2,3-дигидроизоиндол-1-оны, обладающие ингибирующей активностью в отношении мао-в

2,3-дигидроизоиндол-1-оны, обладающие ингибирующей активностью в отношении мао-в

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Настоящее изобретение относится к новым производным 2,3-дигидроизоиндол-1-она, к способам их получения, их использованию в качестве лекарственных средств и к включающим их фармацевтическим композициям.

Более конкретно, первым объектом настоящего изобретения является соединение формулы I или II

в которой

Х означает -N= или -СН=;

R¹ означает -(CH₂)_n-CO-NR⁵R⁶, -(CH₂)_n-NR⁵R⁶, -(CH₂)_n-COOR⁷; -(CH₂)_n-CN; -(СН₂)_n-изоиндол-1,3-диония; или -(CH₂)_p-OR⁸;

R² означает водород, C₁-С₆алкил или ОН;

R³ означает водород или C₁-С₆алкил;

R⁴ означает галоген, галоген-(С₁-С₆)алкил, C₁-С₆алкоксигруппу или галоген-(С₁-С₆)алкоксигруппу;

R⁵ и R⁶ независимо друг от друга означают водород или C₁-С₃алкил;

R⁷ означает C₁-С₆алкил;

R⁸ означает водород или C₁-С₆алкил;

m означает 1, 2 или 3;

n означает 0, 1 или 2; и

р означает 1 или 2;

а также их фармацевтически приемлемые соли.

Согласно изобретению было установлено, что соединения общей формулы I или II являются селективными ингибиторами моноаминоксидазы В.

Моноаминоксидаза (МАО, КФ 1.4.3.4) представляет собой флавинсодержащий фермент, ответственный за окислительное дезаминирование эндогенных моноаминовых нейротрансмиттеров, таких как дофамин, серотонин, адреналин или норадреналин, а также аминов, присутствующих в организме в следовых концентрациях, например, фенилэтиленамина, и ряда аминовых ксенобиотиков. Фермент существует в двух формах (МАО-А и МАО-В), которые кодируются разными генами (Bach и др., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85, 1988, сс.4934-4938) и различаются по характеру распределения в тканях, структуре и субстратной специфичности. МАО-А обладает более высокой аффинностью к серотонину, октопамину, адреналину и норадреналину, тогда как природными субстратами для МАО-В являются фенилэтиламин и тирамин. Считается, что дофамин окисляется обеими изоформами фермента. МАО-В присутствует в целом ряде органов, в том числе в тканях головного мозга (Cesura и Pletscher, Prog. Drug Research 38, 1992, cc.171-297). С возрастом активность МАО-В в головном мозге повышается. Повышение активности МАО-В связывают с разрастанием глиальной ткани в процессе старения организма (Fowler и др., J. Neural. Transm. 49, 1980, cc.1-20). Кроме того, значительное повышение активности МАО-В в тканях головного мозга характерно для больных, страдающих болезнью Альцгеймера (Dostert и др., Biochem. Pharmacol. 38, 1989, сс.55-561); высокая экспрессия МАО-В обнаруживается в астроцитах вокруг сенильных бляшек (Saura и др., Neuroscience 70, 1994, сс.755-774). Поскольку в результате окислительного дезаминирования основных моноаминов МАО образуется NH₃, альдегиды и Н₂О₂, то есть агенты с известной или возможной токсичностью, предполагается, что существуют разумные основания для использования селективных ингибиторов МАО для лечения деменции и болезни Паркинсона. При подавлении активности МАО снижается ферментативная активация дофамина и, таким образом, увеличивается время доступности нейротрансмиттера в дофаминэргических нейронах. Дегенеративные процессы, связанные со старением и болезнями Альцгеймера и Паркинсона, также можно объяснить оксидативным стрессом, обусловленным повышенной активностью МАО и, как следствие, более активным образованием Н₂О₂ при участии МАО. Поэтому механизм действия ингибиторов МАО-В может быть основан как на снижении количества образующихся кислородных радикалов, так и на повышении содержания моноаминов в тканях головного мозга.

Роль МАО-В в патогенезе упомянутых выше неврологических нарушений объясняет значительный интерес к получению мощных и селективных ингибиторов его ферментативной активности. Фармакология некоторых известных ингибиторов МАО-В обсуждается, например, Bentue-Ferrer и др. (Bentue-Ferrer и др., CNS Drugs 6, 1996, сс.217-236). Основным недостатком необратимых и неселективных ингибиторов МАО является необходимость соблюдать меры предосторожности при составлении рациона питания, так как поступление в организм тирамина с пищей может спровоцировать гипертонический криз; кроме того, возможно взаимодействие ингибиторов МАО с другими лекарственными препаратами (Gardner и др., J. Clin. Psychiatry 57, 1996, сс.99-104). В случае же применения обратимых и селективных ингибиторов МАО, в частности МАО-В, указанные побочные эффекты не так опасны. Таким образом, существует необходимость в получении ингибиторов МАО-В с высокой селективностью и без побочных эффектов, свойственных ингибиторам МАО с низкой селективностью.

