ОН или NR₉R₁₀, в частности, NR₉R₁₀, и m представляет собой целое число, составляющее от 1 до 8, конкретно от 1 до 4, и преимущественно представляет собой 1 или 2.

Согласно предпочтительному воплощению изобретения R₄ имеет следующую формулу:

где Х₀ и m являются такими, как определено выше, и, в частности, где X₀=NR₉R₁₀ и m=1 или 2.

R₄ может быть, в частности, выбран из:

Преимущественно соединение формулы (I) выбрано из соединений 11-15, 19-20, 23-24, 27-29, 49-51 и 61-64, описанных ниже в примерах.

Следующим объектом настоящего изобретения является соединение формулы (I), такое как определено выше, применяемое в качестве лекарственного препарата, в частности, для лечения или профилактики рака или доброкачественных пролиферативных расстройств.

Настоящее изобретение также относится к применению соединение формулы (I), такого как определено выше, для получения лекарственного препарата, в частности, предназначенного для лечения или профилактики рака или доброкачественных пролиферативных расстройств.

Настоящее изобретение также относится к способу лечения или профилактики рака или доброкачественных пролиферативных расстройств, включающему введение человеку, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I), такого как определено выше.

Рак, подлежащий лечению или профилактике, представляет собой более конкретно рак легкого, поджелудочной железы, кожи, головы, шеи, матки, яичников, ануса, желудка, ободочной кишки, молочной железы, пищевода, тонкого кишечника, щитовидной железы, лимфатической системы, предстательной железы, почки или мочевого пузыря, либо острый или хронический лейкоз, либо комбинацию двух или более из этих раков.

Под доброкачественными пролиферативными расстройствами подразумевают пролиферативные расстройства, не вызывающие метастазов, или еще не прогрессирующие в направлении рака (предраковые опухоли).

Следующим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I), такое как определено выше, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент.

Активный ингредиент можно вводить животным или людям в единичных дозированных формах введения в смеси с традиционными фармацевтическими носителями. Подходящие единичные дозированные формы введения включают формы введения посредством перорального пути, формы для сублингвального или трансбуккального введения, формы введения посредством парентерального пути (подкожного, внутрикожного, внутримышечного или внутривенного), формы для местного введения (на кожу и слизистую оболочку, включая интраназальное и внутриглазное введение) и формы для ректального введения.

Такие композиции могут иметь форму твердого вещества, жидкости, эмульсии, лосьона или крема.

В качестве твердых композиций для перорального введения можно применять таблетки, пилюли, порошки (твердые или мягкие желатиновые капсулы) или гранулы. В этих композициях активный ингредиент по изобретению смешивают с одним или более инертных разбавителей, таких как крахмал, целлюлоза, сахароза, лактоза или диоксид кремния, в потоке аргона. Эти композиции могут также содержать вещества, отличающиеся от разбавителей, например, одно или более смазывающих веществ, таких как стеарат магния или тальк, красящее вещество, покрытие (таблетки с покрытием) или глянцевое покрытие.

В качестве жидких композиций для перорального введения можно применять растворы, суспензии, эмульсии, сиропы и эликсиры, которые являются фармацевтически приемлемыми и содержат инертные разбавители, такие как вода, этанол, глицерин, растительные масла или вазелиновое масло. Эти композиции могут содержать вещества, отличающиеся от разбавителей; например, увлажняющие, подслащивающие, загущающие, корригирующие или стабилизирующие препараты.

Стерильные композиции для парентерального введения предпочтительно представляют собой водные или неводные растворы, суспензии или эмульсии. В качестве растворителя или основы можно применять воду, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла, в частности, оливковое масло, инъекционные органические сложные эфиры, например, этилолеат или другие подходящие органические растворители. Эти композиции могут также содержать адъюванты, в частности, увлажняющие, изотонические, эмульгирующие, диспергирующие и стабилизирующие средства. Стерилизацию можно проводить несколькими способами, например, путем обеззараживающего фильтрования, путем включения стерилизующих средств в композицию, путем облучения или путем нагревания. Их можно также готовить в форме твердых стерильных композиций, которые можно растворять в момент применения в стерильной воде или любой другой инъекционной стерильной среде.

