Способ получения 2-дезоксистрептаминаминогликозидов или их солей

Способ получения 2-дезоксистрептаминаминогликозидов или их солей

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ .К ПАТЕНТУ

Союз Советских

Социалистических республик (uj865128 (61) Дополнительный к патенту@ м „з

С 07 Н 15/224

A 61 К 31/70 (22) Заявлено15.06.77 (21) 2494017/23-04

1 6.0 6.7 6 (23) Приоритет- (32) 280976

24989/76 0 81 2.76 (31) 40145/76 (33) Великобритани

51294/76

Опубликовано 15.0981.Бюллетень йо34

Государственный комитет

СССР, ио делам изобретений и открытий ) 547 455 ° 07 (088. 8) Дата опубликования описания 150981 (Панама) (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 2-ДЕЗОКСИСТРЕПТАИИНАИИНОГЛИКОЗИДОВ

ИЛИ ИХ СОЛЕЙ

О нон,d он ио н., Изобретение относится к способу получения новых 2-дезоксистрептаминаииногликозидов, обладающих:ценными фармакологическими свойствамн.

Цель изобретения — получение новых полезных соединений, расширяющих арсенал средств воздействия на живой организм, достигается путем синтеза последних, основанного на известной реакции восстановительного алкилирования 1 .

Предлагаемые антибактериальные агенты представляют собой. ряд 2-деэоксистрептаминаминогликозидов, в которых аминогруппа, находящаяся в положении 1; замещена алкильной группой. Такие соединения являются эффек-20 тивнымн при борьбе с различными грамположительными и грамотрицатель- ными бактернальными инфекциями и отличаются пониженной токсичностью по сравнению с исходными аминогликозидами.

Предлагается способ получения 2деэоксистрептамннамнногликозидов общей Формулы I i 30

ЗУ где, R" - СН RI или

1: е

R - С -Св алкил, замещенный 2-.5 гнд В роксильными группамиу

R9 - С -Се-алкил, замещенный 1-5 гидроксильными группамид

Р - C-Ср-алкил, незамещенный или замещенный 1-5 гидроксильньми группамит

R1 - амино- нлн гидроксильная груапау

RÐ - водород илн гидроксилъная группа при условии, когда

RR - амнногруппа, а R - водород, В .а - С.,-С -алккл, по крайней мере, один из углеро"

865128 дов которого имеет гидрокс иль ную yummy.

R — водород или C„Ñ -алкил, или их солей, заключающийся в том, что соединение формулы Й

Н

®5

OK

МН З где R и R7 имеют указанные значения;

R — окси- или NHR группа;

R — выбран из группы, включающей 26 формил и ацетил;

R — выбран из группы, включающей водород, формил и ацетил, подвергают взаимодействию с алкилирующим агентом формулы 25

0 = СНR или 0 =С

8 Я 10

Зо где R, R8 и и имеют указанные значения, в присутствии цианоборгидрида натрия в реакционно-инертном растворителе при температуре от комнатной до 90ОС с последующим удалением формильных или ацетильных групп гидролизом при температуре от комнатной до

90 С или взаимодействием с гидразином при температуре около 100 С.

Соединения формул 1 и 8 могут существовать в различных конформациях. .46

Обычно каждое кольцо находится в форме "кресла", и каждая из групп заместителей расположена экваториально по отношению к кольцу.

Гликозидная связь между гексопираноэильным кольцом и кольцом 2-дезоксистрептамина обычно является ol— связью по отношению к последнему.

Дополнительный окси-замещенный алкильный заместитель у аминогруппы в положении 1 имеет один или более оптически активных центров, и каждый может быть в R или S коифигурации или в ожет присутствовать в смеси оптических изомеров.

