Халконовые кумарины

Халконовые кумарины

Реферат

Настоящее изобретение относится к новому классу соединений, аналогичных по структуре некоторым встречающимся в природе и синтетическим халконам, а также к способам получения таких соединений и к их фармацевтическому применению.

Соединение 1,3-дифенил-2-пропен-1-он известно под ненаучным названием "халкон". Многие встречающиеся в природе флавоноиды по структуре аналогичны халкону и обозначаются общим термином "халконы". В последнее время показано, что некоторые флавоноиды, в том числе те, которые называются также халконами, обладают противораковым действием (Cancer Research 48, 5754, 1988) и химиопрофилактическим действием на некоторые опухоли (J.Nat.Prod. 53, 23, 1990).

В частности, показано, что кверцетин - повсеместно обнаруживаемый в растениях флавоноид - воздействует на пролиферацию клеток лейкемии человека (Br.J.Haematology, 75, 489, 1990) и на другие линии клеток (Br.J.Cancer, 62, 94, 942, 1990; Int. J.Cancer, 46, 112, 1990; Gynaecologic Oncology, 45, 13, 1992) и обладает синергическим эффектом в сочетании с обычными лекарственными средствами.

Кроме того, обнаружено, что некоторые природные или синтетические халконы, описанные в нашей международной заявке WO 91/17749 и в международной заявке WO 96/19209 (Baylor College of Medicine), обладают значительным антипролиферативным действием по отношению к различным культурам клеток.

Хотя механизм антипролиферативного действия флавоноидов и халконов в настоящее время неизвестен, считается, что он связан со взаимодействием этих соединений с рецепторами эстрогена типа II.

Действие этих соединений класса полифенолов in vivo, несомненно, еще более сложно. Все эти соединения характеризуются, как правило, почти полной нерастворимостью в воде и крайне низкой биодоступностью in vivo. связанной с быстрым метаболизмом фенолов и сильно выраженным сродством к жирам и протеинам.

Ныне неожиданно обнаружено, что некоторые новые халконы, производные халконов и аналоги халконов и, в частности, соединения, в которых фенильный цикл в положении 1 замещен или заменен циклами, содержащими один или несколько гетероатомов, обладают повышенным антипролиферативным действием в отношении как чувствительных раковых клеток, так и клеток, устойчивых к обычным химиотерапевтическим средствам, в том числе к противоопухолевым лекарственным средствам последнего поколения, паклитакселу и доцетакселу.

Таким образом, в соответствии с одним аспектом настоящего изобретения, предлагается соединение общей формулы (I):

или его фармацевтически приемлемая соль либо сольват, где:

Ar представляет собой

замещенную или незамещенную (предпочтительно ароматическую) карбоциклическую или гетероциклическую группу, причем упомянутая карбоциклическая или гетероциклическая группа содержит в циклической структуре от 5 атомов до 10 атомов, причем упомянутые атомы в циклической структуре образуют один или два цикла, где цикл или каждый из циклов содержит 5 атомов или 6 атомов, любые гетероатомы выбраны из группы, состоящей из N, О и S, а любые заместители при группе Ar выбраны независимо друг от друга из группы, состоящей из:

(а) Cl, (b) Br, (с) F, (d) ОН, (е) NO₂, (f) CF₃, (g) низший алкил C₁-C₄ (в частности, СН₃), (h) SCH₃, (i) NHCOCH₃, (j) N(R⁶)(R⁸), где R⁶ и R⁸ одинаковы или различны и каждый из них представляет собой Н или низший алкил C₁-C₄, (k) OR¹⁰, где R¹⁰ представляет собой насыщенный или ненасыщенный низший углеводородный радикал C₁-C₆ нормального или разветвленного строения, который может быть незамещенным или замещенным одним, двумя или тремя заместителями, выбранными из следующих:

Cl, Br, F, OMe, NO₂ и CF₃,

и (1) -OCOR¹¹, где R¹¹ представляет собой насыщенный или ненасыщенный низший углеводородный радикал C₁-C₆ неразветвленного или разветвленного строения или фенил;

R представляет собой

ОН, OR¹⁰ или OCOR¹¹, где R¹⁰ и R¹¹ соответствуют вышеприведенным определениям; и

R¹ представляет собой Н или низший углеводородный радикал C₁-C₆ нормального или разветвленного строения, который может быть незамещенным или замещенным одним, двумя или тремя заместителями, выбранными из Cl, Br, F, OMe, NO₂ и CF₃,

при условии, что:

(1) если R¹=СН₃ и R=OH, то

группа Ar не может представлять собой: 4-пиридил, 4-метилфенил,

3-нитрофенил, 3-метокси-4-этоксифенил, 3-метокси-4-n-бутоксифенил,

4-(N,N-диметиламино)фенил, 2-гидрокси-3,5-дибромфенил, 2-гидрокси-5-метилфенил, 4-хлорфенил, фенил, 3-метоксифенил, 4-метоксифенил или 3,4-диметоксифенил;