Композиции для ректального введения представляют собой суппозитории или ректальные капсулы, которые в дополнение к активному ингредиенту содержат эксципиенты, такие как масло какао, полусинтетические глицериды или полиэтиленгликоли.

Композиции для местного введения могут, например, представлять собой кремы, лосьоны, глазные капли, жидкости для полоскания рта, назальные капли или спреи.

Дозы зависят от желаемого эффекта, от продолжительности лечения и от применяемого пути введения. Как правило, врач определит подходящую дозу относительно возраста, массы и всех других факторов, конкретных для субъекта, подлежащего лечению.

В фармацевтических композициях согласно настоящему изобретению может содержаться другой активный ингредиент. В частности, он может представлять собой противораковое средство и, в частности, цитотоксическое противораковое средство, такое как навельбин, винфлунин, таксол, таксотер, 5-фторурацил, метотрексат, доксорубицин, камптотецин, гемцитабин, этопозид, цисплатин или кармустин (также называемый BCNU); или гормональное противораковое средство, такое как тамоксифен или медроксипрогестерон.

Радиационную терапию (рентгеновские лучи или гамма-лучи) можно также сочетать с введением соединения по настоящему изобретению. Такое облучение можно применять с использованием внешнего источника или путем имплантации крошечных внутренних источников радиоактивности.

Настоящее изобретение также относится к получению соединений формулы (I) согласно изобретению с использованием общих способов, описанных в приведенных ниже схемах синтеза, при необходимости необязательно с добавлением любой стандартной операции, описанной в литературе или хорошо известной специалистам в данной области техники, либо описанной в примерах в экспериментальном разделе.

Схема 1

На схеме 1 проиллюстрирован первый общий способ, который можно применять для получения соединений формулы (I). В приведенных выше формулах R₁, R₂ и R₃ являются такими, как определено выше, R_4a представляет собой группу R₄, такую как определено выше, необязательно в защищенной форме, и G представляет собой защитную группу.

Первая стадия состоит в конденсации соединения (II), защищенного на его аминной функциональной группе защитной группой G, с соединением (III). X может представлять собой уходящую группу, такую как атом хлора. В этом случае первая стадия состоит во взаимодействии между хлорангидридом и амином. Эту реакцию можно проводить с использованием способов и методов, хорошо известных специалистам в данной области техники. При одном особенно приемлемом способе вызывают взаимодействие этих двух химических соединений в присутствии органического или неорганического основания, например, Et₃N, iPr₂NEt, пиридина, NaH, Cs₂CO₃, K₂СO₃, в растворителе, таком как ТГФ, дихлорметан, ДМФ, ДМСО, при температуре, в частности, от -20°С до 100°С. X может также представлять собой гидроксил (ОН). В этом случае первая стадия представляет собой реакцию конденсации между карбоновой кислотой (II) и амином (III). Эту реакцию можно проводить путем следования способам и методам, хорошо известным специалистам в данной области техники. При одном особенно приемлемом способе вызывают взаимодействие этих двух химических соединений в присутствии агента сочетания, такого как 1-(3-диметиламинопропил)-3-этил-карбодиимид (EDC), 3-гидрокси-1,2,3-бензотриазин-4(3Н)-он, третичный амин, такой как диизопропилэтиламин, в полярном апротонном растворителе, таком как дихлорметан или ДМФ, при температуре, в частности, от -15°С до 40°С. При другом, особенно приемлемом способе вызывают взаимодействие этих двух химических соединений в присутствии диэтилфосфорцианидата (DEPC), третичного амина, такого как триэтиламин, в полярном апротонном растворителе, таком как дихлорметан или ДМФ, при температуре от -15°С до 40°С. Другой особенно приемлемый способ состоит в том, чтобы вызвать взаимодействие этих двух химических соединений в присутствии О-(7-азабензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфата (HATU), третичного амина, такого как диизопропилэтиламин, в полярном апротонном растворителе, таком как дихлорметан или ДМФ, при температуре от -15°С до 100°С.