Как было установлено, соединения, которые являются объектом настоящего изобретения, являются высокоселективными ингибиторами МАО-В. Поэтому создание композиций, содержащих одно или более соединений настоящего изобретения и фармацевтически приемлемый носитель, также является объектом настоящего изобретения, равно как и способ их получения и использование соединений настоящего изобретения для лечения и профилактики заболеваний, в основе которых лежит активность фермента моноаминоксидазы В, и соответственно их использование для получения соответствующих лекарственных препаратов.

В контексте настоящего описания употребляются следующие определения общих терминов независимо от того, употребляется термин один или в комбинации. Следует отметить, что при употреблении в описании и в прилагаемых формулах изобретения терминов в единственном числе аналогичное значение относится и к терминам, употребляемым во множественном числе, за исключением тех случаев, когда из контекста однозначно следует иное толкование.

В контексте настоящего описания термин "C₁-С₆алкил" ("(низш.)алкил") обозначает насыщенную углеводородную группу с прямой или разветвленной цепью, содержащую от 1 до 6 атомов углерода, предпочтительно с 1, 2, 3 или 4 атомами углерода, например метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, 2-бутил, трет-бутил и т.п.

Термин "галоген" обозначает фтор, хлор, бром и йод.

Термин "Галоген-(С₁-С₆)алкил" обозначает (низш.)алкиловый остаток, как определено здесь, замещенный в любом положении одним или несколькими атомами галогена, как определено здесь. Примеры галоген алкиловых остатков включают, не ограничиваясь ими, 1,2-дифторпропил, 1,2-дихлорпропил, трифторметил, 2,2,2-трифторэтил, 2,2,2-трихлорэтил, 1,1,1-трифторпропил и т.п.

Термин "(С₁-С₆)алкоксигруппа" обозначает остаток -О-R, в котором R означает (низш.)алкил, как указано выше. В качестве примера алкоксигрупп можно назвать, не ограничиваясь этим, метоксигруппу, этоксигруппу, изопропоксигруппу и т.п.

Под понятием "фармацевтически приемлемые соли" соединения имеются в виду соли, которые пригодны для целей использования в качестве лекарственных препаратов и, как правило, безопасны, нетоксичны, ни в биологическом, ни в любом ином отношении не являются нежелательными и обладают искомой фармакологической активностью исходного соединения. Эти соли получают из неорганических или органических кислот или оснований.

Такие соли включают:

(I) кислотно-аддитивные соли, образованные неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п.; или образованы органическими кислотами, такими как уксусная кислота, бензолсульфоновая кислота, бензойная кислота, камфорсульфоновая кислота, лимонная кислота, этансульфоновая кислота, фумаровая кислота, глюкогептоновая кислота, глюконовая кислота, глутаминовая кислота, гликолевая кислота, гидроксинафтойная кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, молочная кислота, малеиновая кислота, яблочная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, муконовая кислота, 2-нафталенсульфоновая кислота, пропионовая кислота, салициловая кислота, янтарная кислота, дибензоил-L-винная, винная кислота, р-толуолсульфоновая кислота, триметилуксусная кислота, 2,2,2-трифторуксусная кислота и т.п. или

(II) соли, которые образуются, когда протон кислоты, присутствующий в исходном соединении, замещается ионом металла, например ионом щелочного металла, ионом щелочноземельного металла или ионом алюминия, или координирован с органическим или неорганическим основанием. К приемлемым органическим основаниям относятся диэтаноламин, этаноламин, N-метилглюкамин, триэтаноламин, трометамин и т.п. К приемлемым неорганическим основаниям относятся гидроокись алюминия, гидроокись кальция, гидроокись калия, карбонат натрия и гидроокись натрия.

Следует понимать, что все ссылки на фармацевтически приемлемые соли включают сольвент-аддитивные формы (сольваты) или кристаллические формы (полиморфы) тех же кислотно-аддитивных солей.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения в нем предлагаются соединения формулы I или II, в которых Х означает -СН=, например соединения формулы Ia или IIa

в которых R¹, R², R³, R⁴ и m имеют вышеуказанные значения.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения в нем предлагаются соединения формулы I, в которых R означает -(CH₂)_n-CO-NR⁵R⁶, -(CH₂)_n-COOR⁷; -(CH₂)_n-CN; -(СН₂)_n-изоиндол-1,3-дионил; или -(CH₂)_р-OR⁸, в которых R⁵ и R⁶ означают водород, R⁷ означает C₁-С₆алкил; R⁸ означает водород или C₁-С₆-алкил; n означает 0 или 1; и р означает 1; или R означает -(СН₂)_n-СО-NR⁵R⁶ или -(CH₂)_p-OR⁸ ; в которых R⁵ и R⁶ означают водород; R⁸ означает C₁-С₆алкил; n означает 0; и р означает 1; или R¹ означает -CONH₂ или -СН₂ОСН₃.