(2) если R¹=СН₃ и R=ОСОСН₃, то

группа Ar не может представлять собой: фенил, 4-метоксифенил, 3,4-диметоксифенил, 4-(N,N-диметиламино)фенил, 3-метокси-4-ацетоксифенил, 3,4,5-триметоксифенил или 2-хлорфенил;

(3) если R¹=фенил или Н и R=ОСН₃ или ОН, то группа Ar не может представлять собой 4-метоксифенил; и

(4) если R¹=СН₃ и R=ОСН₃ или ОН, то группа Ar не может представлять собой 4-метоксифенил или 3,4-диметоксифенил.

К предпочтительному классу соединений формулы (I) относятся соединения, в которых Ar - замещенная или незамещенная (предпочтительно ароматическая) гетероциклическая группа, содержащая в циклической структуре от 5 атомов до 10 атомов, причем упомянутые атомы в циклической структуре образуют один или два цикла, где цикл или каждый из циклов содержит 5 атомов или 6 атомов, любые гетероатомы выбраны из группы, состоящей из N, О и S, а любые заместители выбраны из группы, в состав которой входят:

(а) Cl, (b) Br, (с) F, (d) ОН, (е) NO₂, (f) CF₃, (g) низший алкил C₁-C₄ (в частности, СН₃), (h) SCH₃, (i) NHCOCH₃, (j) N(R⁶)(R⁸), где R⁶ и R⁸ одинаковы или различны и каждый из них представляет собой Н или низший алкил C₁-C₄ (предпочтительно R⁶ и R⁸ одинаковы или различны и каждый из них представляет собой Н или низший алкил C₁-C₄), (k) OR¹⁰, где R¹⁰ представляет собой насыщенный или ненасыщенный низший углеводородный радикал C₁-C₆ нормального или разветвленного строения, который может быть незамещенным или замещенным одним, двумя или тремя заместителями, выбранными из следующих:

Cl, Br, F, ОМе, NO₂ и CF₃,

и (1) -OCOR¹¹, где R¹¹ представляет собой насыщенный или ненасыщенный низший углеводородный радикал С₁-C₆ нормального или разветвленного строения или фенил.

В предпочтительном классе соединений Ar содержит основную азотсодержащую функцию, например, обусловленную присутствием гетероциклического атома азота в цикле, или Ar может нести заместитель, содержащий основный атом азота, такой как аминогруппа или ацетамидогруппа. Таким образом, предпочтительной группой Ar является замещенная или незамещенная (предпочтительно ароматическая) гетероциклическая группа, содержащая в циклической структуре от 5 атомов до 10 атомов, по меньшей мере один из которых является атомом азота, а любой заместитель при цикле соответствует определению, относящемуся к формуле (I). К особо предпочтительным группам Ar относятся пиридил или индолил.

Второй предпочтительной группой соединений формулы (I) являются соединения, в которых Ar - замещенная или незамещенная (предпочтительно ароматическая) карбоциклическая группа, содержащая в циклической структуре от 5 атомов до 10 атомов, причем упомянутые атомы в циклической структуре образуют один или два цикла, где цикл или каждый из циклов содержит 5 атомов или 6 атомов, а любые заместители при группе Ar выбраны независимо друг от друга из группы, в которую входят:

(а) Cl, (b) Br, (с) F, (d) ОН, (е) NO₂, (f) CF₃, (g) низший алкил C₁-C₄ (в частности, СН₃), (h) SCH₃, (i) NHCOCH₃, (j) N(R⁶)(R⁸), где R⁶ и R⁸ одинаковы или различны и каждый из них представляет собой Н или низший алкил C₁-C₄, (k) OR¹⁰, где R¹⁰ представляет собой насыщенный или ненасыщенный низший углеводородный радикал С₁-C₆ нормального или разветвленного строения, который может быть незамещенным или замещенным одним, двумя или тремя заместителями, выбранными из следующих:

Cl, Br, F, ОМе, NO₂ и CF₃,

и (1) -OCOR¹¹, где R¹¹ представляет собой насыщенный или ненасыщенный низший углеводородный радикал С₁-C₆ нормального или разветвленного строения или фенил.

В соединениях формулы (I) любые заместители при группе Ar предпочтительно выбраны из группы, в состав которой входят NHCOCH₃, N(R⁶)(R⁸), OR¹⁰ и -OCOR¹¹, где R⁶, R⁸, R¹⁰ и R¹¹ соответствуют вышеприведенным определениям, относящимся к формуле (I). Предпочтительно каждый из R¹⁰ и R¹¹ - насыщенный или ненасыщенный углеводородный радикал C₁-C₆ нормального или разветвленного строения, в частности, метил, этил, n -пропил или изопропил.