После удаления защиты промежуточного соединения с использованием методов, хорошо известных специалистам в данной области техники («Protective Groups in Organic Synthesis», T.W. Greene, John Wiley & Sons, 2006 и «Protecting Groups», P.J. Kocienski, Thieme Verlag, 1994), соединение (IV) можно конденсировать с соединением (V), следуя способам и методам, описанным выше, что приводит к соединению (VI) после стадии удаления защиты. Затем это соединение после конденсации с промежуточным соединением (VII) и необязательного удаления защиты может приводить к образованию соединений формулы (I). Соединение (VI) можно также подвергать сочетанию с соединением (VII'), в котором R'₃ представляет собой предшественник R₃, в частности, группу R₃, защищенную защитной группой. Сочетание с последующим удалением защиты группы R'₃ с получением R₃ cмoжнo проводить, следуя таким же методикам, как описано выше.

Схема 2

На схеме 2 проиллюстрирован второй общий способ, который можно использовать для получения соединений формулы (I). В приведенных выше общих формулах R₁, R₂ и R₃ являются такими, как определено выше, R_4a представляет собой группу R₄, такую как определено выше, необязательно в защищенной форме, R_4b представляет собой предшественник группы R₄, и G представляет собой защитную группу.

На первой стадии соединение (IX), защищенное на его аминной функциональной группе защитной группой G, конденсируют с соединением (VI). X может представлять собой уходящую группу, например, атом хлора. В данном случае первая стадия состоит во взаимодействии между хлорангидридом и амином. Эту реакцию можно проводить с использованием способов и методов, хорошо известных специалистам в данной области техники. При одном особенно приемлемом способе вызывают взаимодействие двух химических соединений в присутствии органического или неорганического основания, такого как Et₃N, iPr₂NEt, пиридин, NaH, Cs₂CO₃, K₂СO₃, в растворителе, таком как ТГФ, дихлорметан, ДМФ, ДМСО, при температуре конкретно от -20° до 100°С. X может также представлять собой гидроксил. В этом случае первая стадия представляет собой реакцию конденсации между карбоновой кислотой (IX) и амином (VI). Эту реакцию можно проводить, следуя способам и методам, хорошо известным специалистам в данной области техники. При одном особенно приемлемом способе вызывают взаимодействие этих двух химических соединений в присутствии 1-(3-диметиламинопропил)-3-этил-карбодиимида (EDC), 3-гидрокси-1,2,3-бензотриазин-4(3Н)-она, третичного амина, такого как диизопропилэтиламин, в полярном апротонном растворителе, таком как дихлорметан или ДМФ, при температуре конкретно от -15°С до 40°С. При другом, особенно приемлемом способе вызывают взаимодействие этих двух химических соединений в присутствии диэтилфосфорцианидата (DEPC), третичного амина, такого как триэтиламин, в полярном апротонном растворителе, таком как дихлорметан или ДМФ, при температуре конкретно от -15°С до 40°С.