При оценке соединений как антибактерийльных агентов in чitго проводят определение минимальной концентрации ингибирующей (М.И.К.) испытуемого соединения в подходящей среде, в которой удается наблюдать рост конкрет- @Q ных микроорганизмов. В чашки с агарной средой, в каждой из которых находится испытуемое соединение в определенной концентрации, инокулируют стандартное число клеток испытуемого мик- 65 роорганизма, и затем каждую чашку инкубируют в течение 24 ч при 37 С. Затем чашки исследуют на предмет присутствия или отсутствия роста бактерий, и вычисляют соответствующее значение

М .И.К. Микроорганизмы, исследованные в настоящем испытании, включают штаммы Escherichia coii, Klebsiel1à pneumoniае, Proteus miгаЬi1is, Pseudomonas aerupinosa, Staphylococcus aureus

and Streptococcus faeca1is.

Оценку in viva осуществляют путем подкожного введения соединений мышам, зараженным штаммом E sch årichiа со1i.

Каждое соединение вводится в различных дозах группе мышей, и его активность определяют как уровень, при котором оно дает 508 защиты от леталь- . ного исхода от Escherichiа col i за

72 ч.

Предлагаемые антибактериальные соединения можно вводить человеку отдельно, однако обычно их принимают в смеси с фармацевтическим носителем, выбранным в соответствии q.обычным способом введения и стандартной фармацевтической практикой. Например, их можно вводить орально в форме таблеток, содержащих такие инертнйе наполнители, как крахмал или лактозу, отдельно в капсулах, в смеси с наполнителем, в форме элексиров или суспензий, содержащих отдушивающие или окрашивающие агенты. Их можно .вводить парентерально, например внутривенно, внутримышечно или подкожно.

Для парентерального введения их лучше использовать в форме стерильных водных растворов, которые могут содержать и другие растворенные вещества, например достаточное количество соли или глюкозы для получения изотоничного раствора.

При введении препарата пациентам, следует учитывать, что дневная доза антибактериального соединения будет сопоставимой с дозой аминогликозидных антибактериальных агентов, уже находящихся в употреблении, т.е.

0,1 — 50 мг/кг (в разделенных дозах) при парентеральном введении или 10

100 мг/кг (в разделенных дозах) при оральном введении.

Хроматографию в тонком слое осуществляют на пластинках с двуокисью кремния,. используя указанную сисТему растворителя. Пятна проявляют после сушки пластин напылением 58-ного раствора третбутилгипохлорита в циклогексане, сушки пластин при 100 С в течение

10 мин в вентилируемом сушильном шкафу, охлаждения, и напыления раствора крахмал-иодид калия.

Пример 1. 1-й= t(S) — 2, 3Диоксипропил канамицин A .

3,3,6" — Три- Р о- формил-канамицин (100 мг; 0,18 ммоль),D -глицеральдегид (31,6 мг; 0,36 ммоль) и цианоборгидрид натрия (33 мгр0,52

I 5 8651

I ммоль) растворяют в водном метаноле (10 мл метанолами 2 мл воды) и устанавливают рН 6,0 с помощью 5 н. соля; ной кислоты. Раствор выдерживают при комнатной температуре в течение 40 ч.

Затем. растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток обрабатывают 1н. гидроокисью натрия, после . чего оставляют его при комнатной тем пературе еще на 20 ч. После концентрирования при пониженном давлении

;остаток хроматографируют на колонке (О ионообменной смолой "Амберлит" С6-50 (NHt. форма), используя в качестве .растворителя градиент гидроокисн ам-. мония повыаающейся концентрации 0—

0,1н., в результате чего получают

1 N ((S ) -2, 3-диоксипропил канамицин A (66 мг; .67Ъ), Rg 0,27 в 1 И водном растворе хлористого натрия (канамицин A eeT .eme emme Rf 0,21), Rf

0,70.в метаноле; 0,88 водной гидрооки-Ю си аммония 1 2 (канамицин A дает Rf

0,70) .

Найдено: С401; Н70; М8,3

Cgg Н,щй4.0,6- 2Н СОз

Вычислено: С 40,5у H 6,8t и 8,2.

