Соединения и композиции в качестве ингибиторов протеинкиназы

Соединения и композиции в качестве ингибиторов протеинкиназы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Ссылка на родственную (предварительную) заявку

Данная заявка испрашивает более ранний приоритет, основанный на предварительной заявке США сер. Номер 60/662330, зарегистрированной 15 марта 2005 г. Полное описание этой заявки включено в описание настоящей заявки в виде ссылки в полном объеме.

Предпосылки создания изобретения

Область изобретения

В изобретении предлагается новый класс соединений, фармацевтические композиции, включающие такие соединения и способы применения таких соединений для лечения или профилактики заболеваний или нарушений, ассоциированных с аномальной или нарушенной активностью киназ, прежде всего заболеваний или нарушений, которые ассоциированы с аномальной активацией киназ Аbl, Всr-Аbl, ВМХ, ВТК, СНК2, c-RAF, CSK, c-SRC, Fes, FGFR3, F1t3, IKKα, IKKβ, JNK2α2, Lck, Met, MKK4, MKK6, MCST2, NEK2, p70S6K, PDGFRβ, PKA, PKBα, PKD2, Rsk1, SAPK2α, SAPK2β, SAPK3, SGK, Tie2 и TrkB.

Предпосылки создания изобретения

Протеинкиназы представляют собой большое семейство белков, которые играют центральную роль в регуляции многих клеточных процессов и контроля клеточной функции. Неполный перечень таких киназ включает, без ограничения перечисленным, рецепторные тирозинкиназы, такие как рецепторная киназа фактора роста тромбоцитов (PDGF-R), рецептор фактора роста нервной ткани, trkB, Met и рецептор фактора роста фибробластов, FGFR3; нерецепторные тирозинкиназы, такие как Аb1 и гибридная киназа BCR-Ab1, Lck, Csk, Fes, Bmx и c-src, и серин/треонинкиназы, такие как c-RAF, sgk, киназы MAP (например, MKK4, МКК6 и т.п.) и SAPK2α, SAPK2β и SAPK3. Нарушенная киназная активность наблюдается при многих патологических состояниях, включающих доброкачественные и злокачественные пролиферативные нарушения, а также заболевания, связанные с нарушенной активацией иммунной и нервной систем.

Новые соединения по настоящему изобретению ингибируют активность одной или более протеинкиназ и, следовательно, могут использоваться для лечения киназа-ассоциированных заболеваний.

Краткое описание сущности изобретения

Одним объектом настоящего изобретения являются соединения формулы I:

где n выбирают из 0, 1, 2, 3, 4,

Z₁ выбирают из N, C(O) и СR₃, где R₃ выбирают из группы, включающей водород, галоген, С₁-С₄алкил, С₁-С₄алкокси, галоген(С₁-С₄)алкил, галоген(С₁-С₄)алкокси, С₆-С₁₂ арил, С₅-С₈ гетероарил, С₃-С₁₂ циклоалкил, С₃-С₈ гетероциклоалкил и NR₅R₆, где R₅ независимо выбирают из группы, включающей водород и С₁-С₄ алкил, а R₆ выбирают из группы, включающей водород, С₁-С₄ алкил и С₆-С₁₂ арил, причем любой арил, гетероарил, циклоалкил или гетероциклоалкил R₃ необязательно замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей водород, галоген, С₁-С₄ алкил, С₁-С₄ алкокси, галоген(С₁-С₄)алкил и галоген(С₁-С₄₎алкокси,

Z₂ выбирают из группы, включающей N и CR₄, где R₄ выбирают из группы, включающей водород, галоген, С₁-С₄ алкил, С₁-С₄ алкокси, галоген(С₁-С₄) алкил, галоген (С₁-С₄) алкокси, С₆-С₁₂ арил, C₅-C₈ гетероарил, С₃-С₁₂циклоалкил, С₃-С₈гетероциклоалкил и NR₅R₅, причем связь между Z₁ и Z₂ выбирают из простой и двойной связи, R₅ независимо выбирают из группы, включающей водород и С₁-С₄алкил, а любой арил, гетероарил, циклоалкил или гетероциклоалкил R₄ необязательно замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей водород, галоген, С₁-С₄ алкил, С₁-С₄ алкокси, галоген(С₁-С₄)алкил и галоген(С₁-С₄)алкокси,

R₁ выбирают из группы, включающей галоген, С₁-С₄ алкил, С₁-С₄ алкокси,

R₂ выбирают из группы, включающей NR₅С(O)NR₅R₆, NR₅С(O)R₆, C(O)NR₅R₆, NR₅S(O)_0-2R₆, S(O)_0-2NR₅R₆ и NR₅R₆, причем R₅ независимо выбирают из группы, включающей водород и С₁-С₄ алкил, a R₆ выбирают из группы, включающей водород, С₁-С₄ алкил, С₆-С₁₂ арил, С₅-С₈ гетероарил, С₃-С₁₂ циклоалкил и С₃-С₈гетероциклоалкил, причем любой арил, гетероарил, циклоалкил и гетероциклоалкил R₆ необязательно замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей галоген, циано, нитро, галоген (С₁-С₄)алкил, галоген(С₁-С₄)алкокси,

С₅-С₁₂гетероарил(С₀-С₄)алкил и С₃-С₁₂ гетероциклоалкил(С₀-С₄)алкил, причем любой гетероарильный или гетероциклоалкильный заместитель R₆ необязательно замещен заместителем, независимо выбранным из группы, включающей С₁-С₄ алкил и С₃-С₁₂гетероциклоалкил,

и N-оксиды, пролекарства, замещенные производные, индивидуальные изомеры и смеси изомеров, фармацевтически приемлемые соли и сольваты (например, гидраты) таких соединений.

