Пептиды или их физиологически приемлемые соли

Пептиды или их физиологически приемлемые соли

Реферат

 

Использование: в медицине как соединения, обладающие брадикинин-антагонистическим действием. Сущность изобретения: производные пептидов общей формулы I: A-B-C-E-F-K-(D)-Tic -G-M-F'-I где A = H, ацетил, D-Tyr, Lys, Arg, D Arg, последний замещен 4-гидроксифенилпропионилом или ацетилом; B = L- или D - Arg или Lys, которые могут быть размещены в боковой цепи NO₂, TOs, никотиноилом, CONHC₆H₅, BOC, 4-MeO-2,3,6-триметилфенилсульфонилом или связь; C= Hyp-Pro-Gly; Pro-Hyp-Gly; Pro-Pro-Gly, дегидро Pro-Hyp-Gly и D-Pro-Hyp-Gly; E = Phe, Thia, Trp, D-Thia; F = Ser, D-Ser, Glun, Trp, D-Asn, Cys или связь; K = Gly, -Ala или связь; G = Pro, Aoc, Tic, Oic, D-Oic, (D, L) Oic, (L) - (3a s, 7aR) Oic, (L) - (3aR, 7aS) Oic или связь; M = Phe, Thia или связь; F¹= Arg, который может быть замещен в боковой цепи 4-MCO-2,3,6-триметилфенилсульфонилом, или D - Arg или D-Ser (Rha) или связь Y = OH или NH₂ или их фармацевтически приемлемые соли. 5 з.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение касается новых пептидов с брадикинин-антагонистическим действием, а также фармацевтической композиции на их основе.

В бюллетене Всемирной организации интеллектуальной собственности N 86/07263 описывают брадикинин-антагонистические пептиды, в которых среди прочего L-Pro в позиции 7 пептидного гормона брадикинина или другого аналога брадикинина замещен D-аминокислотой, как, например, D-Phe, D-Thi, D-Pal, CDF, D-Nal, MDY, D-Phg, D-His, D-Trp, D-Tyr, D-hPhe, D-Val, D-Ala, D-His, D-Ile, D-Leu и DOMT.

В основе изобретения лежит задача нахождения новых эффективных пептидов с брадикинин-антагонистическим действием.

Эта задача решается с помощью пептидов формулы (I).

A-B-C-E-F-K-(D)-Tic-G-M-F'-I, (1) в которой A водород, ацетил, Arg, D-Arg, D-Tyr, Lys или D-Arg, который замещен 4-гидрокси-фенилпропионилом или ацетилом; B аминокислота в L- и D-конфигурации из серии, содержащей Arg и Lys, которые могут быть замещены в боковой цепи нитро, тозилом, никотиноилом, CO-NH-C₆H₅, бензилоксикарбонилом или 4-метокси-2,3,6-триметил-фенилсульфонилом или означает направленную связь; C соединение из серии, включающей Hyp-Pro-Cly, Pro-Hyp-Gly, Pro-Pro-Gly, дегидро-Pro-Hyp-Glu и D-Pro-Hyp-Gly; E Phe, Thia, Trp или D-Thia; F Ser, D-Ser, Gln, Trp, D-Asn, Cys или направленная связь; K Gly, -Ala или направленная связь; (D)-Tic обозначает радикал формулы V G Pro, Aoc, Tic, Oic, D-Oic, (D,L)Oic, (L)-(3aS,7aR)Oic, (L)-(3aR, 7aS)Oic или направленная связь; M Phe, Thia или направленная связь; F' Arg, который может быть замещен в боковой цепи 4-метокси-2,3,6-триметил-фенилсульфонилом или D-Arg, или D-Ser (Rha), или означает направленную связь; J -OH или -NH₂ и его физиологически приемлемые соли.

Если не указано ничего иного, то сокращение радикала аминокислоты без стереодискриптора предназначено для обозначения радикала в L-форме (сравни: Шредер, Любке. "Пептиды", том 1, Нью-Йорк, 1965, стр. XXII-XXIII; Хоубен-Вейл. "Методы органической химии", том XV/1 и 2, Штутгарт, 1974) как например, В качестве радикала гетероциклической кольцевой системы формулы IV во внимание, в частности, принимаются радикалы гетероциклов из следующих групп: пирролидин (A); пиперидин (B); тетрагидроизохинолин (C); декагидроизохинолин (D); октагидроиндол (E); октагидроциклопента (b)-пиррол (F); 2-аза-бицикло (2.2.2)-октан (G); 2-азабицикло(2.2.1)-гептан (H); 2-азаспиро (4.5)-декан (I); 2-азаспиро (4.4)-нонан (J); спиро((бицикло(2.2.1)-гептан)-2.3-пирролидин) (K); спиро((бицикло(2.2.2)октан)-2,3-пирролидин) (L); 2-азатрициикло(4.3.0.1^6,9)-декан (M); декагидроциклогепта(b)пиррол (N); октагидроизоиндол (O); октагидроциклопента (c) пиррол (P); 2,3,3a,4,5,7a-гексагидроиндол (O); тетрагидротиазол (P); 2-азабицикло (3.1.0)гексан (S); изоксазолин (T); пиразолидин (U); гидроксипролин (V); которые все при необходимости могут быть замещены.