В этом предпочтительном классе соединений Ar предпочтительно замещен одной или несколькими группами OR¹⁰, где R¹⁰ - насыщенный или ненасыщенный низший углеводородный радикал С₁-C₆ нормального или разветвленного строения. Особенно предпочтительной группой R¹⁰ является метил. К особо предпочтительным группам Ar относятся фенил или фенил, замещенный одной, двумя или тремя метоксигруппами.

В предпочтительном классе соединений, где Ar содержит по меньшей мере одну основную азотсодержащую функцию и где Ar является карбоциклической группой, основная азотсодержащая функция обусловлена присутствием карбоциклической группы, несущей по меньшей мере один заместитель, выбранный из группы, состоящей из NHCOCH₃ или N(R⁶)(R⁸), где R⁶ и R⁸ соответствуют определениям, относящимся к формуле (I).

В соединениях формулы (I) R предпочтительно представляет собой ненасыщенный низший углеводородный радикал C₁-C₆ нормального или разветвленного строения. В частности, R может быть ОСН=С(СН₃)2, ОСН₂-СМе=СН₂, ОСН₂СН=СН₂ или ОСН₂C≡СН. Особо предпочтительную группу составляют соединения, в которых Ar выбран из группы, в которую входят фенил, триметоксифенил, 3-пиридил, 4-пиридил и 3-индолил, а R выбран из ОСН=С(СН₃)₂, ОСН₂СМе=СН₂, ОСН₂СН=СН₂ или ОСН₂С≡СН.

В соединениях формулы (I) R¹ предпочтительно представляет собой низший углеводородный радикал С₁-C₆ нормального или разветвленного строения, в частности, метил.

Кроме того, предпочтительной группой соединений в соответствии с настоящим изобретением являются соединения формулы (I), в которых

Ar представляет собой

фенил, который может быть незамещенным или замещенным одним, двумя или тремя заместителями, каждый из которых независимо от других выбран из группы, в которую входят:

Cl, Br, F, ОМе, NO₂, CF₃, низший алкил C₁-C₄ (в частности, СН₃), NMe₂, NEt₂, SCH₃ и NHCOCH₃;

тиенил, 2-фурил, 3-пиридил, 4-пиридил или индолил.

R представляет собой

ОН или OCH₂R¹, где R¹ выбран из -СН=СМе₂, -СМе=СН₂, -СН=СН₂ или -С≡СН.

Подразумевается, что соединения формулы (I), содержащие основную аминную функцию, могут быть превращены в соли кислот с фармакологически приемлемыми кислотами, например, хлористоводородной и фосфорной кислотами. Такие соли также включены в объем настоящего изобретения.

Настоящее изобретение также предлагает применение соединения формулы (I)

или его фармацевтически приемлемой соли либо сольвата, где:

Ar представляет собой

замещенную или незамещенную (предпочтительно ароматическую) карбоциклическую или гетероциклическую группу, причем упомянутая карбоциклическая или гетероциклическая группа содержит в циклической структуре от 5 атомов до 10 атомов, причем упомянутые атомы в циклической структуре образуют один или два цикла, где цикл или каждый из циклов содержит 5 атомов или 6 атомов, любые гетероатомы выбраны из группы, состоящей из N, О и S, а любые заместители при группе Ar выбраны независимо друг от друга из группы, состоящей из:

(а) Cl, (b) Br, (с) F, (d) ОН, (е) NO₂, (f) CF₃, (g) низший алкил С₁-С₄ (в частности, СН₃), (h) SCH₃, (i) NHCOCH₃, (j) N(R⁶)(R⁸), где R⁶ и R⁸ одинаковы или различны и каждый из них представляет собой Н или низший алкил C₁-C₄, (k) OR¹⁰, где R¹⁰ представляет собой насыщенный или ненасыщенный низший углеводородный радикал C₁-C₆ нормального или разветвленного строения, который может быть незамещенным или замещенным одним, двумя или тремя заместителями, выбранными из следующих:

Cl, Br, F, ОМе, NO₂ и CF₃,

и (1) -OCOR¹¹, где R¹¹ представляет собой насыщенный или ненасыщенный низший углеводородный радикал С₁-C₆ нормального или разветвленного строения или фенил;

R представляет собой

ОН, OR¹⁰ или OCOR¹¹, где R¹⁰ и R¹¹ соответствуют вышеприведенным определениям; и

R¹ представляет собой Н или низший углеводородный радикал C₁-C₆ нормального или разветвленного строения, который может быть незамещенным или замещенным одним, двумя или тремя заместителями, выбранными из Cl, Br, F, OMe, NO₂ и CF₃,

в производстве антипролиферативного лекарственного средства. В частности, соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть полезны для изготовления лекарственного средства для лечения или профилактики новообразований, в частности, опухолей, локализующихся в матке, яичниках или молочных железах. В частности, эти соединения могут быть полезны для приготовления лекарственного средства для поражения раковых клеток, стойких к действию паклитаксела и доцетаксела.