Еще в одном варианте осуществления изобретения в нем предлагаются соединения формулы I, в которых R² означает водород, C₁-С₆алкил или ОН; или R² означает водород или C₁-С₆алкил; или R² означает водород или -СН₃.

В следующем варианте осуществления изобретения в нем предлагаются соединения формулы I, в которых R³ означает водород.

Еще в одном варианте осуществления изобретения в нем предлагаются соединения формулы I, в которых m означает 1 или 2 или m означает 1.

Соединения формулы I или формулы II замещаются одним, двумя или тремя R⁴, выбранными из группы, включающей C₁-С₃алкил, галоген, галоген -(С₁-С₆)алкил, C₁-С₆алкоксигруппу или галоген-(С₁-С₆)алкоксигруппу, предпочтительно одним R⁴.

Особенно предпочтительными соединениями формулы I или формулы II являются те из них, в которых R⁴ означает галоген или галоген-(С₁-С₆)алкил. Особенно предпочтительными являются те соединениями формулы I, в которых R⁴ означает фтор- или трифторметил.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения в нем предлагаются соединения формулы I, в которых Х означает -СН=; R¹ означает -(CH₂)_n-CO-NR⁵R⁶, -(CH₂)_n-COOR⁷; -(CH₂)_n-CN; -(CH₂)_n-изоиндол-1,3-дионил; или (СН₂)_р-OR⁸; R² означает водород, C₁-С₆алкил или ОН; R³ означает водород; R⁴ означает галоген или галоген-(С₁-С₆)алкил; R⁵ и R⁶ означают водород; R⁷ означает C₁-С₆алкил; R⁸ означает водород или C₁-С₆алкил; m означает 1 или 2; n означает 0 или 1; и р означает 1.

В следующем варианте осуществления настоящего изобретения в нем предлагаются соединения формулы I, в которых Х означает -СН=; R¹ означает -(CH₂)_n-CO-NR⁵R⁶ или -(CH₂)_p-OR⁸; R² означает водород или C₁-С₆алкил; R³ означает водород; R⁴ означает галоген или галоген-(С₁-С₆)алкил; R⁵ и R⁶ означают водород; R⁷ означает C₁-С₆алкил; R⁸ означает C₁-С₆алкил; m означает 1; n означает 0; и р означает 1.

Еще в одном варианте осуществления настоящего изобретения в нем предлагаются соединения формулы I, в которых Х означает -СН=; R¹ означает -CONH₂ или -СН₂OCH₃; R означает водород или -СН₃; R³ означает водород; R⁴ означает F или -CF₃; и m означает 1.

Предпочтительными соединениями формулы I являются те из них, в которых R означает -(CH₂)_n-CO-NR⁵R⁶, и в которых R⁵ и R независимо друг от друга означают водород или C₁-С₆алкил и n означает 0, 1 или 2.

В качестве примеров предпочтительных соединений можно назвать следующие соединения:

2-[5-(3-фторбензилокси)-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]ацетамид,

2-[5-(3-фторбензилокси)-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]пропионамид,

(S)-2-[6-(3-фторбензилокси)-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]пропионамид,

(R)-2-[6-(3-фторбензилокси)-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]пропионамид,

2-[5-(4-фторбензилокси)-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]ацетамид и

2-[1-оксо-5-(4-трифторметилбензилокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]ацетамид.

К другой группе предпочтительных соединений формулы I относятся те соединения, в которых R¹ означает -(CH₂)_p-OR⁸ и в которых R⁸ означает C₁-С₆алкил и n означает 0, 1, или 2.

Примером такого соединения является 5-(3-фторметилбензилокси)-2-(2-метоксиэтил)-2,3-дигидроизоиндол-1-он

В другом варианте осуществления настоящего изобретения в нем предлагаются соединения формулы II, в которых R¹ означает -(CH₂)_n-CO-NR⁵R⁶; -(CH₂)_n-NR⁵R⁶, -(CH₂)_n-COOR⁷; -(CH₂)_n-CN; или -(CH₂)_p-OR⁸; в которых R⁵ и R⁶ означают водород; R⁷ означает C₁-С₆алкил; R⁸ означает C₁-С₆алкил; n означает 0; и р означает 1; или R¹ означает -(CH₂)_n-CO-NR⁵R⁶; -(CH₂)_n-NR⁵R⁶, -(CH₂)_n-COOR⁷; или -(CH₂)_p-OR⁸; в которых R⁵ и R⁶ означают водород; R⁷ означает C₁-С₆алкил; R⁸ означает C₁-С₆алкил; m означает 1; n означает 0; и р означает 1; или R¹ означает -CONH₂; -CH₂NH₂, -СООСН₃; или -СН₂ОСН₃.