Лежащие в основе перечисленных выше радикалов гетероциклы известны, например, из выложенных заявок США NN 4344949, 4374847, 4350704, европейских выложенных заявок NN 50800, 31741, 51020, 49658, 49605, 29488, 46953, 52870, 271865, выложенных заявок ФРГ NN 3226768, 3151690, 3210496, 3211397, 3211676, 3227055, 3242151, 3246503 и 3246757.

Кроме того, некоторые из этих гетероциклов предлагаются в выложенной заявке ФРГ N 3818850.3.

Если в отдельном случае не указано ничего иного, алкил может иметь прямую или разветвленную цепь атомов. Вышесказанное справедливо и для таких радикалов, как, например, алкокси, аралкил или алканоил.

(C₂-C₁₂)-арил означает предпочтительно фенил, нафтил или бифенил. Соответственно можно формулировать производные радикалы, как, например, арилокси, аралкил или ароил.

Галоген предназначен для обозначения фтора, хлора, брома или иода, предпочтительно хлора.

В качестве солей в расчет принимаются, в частности, соли щелочных металлов или соли щелочноземельных металлов, соли с физиологически усваиваемыми аминами и соли с неорганическими или органическими кислотами, как, например, соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, фосфорная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, лимонная кислота, винная кислота, уксусная кислота.

Примерами в высшей степени предпочтительных пептидов формулы I являются H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH, H-(D)-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH, H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-PPhe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH, H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH, H-(D)-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.

Изобретение касается способа получения пептидов формулы I, который отличается тем, что a) фрагмент с С-концевой свободной карбоксильной группой или его активированную производную вводят во взаимодействие с соответствующим фрагментом с N-концевой свободной аминогруппой, или b) постепенно создают структуру пептида, в полученном в соответствии с (а) или (b) соединении отщепляют при необходимости одну или несколько защитных групп, временно введенных для защиты других функций, и полученные таким образом соединения формулы I при необходимости переводят в их физиологически усваиваемую соль.

Пептиды изобретения были получены в соответствии с известными методами химии пептидов, смотри, например, Houbenweyl, Methoden der organischen Chemie, Band 15/2, предпочтительно с помощью синтеза в твердой фазе, как например, описано B. Merrifield, J. Am. Chem. Soc. 85, 2149 (1963) или R.C. Sheppard, Int. J. Peptide Protein Res. 21, 188 (1983), или с помощью эквивалентных известных методов. В качестве -аминозащитной группы применяются уретановые защитные группы, как, например, третичная бутилоксикарбонильная (Boc) защитная группа или фторэнилметилоксикарбонильная (Fmoc) защитная группа. Если для предотвращения побочных реакций или для синтеза специальных пептидов необходимо, то функциональные группы в боковой цепи аминокислот дополнительно защищены с помощью соответствующих защитных групп (см. например, T.W. Greene, "Protective Sroups in Organie Synthesis"), причем в первую очередь используются Arg(Tos), Arg(Mts), Arg(Mir), Arg(PMC), Asp(OBzl), Asp(OBut), Cys (4-MeBzl), Cys(Acm), Cys(SBut), Glu(OBzl), Glu(OBut), His(Tos), His(Fmoc), His(Dnp), His(Trt), Lys(Cl-z), Lys(Boc), Met(O), Ser(But), Ser(Bzl), Thi(Bzl), Thr(But), Trp(Mts), Trp(CHO), Tyr(Bzl) или Tyr(But).

Синтез твердой фазы начинается на C-концевом конце пептида сочетанием защищенной аминокислоты с соответствующей смолой. Подобного рода исходные материалы могут быть получены путем связывания защищенной аминокислоты с модифицированной с помощью хлорметильной группы, гидроксиметильной группы, бензгидриламиногруппы (BHA), метилбензгидриламиногруппы (MBHA) полистирольной или полиакриламидной смолой с помощью эфирной или амидной связи. Использованные в качестве несущего материала смолы могут быть приобретены коммерческим путем. BHA- и MBHA смолы используются обычно тогда, когда синтезированный пептид на углеродном терминале должен содержать свободную амидную группу. Если пептид должен содержать на C-терминальном конце вторичную амидную группу, применяется хлорметильная или гидроксиметильная смола и отщепление осуществляется с помощью соответствующих аминов. Если, например, хотят получить этиламид, пептид может быть отщеплен от смолы с помощью этиламина, причем отщепление защитной группы боковой цепи осуществляется в последующем с помощью других соответствующих реактивов. Если в пептиде третичные бутиловые защитные группы аминокислоты должны сохранять боковую цепь, то синтез проводится с помощью Fmoc-защитной группы с целью временного блокирования a -аминогруппы аминокислоты при использовании, например, описанной у R.C. Sheppard, J. Chem. Soc. Chem. Comm. 1982, 587 методики, причем гуанидино-функция аргинина защищается путем протонирования с помощью пиридин-перхлората, а защите других функционализированных в боковой цепи аминокислот осуществляется с помощью бензильных защитных групп, отщепляемых путем обратимого каталитического гидрирования (A. Felix et al. J. Org. Chem. 13, 4194 (1978)) или с помощью натрия в жидком аммиаке (W. Roberts, J. Am. Chem. Soc. 76, 6203 (1954)).

