17 -акил-17 -оксиэстратриены, их применение и фармацевтический препарат

17 -акил-17 -оксиэстратриены, их применение и фармацевтический препарат

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Настоящее изобретение относится к 17α-алкил-17β-оксиэстратриенам и к промежуточным продуктам для их получения, к применению 17α-алкил-17β-оксиэстратриенов для получения лекарственных средств, а также к фармацевтическим препаратам, содержащим эти соединения.

Предлагаемые в изобретении соединения обладают антиэстрогенной эффективностью, иными словами, они оказывают ингибирующее действие на эстрогены. Подобные вещества описаны во многих публикациях. Так, например, обладающие антиэстрогенным действием соединения известны из заявки ЕР 0138504 В1. В этой публикации речь идет в основном о производных эстра-1,3,5(10)-триенов, замещенных в положении 3, в частности, гидрокси- или алкоксигруппами, в положении 17β - гидроксигруппами, а в положении 17α - в частности, водородом или алкилом. Кроме того, эти соединения имеют в положении 7α алкильную боковую цепь, которая может быть частично фторирована и которая, в частности, может быть прервана амидо-, амино-, N-оксидными амино-, окси-, сульфанильными, сульфинильными и/или сульфонильными группами.

В заявке WO 99/33855 А1 описаны 11β-галоген-7α-замещенные эстра-1,3,5(10)-триены, которые в положении 3 и 17 могут содержать гидроксигруппы. 7α-боковая цепь представляет собой частично фторированную, необязательно ненасыщенную углеводородную цепь, прерванную аминным атомом азота или сульфанильной, сульфинильной либо сульфонильной группой.

Соединения подобного типа описаны также в заявке WO 98/07740 А1. Речь в данной публикации идет о замещенных 7α-(ξ-аминоалкил)-эстра-1,3,5(10)-триенах. Эти соединения в положении 3 содержат предпочтительно гидрокси-, метокси- либо ацетилоксигруппу, а в положении 17α и/или 17β - предпочтительно метильную, соответственно трифторметильную группу. В положении 11β предусмотрен предпочтительно атом фтора, а в положении 7α - алкильная боковая цепь, которая в концевом положении по меньшей мере частично фторирована и прервана аминным атомом азота и сульфанильной, сульфинильной либо сульфонильной группой.

В заявке WO 97/45441 А1 описаны 7α-(5-метиламинопентил)-эстра-1,3,5(10)-триены, содержащие в положении 3 и в положении 17β гидроксигруппу. В положении 17α может быть предусмотрена метильная или этильная группа. Кроме того, эстратриеновый скелет может быть также в положении 2 замещен атомом фтора.

Известные соединения, как было установлено, образуют при введении в организм целый ряд различных, крайне активных метаболитов. Образование этих метаболитов приводит к появлению нежелательных эффектов и тем самым к возникновению неконтролируемого спектра действий. Прежде всего могут появиться побочные эффекты или же в результате спонтанного образования указанных метаболитов требуемое первичное действие (антиэстрогенное действие) станет неконтролируемым. К недостаткам известных соединений следует отнести и их неудовлетворительную совместимость при пероральном применении. Кроме того, было установлено, что известные соединения способствуют накоплению альвеолярных макрофагов.

Исходя из вышеизложенного, в основу настоящего изобретения была положена задача получить обладающие антиэстрогенным действием соединения, метаболизм которых можно было бы контролировать и которые благодаря этому не образовывали бы вовсе или образовывали лишь минимум биологически активных метаболитов. Наряду с этим при создании изобретения предусматривалось обеспечить необходимую совместимость предлагаемых соединений при их пероральном применении и при их введении в организм исключить полностью или по меньшей мере предельно минимизировать накопление альвеолярных макрофагов.

Указанная задача решается благодаря новым 17α-алкил-17β-оксиэстратриенам, охарактеризованным в п.1 формулы изобретения, далее благодаря новым 17β-оксиэстратриенам согласно п.16, а также 17-оксоэстратриенам согласно п.18, каждые из которых могут применяться соответственно в качестве промежуточных продуктов для получения предлагаемых в изобретении 17α-алкил-17β-оксиэстратриенов. Указанная задача решается далее благодаря применению 17α-алкил-17β-оксиэстратриенов для получения лекарственных средств согласно п.20 и благодаря содержащим предлагаемые в изобретении соединения фармацевтическим композициям согласно п.21.