Еще в одном варианте осуществления настоящего изобретения в нем предлагаются соединения формулы II, в которых R² означает водород или C₁-С₆алкил; или R² означает водород или -СН₃.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения в нем предлагаются соединения формулы II, в которых R³ означает водород.

В следующем варианте осуществления настоящего изобретения в нем предлагаются соединения формулы II, в которых R⁴ означает галоген или галоген-(С₁-С₆)алкил; R⁴ означает F или -CF₃.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения в нем предлагаются соединения формулы II, в которых m означает 1.

В следующем варианте осуществления настоящего изобретения в нем предлагаются соединения формулы II, в которых Х означает -СН=; R¹ означает -(CH₂)_n-СО-NR⁵R⁶; -(CH₂)_n-NR⁵R⁶, -(CH₂)_n-COOR⁷; -(CH₂)_n-CN; или -(CH₂)_р-OR⁸; R² означает водород или С₁-С₆алкил; R³ означает водород; R⁴ означает галоген или галоген-(С₁-С₆)алкил; R⁵ и R⁶ означают водород; R⁷ означает C₁-С₆алкил; R⁸ означает C₁-С₆алкил; m означает 1; n означает 0; и р означает 1.

Еще в одном варианте осуществления настоящего изобретения в нем предлагаются соединения формулы II, в которых Х означает -СН=; R¹ означает -(CH₂)_n-CO-NR⁵R⁶; -(CH₂)_n-NR⁵R⁶, -(CH₂)_n-COOR⁷; или -(CH₂)_p-OR⁸; R² означает водород или C₁-С₆алкил; R³ означает водород; R⁴ означает галоген или галоген-(С₁-С₆)алкил; R⁵ и R⁶ означают водород; R⁷ означает C₁-С₆алкил; R⁸ означает C₁-С₆алкил; m означает 1; n означает 0; и р означает 1.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения в нем предлагаются соединения формулы II, в которых Х означает -СН=; R¹ означает -CONH₂; -CH₂NH₂, -СООСН₃; или -CH₂OCH₃; R² означает водород или -СН₃; R³ означает водород; R⁴ означает F или -CF₃; и m означает 1.

Особенно предпочтительными соединениями формулы II являются те из них, в которых R¹ означает -(CH₂)_n-CO-NR⁵R⁶, и в которых R⁵ и R⁶ независимо друг от друга означают водород или C₁-С₆алкил и n означает 0, 1 или 2.

Примерами таких соединений являются

2-[6-(3-фторбензилокси)-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]ацетамид,

(R)-2-[6-(3-фторбензилокси)-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]пропионамид,

(S)-2-[1-оксо-6-(4-трифторметилбензилокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]пропионамид и

(R)-2-[1-оксо-6-(4-трифторметилбензилокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]пропионамид.

Также предпочтительными являются соединения формулы II, в которых R¹ означает -(CH₂)_p-OR⁸ и в которых R⁸ означает C₁-С₆алкил и р означает 1 или 2.

Примерами таких соединений являются метиловый эфир [6-(3-фторбензилокси)-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]уксусной кислоты,

метиловый эфир [1-оксо-6-(4-трифторметилбензилокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]уксусной кислоты.

Другими предпочтительными соединениями формулы II являются те из них, в которых R¹ означает -(CH₂)_p-OR⁸ и в которых R⁸ означает C₁-С₆алкил и р означает 1 или 2.

Примерами таких соединений являются

2-(2-метоксиэтил)-6-(3-фторбензилокси)-2,3-дигидроизоиндол-1-он и

2-(2-метоксиэтил)-6-(4-трифторметилбензилокси)-2,3-дигидроизоиндол-1-он.

Также предпочтительными соединениями формулы II являются те из них, в которых R¹ означает -(CH₂)_n-NR⁵R⁶, и в которых R⁵ и R⁶ независимо друг от друга означают водород или C₁-С₆алкил и n означает 0, 1 или 2.

Примерами таких соединений являются

гидрохлорид 2-(2-аминоэтил)-6-(4-трифторметилбензилокси)-2,3-дигидроизоиндол-1-она в соотношении 1:1 и

гидрохлорид 2-(2-аминоэтил)-6-(4-трифторметилбензилокси)-2,3-дигидроизоиндол-1-она в соотношении 1:1.

Соединения формулы I или II и их фармацевтически приемлемые соли получают взаимодействием соединения формулы III или V

с соединением формулы IV

необязательно с последующим переводом в фармацевтически приемлемые соли.