Соединения формулы (I) могут быть эффективно применены в комбинированных схемах терапии, включающих совместное использование соединения формулы (I) с другим противоопухолевым препаратом, в частности, с паклитакселом или доцетакселом. Комбинированная терапия может включать одновременное или последовательное применение соединения формулы (I) и противоопухолевого препарата. Такая комбинированная терапия является еще одним аспектом настоящего изобретения.

Далее, соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть применены при приготовлении лекарственного средства для лечения или предупреждения расстройств, возникающих в климактерический период, и остеопороза.

Кроме того, настоящее изобретение охватывает фармацевтическую композицию, содержащую одно или несколько соединений формулы (I) в сочетании с одной или несколькими фармацевтически приемлемыми добавками.

Изобретение описано ниже в форме иллюстративных примеров со ссылками на прилагаемые рисунки формул.

ПРИМЕРЫ

Пример 1. Общие условия получения халконов

Методика А

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору кетона (0,0075 моль) и альдегида (0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют; осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединения кристаллизуют из этанола или вначале разделяют хроматографированием, а затем кристаллизуют из этанола.

Методика В

Раствор кетона (0,0075 моль), альдегида (0,0075 моль), пиперидина (15 мл) и уксусной кислоты (75 мл) в 95%-ном этаноле (80 мл) нагревают в противотоке в течение 5 ч. Добавляют к раствору молекулярные сита для удаления воды и оставляют смесь стоять (без перемешивания) в течение ночи. Как правило, образуется осадок, который собирают и кристаллизуют. Если продукт в этих условиях не выпадает в осадок, то выпаривают растворитель в вакууме, и остаток очищают хроматографированием на колонке с силикагелем.

Пример 2. 1-[4-метил-7-(2-метилпроп-1-енилокси)кумарин-8-ил]-3-(пиридин-3-ил)-пропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 106)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 4-метил-7-(3-метилбут-2-енилокси)-8-ацетилкумарина (2,14 г, 0,0075 моль) и пиридин-3-карбоксиальдегида (0,8 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют. Осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединение кристаллизуют из этанола и получают 0,84 г продукта с т.пл. 156-157°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,69 (s, 3H); 1,72 (s, 3H); 2,44 (d, 3H, J=1,22 Гц); 4,65 (d, 2H, J=6,5 Гц); 5,34-5,38 (m, 1H); 6,16 (d, 1H, J=1,2 Гц); 6,95 (d, 1H, J=8,8 Гц); 7,07 (d, 1H, J=18 Гц); 7,36 (d, 1H); 7,30-7,40 (m, 1H); 7,64 (d, 1H, J=8,9 Гц); 7,90 (m, 1H); 8,58-8,68 (m, 2H).

Пример 3. 1-[4-метил-7-(3-метилбут-2-енилокси)кумарин-8-ил]-3-фенилпропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 119)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 4-метил-7-(3-метилбут-2-енилокси)-8-ацетилкумарина (2,14 г, 0,0075 моль) и бензальдегида (0,8 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют; осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединение кристаллизуют из этанола и получают 1,34 г продукта с т.пл. 114-116°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,69 (s, 3H); 1,72 (s, 3H); 2,44 (d, 3H, J=1,22 Гц); 4,65 (d, 2H, J=6,5 Гц); 5,34-5,38 (m, 1H); 6,16 (d, 1H, J=1,2 Гц); 6,95 (d, 1H, J=8,8 Гц); 7,00 (d, 1H, J=18 Гц); 7,10 (d, 1H); 7,30-7,40 (m, 3H); 7,45-7,52 (m, 12H); 7,61 (d, 1H, J=8,9 Гц).

Пример 4. 1-[4-метил-7-(3-метилбут-2-енилокси)кумарин-8-ил]-3-(3,4,5-триметоксифенил)пропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 120)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 4-метил-7-(3-метилбут-2-енилокси)-8-ацетилкумарина (2,14 г, 0,0075 моль) и 3,4,5-триметоксибензальдегида (1,47 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют; осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединение кристаллизуют из метанола и получают 1,3 г продукта с т.пл. 148-150°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,69 (s, 3H); 1,72 (s, 3H); 2,44 (d, 3H, J=1,2 Гц); 3,74-3,88 (m, 9H); 4,65 (d, 2H, J=6,5 Гц); 5,34-5,38 (m, 1H); 6,16 (s, 1H); 6,93 (d, 1H, J=16 Гц); 6,95 (d, 1H, J=8,9 Гц); 7,25 (d, 1H, J=16 Гц); 7,63 (d, 1H, J=8,9 Гц).