Предлагаемые в изобретении 17α-алкил-17β-оксиэстратриены имеют следующую общую формулу I:

в которой

Hal обозначает F или Cl и в положении 11β связан с эстратриеновым скелетом,

R³ обозначает водород, С₁-С₄алкил, С₁-С₄алканоил или простой циклический С₃-С₇эфир с O-атомом,

R^17' обозначает водород, С₁-С₄алкил или С₁-С₄алканоил,

R^17'' обозначает С₁-С₄алкил, С₁-С₄алкинил, а также по меньшей мере частично фторированные алкильные остатки, при этом R^17'-О в положении 17β и R^17'' в положении 17α связаны с эстратриеновым скелетом,

SK обозначает группировку U-V-W-X-Y-Z-E, которая через U связана в положении 7α с эстратриеновым скелетом.

В боковой цепи символы U, V, W, X, Y, Z и Е имеют следующие значения:

U представляет собой либо прямоцепочечный или разветвленный С₁-С₁₃алкиленовый, -алкениленовый или -алкиниленовый остаток, либо группу А-В, где

А связан с эстратриеновым скелетом и обозначает соединенный через -СН₂- с эстратриеновым скелетом бензилиденовый, фениленовый или соединенный через алкильную группу с эстратриеновым скелетом C₁-С₃алкиларильный остаток, а

В обозначает прямоцепочечный или разветвленный С₁-С₁₃алкиленовый, -алкениленовый или -алкиниленовый остаток,

при этом А и В могут быть также связаны между собой атомом кислорода,

V представляет собой группу СН₂ или С(O),

W представляет собой группу N(R⁶) или N⁺(O^-)(R⁶) либо азолидиниленовое или N-оксидное азолидиниленовое кольцо, при этом азолидиниленовое или N-оксидное азолидиниленовое кольцо включает по меньшей мере один С- атом группы Х и

R⁶ представляет собой либо Н, либо СН₂-R⁷, либо C(O)-R⁷, где R⁷ может обозначать:

а) водород или

б) прямоцепочечный либо разветвленный, нефторированный либо по меньшей мере частично фторированный С₁-С₁₄алкильный,

-алкенильный или -алкинильный остаток, который может быть одно- либо многократно гидроксилирован и который может быть прерван одним-тремя гетероатомами -О- и -S- и/или одной-тремя группами -NR⁹-, где R⁹ представляет собой водород либо С₁-С₃алкильный остаток, или

в) незамещенный либо замещенный арильный или гетероарильный остаток, или

г) незамещенный либо замещенный С₃-С₁₀циклоалкильный остаток, или

д) незамещенный либо замещенный С₄-С₁₅циклоалкилалкильный остаток, или

е) незамещенный либо замещенный С₇-С₂₀аралкильный остаток, или

ж) незамещенный либо замещенный гетероарил-С₁-С₆алкильный остаток, или

з) незамещенный либо замещенный аминоалкильный остаток или бифенильный остаток,

Х представляет собой предпочтительно прямоцепочечный либо разветвленный С₁-С₁₂алкиленовый, -алкениленовый или -алкиниленовый остаток,

Y может представлять собой прямую связь между Х и Z, а также может обозначать:

а) SO_n-R¹⁰-группу, но лишь при условии, что W представляет собой группу N⁺(O^-)(R⁶) или N-оксидное азолидиниленовое кольцо, а не группу N(R⁶) или азолидиниленовое кольцо, при этом n обозначает 0, 1 или 2, а R¹⁰ представляет собой прямую связь между SO_n и Z или прямоцепочечный либо разветвленный С₁-С₆алкиленовый, -алкениленовый или -алкиниленовый остаток, или

б) группу R¹¹ или O-R¹¹, где R¹¹ представляет собой

1) прямоцепочечный либо разветвленный С₁-С₅алкиленовый, -алкениленовый или -алкиниленовый остаток, или

2) незамещенный либо замещенный арильный или гетероарильный остаток, или

3) незамещенный либо замещенный С₃-С₁₀циклоалкильный остаток, или

4) незамещенный либо замещенный С₄-С₁₅циклоалкилалкильный остаток, или

5) незамещенный либо замещенный С₇-С₂₀аралкильный остаток, или

6) незамещенный либо замещенный гетероарил-С₁-С₆алкильный остаток, или

в) группировку CH=CF, или

г) группировку HN-C(O)-NH-R¹², где R¹² представляет собой незамещенный либо замещенный ариленовый остаток и при этом R¹² связан c Z,

Z представляет собой прямую связь между Y и Е или прямоцепочечный либо разветвленный С₁-С₉алкиленовый, -алкениленовый или -алкиниленовый остаток, который может быть частично либо полностью фторирован;

Е представляет собой группу CF₃ или по меньшей мере частично фторированную арильную группу, прежде всего фенильную группу.