Соединения формулы I, Ia и IIa или II и их фармацевтически приемлемые соли получают растворением соединения формулы VI или VIa

в пригодном для этой цели растворителе с добавлением или без добавления основания, например в триэтиламине, с последующим воздействием соединением формулы VII

необязательно с последующим переводом в фармацевтически приемлемые соли.

Соединения формулы 1а можно получить, например, по следующей схеме 1: соединения формулы VIII нагревают в присутствии спирта (например метанола) и кислоты (например соляной кислоты). Затем полученное соединение IX галогенируют, например бромируют с применением, например N-бромсукцинимида, с образованием X, который в свою очередь превращают, например, в ходе процесса, проводимого в одном реакционном аппарате, в соединение формулы XI путем обработки нуклеофильным источником азида, например азидом натрия, восстановлением полученного соединения XII, например, трифенилфосфином в присутствии воды, и циклизации путем нагревания в присутствии спирта, например метанола. После воздействия на соединение формулы XII O-деметилирующим агентом, например трибромидом бора в дихлорметане, получают соединения формулы XIII. После этого соединения общей формулы IIIa получают путем обработки соединений типа XIII, которые растворяют в пригодном для этой цели растворителе в присутствии основания, например К₂СО₃ в ДМФ, в присутствии приемлемого галогенида бензила. В результате воздействия на соединения типа IIIa или III, которые растворяют в ТГФ и обрабатывают гидридом натрия и электрофильным соединением формулы IV, получают соединения формулы Ia.

Соответственно эту схему можно применить к получению соединений формулы I, II и IIa. Все исходные соединения могут представлять собой коммерчески доступные продукты, или их можно получать по хорошо известным в данной области методам.

Схема 1

Соединения формулы Ia и IIa получают, например, следуя схемам 3 и 4: используя в качестве исходных соединений парафторанизол или 4-фтор-3-метиланизол, кислоту XIV получают путем ортометаллирования с последующим быстрым прекращением реакции моноокисью углерода или путем окисления KMnO₄ соответственно. Полученный продукт преобразуют в хлорид кислоты и обрабатывают амином XV в дихлорметане с карбонатом натрия в качестве основания. Амид XVI подвергают циклизации в соединение XVII с использованием бис(триметилсилил)амида калия или путем обработки 2,2,6,6-тетраметилпиперидином и n-бутиллитием (BuLi) в ТГФ. Обработка XVII водным раствором гидроокиси натрия дает соединение XVIII, которое затем подвергают обработке церийаммоний-нитратом (ЦАН) в воде с ацетонитрилом или трифторуксусной кислотой (ТФУК) в дихлорметане с образованием амида XIX. Последующая низкотемпературная реакция с BBr₃ в дихлорметане дает соединение XX, из которого могут быть получены желаемые продукты II, как описано выше.

Схема 3

В другом варианте, используя в качестве исходного вещества 4-гидрофталиевую кислоту, проводят обработку соединения XXI избытком соединения XXII в присутствии основания, например карбоната калия, в растворе вода/ТГФ, получают продукт XXIII, который выделяют и затем восстанавливают LiAlH₄ в диэтиловом эфире с получением соединения XXIV. Окисление в условиях реакции Сверна в дихлорметане обеспечивает доступ к диальдегиду VI, который можно подвергнуть воздействию аминов VII с получением желаемых продуктов IIa или Ia, добавляя или исключая триэтиламин.

Схема 4

Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы I или II легко получают в соответствии с известными методами, учитывая природу соединения, превращаемого в соль. Для образования фармацевтически приемлемых солей основных соединений формулы I или II удобно использовать такие неорганические и органические кислоты, как, например, соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота и фосфорная кислота или лимонная кислота, муравьиная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота, уксусная кислота, янтарная кислота, винная кислота, метансульфоновая кислота, p-толуолсульфоновая кислота и т.п. Для образования фармацевтически приемлемых солей кислых соединений удобно использовать соединения, которые содержат щелочные или щелочноземельные металлы, например натрий, калий, кальций, магний и т.п.

