Способ приготовления питательной среды для получения бактериального препарата молочнокислых бактерий

Способ приготовления питательной среды для получения бактериального препарата молочнокислых бактерий

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИС

ИЗОБРЕТЕНИЯ!

ii) 4908l4

Союз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 28.12.73 (21) 1980577/28-13 с присоединением заявки № (23) Приоритет

Опубликовано 05.11.75. Бюллетень № 41

Дата опубликования описания 06.02.76 (51) М. Кл. С 12Ь 3/00

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 576.8 (088.8) (72) Авторы изобретения

Г. А. Белова, 3. П. Медведева, А. Н. Корнелюк, Л. И. Климова, А. А. Юлиус и К. А. Калунянц

Всесоюзный научно-исследовательский институт маслодельной и сыродельной промышленности (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ

ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНОГО ПРЕПАРАТА

МОЛОЧНОКИСЛЫХ БАКТЕРИЙ

Изобретение относится к молочной промышленности и может быть применено при выработке бактериальных препаратов для маслодельной и сыродельной промышленности.

Известен способ приготовления питательной среды для накопления термофильных молочнокислых бактерий при получении их концентрированной суспензии для сыроделия, заключающийся в том, что в подсырной сыворотке при 30 С растворяют сухое молоко (50 г/л), затем смесь (рН 6,6 — 6,7) доводят. в течение 15 мин до 65 — 70 С, вносят в нее фермент папаин, предварительно разведенный в небольшом количестве горячей смеси, и выдерживают при этой температуре в течение 10 мин. Затем смесь нагревают до 90—

95 С и выдерживают 10 мин, после чего в нее добавляют дрожжевой экстракт (5 г/л) и сернокислый марганец (0,12 г/л). Среду при температуре 50 — 60 С очищают путем центрифугирования и стерилизуют.

В СССР такой способ приготовления питательной среды при получении бакконцентрата не применяется ввиду сложности его осуществления и дороговизны используемых компонентов.

С целью упрощения процесса приготовления питательной среды для накопления молочнокислой микрофлоры, увеличения выхода бактериальной массы, повышения активности готовых препаратов и снижения трудозатрат по предлагаемому способу в качестве ферментного препарата используют

5 протомезентерин, выдерживание смеси осуществляют при 53 — 57 С в течение 1 — 2 час, а препарат вводят в виде 5О/О-ного раствора.

Приготовляют питательную среду следую10 щим образом. Готовят восстановленное обезжиренное молоко, для чего сухое молоко растворяют в водопроводной воде (в небольшом количестве) при 40 — 45 С в течение 15—

20 мин. Затем проводят гидролиз белков мо15 лока (в необходимом объеме среды) при

53 — 57"C. Для этого в растворенное и профильтрованное молоко вносят фермент протомезентерин. полученный из В. mesentericus

ПБ, в виде 5О/о-ного раствора. В питательной

20 среде во время этой выдержки происходит распад белков молока с образованием продуктов, более доступных для усвоения молочнокислой микрофлорой.

B конце выдержки в среду вносят все ос25 тальные ингредиенты, предварительно растворенные и профильтрованные, все перемешивают и стерилизуют при 108 — 110 С в течение

1 час; рН среды 7 0 — 7,1. Приготовление и стерилизация среды осуществляется в фер30 ментерах. предмет изобретения

Составитель Т, Полянскан

Техред 3. Тараненко

Редактор Л. Гончарова

Корректор О. Тюрина

Заказ 3015 Изд. ¹ 65 Тираж 529 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, %-35, Раушская наб., д. 4)5

Типография, пр, Сапунова, 2

В каче=тве основ!IÎÃO ксмпонента среды х!Ож! о использовать подсырпую сыворотку, предварительно гпдролизовав II:-!el! белки. Для этого в сыворотку (без отделения белков) при рН 6,5 — 7,0 и температуре 53

57 С добавляют протомезентерин в виде

5"",, -ного раствора. Подготовка мезентерина, выдержка среды с ним, добавление компонентов и стерилизация проводятся так же, как и в предыдущей среде.

Выработка бактерпального препарата в услабораторпи il UexB биопрепаратов показали и кт и в и 0 е р а 3 м !.1 О ж е н и е м 0 л 0 ч!! 0 к и слых стрептококков в новой питательной среде. 3TQ подтверждается активным сн!!>кением величины рН, хорошей микроскопической картиной, увеличением выхода готового Ilpeпарата в 1,5 — 2 раза, получением препарата с более HocTQHHHblivl количеством клеток (360 — 560 млрд./г против 83 — 850 млрд./r) и повь!щенной активности (36 — 48"Т против 29—

35 Т) при выдержке препарата в молоке (1 г на 1 л) в течение 2 час при температуре

30 С.

Приготогление питательной среды (расчет па 10 л) осуществляют следующим образом, 300 г сухого обезжиренного молока растгоргпот в 2 л водопроводной воды с температурой 45=С в течение 30 мин (к концу растворения воды 42 — 43 С) .

Раствор молока фильтруют и вносят в 8 л водопроводной воды с температурой 57 С.

Далее вносят раствор фермента протомезентерина Г10Х, который готовят следующим образом. В навеску фермента 0,7 r (свертывающая активность 300 тыс. ед) добавляют

15 мл водопроводной воды с температурой

30 С. Перемешивают и выдерживают при этой температуре в термостате 10 мин. белка pлится a TeHeHHe 1,5 час.

Затем вносят следующие компоненты:

Дрожжевой автолизат 100 мл

Натрий лимоннокислый трехзамещепный 100 г

Г "1 10 KGB B 100 r

Марганец сернокислый 1,6 г рН среды доводят до 7,0 — 7,1. Готовую среду стерилизуют при 1 атм 15 мин.

Порция (0,5 — 1г) бактериального препарата должна содержать не менее 100 — 150 млрд. клеток, При получении препарата с содер15 жанием клеток в 1 г свыше 200 млдр. и BKтивности выше 30 Т расфасовка его ведется по 0,5 г, а при 100 — 200 млрд. и активности

29 — 30 Т вЂ” по 0,7 — 1 г. 3В счет этого снижается количество порций полученного пре20 парата.

Способ приготовления питательной среды

25 для получения бактериального препарата молочнокислых бактерий, включающий добавление протеолитического ферментного препарата в молочные продукты, например сыворотку, выдержку полученной смеси с после30 дующим добавлением в полученный гидролизат лимоннокислого натрия, дрожжевого автолизата, глюкозы и сернокислого марганца, отличающийся тем, что, с целью ускорения процесса приготовления среды и по35 вышения выхода бактериального препарата, в качестве протеолитического ферментного препарата используют протомезентерин, выдержку смеси осуществляют при 53 — 57 С в течение 1 — 2 час, а препарат вводят в виде

40 5", -ного раствора.