После удаления защиты промежуточного соединения с использованием методов, хорошо известных специалистам в данной области техники, полученное соединение (VIII) может приводить к соединениям формулы (I) после взаимодействия с R₄Y. В этом случае Y представляет собой уходящую группу, такую как Cl, Br, I, OSO₂CH₃, OSO₂CF₃ или О-тозил. Эту реакцию проводят в присутствии органического или неорганического основания, такого как Et₃N, iPr₂NEt, NaH, Cs₂CO₃, K₂СO₃, в полярном безводном растворителе, таком как дихлорметан, ТГФ, ДМФ, ДМСО, при температуре конкретно от -20° до 100°С. При другом особенно приемлемом способе вызывают взаимодействие соединения (VIII) с альдегидом формулы R_4b-СНО, где R_4b соответствует предшественнику R₄. В этом случае реакция представляет собой восстановительное аминирование в присутствии восстанавливающего агента, такого как NaBH₄, NaBH₃CN, NaBH(OAc)₃, в полярном растворителе, таком как 1,2-дихлорэтан, дихлорметан, ТГФ, ДМФ, МеОН, при необязательном присутствии изопропоксида титана (IV), при рН, который можно регулировать добавлением кислоты, такой как уксусная кислота, при температуре конкретно от -20°С до 100°С.

В приведенных выше схемах синтеза соединение формулы (I) может приводить к другому соединению формулы (I) после дополнительной стадии взаимодействия, такой как омыление, например, с использованием способов, хорошо известных специалистам в данной области техники, где группа R₂, представляющая собой сложный эфир, предпочтительно метиловый эфир, изменяется на группу R₂, представляющую собой карбоновую кислоту.

Если это желательно для выделения соединения формулы (I), содержащего по меньшей мере одну основную функциональную группу в состоянии соли присоединения кислоты, это возможно путем обработки свободного основания соединения формулы (I) (содержащего по меньшей мере одну основную функциональную группу) подходящей кислотой, предпочтительно в эквивалентном количестве. Подходящая кислота может представлять собой, в частности, трифторуксусную кислоту.

Таким образом, следующим объектом настоящего изобретения является первый способ получения соединения формулы (I), включающий реакцию конденсации между соединением приведенной ниже формулы (VI):

где R₁ и R₂ являются такими, как определено выше, и

соединением приведенной ниже формулы (VII):

где R₃ является таким, как определено выше, R_4a соответствует группе R₄, такой как определено выше, необязательно в защищенной форме, и X представляет собой ОН или Cl.

Когда X=ОН, реакцию сочетания можно проводить в условиях пептидного сочетания, хорошо известных специалистам в данной области техники.

Пептидное сочетание можно проводить в присутствии агента сочетания, такого как диизопропилкарбодиимид (DIC), дициклогексилкарбодиимид (DCC), гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (EDC), карбонилдиимидазол (CDI), 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфат (HBTU), 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония тетрафторборат (TBTU), O-(7-азабензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфат (HATU), диэтилфосфорцианидат (DEPC) или (бензотриазол-1-илокси)трипирролидинофосфония гексафторфосфат (РуВОР), необязательно в сочетании со вспомогательным агентом сочетания, таким как N-гидроксисукцинимид (NHS), N-гидроксибензотриазол (HOBt), 3,4-дигидро-3-гидрокси-4-оксо-1,2,3-бензотриазол (HOOBt), 1-гидрокси-7-азабензотриазол (HAt), N-гидроксисульфосукцинимид (сульфо-NHS) или диметиламинопиридин (DMAP). Предпочтительно агент сочетания представляет собой HATU или DEPC.

Реакцию можно также проводить в присутствии основания, такого как DIEA (диизопропилэтиламин).

В частности, пептидное сочетание проводят в присутствии HATU или DEPC и DIEA.

Данную реакцию можно проводить в полярном апротонном растворителе таком как дихлорметан (ДХМ) или диметилформамид (ДМФ), в частности, при температуре от -15°С до 40°С.

Когда X=Cl, реакцию конденсации следует проводить в присутствии основания, которое может быть органическим или неорганическим, такого как Et₃N, iPr₂NEt, пиридин, NaH, Cs₂CO₃ или K₂СO₃.

Реакцию можно проводить в растворителе, таком как тетрагидрофуран (ТГФ), дихлорметан (ДХМ), диметилформамид (ДМФ) или диметилсульфоксид (ДМСО), в частности, при температуре от -20° до 100°С.