Образец превращают в летучее тетра- и -ацетил-нона-0-триметилсилильное .производное путем обработки уксусным ангидридом в метаноле при комнатной температуре s течение 24 ч, после чего подвергают взаимодействию со смесью гексаметилдисилаэана и триметилхлорсилана 2=1 при комнатной температуре в течение 24 ч.

Найдено: 1285.

СУР Н, У й40 7 5 ig без одной группы C>HDOS i дает m/е

1285.

Пример 2. 1- и -!(S) (R)2, 3, 4-Триоксибутил канамицин A.

46

Раствор 3, 3", 6-три — и — формилканамицина A (100 мг; 0,18 веаоль), 0 -зритрозы (107 мгу 0,90 ммоль) и цианоборгидрида натрия (66 мг; 1,02 ммоль) в смеси метанола (10 мл) и во-4 ды (2 мл) при рН 6, 0 нагревают при

60 С в течение 50 час„ Раствор концентрируют при пониженном давлении. .Остаток растворяют в 10%-ном гидразингидрате (12 мл), рН 6,0 раствора яЕ устанавливают ледяной уксусной кислотой и затем раствор кипятят с обратньик холодильником в течение 6 ч. Растворитель выпаривают при пониженном давлении, .а полученный остаток хроматографируют на колонке с "Амберлитом". CG50 аналогично примеру 1. Затем основную фракцию, содержащую продукт, хроматографируют на колонке с "Сефадексом" СИ25 (МН< форма), проьывая ее градиентом гидроокиси аммония, в Щ результате чего получают 1 — N

Г(8)(R)2, 3, 4-триоксибутил) канамицнн ,А(37 мгу. 36%), R 0,29 в метаноле)

0,88 гидроокиси аммония 2г2 (канамицин А, Rg 0,32). 6$

28

Найдено: С 41,6у Н 6,6; М 7,9 Q Н иN4.0 4 2НQ.СОз °

Вычислено: С 40,5i Н 6,8t М 7,9.

П риме р 3. 1- и - Г(SJC53 (R ) 2, 3, 4, 5-Тетраоксипентил -канами.цин А., Получают аналогично примеру 2,, однако в качестве исходного соединения используют 0 -рибозу. Получают

Rg 0,68 в метаноле; 0,88 гидроокиси аммония 1:2 (канамицин А, Rg 0,70).

Пример 4. 1 - N - ((S)(R)

3,4,5-Триоксипентил3канамицин А получают аналогично примеру 2, однако в качестве исходного соединения используют 2-деокси- D -рибоэу. R g 0,68 в метаноле; О, 88 гидроокиси аммония

1:2 (канамицин A, Rg0, 70) .

П p e p N "((S)(R) (R) (R) 2, 3, 4, 5, 6-Пентаоксигексил) канамицин А получают аналогично примеру

2, однако в качестве исходного соединения используют 0 -глюкозу, Rg

0,55 в метаноле; 0,88 гидроокиси аммония 1:2 (канамицин A, Rg О, 71).

П р н м е р 6. 1 — М - ((R)(S)

Я)2, 3, 4, 5-Тетраокснпентил) канамицин

A получают .аналогично примеру 2, однако в качестве исходного соедине-. ния используют D-арабинозу, Rg 0,34 в метаноле: 0,88 гидроокиси. аммония

1:1 (канамицин А, R 0,49) °

П риме р 7. 1 - и - ((S) (R)(R)

:2,3,4,5-Тетраоксипентил канамицин A.

Раствор 3,3",6-три- и --формил-ка.намицина A (100 мг; 0,18 ммоль), 0 ксилозы (79 мгу 0,53 смоль) и циано ;бОргидрида, натрия (44 мгg 0,68 ммоль) вводе (10 мл) при рН 4,6 нагревают при 90 С в течение 3 1/2 ч.

Растворитель выпаривают при пониженном давлении, а остаток растворяют в 5 н.соляной кислоте (10 мл) и перемешивают при 30 С в течение 16 ч.