Пример 5. 1-[4-метил-7-(2-метилаллилокси)кумарин-8-ил]-3-(пиридин-3-ил)пропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 122)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 4-метил-7-метилаллилокси-8-ацетилкумарина (2,04 г, 0,0075 моль) и пиридин-3-карбоксиальдегида (0,8 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют. Осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединение кристаллизуют из метанола и получают 0,8 г продукта с т.пл. 110-112°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,74 (s, 3Н); 2,43 (s, 3H); 4,55 (s, 2H); 4,98 (d, 2H, J=15 Гц); 6,16 (s, 1H); 6,93 (d, 1H, J=8,9 Гц); 7,09 (d, 1H, J=16 Гц); 7,35-7,37 (m, 1H); 7,36 (d, 1H, J=16 Гц); 7,64 (d, 1H, J=8,9 Гц); 7,85 (d, 1H, J=7 Гц); 8,58 (d, 1H, J=5 Гц); 8,67 (s, 1H).

Пример 6. 1-[4-метил-7-(2-метилаллилокси)кумарин-8-ил]-3-фенилпропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 121)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 4-метил-7-метилаллилокси-8-ацетилкумарина (2,04 г, 0,0075 моль) и бензальдегида (0,8 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют; осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединение кристаллизуют из метанола и получают 1,2 г продукта с т.пл. 158-160°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,74 (s, 3Н); 2,43 (s, 3Н); 4,55 (s, 2H); 4,98 (d, 2H, J=15 Гц); 6,16 (s, 1H); 6,93 (d, 1H, J=8,9 Гц); 7,02 (d, 1H, J=16 Гц); 7,43-7,53 (m, 4H); 7,61 (d, 1H, J=8,9 Гц).

Пример 7. 1-[4-метил-7-(2-метилаллилокси)кумарин-8-ил]-3-(3-метоксифенил)пропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 162)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 4-метил-7-метилаллилокси-8-ацетилкумарина (2,04 г, 0,0075 моль) и 3-метокси-бензальдегида (1,01 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют. Осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединение кристаллизуют из метанола и получают 1,6 г продукта с т.пл. 85-87°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,74 (s, 3Н); 2,43 (s, 3Н); 3,85-3,88 (m, 3Н); 4,55 (s, 2H); 4,98 (d, 2H, J=15 Гц); 6,16 (s, 1H); 6,93 (d, 1H, J=8,9 Гц; 7,02 (d, 1H, J=16 Гц); 6,95-7,12 (m, 3Н); 7,26 (m, 1H); 7,30 (d, 1H, J=16 Гц); 7,61 (d, 1H, J=8,9 Гц).

Пример 8. 1-[4-метил-7-(2-метилаллилокси)кумарин-8-ил]-3-(3,4,5-триметоксифенил)пропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 123)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 4-метил-7-метилаллилокси-8-ацетилкумарина (2,04 г, 0,0075 моль) и 3,4,5-триметоксибензальдегида (1,47 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют. Осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединение кристаллизуют из метанола и получают 1,7 г продукта с т.пл. 128-130°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,74 (s, 3Н); 2,43 (s, 3H); 3,75-3,88 (m, 9H); 4,55 (s, 2H); 4,98 (d, 2H, J=15 Гц); 6,16 (s, 1H); 6,72 (s, 1H); 6,93 (d, 1H, J=8,9 Гц); 6,94 (d, 1H, J=16 Гц); 7,23 (d, 1H, J=16 Гц); 7,61 (d, 1H, J=8,9 Гц).

Пример 9. 1-[4-метил-7-(аллилокси)кумарин-8-ил]-3-фенилпропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 158)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 4-метил-7-аллилокси-8-ацетилкумарина (1,93 г, 0,0075 моль) и бензальдегида (0,8 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют. Осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединение кристаллизуют из метанола и получают 1,1 г продукта с т.пл. 136-139°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 2,43 (s, 3Н); 4,65 (d, 2H, J=5,1 Гц); 4,25-4,55 (m, 2H); 5,15-5,35 (m, 1H); 6,16 (s, 1H); 6,93 (d, 1H, J=8,9 Гц); 7,03 (d, 1H, J=16 Гц); 7,04-7,15 (m, 3Н); 7,15-7,26 (m, 2H); 7,33 (d, 1H, J=16 Гц); 7,64 (d, 1H, J=8,9 Гц).