В остальном в положениях 1, 2, 4, 6-9 и 11-16 с эстратриеновым скелетом предпочтительно связаны атомы водорода. В принципе эстратриеновый скелет может быть модифицирован, в частности, за счет наличия углеводородного мостика, например 15β,16β-метановой группы.

Hal обозначает прежде всего фтор.

R³ может обозначать водород, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил и трет-бутил, соответствующий алканоил (ацетил, пропионил, бутаноил) или простой циклический эфир. Прежде всего R³ представляет собой водород, СН₃, СН₃СО или С₅Н₁₀О.

R^17' и R^17'' обозначают прежде всего метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил и трет-бутил, при этом R^17' дополнительно может представлять собой также водород, ацетил, пропионил и бутаноил, и в этом случае возможно также включение соответствующих изомеров. R^17'' наряду с указанными значениями может обозначать также этинил, 1-пропинил, 2-пропинил, 1-бутинил, 2-бутинил и 3-бутинил, кроме того, трифторметил, пентафторэтил, гептафторпропил и нонафторбутил, причем и в этом случае возможно включение соответствующих изомеров. Прежде всего R^17' представляет собой водород, СН₃ или СН₃СО. Наиболее предпочтительными значениями R^17'' являются метил, этинил и трифторметил.

U может представлять собой прежде всего прямоцепочечный либо разветвленный алкиленовый остаток и в первую очередь метиленовый, этиленовый, пропиленовый, бутиленовый, пентиленовый, гексиленовый, гептиленовый, октиленовый, нониленовый, дециленовый, ундециленовый, додециленовый или тридециленовый остаток. Предпочтительно U представляет собой (СН₂)_p, где p обозначает целое число от 2 до 10. Предпочтительно U представляет собой прежде всего бутиленовый, пентиленовый, гексиленовый или гептиленовый остаток. Наиболее предпочтительно U представляет собой н-бутиленовый остаток, т.е. в указанной для U формуле (CH₂)_p p обозначает 4.

V представляет собой прежде всего СН₂. Тем самым группировка U-V в одном из наиболее предпочтительных вариантов осуществления изобретения может представлять собой н-пентилен.

W представляет собой прежде всего N-оксидную аминогруппу N⁺(O^-)(R⁶) или амин N(R⁶), при этом R⁶ предпочтительно представляет собой водород или CH₂-R⁷, где R⁷ обозначает прежде всего водород или метил либо этил. Тем самым R⁶ представляет собой предпочтительно водород или С₁-С₃алкильный остаток, т.е. прежде всего метальный, этильный, н-пропильный или изопропильный остаток. В одном из особенно предпочтительных вариантов осуществления изобретения W представляет собой группу N⁺(O^-)(CH₃)(N-оксидную N-метиламиногруппу).

Х представляет собой предпочтительно (СН₂)_q, где q обозначает 0 или целое число от 1 до 12, т.е. представляет собой прямую связь между W и Y или прямоцепочечный либо разветвленный метиленовый, этиленовый, пропиленовый, бутиленовый, пентиленовый, гексиленовый, гептиленовый, октиленовый, нониленовый, дециленовый, ундециленовый или додециленовый остаток. В одном из особенно предпочтительных вариантов осуществления изобретения X представляет собой этиленовый, н-пропиленовый, н-бутиленовый, н-пентиленовый, н-гексиленовый, н-гептиленовый или н-октиленовый остаток.

Y может представлять собой прежде всего прямую связь между Х и Z. В этом случае Х представляет собой более длинную алкиленовую цепь, т.е. прежде всего н-гексилен, н-гептилен или н-октилен. Y в одном из предпочтительных вариантов осуществления изобретения может представлять собой также группу SO_n, где n обозначает 0, 1 или 2, т.е. сульфанильную, сульфинильную или сульфонильную группу. Если Y представляет собой группу SO_n, то Х в этом случае представляет собой более короткую алкиленовую цепь, прежде всего н-пропильную цепь.

Z представляет собой предпочтительно прямую связь между Y и Е или прямоцепочечный либо разветвленный С₁-С₇алкиленовый остаток, который по меньшей мере частично может быть фторирован. Z может представлять собой прежде всего метиленовый, этиленовый, пропиленовый или бутиленовый остаток, который по меньшей мере частично может быть фторирован. Прежде всего Z может представлять собой дифторметилен или прямоцепочечный алкиленовый остаток, который у одного конца перфторирован, т.е. представляет собой, например, 1,1-дифторэтиленовый, 1,1,2,2-тетрафтор-н-пропиленовый или 1,1,2,2,3,3-гексафтор-н-бутиленовый остаток. Особенно предпочтительными являются алкиленовые остатки, несущие у одного из концевых С-атомов только два атома фтора, причем эти CF₂-группы связаны с остатком Е. В этом случае боковая цепь SK имеет в качестве концевой группу C₂F₅.