Затем растворитель упаривают, а остаток хроматографируют на колонке с

-ионообмЕнной смолой "АмбЕрЛит" CGSO (МН + форма). Причем градиентное элюирование проводят с повышением концентрации гидроокиси аммония от 0 до

0,2 н., в результате чего получают

1 - N - ((5) (R) (R) 2,3,4,5-тетраоксипентил) канамицин A (56 мгу 51%), Rg

0,59 в метаноле: 0,88 гндроокиси аммония 2 (канамицин А, Rg 0,66).

Пример 8 ° 1 — и - K(R)(S)(S)

2,3,4,5-Тетраоксипентил)канамицин A получают аналогично примеру 7, однако в качестве исходного соединения используют L- êñèëîçó. R 0,34 в метаноле: 0,88 гидроокиси аммония 1:2 (канамицин А, и 0,50) .

П р име р 9. 1:- и -((R)tR)(S)

2, 3,4, 5-Тетраоксипентил) канамицин А получают аналогично примеру 7, одна-. ко в качестве исходного соединения используют L-рибозу, Rg 0,38 в метаноле: 0,88 гидроокиси аммония 1,1

865128 (канамицин Ap Ry 0,51), m/e (полевая десорбция) М+1 найдено 619.

Пример 10. 1 — и - ((R)(R) (R) 2, 3, 4, 5-Тетраок сипентил) канамицин

A получают аналогично примеру 7, однако в качестве исходного соединения используют О-ксилозу, Rg 0,37„ в метаноле: О, 88 гидроокиси аммония

1:1 (канамицин A, R< О, 48) .

Пример 11. 1 — N -f(S)2,3Диоксипропил) канамицин В . (0

Раствор р -глицеринового альдегида (45 мгр 0,5 ммоль) в метаноле (1 мл) добавляют к раствору 2,3,3",6-тетра— й-формил-канамицина В (100 мгр

0,17 ммоль) в метаноле (5 мл) и воде (1 мл). К перемешиваемому. раствору добавляют цианоборгидрид натрия .(20 мг; 0,3 ммоль), рН 6, О устанавливают с помощью 5н.соляной кислоты, и полученный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. 20

Затем раствор выпаривают досуха при пониженном давлении, а остаток гоме щают в 5н.соляную кислоту, и раствор оставляют на ночь при комнатной температуре. Устанавливают рН раствора

6,0 с помощью раствора гидроокиси натрия, а затем. полученный раствор хроматографируют на колонке с "Амберлитом" CG50 как указано в примере 1.

После лиофилизации соответствующей фракции получают 1-N- ((S) 2, 3-диоксипропил канамицин В (53 мг; 56%) .

R 0,51 в 3 М водном растворе хлористого натрия (канамицин B, Rg 0,42).

Rg0,54 в метаноле: 0,88 гидроокиси аммония 1 1 (канамицин В, R 0 58).

Масс-спектрометрический метод полевой десорбции дает сильный М+1 пик при m/е 558. Для С Нл и О М+1=558.

Пример 12. 1 — и - ((S)(R)

2, 3, 4-Триоксибутил) канамицин В полу- 40 чают аналогично примеру 11, однако в качестве исходного соединения используют D-эритрозу. R 0,60 в ЗИ растворе хлористого натрия (канамицин В, и 0,45) . 45

Пример 13. 1 — и -((5)(S) (R) 2, 3, 4, 5-Тетраоксипентил) канамицин

В получают аналогично примеру 11, однако в качестве исходного соединения используют D-рибозу, Rg О, 3 в 2М щ растворе хлористого натрия (канамицин В, R 0,2) .

П р име р 14. 1- и -f(S)(R)

3, 4,5-Триоксипентил канамицин В получают аналогично примеру 11, однако в качестве исходного соединения используют 2-дезокси-D-рибозу, R 0,3 в 2М растворе хлористого натрия (канамицин В, R q 0,2 ).