Пример 10. 1-[4-метил-7-(аллилокси)кумарин-8-ил]-3-(пиридин-3-ил)пропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 161)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 4-метил-7-аллилокси-8-ацетилкумарина (1,93 г, 0,0075 моль) и пиридин-3-карбоксиальдегида (0,8 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют. Осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединение кристаллизуют из этанола и получают 0,6 г продукта с т.пл. 124-126°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 2,43 (s, 3Н); 4,65 (d, 2H, J=5,1 Гц); 4,25-4,55 (m,2H); 5,15-5,35 (m, 1H); 6,16 (s, 1H); 6,93 (d, 1H, J=8,9 Гц); 7,08 (d, 1H, J=16 Гц); 7,30 (d, 1H, J=16 Гц); 7,49 (d, 1H, J=8,9 Гц); 7,83-7,87 (m, 1H); 8,58 (d, 1H, J=5 Гц); 6,87 (s, 1H).

Пример 11. 1-[4-метил-7-(аллилокси)кумарин-8-ил]-3-(3-метоксифенил)пропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 159)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 4-метил-7-аллилокси-8-ацетилкумарина (1,93 г, 0,0075 моль) и 3-метокси-бензальдегида (1,01 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют. Осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединение кристаллизуют из метанола и получают 1,6 г продукта с т.пл. 61-63°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 2,43 (s, 3Н); 3,82 (s, 3Н); 4,65 (d, 2H, J=5,1 Гц); 5,20-5,42 (m, 2H); 5,82-6,02 (m, 1H); 6,16 (s, 1H); 6,90 (d, 1H, J=8,9 Гц); 7,15 (d, 1H, J=16 Гц); 6,90-7,15 (m, 3Н); 7,15 (d, 1H, J=16 Гц); 7,20-7,29 (m, 1H); 7,30 (d, 1H, J=16 Гц); 7,64 (d, 1H, J=8,9 Гц).

Пример 12. 1-[4-метил-7-(аллилокси)кумарин-8-ил]-3-(3,4,5-триметоксифенил)пропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 160)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 4-метил-7-аллилокси-8-ацетилкумарина (1,93 г, 0,0075 моль) и 3,4,5-триметоксибензальдегида (1,47 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют. Осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединение кристаллизуют из метанола и получают 1,8 г продукта с т.пл. 138-140°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 2,43 (s, 3Н); 3,82-3,91 (m, 9H); 4,65 (d, 2H, J=5,1 Гц); 5,25-5,40 (m, 2H); 5,90-6,02 (m, 1H); 6,16 (s, 1H); 6,74 (s, 2H); 6,90-7,15 (m, 3Н); 7,15 (d, 1H, J=16 Гц); 7,20-7,29 (d, 1H, J=16 Гц); 7,70 (d, 1H, J=8,9).

Пример 13. 1-[4-метил-7-(проп-2-инилокси)кумарин-8-ил]-3-(3,4,5-триметоксифенил)пропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 126)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 4-метил-7-проп-2-инилокси-8-ацетилкумарина (1,92 г, 0,0075 моль) и 3,4,5-триметоксибензальдегида (1,47 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют. Осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединение кристаллизуют из этанола и получают 1,1 г продукта с т.пл. 191-193°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 2,45 (s, 3H); 2,53-2,56 (m, 1H); 3,83-3,85 (m, 9H); 4,82 (d, 2H, J=2,2 Гц); 6,20 (s, 1H); 6,72 (s, 2H); 6,92 (d, 1H, J=16 Гц); 7,12 (d, 1H, J=8,9 Гц); 7,15 (d, 1H, J=16Hz); 7,67 (d, 1H, J=8,9 Гц).

Пример 14. 1-[4-метил-7-(проп-2-инилокси)кумарин-8-ил]-3-фенилпропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 124)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 4-метил-7-проп-2-инилокси-8-ацетилкумарина (1,92 г, 0,0075 моль) и бензальдегида (0,8 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют. Осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединение кристаллизуют из этанола и получают 0,8 г продукта с т.пл. 140-142°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃ ) δ: 2,45 (s, 3H); 2,53-2,56 (m, 1H); 4,82 (d, 2H, J=2,2 Гц); 6,20 (s, 1H); 7,02 (d, 1H, J=16 Гц); 7,13 (d, 1H, J=8,9 Гц); 7,32 (d, 1H, J=16 Гц); 7,35-7,45 (m, 3H); 7,48-7,52 (m, 2H); 7,67 (d, 1H, J=8,9 Гц).

Пример 15. 1-[4-метил-7-(проп-2-инилокси)кумарин-8-ил]-3-(пиридин-3-ил)пропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 125)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 4-метил-7-проп-2-инилокси-8-ацетилкумарина (1,92 г, 0,0075 моль) и пиридин-3-карбоксиальдегида (0,8 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле;

добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют. Осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединение кристаллизуют из этанола и получают 0,7 г продукта с т.пл. 203-205°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 2,45 (s, 3H); 2,53-2,56 (m, 1H); 4,82 (d, 2H, J=2,2 Гц); 6,20 (s, 1H); 7,02 (d, 1H, J=16 Гц); 7,13 (d, 1H, J=8,9 Гц; 7,32 (d, 1H, J=16 Гц); 7,28-7,35 (m, 1H); 7,69 (d, 1H, J=8,9 Гц); 7,88-7,92 (m, 1H); 8,58-8,62 (m, 1H); 8,66 (s, 1H).