После отщепления защитной аминогруппы сочлененной со смолой аминокислоты с помощью соответствующего реактива, как например, трифторуксусная кислота в хлористом метилене в случае Boc-защитной группы или 20%-ный раствор пиперидина в диметилформамиде в случае F moc-защитной группы, защищенные в последующем аминокислоты последовательно сочленяются в желаемой последовательности. Промежуточно образующиеся терминально защищенные пептидные смолы перед связыванием с последующей производной аминокислоты деблокируются с помощью описанных выше реактивов.

В качестве реактивов сочетания могут применяться все возможные реактивы активирования, использованные в синтезе пептидов, см. например, Хоубен-Вейл, "Методы органической химии", том 15/2, однако, в частности, карбодиимиды, как, например, N, N'-дициклогексилкарбодиимид или N-этил-N'-(3-диметиламинопропил)карбодиимид. При этом сочетание может проводиться непосредственно путем присоединения производной аминокислоты с помощью реактива активирования и при необходимости с помощью направляющей рацемизацию добавки, как, например, 1-гидросибензотриазол (HOBt)(W. Konig, R. Geier, Chem. Ber. 103, 708 (1970)) или 3-гидрокси-4-оксо-3,4-дигидробензотриазин (HOObt)(W. Konig. R. Geiger, Chem. Ber. 103, 2054 (1970)) к смоле или однако предварительное активирование производной аминокислоты в виде симметричного ангидрида или HOBt- или HOObt-эфира может производиться отдельно и раствор активированной специи в надлежащем растворителе может добавляться к сочетающейся пептидной смоле.

Сочетание или активирование производных аминокислоты с помощью одного из названных выше активирующих реактивов может проводиться в диметилформамиде, N-метилпирролидоне или хлористом метилене или в смеси из перечисленных растворителей. Активированная производная аминокислоты используется обычно с 1,5 и 4-кратным избытком. В случаях, в которых происходит неполное сочетание, реакция сочетания повторяется, не проводя прежде необходимого для сочетания последующей аминокислоты деблокирования аминогруппы пептидной смолы.

Успешное протекание реакции сочетания может проверяться с помощью реакции нингидрина, как, например, описано в источнике E. Kaiser et al. Anal. Biochem. 34 595 (1970)). Синтез может проводиться также автоматизировано, например, с помощью модели синтезирования пептидов 430A фирмы "Апплид Биосистемс", причем могут использоваться или предусмотренные изготовителем оборудования программы синтеза, или также составленные самим использователем программы синтеза. Последние в частности используются при применении защищенных с помощью Fmoc-группы производных аминокислоты.

После синтеза пептидов описанным выше образом пептид может отщепляться от смолы с помощью реактивов, как, например, с помощью жидкого фтористого водорода (предпочтительно при полученных в соответствии с Boc-методом пептидах) или трифторуксусной кислоты (предпочтительно при синтезированных в соответствии с Fmoc-методом пептидах). Эти реактивы отщепляют не только пептид от смолы, но и другие защитные группы боковой цепи производных аминокислоты. Таким образом при использовании BHA- и MBHA-смол получают пептид в виде свободной кислоты. При использовании BHA- или MBHA-смол при расщеплении с помощью фтористого водорода или трифторметансульфокислоты получают пептид в виде амида кислоты. Другие способы получения амидов пептида описаны в заявках на патент ФРГ NN P 37 11 866.8 и P 37 43 620.1. Здесь отщепление амидов пептида от смолы осуществляется путем обработки с помощью используемых обычно в синтезе пептидов среднесильных кислот (например, трифторуксусной кислоты), причем в качестве ловушки катионов добавляются субстанции, как, например, фенол, крезол, триокрезол, анизол, тианизол, этандитиол, диметилсульфид, этилметилсульфид или аналогичные ловушки катионов, обычные в синтезе твердой фазы, по отдельности или в виде смеси двух или нескольких этих вспомогательных средств. При этом трифторуксусная кислота может использоваться также разбавленной соответствующими растворителями, как, например, хлористым метиленом.

Если должны быть сохранены защитные группы третичного бутила или бензильных боковых цепей пептидов, отщепление синтезированного на специально модифицированной смоле подложки пептида производится с помощью 1-процентной трифторуксусной кислоты в хлористом метилене, как, например, описано в источнике R. C. Sheppard. J. Chem. Soc. Chem. Comm. 1982, 587. Если должны быть сохранены отдельные защитной группы третичного бутила или бензильных цепей, то используют соответствующую комбинацию методов синтеза и отщепления.

Для синтеза пептидов с помощью C-терминальной амидной группы или w -амино- или w -гуанидиноалкильной группы также используется описанная Шеппардом смола подложки. После синтеза полностью защищенный в боковой цепи пептид отщепляется от смолы и затем в процессе классического синтеза растворения преобразуется с помощью соответствующего амина, или w -аминоалкиламина, или w -гуанидиноалкиламина, причем при необходимости имеющиеся другие функциональные группы могут быть временно защищены известным образом.

Другой способ получения пептидов с помощью w -аминоалкильной группы описан в заявке на патент ФРГ N P 36 35 670.0.

Пептиды изобретения были синтезированы преимущественно с использованием техники реакций в твердой фазе в соответствии с двумя основными тактиками защитных групп.