Соединения формулы I или II и их фармацевтически приемлемые соли (здесь и далее "Фармацевтические Соединения") обладают фармакологической активностью и полезны в качестве лекарственных средств. В частности, Фармацевтические Соединения являются ингибиторами моноаминоксидазы В и могут быть использованы для лечения и профилактики заболеваний, при которых ингибиторы МАО-В могут оказывать терапевтическое воздействие. К таким заболеваниям относятся острые и хронические неврологические нарушения, когнитивные расстройства и нарушения памяти. К неврологическим нарушениям, для лечения которых применяют ингибиторы МАО-В, относят посттравматические или хронические дегенеративные процессы в нервной системе (например, болезнь Альцгеймера), другие виды деменции, минимальные когнитивные расстройства и болезнь Паркинсона. Другими показаниями к применению ингибиторов МАО-В являются психические заболевания, например депрессия, тревожные расстройства, приступы паники, социальные фобии, шизофрения, расстройства пищевого поведения и метаболические нарушения (например, ожирение), а также профилактика и лечение синдромов отмены при алкоголизме, никотиновой зависимости и других видах наркомании. Также показаниями к лечению могут быть синдром дефицита положительного подкрепления (WO 01/34172), периферическая нейропатия, вызванная противораковой химиотерапией (WO 97/33572), а также рассеянный склероз (WO 96/40095) и другие нейровоспалительные заболевания.

Фармацевтические Соединения особенно полезны для лечения и профилактики болезни Альцгеймера и сенильной деменции.

Фармакологическую активность соединений проверяют с применением следующих методов.

Гены, кодирующие МАО-А и МАО-В человека, путем трансфекции вводили в клетки линии EBNA с использованием процедуры, описанной Schlaeger и Christensen (Transient Gene Expression in Mammalian Cells Grown in Serum-free Suspension Culture; Cytotechnology 15, 1998, сс.1-13). Трансфицированные клетки гомогензировали с помощью гомогенизатора (Polytron) в трис-HCl буфере (20 мМ), содержавшем 0,5 мМ ЭГТА [этиленгликоль-бис(2-аминоэтиловый эфир)-N,N,N',N'-тетрауксусная кислота] и 0,5 мМ фениметилсульфонилфторида (рН 8,0). Клеточные мембраны получали путем центрифугирования при 45000 g с последующим двукратным промыванием трис-HCl буфером (20 мМ), содержавшем 0,5 мМ ЭГТА (рН 8,0). Мембраны ресуспендировали в вышеуказанном буфере, аликвоты хранили при -80°С до проведения анализа.

Ферментативную активность МАО-А и МАО-В определяли в 96-луночных планшетах спектрофотометрическим методом, представляющим собой модификацию метода, описанного Zhou и Panchuk-Voloshina (A One-Step Fluorometric Method for the Continuous Measurement of Monoamine Oxidase Activity, Analytical Biochemistry 253, 1997, сс.169-174). Вкратце, аликвоты мембран инкубировали в 0,1 М калиево-фосфатном буфере (рН 7,4) в течение 30 мин при 37°С в присутствии анализируемых соединений (добавленных в разных концентрациях) или без них. После инкубации инициировали ферментативную реакцию добавлением тирамина (субстрат МАО) вместе с 1 ед/мл пероксидазы хрена (Roche Biochemicals) и 80 мкл N-ацетил-3,7,-дигидроксифеноксазина (Amplex Red, Molecular Probes). Образцы инкубировали в течение 30 мин при 37°С в конечном объеме 200 мкл и определяли поглощение при длине волны 570 нм, используя специальное считывающее устройство для планшет (SpectraMax, Molecular Devices). Фоновое (неспецифическое) поглощение определяли в присутствии 10 мкл клоргилина для МАО-А и 10 мкМ L-депренила для МАО-В.

IC₅₀-значения определяли по кривым ингибирования, построенным с использованием девяти концентраций ингибитора (в двух повторностях), с помощью четырехпараметрических логистических уравнений.

Соединения настоящего изобретения являются специфическими ингибиторами МАО-В. Активность соединений формулы I или II, определяемая с помощью описанного выше метода, находится в диапазоне от 10 мкМ и менее, в типичном случае от 1 мкМ или менее, в оптимальном - от 0,03 мкМ или менее.

Фармацевтические Соединения могут использоваться в качестве лекарственных средств, например в виде лекарственных препаратов. Лекарственные препараты могут быть предназначены для перорального введения, например в виде таблеток, таблеток с покрытием, драже, твердо- и мягкожелатиновых капсул, растворов, эмульсий или суспензий. Однако указанные препаративные формы могут быть предназначены также для ректального введения, например в виде суппозиториев, или парентерального введения, например в виде растворов для инъекций.

Для получения лекарственных препаратов Фармацевтические Соединения можно перерабатывать совместно с фармацевтически инертными неорганическими или органическими носителями. Так, например, для изготовления таблеток, таблеток с покрытием, драже и твердожелатиновых капсул в качестве таких носителей можно использовать лактозу, кукурузный крахмал или его производные, тальк, стеариновые кислоты или их соли и т.п. Пригодными носителями для изготовления мягкожелатиновых капсул являются, например, растительные масла, воски, жиры, полутвердые и жидкие полиолы и т.д. Однако в зависимости от природы действующего вещества для изготовления мягкожелатиновых капсул обычно не требуются носители. Пригодными носителями для получения растворов и микстур являются, например, вода, полиолы, глицерин, растительные масла и т.п. Для изготовления суппозиториев пригодны, например, такие носители, как природные или отвержденные масла, воски, жиры, полутвердые или жидкие полиолы и т.д.