Е представляет собой предпочтительно CF₃ или пентафторфенил. Тем самым группировка Z-E предпочтительно представляет собой одну из групп, выбранную в свою очередь из группы, включающей C₂F₅, С₃F₇ и С₄F₉, а также С₆F₅.

В объем настоящего изобретения включены также фармакологически совместимые кислотно-аддитивные соли, равно как и эфиры 17α-алкил-17β-оксиэстратриенов. В случае кислотно-аддитивных солей речь идет о соответствующих солях, образованных с неорганическими и органическими кислотами. В качестве кислотно-аддитивный солей приемлемы прежде всего гидрохлориды, гидробромиды, ацетаты, цитраты, оксалаты, тартраты и метансульфонаты. Если R³ и R^17' обозначают водород и в результате образуется 3,17β-диол, то в этом случае возможно также образование эфиров указанных гидроксисоединений. Эти эфиры предпочтительно образовывать с органическими кислотами, причем можно использовать те же самые кислоты, которые используют для образования кислотно-аддитивных солей, а именно прежде всего уксусную кислоту, но в равной мере пригодны и высшие карбоновые кислоты, такие, например, как пропионовая, масляная, изомасляная, валериановая, изовалериановая или пивалиновая кислота.

Новые 17α-алкил-17β-оксиэстратриены имеют несколько хиральных центров, в том числе, например, у атома азота, оксидированного при определенных условиях до N-оксида. Поэтому существуют соответственно несколько стереоизомерных форм каждого соединения. Соединения формулы I могут быть представлены в виде таутомеров, стереоизомеров или геометрических изомеров. В объем изобретения включены далее также все возможные изомеры, такие как Е- и Z-изомеры, S- и R-энантиомеры, диастереомеры, рацематы и их смеси, включая таутомерные соединения. Все эти изомерные соединения являются, даже если не указано иное, составной частью настоящего изобретения. Смеси изомеров можно разделять с помощью обычных методов, таких, например, как кристаллизация, хроматография или образование солей, на энантиомеры, соответственно на E/Z-изомеры.

К особенно предпочтительным согласно изобретению относятся следующие эстратриены общей формулы I:

1) N-оксид 11β-фтор-7α-{5-[метил(7,7,8,8,9,9,9-гептафторнонил)амино]пентил}-17α-метилэстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диола,

2) N-оксид 11β-фтор-7α-{5-[метил(8,8,9,9,10,10,10-гептафтордецил)амино]пентил}-17α-метилэстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диола,

3) N-оксид (RS)-11β-фтор-7α-{5-[метил(7,7,8,8,9,9,10,10,10-нонафтордецил)амино]пентил}-17α-метилэстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диола,

4) N-оксид 11β-фтор-7α-{5-[метил(8,8,9,9,9-пентафторнонил)амино]пентил}-17α-метилэстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диола,

5) N-оксид 11β-фтор-7α-{5-[метил(9,9,10,10,10-пентафтордецил)амино]пентил-17α-метилэстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диола,

6) 11β-фтор-7α-{5-[метил(8,8,9,9,9-пентафторнонил)амино]пентил}-17a-метилэстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диол,

7) 11β-фтор-7α-{5-[метил(7,7,8,8,9,9,10,10,10-нонафтордецил)амино]пентил}-17α-метилэстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диол,

8) 11β-фтор-7α-{5-[метил(7,7,8,8,9,9,9-гептафторнонил)амино]пентил}-17α-метилэстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диол,

9) 17α-этинил-11β-фтор-7α-{5-[метил(7,7,8,8,9,9,10,10,10-нонафтордецил)амино]пентил}эстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диол,

10) 17α-этинил-11β-фтор-3-(2-тетрагидропираноилокси)-7α-{5-[метил(7,7,8,8,9,9,10,10,10-нонафтордецил)амино]пентил}эстра-1,3,5(10)-триен-17β-ол,

11) 11β-фтор-3-(2-тетрагидропиранилокси)-7α-{5-[метил(7,7,8,8,9,9,10,10,10-нонафтордецил)амино]пентил}-17α-метилэстра-1,3,5(10)-триен-17β-ол,

12) 11β-фтор-7α-{5-[метил(7,7,8,8,9,9,10,10,10-нонафтордецил)амино]пентил}-17α-трифторметилэстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диол,

13) 11β-фтор-7α-{5-[метил(6,6,7,7,8,8,8-гептафтороктил)амино]пентил}-17α-метилэстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диол,