Пример 15. 1 — N - t(S)(R) (R) (R) 2,3,4, 5, 6-Пентаоксигексил| ка- 60 намицин В получают аналогично примеру 11, однако в качестве исходного соединения используют D-глюкозу, R

0,25 в метаноле: 0,88 гидроокиси ам .мония 1:1 (канамицин В, Rg 0,42). 65

Пример 16. 1 — и -f2,3 Диокси-2-оксиметиленпропил(канамицин

В получают аналогично примеру 11, однако в качестве исходного соединения используют DL-2-оксиметил-2, 3-0изопропилиден-глицериновый альдегид, RK 0,55 в ЗМ растворе хлористого натрия (канамицин В",R 0,42), m/e (полевая десорбция) M+1 найдено 588.

Для С 1 Н®й О Э М + 1 = 588.

П р им е р 17. 1 — N -((Р)2,3Диоксипропил канамицин В получают аналогично примеру 11, однако в качестве исходного соединения используют 1-глицериновый альдегид. По данным тонкэслойной хроматографии продукт идентичен продукту, полученному в примере 11.

Пример 18. 1 — и — (1,3Диок си-2-пропил) канамицин A.

3, 3", б, -Три-N-формил-канамицин

A (200 мгу 0,36 ммоль), диоксиацетон (95 Ml р 1, 05 ммоль) и цианоборгидрид натрия (88 мг; 1, 40 ммоль) растворяют в водном метаноле (20 мл

IIe=.анола, 4 мл воды), и рН 6,6 раствора доводят с помощью 5н. соляной кислоты. Pаствор кипятят c обратным холодильником в течение 22 ч. Затем добавляют еще диоксиацетон (95 мг) и цианоборгидрид натрия (88 мг), а рН доводят до 5,5. Кипячение с обратным холодильником продолжают еще в течение 24 ч, после чего упаривают растворитель при пониженном давлении.

Полученный остаток, обрабатывают

10---ным гидразингидратом,добавляют уксусную кислоту при рН 6, О (20 мл) и кипятят с обратным холодильником в течение б ч. После концентрирования при пониженчом давлении остаток хроматографируют на колонке с ионообменной смолой "Амберлит CG50 (йН4 Ciopма), причем проводят градиентное элюирование с повышением концентрации гидроокиси аммония от О до 0,1 н.

Фракции, в которых (по данным ТСХ) содержится продукт, объединяют, упаривают и продукт повторно хроматографируют на колонке с "Сефадексом"

СМ25 (в виде аммониевого иона), проводя такое же элюирование как и раньше. Получают 1 — и — (.1,3-диокси2-пропил) канамицин А (О, 11 r; 57%), R< 0,40 в метаноле: 0,88 гидроокиси аммония 2 1 (канамицин A, Rg О, 30) .

Найдено: С 40 6; Н 6,5; N 8,4.

С „Нлл О 2Н СО .

Вычислено: С 40,5; H 6,8; N 8.2

Пример 19. 1 — N — (1,3Диок си-2-пропил) канамицин В.

U,èàíoáoðãHäðèä натрия (88 мг;

1, 40 ммоль) добавляют к раствору

2,3, 3" б" -тетра- и -формил-канамицина В (200 мг; 0,33 ммоль) и диоксиацетона (95 мгу 1,05 ммоль) в метаноле(12 мл и воде (3 мл) . Доводят рН раствора до 4,5 с помощью 2н.соляной кислоты, и раствор кипятят с обратным

865128 холодильником в течение 20 ч. Затем растворитель выпаривают при пониженном давлении, а остаток обрабатывают водой (10 мл) . Добавляют гидразингидрат (2 млу 60%), рН раствора доводят до 6,0 ледяной уксусной кислотой (2 мл). Полученный раствор кипятят с обратным холодильником в течение ь ч, а затем выпаривают до получения смолистого остатка при пониженном давлении. Затем продукт растворяют в воде 1О (8 мл), рН доводят до 5 5 с помощью

0,2 н.соляной кислоты. Раствор хроматографируют на колонке с ионообменной .смолой "Амберлит" CG50 (в форме иона аммония), причем сначала проводят элюирование водой, а затем градиентное элюирование с повышением концентрации гидроокиси аммония до 0,25 н.