Пример 16. 1-[4-метил-7-(проп-2-инилокси)кумарин-8-ил]-3-(3-метоксифенил)пропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 163)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 4-метил-7-проп-2-инилокси-8-ацетилкумарина (1,92 г, 0,0075 моль) и 3-метокси-бензальдегида (1,01 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют. Осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединение кристаллизуют из метанола и получают 1,5 г продукта с т.пл. 154-156°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 2,45 (s, 3Н); 3,48 (m, 1H); 3,81 (s, 3Н); 4,82 (d, 2H, J=2,2 Гц); 6,15 (s, 1H); 6,90-7,26 (m, 5H); 7,10 (d, 1H, J=8,9 Гц); 7,65 (d, 1H, J=8,9 Гц).

Пример 17. 1-[4-метил-7-(аллилокси)кумарин-8-ил]-3-(4-хлорфенил)пропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 241)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 4-метил-7-аллилокси-8-ацетилкумарина (1,93 г, 0,0075 моль) и 4-хлор-бензальдегида (1,05 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют; осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединение кристаллизуют из метанола и получают 1,1 г продукта с т.пл. 153-155°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 2,42 (d, J=1,2 Гц, 3Н), 4,65 (m, 2H), 5,2 (m, 2H), 6,15 (m, 1H), 6,91-7,61 (m, 8H).

Пример 18. 1-[4-метил-7-(проп-2-инилокси)кумарин-8-ил]-3-(4-фторфенил)пропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 240)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 4-метил-7-проп-2-инилокси-8-ацетилкумарина (1,92 г, 0,0075 моль) и 4-фтор-бензальдегида (0,93 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют; осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме.

Соединение кристаллизуют из этанола и получают 1,2 г продукта с т.пл. 185-186°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 2,43 (d, J=1,2 Гц, 3Н), 2,52 (m, 1H), 4,79 (d, J=1,2 Гц, 2H), 6,17 (d, J=1,2 Гц, 1H), 6,96-7,66 (m, 8H).

Пример 19. 1-[3-метил-7-(метокси)кумарин-8-ил]-3-(2-тиенил)пропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 242)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 7-метокси-8-ацетил-3-метилкумарина (1,74 г, 0,0075 моль) и 2-тиофен-карбоксиальдегида (0,84 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют; осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединение кристаллизуют из метанола и получают 1,8 г продукта с т.пл. 172-173°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 2,46 (d, 3Н), 4,0 (s, 3Н), 6,21 (d, J=1,2 Гц, 1H), 6,91-7,84 (m, 7H).

Пример 20. 1-[4-метил-7-(аллилокси)кумарин-8-ил]-3-(2,6-дихлорфенил)пропен-1-он (см. прилагаемую формулу VIB 243)

50%-ный раствор КОН (3 мл) добавляют к эквимолярному раствору 4-метил-7-аллилокси-8-ацетилкумарина (1,93 г, 0,0075 моль) и 2,6-дихлорбензальдегида (1,31 г, 0,0075 моль) в 95%-ном этаноле; добавление производят при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение ночи, затем разбавляют водой и подкисляют; осадок отделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Соединение кристаллизуют из метанола и получают 1,1 г продукта с т.пл. 149-151°С. ¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 2,41 (m, 3Н), 4,66 (m, 2H), 5,3 (m, 2H), 5,9 (m, 1H), 6,9-7,64 (m, 8H).

БИОЛОГИЧЕСКИЕ ИСПЫТАНИЯ

Соединения VIB 106 и VIB 122 были испытаны с целью определения их цитотоксичности в отношении устойчивых к лекарственным средствам раковых клеток как по отдельности, так и в сочетании с паклитакселом. Ниже представлены результаты этих исследований.

При испытаниях соединений VIB 106 и VIB 122 в отдельности было обнаружено, что они обладают сравнительно низкой цитотоксичностью (IC₅₀>1 мкМ) в отношении устойчивых к лекарственным средствам раковых клеток.

Затем соединения испытывали в сочетании с паклитакселом для определения цитостатической активности в отношении стойких к лекарственным средствам клеток рака молочной железы MDA-435/LCC₆-MDR. В этих экспериментах упомянутые соединения применяли в сочетании с паклитакселом, концентрация паклитаксела составляла 0,1 мкМ; при применении паклитаксела совместно с каждым из соединений VIB 106 и VIB 122 его IC₅₀ понижается в 3-5 раз, т.е. с 426 нМ до 130-86 нМ, по сравнению с применением индивидуального паклитаксела. Следовательно, в присутствии этих соединений паклитаксел может проявить свою высокую ингибирующую активность в отношении устойчивых к лекарственным средствам раковых клеток.