14) 11β-фтор-7α-{5-[метил(8,8,9,9,10,10,10-гептафтордецил)амино]пентил}-17α-метилэстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диол,

15) 11β-фтор-7α-{5-[метил(6,6,7,7,8,8,9,9,10,10,10-ундекафтордецил)амино]пентил}-17α-метилэстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диол,

16) 11β-фтор-7α-{5-[метил(5,5,6,6,7,7,8,8,8-нонафтороктил)амино]пентил}-17α-метилэстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диол,

17) 11β-фтор-7α-{5-[метил(9,9,10,10,11,11,11-гептафторундецил)амино]пентил}-17α-метилэстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диол,

18) 11β-фтор-7α-{5-[метил(9,9,10,10,10-пентафтордецил)амино]пентил}-17α-метилэстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диол.

Физические свойства некоторых вышеприведенных соединений указаны в таблице 1.

Предлагаемые в изобретении 17α-алкил-17β-оксиэстратриены отличаются от известных соединений прежде всего тем, что в положении 11α в связанном виде находится один атом галогена и/или в положении 17α - один алкильный остаток. Кроме того, предпочтительные соединения в 17α-боковой цепи содержат N-оксидную аминогруппу.

В отличие от 3,17β-дигидроксиэстратриенов, которые в положении 17α не замещены, из предлагаемых в изобретении 17α-алкил-17β-оксиэстратриенов практически не образуются какие-либо метаболиты. Метаболиты, как известно, также могут быть биологически активны. Было установлено, что производные эстратриенов, образующиеся в результате окисления связанной в положении 17β гидроксигруппы, когда при этом образуется 17-оксопроизводное, обладают исключительно высокой биологической активностью.

Благодаря блокированию положения 17α алкильным остатком, прежде всего С₁-С₄алкильной группой, эту окислительную реакцию удается подавить, что позволяет в конечном счете подавить и различные формы метаболизма. Поэтому применяемые в качестве действующих веществ эстратриены согласно изобретению проявляют видонезависимую эффективность и активность. Одно из преимуществ этих соединений заключается именно в том, что эффективность действующего вещества в полном объеме удается реализовать в одном единственном соединении.

Это создает в свою очередь благоприятные предпосылки для разработки соответствующих лекарственных средств, поскольку благодаря отсутствию образования биологически активных метаболитов требуемую эффективность этих средств можно обеспечить более простым путем, исходя из определенных структурных принципов, что позволяет проводить целенаправленный поиск действующих веществ.

Кроме того, предлагаемые в изобретении 17α-алкил-17β-оксиэстратриены ингибируют действие эстрадиола практически полностью. Сказанное означает, что они являются антиэстрогенами.

Для выявления эффективности предлагаемых в изобретении соединений проводили исследования in vivo на подопытных животных, в качестве которых использовали молодых крыс. С этой целью исследовали рост матки при пероральном введении лекарственного средства (тест на антиэстрогенное действие).

Принцип такой методики основан на том, чтобы выявить влияние обладающих антиэстрогенным действием соединений при их введении в организм одновременно с эстрогеном. У грызунов матка реагирует на введение эстрогена увеличением своей массы (в результате пролиферации и включения в ткань воды). Этот рост можно подавить за счет одновременного введения обладающих антиэстрогенным действием соединений в соответствующей дозировке.

В исследованиях использовали молодых самок крысы, вес которых в начале опытов составлял 35-45 г. Каждую дозу тестируемых соединений вводили группам из 5-6 животных. При пероральном введении соединения растворяли в одной части этанола (Э) и дополняли девятью частями арахисового масла (AM). Для адаптации к новым условиям за день до начала опытов молодых крыс доставляли непосредственно после отъема и им сразу же, в том числе и в клетках, давали корм. Затем животным ежедневно по одному разу в течение трех дней вводили тестируемые соединения в комбинации с 0,5 мкг эстрадиолбензоата (ЭБ). ЭБ постоянно вводили подкожно (s.c.), тогда как тестируемые соединения вводили перорально (p.o.). Через 24 часа после заключительного введения животных взвешивали, умерщвляли и у них удаляли матку. Затем определяли влажную массу препарированных маток (без содержимого). При этом проводили контрольные исследования. Для негативного контроля каждому животному ежедневно вводили 0,2 мл смеси Э/АМ. Для положительного контроля каждому животному ежедневно вводили 0,1 мл ЭБ.

Для каждой группы определяли средние значения относительной массы органов (мг/100 г веса тела) ± стандартное отклонение (Х±СО), а также определяли значимость различий в сравнении с контрольной группой (ЭБ) в соответствии с критерием Даннета (р<0,05). Степень подавления (в %) в сравнении с ЭБ-контролем определяли с помощью компьютерной программы. Относительную эффективность исследуемых соединений рассчитывали ковариационным и регрессионным анализом.