Фракции, которые по данным ТСХ содержат продукт, объединяют, выпаривают, и продукт повторно хроматографируют 20, на колонке с "Сефадексом CN25 (в форме аммониевого иона), проводя элюирование как и раньше, в результате чего получают 1 — и — f1, 3-диокси-2пропил)канамицин В (59 мгу 32%) .

R . 0,55 в метаноле: 0,88 гидроокиси аммония 1:1 (канамицин В, R 0,47), R g 0,37 в 2 М растворе хлористого натрия (канамицин В, Ну О, 26) .

НаЩ ено: С 37 б: н 6 Зр и 9 2.

Cg Hgg N g0yg хЗН СОз Н О

Вычислено: С 37,8; Н 6,8;у и 9,2%.

Пример 20. 1 — И вЂ” Г 1-окси2-пропил.)канамицин В. 2,3,3" 6 -тетра- й- формил-канамицин В (200 мгр

0,36 ммоль), оксиацетон (78 мгр

1,05 ммоль) и цианоборгидрид натрия (88 мг; 1,40 ммоль) растворяют в водном метаноле (20 мл метанола, 4 мл води), и рН раствора доводят до 6,0 4О с помощью 5н.соляной кислоты. Раствор кипятят с обратным холодильником в течение 22 ч. Затем добавляют еще оксиацетон .(23 мг) и цианоборгидрид натрия (30 мг), после чего продолжают кипячение с обратным холодильником в течение 24 ч. Затем раствори-. тель выпариваютьпри пониженном давлении, а остаток обрабатывают 10%-ным гидразингидратом, доведя рН до б ле- о дяной уксусной кислотой (20 мл), и кипятят раствор с обратным холодильником в течение б ч. После концентрирования при пониженном давлении остаток хроматографируют на колонке с ионообменной смолой "Амберлит" CG50 (в форме ИН+), причем проводят градиентное элюирование с повышением концентрации гидроокиси аммония от О

Ьо 0,1н. Фракции, которые по данным

Т С Х содержат продукт, объединяют и N выпаривают, в результате чего получают 1 — и — (1-окси-2-пропил| канамицин В (0,11 г; 50%). R 0,55 в 3М растворе хлористого натрия (канамицин В, Ry 0,47). 65

Найденов С 39.6: Н 6, 8; и 10,5.

С gq Н 4 и у 0«х2 /д Н gCOg . ,Вычислено: С 40,5р Н 6,9; N 10,0%.

m/е (полевая десорбция) M+1 найдено 542. Для Ср1Щфр 0 1 М + 1 = 542.

П р -и м е р 21. 1 — и — (1-Окси2-пропил)канамицин A получают аналогично примеру 20, однако в качестве исходного соединения используют

3,3,6 -три - N -кормил-канамицин А.

Rg 0,3 в метаноле, хлороформе, 8%-ной .гидроокиси аммония (4:1:2) (канамицин А, Rg 0,20) .

Пример 22. 1 — N - 1-Окси2-пропил) тобрамицин.

6 — и -трет-Бутилоксикарбонилтобрамицин (2,0 гу 3,5 ммоль), оксиацетон (0,78 г; 10,6 ммоль) и цианоборгидрид натрия (0,89 гу 14,0 ммоль) растворяют в смеси метанола (150 мл) и воды (ЗО мл), рН раствора доводят до 6,0 с помощью 5н. соляной кислоты.

Полученную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 72 ч. Затем растворитель упаривают при пониженном давлении, и остаток обрабатывают трифторуксусной .кислотой (20 мл), перемешивая в течение 15 мин при комнатной температуре. Затем раствор снова выпаривают досуха "при пониженном давлении, остаток обрабатывают небольшим количеством воды,. рН доводят до 6,0 Зн.гидроокисью аммония.