Кроме того, в состав лекарственных препаратов могут также входить консерванты, солюбилизаторы, стабилизаторы, смачивающие агенты, эмульгаторы, подслащивающие вещества, красители, ароматизаторы (корригенты), соли для регулирования осмотического давления, буферы, маскирующие агенты или антиокислители. Лекарственные препараты могут содержать также другие терапевтически ценные субстанции (действующие вещества).

Как указано выше, лекарственные препараты, содержащие Фармацевтические Соединения и терапевтически инертный носитель, также являются объектом настоящего изобретения, равно как и способ их получения, заключающийся в том, что одно или несколько Фармацевтических Соединений и при необходимости одно или несколько других терапевтически активных веществ переводят совместно с одним или несколькими терапевтически инертными носителями в пригодную для введения в организм галенову форму.

Дозу назначаемого пациенту действующего вещества можно варьировать в широких пределах, и ее, как очевидно, следует подбирать в каждом конкретном случае в соответствии с индивидуальными особенностями пациента. В общем эффективная доза для перорального или парентерального введения находится в интервале между 0,01 и 20 мг/кг/день, для всех описанных показаний предпочтительно в интервале между 0,1 и 10 мг/кг/день. Соответственно суточная доза для взрослого человека весом 70 кг находится между 0,7 и 1400 мг в день, предпочтительно между 7 и 700 мг в день.

Ниже изобретение проиллюстрировано на примерах, не ограничивающих его объем. Аббревиатура КТ означает "комнатная температура".

Пример 1

2-[5-(3-фторбензилокси)-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]ацетамид

а) метиловый эфир 4-метокси-2-метилбензойной кислоты

В соответствии с описанной методикой (J. Org. Chem. 33, 1968, с.494), смесь 20 г (120 ммоль) 4-метокси-2-метилбензойной кислоты и 97 мл МеОН, содержащую 0,6 мл серной кислоты (конц.), нагревали с обратным холодильником в течение 48 ч. После охлаждения смесь выпаривали, растворяли остаток диэтиловым эфиром и промывали насыщенным раствором гидрокарбоната натрия и рассолом. Затем органическую фазу отделяли и высушивали над сульфатом натрия. После выпаривания остаток перегоняли на 8-см колонке Vigreux с получением указанного в заголовке соединения (21,2 г, 98%) в виде бесцветной жидкости. t_кип 60°С/1 мбар. МС: m/e=180,3 (M⁺).

б) метиловый эфир 2-бромметил-4-метокси-2-метилбензойной кислоты

Смесь 20 г (111 ммоль) метилового эфира 4-метокси-2-метилбензойной кислоты, 20,7 г (117 ммоль) N-бромсукцинимида и 0,54 г (2 ммоль) дибензоилпероксида в 150 мл CCl₄ освещали лампой мощностью 300 ватт. Реакция идет с постоянным рефлюксом без перемешивания реакционной смеси. Через 4,5 часа лампу убирали, а смесь охлаждали до 5°С. Затем смесь фильтровали, фильтрат выпаривали, а остаток подвергали двойной хроматографической очистке (SiO₂, гептан/диэтиловый эфир с градиентным элюированием с изменением соотношения от 95:5 до 85:15) с получением указанного в заголовке соединения (16,6 г, 58%) в виде белого твердого вещества. МС: m/е=258,1 (М-Н⁺).

в) 5-метокси-2,3-дигидроизоиндол-1-он

Смесь 7,0 г (27 ммоль) метилового эфира 2-бромметил-4-метокси-2-метилбензойной кислоты и 2,3 г (35 ммоль) азида натрия в 100 мл ДМФ нагревали при температуре 50°С в течение 16 ч. После охлаждения до КТ смесь разводили 100 мл воды и подвергали экстракции диэтиловым эфиром (3×100 мл). Затем объединенные органические фазы промывали рассолом и высушивали над сульфатом натрия. После фильтрации и выпаривания получали азидопродукт в виде прозрачного масла, который затем растворяли в 100 мл ТГФ и последовательно добавляли 7,1 г (27 ммоль) трифенилфосфина и 0,7 мл (41 ммоль) воды. Получающуюся смесь перемешивали при КТ в течение 24 ч и затем нагревали при 55°С в течение 48 ч. Затем добавляли 2 мл МеОН и смесь нагревали при 70°С в течение 3 ч. После охлаждения до КТ смесь выпаривали, а остаток подвергали хроматографической очистке (SiO₂, CH₂Cl₂/2N NH₃-МеОН с градиентным элюированием с изменением соотношения от 99:1 до 94:6) с получением указанного в заголовке соединения (3,8 г, 86%) в виде беловатого твердого вещества. МС: m/e=163,3 (M⁺).