Синтез осуществлялся с помощью автоматической модели синтезирования пептидов 430A фирмы "Апплид Биосистемс" с использованием Boc- или Fmoc-защитных групп для временного блокирования a -аминогруппы.

При использовании Boc-защитной группы для синтеза были использованы заранее запрограммированные изготовителем оборудования циклы синтеза.

Синтез пептидов со свободной карбоксильной группой на C-терминальном конце осуществлялся на функционированной с помощью соответствующей Boc-аминокислоты-4-(гидроксиметил)фенилацетамидометилполистирольной смоле (R. B. Merrifield, J. Org. Chem. 43, 2845 (1978)) фирмы "Апплид Биосистемс". Для получения пептидов была использована MBHA-смола той же фирмы.

В качестве активирующих реактивов служили N,N'-дициклогексилкарбодиимид или N,N'-диизопропилкарбодиимид. Активирование осуществлялось в виде симметричного ангидрида, HOBt-эфира или HOObt-эфира в CH₂C₂, CH₂C₂-DMF-смесях или в NMP. Для сочетания были использованы 2 - 4 эквивалента активированной производной аминокислоты. Для случаев, в которых сочетание протекало неполностью, реакция повторялась.

При использовании Fmoc-защитной группы для временной защиты a -аминогруппы для синтеза с помощью автоматической модели синтезирования пептидов 430A фирмы "Апплид Биосистемс" были введены собственные программы синтезирования. Синтез осуществлялся на p-бензилоксибензилспиртовой смоле (S. Wang. J. Am. Chem. Soc. 95, 1328 (1973)) фирмы "Бахем", которая была этерифицированая в соответствии с известным методом (E. Atherton et al. J. C. S. Chem. Com.m. 1981, 336) с помощью соответствующей аминокислоты. Активирование производных аминокислоты в виде HOBt или HOObt эфира осуществлялось непосредственно в поставленных изготовителем оборудования патронах с аминокислотой путем добавления раствора диизопропилкарбодиимида в диметилформамиде к полученной ранее смеси из производной аминокислоты HOBt или HOObt. Точно также могут использоваться в субстанции полученные Fmoc-аминокислота-OObt сложные эфиры, как они описаны в европейской заявке на патент N 87107634.5. Отщепление Fmoc-защитной группы осуществлялось с помощью 20%-ного раствора пиперидина в диметиформамиде в реакционном сосуде. Используемый избыток реактивной производной аминокислоты составлял 1,5 -2,5 эквивалента. Если сочетание было неполным, оно, как и при Boc-методе, повторялось.

Пептиды в соответствии с изобретением по отдельности или в комбинации обладают брадикинин-антагонистическим воздействием, которое можно испытать в различных моделях (смотри: Handbook of Exp. Pharmacol. Vol. 25, Springer verlag. 1970, S. 53 55), так например, на изолированной крысиной матке, на подвздошной кишке морской свинки или на изолированной легочной артерии морской свинки.

Для испытания пептидов в соответствии с изобретением на изолированной легочной артерии свинки (Dunkin Hartley) весом 400 450 г умерщвляются ударом в затылок.

Грудная клетка вскрывается и осторожно извлекается легочная артерия. Окружающая ткань тщательно удаляется и легочная артерия разрезается спирально под углом 45^o.

Полосу сосудов длиной 2,5 см и шириной 3 4 фиксируют в органической ванне емкостью 10 мл, которая заполнена раствором.

Состав раствора, ммол/л NaCl 154 KCl 5,6 CaCl₂ 1,9 NaHCO₃ 2,4 Глюкоза 5,0 Через раствор барботируют смесь из 95% O₂ и 5% CO₂ и нагревают до 37^oC. Водородный показатель составляет 7,4, предварительная нагрузка на полосу сосудов составляет 1,0 г.

Изотонические изменения сокращения обнаруживаются с помощью рычажной приставки и высокочастотного модема (измерители перемещений) Хуго Закса и регистрируются на компенсографе (BEC, Coerz MetrawattSE 460).

После установления равновесия в течение 1 ч начинается опыт. После того как полосы сосудов достигли своей максимальной чувствительности по отношению к 2 10^-7 мол/л брадиканина (брадиканин приводит к сокращению полос сосудов) заставляют пептиды в дозах 5 10^-8 5 10^-5 мол/л воздействовать соответственно в течение 10 мин и после нового добавления брадикинина сравнивается снижение эффективности брадикинина по сравнению с контрольной пробой.

Для распознавания частично агонистического эффекта пептиды используются в дозах 1 10^-5 1 10^-3 мол/л.

Рассчитанные по графикам воздействия доз IC₅₀ величины пептидов в соответствии с изобретением приведены в табл. I.

Терапевтическое использование пептидов в соответствии с изобретением охватывает все патологические состояния, которые вызываются или поддерживаются брадикинином и родственными брадикинину пептидами. Это охватывает в том числе травмы, как, например, раны, ожоги, сыпи, эритемы, отеки, ангину, артриты, астму, аллергические состояния, риниты, шок, воспаления, низкое кровяное давление, боль, зуд и измененную моторику спермы.

Поэтому изобретение касается также применения пептидов формулы I в качестве лечебных средств в фармацевтических препаратах, которые содержат эти соединения.

Фармацевтические препараты содержат эффективное количество биологически активного вещества формулы I, по отдельности или в комбинации, совместно с неорганической или органической фармацевтически применимой основой лекарственных препаратов.