Результаты исследований некоторых соединений представлены в таблице 2. Эти результаты были получены в опытах по выявлению роста матки при одновременном введении 0,5 мкг ЭБ/0,1 мл s.c. и обладающих антиэстрогенным действием соединений р.о. в дозировке 0,03 мг/кг веса тела и 0,3 мг/кг веса тела.

Из приведенных в таблице 2 данных следует, что при пероральном введении соединений в дозе порядка 0,3 мг/кг удается достичь почти 100%-ного антиэстрогенного эффекта.

Предлагаемые в изобретении соединения обладают такой же или даже более высокой эффективностью по сравнению с соответствующими соединениями, не замещенными в положении 17α. В сравнении с этими не замещенными в положении 17α соединениями предлагаемые в изобретении эстратриены отличаются, кроме того, лучшей совместимостью, что делает их гораздо более предпочтительными. Лучшая совместимость обусловлена прежде всего практически полностью ограниченной возможностью образования метаболитов.

Определение метаболической устойчивости: опыт in vitro с использованием 17β-HSD (эстрадиол-17β-дегидрогеназы)

17β-HSD₂ опосредует ферментативную дегидрогенизацию в кишечнике ОН-группы в положении 17 стеранового скелета с образованием кетогруппы.

В данном опыте используют следующие материалы:

Na-фосфатный буферный раствор: 100 мМ Na₂HPO₄×2H₂O и 100 мМ NaH₂PO₄×H₂O;

раствор исследуемых соединений:

11β-фтор-7α-{5-[метил(8,8,9,9,9-пентафторнонил)амино]пентил}-17α-метилэстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диола (соединение 1 в качестве представителя соединений общей формулы I) и

11β-фтор-7α-{5-[метил(8,8,9,9,9-пентафторнонил)амино]пентил}эстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диола (соединение 2): 15 мкМ в МеОН (в опытном растворе 0,3 мкМ);

раствор коферментов: 2 мл смеси глюкозо-6-фосфата (160 мМ)/MgCl₂ (80 мМ) добавляют к 400 мкл раствора глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, затем добавляют 15,6 мг НАДФ (никотинамид-аденин-динуклеотидфосфат) и 13,4 мг НАД (никотинамид-аденин-динуклеотид);

раствор микросом:

кишечные микросомы (технология in vitro, содержание белков: 24 мг/мл, содержание CYP 450: 0,058 нмоля/мг белка), после оттаивания в водяной бане при 37°С (˜60 с) разбавляют Na-фосфатным буферным раствором до концентрации белка, равной 5 мг/мл.

В каждую лунку помещают по 170 мкл буферного раствора и по 5 мкл растворов исследуемых соединений, при этом в каждый момент времени измерений (0, 10, 20, 30, 45 и 60 минут) значения определяют в двух повторностях. К образцам, соответствующим нулевому моменту времени измерений, добавляют по 250 мкл охлажденного льдом МеОН. Непосредственно после этого во все лунки добавляют по 25 мкл раствора микросом и по 50 мкл раствора коферментов. Образцы, соответствующие нулевому моменту времени измерений, без инкубации помещают примерно на 24 ч на хранение при температуре порядка -20°С. Остальные образцы инкубируют соответственно в течение 10, 20, 30, 45 и 60 минут при 37°С и по истечении каждого из этих промежутков времени в соответствующих образцах прекращают реакцию дегидрогенизации добавлением к ним по 250 мкл охлажденного льдом МеОН. Образцы до проведения анализа с помощью ЖХ/МС/МС хранят в течение примерно 24 ч при температуре порядка -20°С и непосредственно перед анализом центрифугируют при 3000 об/мин, при этом для измерений используют надосадочную жидкость.

Выявленные с помощью ЖХ/МС/МС концентрации тестируемых соединений и образующийся 17-кетоновый продукт представлены на прилагаемых к описанию чертежах (фиг.2а-2е).