г) 5-гидрокси-2,3-дигидроизоиндол-1-он

Смесь 3,7 г (23 ммоль) 5-метокси-2,3-дигидроизоиндол-1-она и 15,2 мл (88 ммоль) трехбромистого бора (1 М в CH₂Cl₂) в 30 мл CH₂Cl₂ при -78°С перемешивали при КТ в течение 16 ч. Затем в смесь, охлажденную до -78°С, добавляли 25 мл МеОН. После инкубации при -78°С в течение 1 часа смесь выпаривали и остаток подвергали хроматографической очистке (SiO₂, CH₂Cl₂/2N NH₃-МеОН с градиентным элюированием с изменением соотношения от 98:2 до 90:10) с получением указанного в заголовке соединения (2,5 г, 72%) в виде беловатого твердого вещества. МС: m/e=148,0 (M-H⁺).

д) 5-(3-фторбензилокси)-2.3-дигидроизоиндол-1-он

Смесь 2,4 г (16 ммоль) 5-гидрокси-2,3-дигидроизоиндол-1-она, 2,4 г (18 ммоль) карбоната калия и 3,3 г (18 ммоль) 3-фторбензилбромида в 40 мл ацетона нагревали с обратным холодильником в течение 22 ч. После охлаждения до КТ смесь фильтровали и выпаривали. Остаток подвергали хроматографической очистке (SiO₂, CH₂Cl₂/2N NH₃-МеОН в соотношении 90:10) с получением указанного в заголовке соединения (2,8 г, 67%) в виде белого твердого вещества. МС: m/е=257,2 (М⁺).

е) 2-[5-(3-фторбензилокси)-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]ацетамид

Смесь 400 мг (1,6 ммоль) 5-(3-фторбензилокси)-2,3-дигидроизоиндол-1-она и 75 мг (1,7 ммоль) гидрида натрия (55% в минеральном масле) в 20 мл ТГФ перемешивали при КТ в течение 45 минут, затем добавляли 75 мг (1,9 ммоль) 2-бромацетамида и получающуюся смесь нагревали при 50°С в течение 16 ч. После охлаждения до КТ смесь упаривали наполовину и разводили водой. Смесь экстрагировали этилацетатом и объединенные органические фазы промывали рассолом и сушили над сульфатом натрия. После фильтрации и упаривания остаток подвергали хроматографической очистке (SiO₂, CH₂Cl₂/2N NH₃-МеОН с градиентным элюированием с изменением соотношения от 98:2 до 85:15) с получением указанного в заголовке соединения (337 мг, 67%) в виде белого твердого вещества. МС: m/e=315,3 (M+H⁺).

Пример 2

2-[5-(3-Фторбензилокси)-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]пропионамид

Аналогично примеру 1е 250 мг (0,97 ммоль) 5-(3-фторбензилокси)-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-1-она превращали в указанное в заголовке соединение (58 мг, 18%) (с использованием 2-бромпропионамида вместо 2-бромацетамида), которое получали в виде белого твердого вещества. МС: m/e=329,3 (M+H⁺).

Пример 3

(S)-2-[6-(3-фторбензилокси)-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]пропионамид

а) бис-3-фторбензиловый эфир 4-(3-фторбензилокси)фталевой кислоты

Смесь 5,0 г (27,5 ммоль) 4-гидроксифталевой кислоты, 31,14 г (164,7 ммоль) 3-фторбензилбромида и 15,18 г (109,8 ммоль) карбоната калия в 200 мл смеси ТНФ/вода (в соотношении 1:1) нагревали с обратным холодильником в течение 72 ч. После охлаждения до КТ смесь наполовину упаривали и остаток экстрагировали 100 мл этилацетата. Затем органический слой промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали. После этого смесь нагревали в аппарате Kugelrohr (температура 160°С при 15 мм рт.ст.) для удаления избытка 3-фторбензилбромида с получением указанного в заголовке соединения (13,1 г, 94%) в виде светло-желтой жидкости. МС: m/е=506,1 (М).

б) [5-(3-фторбензилокси)-2-гидроксиметилфенил]метанол

К охлаждаемой (0°С) суспензии 2,15 г (56,9 ммоль) лития алюминийгидрида в 150 мл диэтилового эфира в течение 1 часа добавляли раствор 13,1 г (25,9 ммоль) бис-3-фторбензилового эфира 4-(3-фторбензилокси)фталевой кислоты в 150 мл диэтилового эфира. Еще через 1,5 ч добавляли 100 мл воды и 100 мл 2 М серной кислоты и реакционную смесь дважды экстрагировали диэтиловым эфиром (по 100 мл). Объединенные экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и выпарив