Таблица 1
Соединение	IC50, нМ	Понижение IC50 паклитаксела, %
Паклитаксел	426	-
VIB 106+паклитаксел	86	80
VIB 122+паклитаксел	130	70

Методика эксперимента

Испытания заключались в одновременной обработке клеток MDA-435/LCC-MDR паклитакселом в присутствии или отсутствии испытываемых соединений (1 мкМ) in vitro в течение 72 ч. Оценку цитотоксичности, т.е. ингибирования роста клеток, производили в соответствии с методикой Скехана и др. (Skehan et al.), описанной в J.Nat.Cancer Inst. 82, 1107, 1990.

Вкратце методику можно описать следующим образом. Клетки высевали в 96-луночную чашку Петри в количестве 400-1200 клеток на лунку и перед введением лекарственного средства инкубировали при 37°С в течение 15-18 ч для обеспечения прикрепления культуры к лунке. Испытываемые соединения растворяли в 100%-ном диметилсульфоксиде и затем разбавляли средой RPMI-1640, содержащей 10 мМ HEPES (N-2-гидроксиэтилпиперазин-N'-2-гидрокси-пропансульфокислоты). После 72 ч инкубации в каждую лунку добавляли 100 мкл 50%-ной трихлоруксусной кислоты, охлажденной льдом, и инкубировали в течение 1 ч при 4°С. Затем чашки промывали 5 раз водопроводной водой для удаления трихлоруксусной кислоты, низкомолекулярных продуктов метаболизма и сывороточных протеинов. Добавляли в каждую лунку 50 мкл сульфородамина В (0,4%). После 5-минутной инкубации при комнатной температуре чашки промывали 5 раз 0,1%-ной уксусной кислотой и сушили на воздухе. Связанный краситель растворяли трис(гидроксиметил)-метиламинометаном (TRIS) (основание, 10 мМ, рН 10,5) в течение 5 мин на вращательном приборе для встряхивания. Оптическую плотность измеряли на длине волны 570 нм.

Пример 21 композиции в форме таблетки на основе соединения по Примеру 8

Соединение по Примеру 8	50 мг
Карбоксиметилцеллюлоза натрия	12 мг
Лактоза	134 мг
Микрокристаллическая целлюлоза	50 мг
Колоидный кремнезем	1 мг
Стеарат магния	3 мг

1. Халконовые кумарины формулы (I)

или их фармацевтически приемлемые соли либо сольваты, где

Ar представляет собой замещенную или незамещенную (предпочтительно ароматическую) карбоциклическую или гетероциклическую группу, причем упомянутая карбоциклическая или гетероциклическая группа содержит в циклической структуре 5 или 6 атомов, причем гетероатом выбран из группы, состоящей из N и S, а любые заместители при группе Ar выбраны независимо друг от друга из группы, состоящей из Cl, Br, F и OR¹⁰, где R¹⁰ представляет собой насыщенный или ненасыщенный низший углеводородный радикал C₁-C₆ нормального или разветвленного строения;

R представляет собой OR¹⁰, где R¹⁰ соответствует вышеприведенному определению;

R¹ представляет собой низший углеводородный радикал С₁-С₆ нормального или разветвленного строения;

при условии, что если R¹-СН₃ и R-ОСН₃ или ОН, то группа Ar не может представлять собой 4-метоксифенил или 3,4-диметоксифенил.

2. Халконовые кумарины по п.1, причем Ar представляет собой замещенную или незамещенную (предпочтительно ароматическую) гетероциклическую группу, содержащую в циклической структуре 5 или 6 атомов, причем гетероатом выбран из группы, состоящей из N и S, а любые заместители при группе Ar выбраны независимо друг от друга из группы, в которую входят Cl, Br, F и OR¹⁰, где R¹⁰ представляет собой насыщенный или ненасыщенный низший углеводородный радикал C₁-С₆ нормального или разветвленного строения.

3. Халконовые кумарины по любому из предыдущих пунктов, причем группа Ar представляет собой замещенную или незамещенную (предпочтительно ароматическую) гетероциклическую группу, содержащую в циклической структуре 5 или 6 атомов, причем по меньшей мере один из атомов цикла является атомом азота, а любой заместитель при цикле соответствует определению, приведенному в п.1.

4. Халконовые кумарины по любому из предыдущих пунктов, причем Ar - пиридил.

5. Халконовые кумарины по п.1, причем Ar представляет собой замещенную или незамещенную (предпочтительно ароматическую) карбоциклическую гр