Соединения формулы (VI) и (VII) могут быть получены путем следования протоколам синтеза, описанным в экспериментальном разделе ниже, или использования методов, известных специалистам в данной области техники.

Следующим объектом настоящего изобретения является второй способ получения соединения формулы (I), включающий реакцию замещения между соединением приведенной ниже формулы (VIII):

где R₁, R₂ и R₃ являются такими, как определено выше, и

соединением приведенной ниже формулы (X):

где R_4a представляет собой группу R₄, такую как определено выше, необязательно в защищенной форме, и Y представляет собой уходящую группу, такую как Cl, Br, I, OSO₂CH₃, OSO₂CF₃ или О-тозил.

Реакцию замещения конкретно следует проводить в присутствии основания, которое может быть органическим или неорганическим, таким как Et₃N, iPr₂NEt, NaH, Cs₂CO₃ или K₂СO₃.

Эту реакцию можно выполнять в полярном растворителе, предпочтительно безводном, таком как ДХМ, ТГФ, ДМФ или ДМСО, в частности, при температуре от -20° до 100°С.

Соединения формул (VIII) и (X) могут быть получены путем следования протоколам синтеза, описанным ниже в экспериментальном разделе, или использования методов, известных специалистам в данной области техники.

Следующим объектом настоящего изобретения является третий способ получения соединения формулы (I), в котором R₄ представляет собой группу -СН₂R_4b, где R_4b представляет собой арильную или арил-(С₁-С₇)алкильную группу, замещенную одной или более групп (в частности, одной, предпочтительно на арильной группировке), выбранной из групп ОН и NR₉R₁₀,

включающий реакцию восстановительного аминирования между соединением приведенной ниже формулы (VIII):

где R₁, R₂ и R₃ являются такими, как определено выше, и

соединением приведенной ниже формулы (XI):

где R_4b является таким, как определено выше.

Реакцию восстановительного аминирования можно проводить в присутствии восстанавливающего агента, такого как NaBH₄, NaBH₃CN или NaBH(OAc)₃, и необязательно изопропоксида титана (IV).

рН можно регулировать добавлением кислоты, такой как уксусная кислота, в частности, до достижения рН от 4 до 5.

Эту реакцию можно выполнять в полярном растворителе, таком как ДХЭ (1,2-дихлорэтан), ДХМ, ТГФ, ДМФ или метанол, в частности, при температуре от -20° до 100°С.

Соединения формул (VIII) и (XI) могут быть получены путем следования протоколам синтеза, описанным ниже в экспериментальном разделе, или использования методов, известных специалистам в данной области техники.

Соединение, полученное после стадии конденсации/замещения/восстановительного аминирования одного из трех описанных выше способов, можно подвергать дополнительным стадиям удаления защиты, в частности, в отношении заместителей R₂ и R₄, и необязательно дополнительным стадиям функционализации с использованием способов, хорошо известных специалистам в данной области техники.

Когда R₂ представляет собой группу СООН, упомянутую выше стадию конденсации/замещения/восстановительного аминирования можно проводить от соединения (VI), где группа R₂ представляет собой сложноэфирную функциональную группу СОО-((С₁-С₆)алкил), где затем данную сложноэфирную функциональную группу, возможно, омыляют с получением соединения формулы (I), где R₂=СООН.

Когда группа R₄ содержит функциональную группу NH, ее можно защищать перед проведением реакции конденсации/замещения/восстановительного аминирования путем замещения атома азота N-защитной группой, такой как группа Boc или Fmoc.

Под «защитной группой» в настоящем изобретении подразумевают группу, которая селективно блокирует реакционный центр в многофункциональном соединении, так что химическую реакцию можно селективно проводить при другом незащищенном реакционном центре, в значении, традиционно связанном с ними в химическом синтезе.