Применение может осуществляться энтерально, парентерально, как, например, подкожно, внутримышечно или внутривенно, подъязычно, аппликационно, через нос, ректально, внутривлагалищно или посредством ингаляции. Дозирование биологически активного вещества зависит от вида теплокровных, веса тела, возраста и вида применения.

Фармацевтические препараты изготавливаются известным способом в виде растворов, смесей, гранул, драже.

Для оральной формы применения или для нанесения на слизистые оболочки активные соединения смешиваются с обычными для этого добавочными веществами, как, например, вещества-носители, стабилизаторы или инертные растворяющие средства и с помощью обычных методов приводятся в надлежащие формы введения, как, например, таблетки, драже, капсулы, водные, спиртовые или масляные суспензии или водные, спиртовые или масляные растворы. В качестве инертных носителей могут использоваться, например, гуммиарабик, магнезия, карбонат магния, фосфат калия, молочный сахар, глюкоза, стеарилфумарат магния или крахмал, в частности, кукурузный крахмал. При этом изготовление может осуществляться как в виде сухого, так и в виде влажного гранулята. В качестве масляных веществ-носителей или растворителей во внимание принимаются, например, подсолнечное масло и рыбий жир.

Препарат для локального применения может существовать в виде водного или масляного раствора, крема, эмульсии или желе, мази или жирной мази или, если возможно, в форме водяной пыли, причем при необходимости связывание может быть улучшено путем добавления полимера.

Для внутриносовой формы применения соединения смешиваются с обычными для этого добавочными веществами, как, например, стабилизаторами или инертными растворителями, и с помощью обычных методов переводятся в надлежащую форму введения, как, например, водные, масляные или спиртовые суспензии или водные, спиртовые или жирные растворы. К водным внутриносовым препаратам могут добавляться хелатообразователь, этилендиамин- N, N, N', N'- тетрауксусная кислота, лимонная кислота, винная кислота или их соли. Применение носовых растворов может осуществляться с помощью дозаторов-распылителей или в виде носовых капель с повышающей вязкостью составляющей или носовых гелей, или носовых кремов.

Для ингаляционного применения могут использоваться распылители или упаковки со сжатым газом с использованием инертных несущих газов.

Для внутривенного, подкожного, аппликационного или внутрикожного применения активные соединения или их физиологически усваиваемые соли при желании с фармацевтически обычными вспомогательными веществами, например, для изотнирования или установления водородного показателя, а также с агентами растворения, эмульгаторами или другими вспомогательными веществами вносятся в раствор, суспензию или эмульсию.

По причине коротких периодов полураспада некоторых из описанных лекарственных веществ в жидкостях организма целесообразно использование инъецируемых замедлителей. В качестве лекарственных форм могут применяться, например, маслянистые кристаллические суспензии, микрокапсулы, палочки или имплантаты, причем последние могут быть построены из переносимых тканями полимеров, в частности биологически разлагаемых полимеров, как, например, на основе сополимеров полимолочной и полигликолевой кислоты или человеческого альбумина.

Надлежащим диапазоном доз для локальных и ингаляционных форм применения являются растворы с концентрацией 0,01 5 мг/мл, при систематических формах применения пригодны концентрации 0,01 10 мг/кг.

Использование для аминокислот сокращения соответствуют обычному в химии пептидов трехбуквенному коду, как он описан в источнике Europ.J.Biochem. 138, 9 (1984). Другие использованные сокращения приведены ниже.

Acm ацетамидометил -Ahx e -аминогексаноил Aoc цис, эндо-2-азабицикло(3.3.0)октан-3-S-карбонил Boc третичный бутилоксикарбонил But третичный бутил Bzl бензил Cl-Z 4-хлор-бензилоксикарбонил DMF диметилформамид Dnp 2,4-динитрофенил Fmoc 9-фторэнилметилоксикарбонил Me метил 4-Mebzl 4-метилбензил Mtr 4-метокси-2,3,6-триметилфенилсульфонил Mts мезитилен-2-сульфонил NMP -N-метилпирролидин Oic цис-эндо-октагидроиндол-2-карбонил Opr изоксазолидин-3-илкарбонил Pmc 2,2,5,7,8-пентаметилхроман-6-сульфонил TFA трифторуксусная кислота Tcs 4-метилфенилсульфонил Thia 2-тиэнилаланил Tic 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-илкарбонил Trt тритил.

Нижеследующие примеры должны пояснить предпочтительные методы для синтеза твердой фазы пептидов в соответствии с изобретением, не ограничивая этим изобретения.

Использовали следующие производные аминокислоты: Fmoc-Arg(Mtr)-OH, Boc(D)-Arg-OH, Fmoc-Arg(Pmc)-OH, Fmoc-Hyp-OH, Fmoc-Pro-OObt, Fmoc-Gly-OObt, Fmoc-Phe-OObt, Fmoc-Ser(tBu)-OObt, Fmoc-(D)-Tic-OH, Fmoc-Gln-OH, Fmoc-Aoc-OH, Fmoc-Thia-OH, Fmoc-Fmoc-Opr-OH, Fmoc-(D)-Asn-OH, Fmoc- -Ala-OH, Fmoc-Oic-OH.