Полученный раствор хроматографируют на колонке с ионообменной смолой

"Амберлит" CG50 (в форме ИН4), проводя градиентное элюирование гидроокисью аммония. Фракции, содержащие продукт, объединяют, выпаривают и продукт повторно хроматографируют на колонке с "Сефадекс" СМ25 (в форме аммониевого.иона), проводя элюирование, как и раньше. В результате получают 1 — и — Г1-окси-2-пропил)тобрамицин (8 мг; 04%). R 0,68 в ЗМ растворе хлористого натрия (тобрамицин, Rg 0,60), m)е (полевая десорбция)

М+1 найдено 526. Для С 1 Н49И О р М +

11 = 526.

Приме р 23. 1- и -, ((S)2,3Диоксипропил) тобрамицин получают аналогично примеру 22,но используя вместо оксиацетона D-глицериновый альдегид. R 0 55 в ЗМ растворе хлористого натрия (тобрамицин, Ry О, 45), R<

0,37 в смеси метанол: 0,88 гидроокись аммония 2г1 (тобрамицин, Rg

0,35) .

Пример 24 ° 1 — и — 1 3 Диокси-2-пропил канамицин A. 6, 3

И» ди- N -Ацетил-канамицин А (500 мгу

0,88 ммоль),1, 3-диоксиацетон (237 мг>

2,64 ммоль) и цианоборгидрид натрйя (181 мгу 2, 64 ммоль) растворяют вводном метаноле (45 мл метанола, 5 мл иоды) и рН раствора. доводят до

6,0 с помощью 2н.соляной кислоты.

Раствор оставляют стоять при комнау-.

865128

М . И.К ., мг/МЛ

Пример

Klebsiella

pneumon l a 1

Е. col!

Staphylococcus

aureus

P roteus Pseudomas

mlгаЬl1is ae rupinosa

6,2

6 2

6,2

6,2

6,2

6,2

6,2

12,5

12,5

6,2

12,5

6,2

12,5

12,5

12,5

12,,5

12,5

12,5

12,5

12,5

12,5

12,5

25

25

12,5

6,2

12,5

12,5 25

100

50

12,5

12,5

100

10 (11

25

3,1

1,6

6,2

6,2

3,1

1,6

1,6

6,2

3,1

3,1

12,5

1,6

3,1

3,1

3,1

3...1

3,1

6,2

1,6

3,1

6,2

100

6,2

6,2

6,2 ной температуре в течение 3 дней.

C помощью ТСХ {метанол, хлороформ, 1н. гидроокись аммония 4:2: 1) обнаруживают два основных компонента: Ry

0,17 и 0,22. Раствор выпаривают, и продукты выделяют с помощью ионообменной хроматографии на колонке.с

"Сефадексом" СМ25 (в форме авмонийиона), проводя градиентное элюирование с повышением концентрации гидроокиси аэвючия. У более медленно выходящего компонента йу0,17,(который элюируют с колонки во вторую очередь) удаляют защитные группы путем нагревания продукта в Зн . растворе гидроокисн натрия при 80-90 С в течение 4 ч. После нейтрализации и очистки с помощью ионообменной хроматографии на колонке с "Амберлитом"

CG50 (в форме иона аммония) после элюирования, проведенного, как и раньше, получают 1 — и — 1,3-диокси-2-пропил.)канамицин А, идентичный продукту, полученному в примере 18.

П р имер 25. 1- И.- Г1,3Днокси-2-пропил3 канамицин В сульфат.