Соединение 1 устойчиво к метаболизму в микросомах кишечника при отсутствии такой устойчивости в микросомах печени, что предположительно указывает на протекание в обеих тканях различных реакций метаболизма в фазе 1. Однако ни в одной из обеих тканей не образуется предполагаемый продукт реакции с 17β-HSD, т.е. 11β-фтор-7α-{5-[метил(8,8,9,9,9-пентафторнонил)амино]пентил}эстра-1,3,5(10)-триен-3-ол-17-он, соединение 3. В отличие от этого соединение 2, не содержащее 17-метильную группу, разлагается в микросомах кишечника и при этом образуется соответствующий 17-кетон. С учетом данного фактора устойчивость соединения 1 к метаболизму (метаболическую устойчивость) можно объяснить блокированием реакции с 17β-HSD, которая полностью подавляется благодаря 17β-метильной группе. Поэтому можно исходить из того, что алкильная, например метильная, группа или же алкенильная либо алкинильная, например этильная, группа, расположенная рядом с 17-ОН-группой, неожиданным образом препятствует ее окислению в кишечнике (в отличие от печени) с образованием кетона, следствием чего является более высокая оральная биодоступность.

Таким образом, предлагаемые в изобретении соединения отличаются помимо прочего исключительно высокой биодоступностью, что позволяет при введении этих соединений в организм пациента достичь высокого уровня их содержания в сыворотке. Благодаря упомянутой выше высокой совместимости создана возможность для проведения успешной и надежной терапии, поскольку с помощью предлагаемых в изобретении соединений удается достичь такого уровня активного соединения в сыворотке, который обеспечивает достаточный временной интервал, требуемый для достижения уровня действия соответствующего соединения. Под уровнем действия имеется в виду концентрация активного вещества в сыворотке, минимально необходимая для достижения нужного эффекта при соответствующем показании.

Предлагаемые в изобретении 17α-алкил-17β-оксиэстратриены общей формулы I пригодны прежде всего для получения соответствующих лекарственных средств. В соответствии с этим изобретение относится также к фармацевтическим препаратам, которые наряду с по меньшей мере одним 17α-алкил-17β-оксиэстратриеном общей формулы I, имеющим заместители Hal, R³, R^17', R^17'', U, V, W, X, Y, Z и Е с их раскрытыми выше значениями, содержат по меньшей мере один фармацевтически совместимый носитель.

Фармацевтические препараты, соответственно композиции согласно изобретению, получают известным образом с использованием обычных твердых или жидких носителей либо разбавителей и обычных фармацевтических и технических вспомогательных средств в соответствии с предусматриваемой методикой введения и в соответствующей дозировке. Предпочтительные композиции представляют собой ту или иную лекарственную форму, пригодную для перорального, энтерального или парентерального, например интраперитонеального (i.p.), внутривенного (i.v.), внутримышечного (i.m.) или же чрескожного применения. Такими лекарственными формами являются, например, таблетки, филмтаблетки, драже, пилюли, капсулы, порошки, кремы, мази, примочки, жидкости, такие как сиропы, гели, инъецируемые жидкости, например предназначенные для интраперитонеальной, внутривенной, внутримышечной или чрескожной инъекции, и т.п. Пригодными для указанных целей являются далее депо-формы, такие как имплантируемые композиции, а также суппозитории. При этом некоторые композиции из числа названных в зависимости от их типа высвобождают предлагаемые в изобретении эстратриены постепенно либо все количество по истечении короткого промежутка времени.

В качестве фармацевтических препаратов для перорального введения могут применяться капсулы, пилюли, таблетки, драже и жидкости или другие известные пероральные лекарственные формы. В этом случае лекарственные средства можно формировать таким образом, чтобы они высвобождали действующие вещества либо в течение короткого промежутка времени, либо обладали эффектом депо, т.е. обеспечивали продолжительное, медленное поступление действующего вещества в организм, иными словами, проявляли пролонгированное действие. Унифицированные дозы наряду с по меньшей мере одним эстратриеном могут содержать один либо несколько фармацевтически совместимых носителей, например вещества для регуляции реологии лекарственного средства, поверхностно-активные вещества, промоторы растворения, микрокапсулы, микрочастицы, гранулы, разбавители, связующие, такие как крахмал, сахар, сорбит и желатин, далее наполнители, такие как кремниевая кислота и тальк, вещества, придающие скользкость, красители, ароматизаторы и другие вещества.

Соответствующие таблетки можно изготавливать, например, смешением действующего вещества с известными вспомогательными веществами, например с инертными разбавителями, такими как декстроза, сахар, сорбит, маннит, поливинилпирролидон, с разрыхлителями, такими как кукурузный крахмал или альгиновая кислота, со связующими, такими как крахмал или желатин, с веществами, придающими скользкость, такими как карбоксиполиметилен, карбоксиметилцеллюлоза, ацетофталат целлюлозы или поливинилацетат. Таблетки могут также состоять из нескольких слоев.

Соответствующим образом могут изготавливаться драже путем нанесения на полученную аналогично таблеткам сердцевину покрытий (оболочки) из обычно используемых для таких целей веществ, таких, например, как поливинилпирролидон или шеллак, гуммиарабик, тальк, оксид титана или сахар. При этом оболочка драже также может состоять из нескольких слоев, при этом возможно использование таких же вспомогательных веществ, что и указанные выше для таблеток.