Пример 1 Соединение H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tis-Phe-Arg-OH постепенно было построено с помощью модели синтезирования пептидов 430А фирмы "Апплид Биосистемс" с использование Fmoc-метода на этерифицированной с помощью Fmoc-Arg(Mtr)-OH p-бензилоксибензилспиртовой смоле фирмы "Новабиохем" (Нагрузка 0,5 ммоль/г смолы). Был использован 1 г смолы и синтез проводился с помощью модифицированной для Fmoc-метода программы синтеза.

В патрон синтезатора поместили 1 ммоль производной аминокислоты со свободной карбоксильной группой вместе с 0,95 ммолями HOObt. Предварительное активирование этих аминокислот осуществлялось непосредственно в патроне путем растворения в 4 мл диметилформамида и добавления 2 мл 0,55 молярного раствора диизопропилкарбодиимида в диметилформамиде.

Сложные HOObt -эфиры других аминокислот были растворены в 6 мл N -метилпирролидина и затем также как и предварительно активированные на нужном месте аминокислоты сочленены с деблокированной прежде с помощью 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде смолой. После законченного синтеза пептид при однвременном удалении защитник групп боковых цепей с помощью трифторуксусной кислоты при использовании тиоанизола и этандитиола в качестве катионных ловушек был отщеплен от смолы. Полученный после сливания трифторуксусной кислоты остаток был многократно дигерирован с помощью сложного эфира уксусной кислоты и центрифугирования. Оставшийся остаток был хроматографирован на Сефадексе LH 20 с помощью 10%-ной уксусной кислоты. Содержащие чистый пептид фракции были объединены и высушены вымораживанием.

MS (FAB) 1294 (M + H).

Пептиды нижеследующих примеров 2 24 были приготовлены и очищены по аналогии с примером 1.

Пример 2.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-(D)-Ser-(D)-Tic-Phe-Arg-OH.

MS(FAB) 1294 (M + H).

Пример 3.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Thia-Arg-OH.

MS(FAB) 1306 (M + H).

Пример 4.

H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-Arg-OH.

MS(FAB) 1294 (M + H).

Пример 5.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Gln-(D)-Tic-Phe-Arg-OH.

MS(FAB) 1335 (M + H).

Пример 6.

H(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.

MS(FAB) 1224 (M + H).

Пример 7.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Trp-(D)-Tic-Phe-Arg-OH.

MS(FAB) 1393 (M + H).

Пример 8.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thip-Ser-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.

MS(FAB) 1250 (M + H).

Пример 9.

H(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-(D)-Asn-(D)-Tic-Thia-Arg-OH.

MS(FAB) 1333 (M + H).

Пример 10.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Opr-(D)-Tic-Thia-Arg-OH.

MS(FAB) 1301 (M + H).

Пример 11.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-(D)-Gln-(D)-Tic-Thia-Arg-OH.

MS(FAB) 1347 (M + H).

Пример 12.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-Gly-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.

MS(FAB) 1307 (M + H).

Пример 13.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thip-Ser-(D)-Tic-Pro-Phe-OH.

MS(FAB) 1241 (M + H).

Пример 14.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Phe-Arg-OH.

MS(FAB) 1397 (M + H).

Пример 15.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser- бета-Ala-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.

MS(FAB) 1321 (M + H).

Пример 16.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Gly-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.

MS(FAB) 1220 (M + H).

Пример 17.

H-(D)-Arg-Arg-Aoc-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Thia-Arg-OH.

MS(FAB) 1330 (M + H).

Пример 18.

H-(D)-Apg-Arg-Pro-Aoc-Gly-Thia-Ser + (D)-Thia-Arg-OH.

MS(FAB) 1330 (M + H).

Пример 19.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1290 (M + H).

Пример 20.

H-(D)-Arg-Arg-Opr-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.

MS(FAB) 1236 (M + H).

Пример 21.

H-(D)-Arg-Arg-Pro-Opr-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.

MS(FAB) 1236 (M + H).

Пример 22.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Opr-Arg-OH.

MS(FAB) 1252 (M + H).

Пример 23.

H-(D)-Agg-(D)-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB): 1290 (M + H).

Пример 24.

H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Agr-OH.

MS(FAB) 1290 (M + H).

Примеры 25 27.

H-(D)-Arg-Arg(Mtr)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-Arg-OH.

и H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-Arg(Mtr)-OH и H-(D)-Arg-Agr(Mtr)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-Arg(Mtr)-OH приготавливаются по аналогии с примером 1, причем отщепление защитных групп боковых цепей и пептида от смолы с помощью трифторуксусуной кислоты было ограничено 30 мин при комнатной температуре. Затем при выбранных таким образом условиях происходит отщепление Mtr-защитной группы на аргинине, которым можно пренебречь. Частично деблокированные пептиды отделяются с помощью хроматографии на материале обратимой фазы и очищаются.

25: H-(D)-Arg-arg(Mtr)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-Arg-OH MS(FAB): 1506 (M + H).

26: H-(D)-Arg-Arg(Mtr)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-Arg(Mtr)-OH MS(FAB):1718 (M+H).

27: H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Dly-Ser-(D)-Tic-Phe-Arg(Mtr)-OH MS(FAB):1506 (M+H).

Пептиды нижеследующих примеров 28 31 были приготовлены и очищены по аналогии с примерами 25 -27.