Под «N-защитной группой» в настоящем изобретении подразумевают любой заместитель, который защищает группу NH от нежелательных реакций, такой как N-защитные группы, описанные в кн. Greene, «Protective Groups In Organic synthesis» (John Wiley & Sons, New York (1981)) и Harrison et al. «Compendium of Synthetic Organic Methods», Vols. 1 to 8 (J. Wiley & sons, 1971 to 1996). N-защитные группы включают карбаматы, амиды, N-алкилированные производные, аминоацеталевые производные, N-бензильные производные, иминные производные, енаминные производные и N-гетероатомные производные. N-защитные группы могут представлять собой формил; арил, такой как фенил, необязательно замещенный одной или несколькими метоксигруппами, такой как пара-метоксифенил (РМР); арил-(С₁-С₆)алкил, такой как бензил, арильную группировку, необязательно замещенную одной или несколькими метоксигруппами, такую как бензил (Bn), пара-метоксибензил (РМВ) или 3,4-диметоксибензил (DMPM); -CO-R_GP1, такую как ацетил (Ас), пивалоил (Piv или Pv), бензоил (Bz) или пара-метоксибензилкарбонил (Moz); -CO₂-R_GP1, такую как трет-бутилоксикарбонил (Воc), трихлорэтоксикарбонил (TROC), аллилоксикарбонил (Alloc), бензилоксикарбонил (Cbz или Z) или 9-флуоренилметилоксикарбонил (Fmoc); -SO₂-R_GP1, такую как фенилсульфонил, тозил (Ts или Tos) или 2-нитробензолсульфонил (также называемый нозил - Nos или Ns); и тому подобное, где R_GP1 представляет собой (С₁-С₆)алкил, необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогена, такими как F или Cl; (С₂-С₆)алкенил, такой как аллил; арил, такой как фенил, необязательно замещенный одной или несколькими группами, выбранными из ОМе (метокси) и NO₂ (нитро); арил-(С₁-С₆)алкил, такой как бензил, арильную группировку, необязательно замещенную одной или несколькими метоксигруппами; или 9-флуоренилметильную группу.

В частности, N-защитная группа включает формил, ацетил, бензоил, пивалоил, фенилсульфонил, бензил (Bn), трет-бутилоксикарбонил (Воc), бензилоксикарбонил (Cbz), пара-метоксибензилоксикарбонил, пара-нитробензил-оксикарбонил, трихлорэтоксикарбонил (TROC), аллилоксикарбонил (Alloc), 9-флуоренилметилоксикарбонил (Fmoc), трифторацетил, бензилкарбаматы (замещенные или незамещенные) и тому подобное. Она может представлять собой, в частности, группу Воc или Fmoc.

Защита функциональной группы амина NH группой Воc или Fmoc и последующее удаление ее защиты после реакции конденсации/замещения/восстановительного аминирования хорошо известна специалистам в данной области техники и описана, в частности, в экспериментальном разделе ниже.

Соединение формулы (I), полученное одним из трех упомянутых выше способов, можно также преобразовать в соль путем добавления фармацевтически приемлемого основания или кислоты, в частности, фармацевтически приемлемой кислоты, такой как трифторуксусная кислота. Данную стадию можно необязательно проводить одновременно с другой стадией реакции, в частности, одновременно со стадией удаления защиты, когда ее необходимо проводить, например, в кислой среде.

Соединение, полученное одним из этих трех способов, необязательно после дополнительной стадии (стадий) удаления защиты, функционализации и/или образования соли, можно выделить из реакционной среды с использованием способов, хорошо известных специалистам в данной области техники, например, путем экстракции, выпаривания растворителя или осаждения и фильтрования.

Соединение можно также при необходимости очищать с использованием методов, хорошо известных специалистам в данной области техники, например, путем перекристаллизации, если соединение является кристаллическим, путем перегонки, путем колоночной хроматографии на силикагеле или высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

Приведенные ниже примеры иллюстрируют изобретение, не ограничивая, тем не мене