Содержащие действующие вещества капсулы можно изготавливать, например, смешением действующего вещества с соответствующим инертным носителем, таким как лактоза или сорбит, и последующим инкапсулированием полученной смеси в желатиновые капсулы.

Предлагаемые в изобретении эстратриены можно формировать также в виде раствора, который предназначен для перорального применения и в состав которого наряду с активным эстратриеном входят в качестве других компонентов фармацевтически совместимое масло, и/или фармацевтически совместимое липофильное поверхностно-активное вещество, и/или фармацевтически совместимое гидрофильное поверхностно-активное вещество, и/или фармацевтически совместимый смешивающийся с водой растворитель.

Для достижения более высокой биодоступности предлагаемых в изобретении действующих веществ соединения можно формировать также в виде циклодекстриновых клатратов. С этой целью соединения подвергают взаимодействию с α-, β- или γ-циклодекстрином либо его производными.

В случае использования кремов, мазей, примочек и применяемых наружно жидкостей все они должны обладать способностью обеспечивать поступление предлагаемых в изобретении соединений в организм в достаточном количестве. В этих лекарственных формах содержатся вспомогательные вещества, например вещества для регуляции реологии лекарственных средств, поверхностно-активные вещества, консерванты, промоторы растворения, разбавители, вещества, повышающие способность предлагаемых в изобретении эстратриенов проникать через кожу, красители, ароматизаторы и защитные средства для кожи, такие как кондиционеры и регуляторы влажности. В состав лекарственного средства вместе с предлагаемыми в изобретении соединениями могут входить дополнительно и другие действующие вещества [Ullmanns Enzyklopädie der technischen Chemie, том 4, 1953, сс.1-39; J. Pharm. Sci., 52, 1963, сс.918 и далее; H.v. Czetsch-Lindenwald, Hilfsstoffe für Pharmazie und angrenzende Gebiete, Pharm. Ind., 2, 1961, сс.72 и далее; Dr. H.P.Fiedler, Lexikon der Hilfsstoffe für Pharmazie, Kosmetik und angrenzende Gebiete, изд-во Cantor AG, Aulendorf/Württ., 1971].

Предлагаемые в изобретении вещества могут применяться также в соответствующих растворах, например в физиологическом растворе поваренной соли, в качестве растворов для инфузии или инъекции. При парентеральном применении действующие вещества могут быть растворены либо суспендированы в соответствующем физиологически совместимом разбавителе. В качестве подобных разбавителей пригодны прежде всего масляные растворы, как, например, растворы в кунжутном масле, касторовом масле и хлопковом масле. Для повышения растворимости могут добавляться промоторы растворения, такие, например, как бензилбензоат или бензиловый спирт.

Для получения инъецируемого препарата можно использовать любой жидкий носитель, в котором предлагаемые в изобретении соединения растворены или эмульгированы. Такие жидкости часто содержат также вещества-регуляторы вязкости, поверхностно-активные вещества, консерванты, промоторы растворения и иные добавки, с помощью которых раствор переводят в изотонический. Совместно с эстратриенами согласно изобретению в организм могут вводиться и другие действующие вещества.

Предлагаемые в изобретении эстратриены можно применять также в виде депо-инъекций или имплантируемого препарата, предназначенных, например, для чрескожного введения. Подобные препараты могут формироваться таким образом, чтобы обеспечить замедленное, постепенное высвобождение действующего вещества. В этих целях можно использовать известные технологии, например применять растворяющиеся или снабженные соответствующей мембраной депо-формы. В качестве инертных материалов имплантаты могут содержать, например, биологически разлагаемые полимеры и синтетические силиконы, в частности силиконовый каучук. Эстратриены в случае их чрескожного введения можно, например, заделывать в пластырь.

Еще одна возможность применения соединений согласно изобретению состоит в том, что их заделывают в трансдермальные системы и таким образом используют для трансдермального введения.

Для более успешного проникновения через кожу с целью обеспечить терапевтически эффективный уровень предлагаемых соединений в крови эти соединения аналогично тому, как это описано в заявке WO 01/76608 применительно к другим антиэстрогенам, можно заделывать в соответствующие трансдермальные системы. Подобные трансдермальные системы отличаются особым соотношением между присутствующими в них двумя усилителями пенетрации, прежде всего лауриновой кислоты и пропиленгликоля.

Дозировку предлагаемых в изобретении соединений общей формулы I определяет лечащий врач в зависимости от типа применяемого лекар