Пример 28.

H-(D)-Arg-Arg(Mtr)-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(Pro-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.

MS(FAB) 1462 (M + H).

Пример 29.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Arg(Mtr)-OH.

MS(FAB) 1462 (M + H).

Пример 30.

H-(D)-Arg-Arg(Mtr)-Hup-Pro-Dly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Phe-OH.

MS(FAB): 1453 (M + H).

Пример 31.

H(D)-Arg-Arg(Mtr)-Hup-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB): 1502 (M + H).

Пример 32.

H-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-NH-(CH₂)₄- NH₂.

Синтез пептида осуществляется на 1 г аминометиловой смолы, которая была модифицирована с помощью описанной в европейской выложенной заявке N 264802 связывающей группы типа с использованием сложных эфиров Fmoc-аминокислоты-OObt с помощью автоматического синтезатора пептидов (модель 430А фирмы "Апплид Биосистемс") и собственных модифицированных программ синтеза. Для этого поместили в поставленный изготовителем патрон 1 ммоль соответствующей производной аминокислоты, вместе с 0,95 ммоля в патрон были отвешены Fmoc Arg(Mtr)-OH, Fmoc-Hyp-OH и Fmoc-(D)= Tic-OH. Предварительное активирование требуемого места молекулы этих аминокислот происходило непосредственно в патроне путем растворения в 4 мл диметилформамида и добавления 2 мл 0,55-молярного раствора диизопропилкарбодиимида в диметилформамида. Сложные HOObt-эфиры других аминокислот были растворены в 6 мл N-метилпирролидина и затем точно также как и активированные в требуемом месте молекулы аминокислоты были дважды сочленены. После закончившегося синтеза от смолы был отщеплен пептид -4- амино-бутиламид с одновременным удалением защитных групп боковых цепей с помощью трифторуксусной кислоты, которая в качестве катионных ловушек содержала тиоанизол и m-крезол. Полученный после сливания трифторуксусной кислоты остаток был многократно дигерирован с помощью сложного эфира уксусной кислоты и центрифугирован. Оставшийся сырой пептид был хроматографирован на Сепгадексе C25 с помощью однонормальной уксусной кислоты. Содержащие чистый пептид фракции были объединены и высушены вымораживанием.

По аналогам с примером 32 были получены соединения примеров 33-35.

Пример 33.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe -NH-(CH₂)₄-NH₂.

Пример 34.

HOOC-(CH₂)₂-CO-Agr-Hyp-Pro -Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-NH-(CH₂)₄-NH₂.

Пример 35.

NOOC-(CH)₂)₂-CO-(D)-Arg-Hya-Pro -Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-NH-(CH₂)₄-NH₂. Примеры 36-161 были синтезированы в соответствии с описанным в примере 1 методом.

Пример 36.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Ly-Thia-Ser-Gly-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.

MS(FAB):1307(M+H).

Пример 37.

H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-Gly-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.

MS(FAB):1307(M+H).

Пример 38.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Phe-OH.

MS(FAB):1241(M+H).

Пример 39.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser- -Ala-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB):1361(M+H).

Пример 40.

H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser- b -Ala-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB):1361(M+H).

Пример 41.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Phe-Arg-OH.

MS(FAB):1397(M+H).

Пример 42.

H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Phe-Arg-OH.

MS(FAB):1397(M+H).

Пример 43.

H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Gly-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB):1260(M+H).

Пример 44.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Gly-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB):1260(M+H).

Пример 45.

H-(D)-Arg-(D)-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB):1290(M+H).

Пример 46.

H-(D)-Arg-(D)-Arg-Pho-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB):1290(M+H).

Пример 47.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Cly-Tnia-Ser-(D)-Tic-Tic-Arg-OH.

MS(FAB): 1312 (M + H).

Пример 48.

H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Tnia-Ser-(D)-Tic-Tic-Arg-OH.

MS(FAB) 1312 (M + H).

Пример 49.

H-(D)-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1274 (M + H).

Пример 50.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1203 (M + H).

Пример 51.

H-(D)-Agr-Agr-Hyp-Pro-Gly-Aoc-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1274 (M + H).

Пример 52.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia- b -Ala-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1274 (M + H).

Пример 53.

H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia- b -Ala-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1274 (M + H).

Пример 54.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Asp-Ser-(D)-Tic-Aos-Arg-OH.

MS(FAB) 1252 (M + H).

Пример 55.

H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Asp-Ser-(D)-Tic-Aoc-Apg-OH.

MS(FAB) 1252 (M + H).

Пример 56.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Trp-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1323,7 (M + H).

Пример 57, H-(D)-Tyr-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1297,7 (M + H).

Пример 58.

H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-(D)-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1304,6 (M + H).

Пример 59.

H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB): 11304,6 (M + H).

Пример 60.

H-(D)-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1289 (M + H).

Пример 61.

H-(D)-Arg-Lys-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aos-Agr-OH.

MS(FAB) 1262 (M + H).

Пример 62.

H-(D)-Arg-Lys-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1276 (M + H.

Пример 63.

H-(D)-Arg-Lys-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1260 (M + H).

Пример 64.

H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1298 (M + H).

Пример 65.

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Cly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1298 (M + H).

Пример 66.