Раствор 1 — и — (1, 3-диокси-2пропил канамицина В (1, 64 кг) в воде (5 л) подкисляют до рН 6,4, добавив концентрированную серную кислоту (0,38 л) в воде (1,64 л). Добавляют древесный уголь (0,15 кг), и полученную смесь перемешивают в течение

1 ч, затем Отфильтровывают . Фильтро. вальную лепешку промывают водой (2x0,75 л), объединенный фильтрат и промывки (8,5 л)добавляют в течение

6 ч к промыаленному метилированному спирту (70 л) при перемешивании. Выпавшую в .осадок сульфатную соль со. би)рают фильтрованием и высушивают в вакууме при 50 С. Выход 2,46 кг (90% регенерированной активности антибиотика). Rg0,47 (в хлороформе, метано<5 ле концентрированной гидроокиси аммония, воде 1:4з2:1).

Найдено: С 33,46ф Н 6,70р и 8,09.

Caa HHHEO+a ° 2Н О .. 1 5С Н ОН ° x х2Н28б4.

Вычислено: С 33,57у Н 6,99

N 8,16.

Результаты испытаний соединений на антибактериальную активность

ln vitro по предлагаемому способу приведены в таблице.

865128

Продолжение таблицы

M.H.К., мг/мл

Пример

Е.со1i

P rot eu s

mi rab i1 i s

Staphylococcus

au reus

Pseudomas

aerupinosa

Klebsiella

pneumonial

3,1

3,1

12,5

3,1

3,1

6,2

12,5

6,2

3,1

6,2

6,2

1,6

1,6

6,2

1,6

1,6

3,1

3,1

3,1

6,2

12,5

3,1

12,5

0,8

3,1

6,5

1,6

3,1

6,2

3,1

Н 7

R-N — R !

Сн

Формула изобретения

МН-З мн, НО

НО

НОН, ОН

НО МН вЂ” З ноя.,d он

45

16 6,2

17 6,2

18 6,2

19 3,1

20 3,1

21 3,1

22 3,1

23 . 6,2

1. Способ получения 2-деэоксистрептаминаминогликозидов общей формулы 7

1 Н NHB ИН но ж, 9

1 В l

R где R - СН - R или СН „ю в

R - С - С -алкил, замещенный 2-5 гидроксильными группами;

R> - С.1 - С -алкил, замещенный

1-5 гидроксильными группами;

R o - С„ - С -алкил, незамещенный или замещенный 1-5 гидроксильными группами;

R> - амино- или гидроксильная группа йэ — водород или гидроксильная 55 группа, при условии, когда

R -, амино группа, а К вЂ” водоРод R - C4. — С -алкил, по

10 крайней мере, один из углеродов которого имеет гидро- 46

7 ксильную группу р

R - водород или C -С4-алкил, или их солей, о т л и ч а ю— шийся тем, что соединение формулы

65 где R и R имеют указанные значения;

3 и

R> - окси- или NHR группаi

R — выбран из группы, включающей формил и ацетил;

R - выбран иэ группы, включающей водород, формил и ацетил, подвергают взаимодействию с алкилирующим агентом формулы

В

О=бК-З или 0=5

З10 о где R, R u R имеют указанные значения, в присутствии цианоборгидрида натрия в реакционно-инертном растворителе при температуре от комнатной до 90 С с последующим удалением формильных или ацетильных групп гидролизом при температуре от комнатной до 90 С или взаимодействием с гидразином при температуре около 100 С с последующим выцелением целевого продукта в свободном состоянии или в виде соли.

865128

Составитель В.Криворучко

Редактор Ю.Петрушко Техред А.Савка, Корре ктор Г . Реше т ни к

Заказ 7844/89 Тираж 400

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий, 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Приоритет по при э иакам

16 06 ° 76 " при R -CHyll, где R - C - Сэ -ала кил, эамеэрниый 2-5 гидроксильными группами.

28. 09. 76

Rg при R - Сй где R u R 0 C„ -Cg к

t алкил, замещенный 1-5 гидроксильными группами.

08.12.76 " при R> - CHR9R

Источники информации, принятые во внимание прн экспертизе

1. Неницеску К.Д. Органическая химия. М., 1963, с. 660.