H-(D)-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1282 (M + H).

Пример 67.

H-(D)-Arg-Arg(NO₂)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 329,7 (M + H).

Пример 68.

H-(D)-Arg-Arg(NO₂)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1343 (M + H).

Пример 69.

H-(D)-Arg-Arg(NO₂)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1327 (M + H).

Пример 70.

H-(D)-Arg-Arg(NO₂)-Pro-Pro-Gly-Tnia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1333 (M + H).

Пример 71.

H-(D)-Arg-Arg(NO₂)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1349 (M + H).

Пример 72.

H-Arg(ToS)-Pro-Hyp-Gly-Tnia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1302 (M + H).

Пример 73.

H-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1142 (M + H).

Пример 74.

H-Lys(-CO-NH-C₆H₅)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1233 (M + H).

Пример 75.

H-Arg(ToS)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1296 (M + H).

Пример 76.

H-Lys(никотиноил)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1219 (M + H).

Пример 77.

H-Arg(ToS)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1282 (M + H).

Пример 78.

Ac-Arg(ToS)-Pro-Hyp-Gly-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1324 (M + H).

Пример 79.

H-D-Arg-Arg(ToS)-Pho-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1438 (M + H).

Пример 80.

H-Arg(ToS)-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1302 (M + H).

Пример 81.

H-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1142 (M + H).

Пример 82.

H-Lys(-CO-NH-C₆H₅)-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1233 (M + H).

Пример 83.

H-Arg(ToS)-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1296 (M + H).

Пример 84.

H-Lys(никотиноил)-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1219 (M + H).

Пример 85.

H-Arg(ToS)-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1282 (M + H).

Пример 86.

Ac-Arg(ToS)-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1324 (M + H).

Пример 87.

H-D-Arg-Arg(ToS)-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1438 (M + H).

Пример 88.

H-Arg(ToS)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1286 (M + H).

Пример 89.

H-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-(OH).

MS(FAB) 1126 (M + H).

Пример 90.

H-Lys(-CO-NH-C₆H₅)-Pro-Pro-Gly -Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1217 (M + H).

Пример 91.

H-Arg(ToS)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1280 (M + H).

Пример 92.

H-Lys(никотиноил)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1203 (M + H).

Пример 93.

H-Arg(ToS)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1266 (M + H).

Пример 94.

Ac-Arg(ToS)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1308 (M + H).

Пример 95.

H-D-Arg-Arg(ToS)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1422 (M + H).

Пример 96.

H-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1148 (M + H).

Пример 97.

H-Lys(-CO-NH-C₆H₅)-Pro-Hyp -Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1239 (M + H).

Пример 98.

H-Lys(никотиноил)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1225 (M + H).

Пример 99.

H-Arg(ToS)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1288 (M + H).

Пример 100.

Ac-Arg(ToS)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1330 (M + H).

Пример 101.

H-D-Arg-Arg(ToS)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1444 (M + H).

Пример 102.

H-Arg-Hyp-Pro-Glu-Thia-Ser-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1148 (M + H).

Пример 103.

H-Lys(-CO-NH-C₆H₅)-Hyp-Pro -Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1239 (M + H).

Пример 104.

H-Lys(никотиноил)-Hap-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1225 (M + H).

Пример 105.

H-ARg(ToS)-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aos-Arg-OH.

MS(FAB) 1288 (M + H).

Пример 106.

Ac-Arg(ToS)-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1330 (M + H).

Пример 107.

H-D-Arg-Arg(ToS)-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1440 (M + H).

Пример 108.

H-Lys(-CO-EH-C₆H₅)-Pro-Pro-Gly -Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1225 (M + H).

Пример 109.

H-Lys(никотиноил)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1209 (M + H).

Пример 110.

H-Arg(ToS)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1272 (M + H).

Пример 111.

Ac-Arg(ToS)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB): 1314 (M + H).

Пример 112.

H-D-Arg-Arg(ToS)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.

MS(FAB) 1428 (M + H).

Пример 113.

H-D-Arg-Lys (никотиноил)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1365 (M + H).

Пример 114.

H-D-Arg-Lys(-CO-NH-C₆H₅) -Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1379 (M + H).

Пример 115.

H-D-Arg-Arg(ToS)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1442 (M + H).

Пример 116.

H-Lys-Lys-(никотиноил)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1337 (M + H).

Пример 117.

H-Lys-Lys(-CO-NH-C₆H₅)-Pro-Pro -Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1351 (M + H).

Пример 118.

H-Lys-Arg(ToS)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1414 (M + H).

Пример 119.

H-D-Arg-Lys(никотиноил)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1381 (M + H).

Пример 120.

H-D-Arg-Lys-(CO-NH-C₆H₅)-Pro-Hyp -Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1395 (M + H).

Пример 121.

H-D-Arg-Arg(ToS)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1458 (M + H).

Пример 122.

H-Lys-Lys(-CO-NH-C₆H₅)-Pro-Hyp -Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1367 (M + H).

Пример 123.

H-Lys-Lys(никотиноил)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1353 (M + H).

Пример 124.

H-Lys-Arg(ToS)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1430 (M + H).

Пример 125.

H-D-Arg-Lys(никотиноил)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

MS(FAB) 1359 (M + H).

Пример 126.

H-D-Arg-Lys(-CO-NH-C₆H₅