Вторым объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I или его N-оксид, индивидуальные изомеры и смеси изомеров или фармацевтически приемлемую соль в смеси с одним или более пригодными эксципиентами.

Третьим объектом настоящего изобретения является способ лечения заболевания у животного, при котором ингбирование киназной активности, прежде всего активности киназ Аb1, Всr-Аb1, ВМХ, ВТК, СНК2, c-RAF, CSK, с-SRC, Fes, FGFR3, F1t3, IKKα, IKKβ, JNK2α2, Lck, Met, MKK4, MKK6, MCST2, NEK2, p70S6K, PDGFRβ, PKA, PKBα, PKD2, Rsk1, SAPK2α, SAPK2β, SAPK3, SGK, Tie2 и/или TrkB, предотвращает, подавляет или смягчает патологические состояния и/или симтомы заболевания, причем указанный способ включает введение животному терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его N-оксида, индивидуальных изомеров и смеси изомеров или фармацевтически приемлемой соли.

Четвертым объектом настоящего изобретения является применение соединения формулы I для получения лекарственного средства, предназначенного для лечения заболевания у животного, при котором киназная активность, прежде всего активность Аb1, Всr-Аb1, ВМХ, ВТК, СНК2, c-RAF, CSK, c-SRC, Fes, FGFR3, F1t3, IKKα, IKKβ, JNK2α2, Lck, Met, MKK4, MKK6, MCST2, NEK2, p70S6K, PDGFRβ, PKA, PKBα, PKD2, Rsk1, SAPK2α, SAPK2β, SAPK3, SGK, Tie2 и/или TrkB, вносит вклад в развитие патологического состояния и/или его симптомов.

Пятым объектом настоящего изобретения является способ получения соединений формулы I и их N-оксидов, пролекарств, замещенных производных, индивидуальных изомеров и смесей изомеров и фармацевтически приемлемых солей.

Подробное описание изобретения

Определения (терминов)

"Алкил" в качестве группы или структурного элемента других групп, например галогеналкил и галогеналкокси, означает углеводородный остаток с прямой или разветвленной цепью. С₁-С₄ алкокси включает метокси, этокси и т.п. Галогеналкил включает трифторметил, пентафторэтил и т.п.

"Арил" означает моноциклическую или конденсированную бициклическую ароматическую систему, содержащую в цикле от шести до десяти атомов углерода. Например, арил означает фенил или нафтил, предпочтительно фенил. "Арилен" означает двухвалентный радикал, образованный арильной группой.

"Гетероарил" имеет значения, указанные выше для группы арил, где один иди более атомов углерода в цикле заменены гетероатомом. Например, С₅-С₁₀ гетероарил включает пиридил, индолил, индазолил, хиноксалинил, хинолинил, бензофуранил, бензопиранил, бензотиопиранил, бензо[1,3]диоксол, имидазолил, бензимидазолил, пиримидинил, фуранил, оксазолил, изоксазолил, триазолил, тетразолил, пиразолил, тиенил и т.п.

"Циклоалкил" означает насыщенную или частично ненасыщенную моноциклическую конденсированную бициклическую или связанную мостиковой связью полициклическую систему, содержащую в цикле указанное количество атомов. Например, С₃-С₁₀ циклоалкил включает циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и т.п.

"Гетероциклоалкил" означает циклоалкил, указанный в описании заявки, в котором один или более атомов углерода в цикле заменены группой, выбранной из -O-,

-N=, -NR-, -С(O)-, -S-, -S(O) - или -S(O)₂-, где R означает водород, С₁-С₄ алкил или аминозащитную группу. Например, при описании соединений, указанных в заявке, С₃-С₈ гетероциклоалкил включает морфолино, пирролидинил, пирролидинил-2-он, пиперазинил, пиперидинил, пиперидинилон, 1,4-диокса-8-азаспиро[4.5]дец-8-ил и т.п.

"Галоген" предпочтительно означает хлор или фтор, а также бром или иод.

Термин "мутантные формы BCR-Abl" означает замену одного или более аминокислотных остатков в последовательности киназы дикого типа. В настоящее время описано более 22 мутаций, наиболее распространенными из которых являются G250E, E255V, Т3151, F317L и М351Т. Если не указано иное, ВсR-АB1 означает дикие и мутантные формы фермента.

"Лечение" означает способ снижения или ослабления интенсивности заболевания и/или сопутствующих ему симптомов.

Подробное описание предпочтительных вариантов осуществления изобретения

Гибридный белок BCR-Аbl образуется в результате взаимной транслокации, которая гибридизует протоонкоген Аbl с геном Всr. Затем BCR-Аbl трансформирует В-клетки благодаря увеличению митогенной активности. Такое увеличение активности приводит к снижению чувствительности к апоптозу, а также к изменению адгезии и хоминга клеток-предшественников CML (хронического миелолейкоза). В настоящем изобретении предлагаются соединения, композиции и способы лечения заболевания, ассоциированного с киназой, прежде всего заболеваний, ассоциированных с киназой Abl, ВсR-Аbl, ВМХ, ВТК, СНК2, c-RAF, CSK, c-SRC, Fes, FGFR3, F1t3, IKKα, IKKβ, JNK2α2, Lck, Met, MKK4, MKK6, MCST2, NEK2, p70S6K, PDGFRβ, PKA, PKBα, PKD2, Rsk1, SAPK2α, SAPK2β, SAPK3, SGK, Tie2 и TrkB. Например, лейкоз и другие пролиферативные заболевания, ассоциированные с Всr-Аb1, можно лечить при ингибировании киназы Всr-Аb1 дикого типа и ее мутантных форм.

В одном варианте соединений формулы I

n выбирают из 1, 2, 3 и 4,

Z₁ выбирают из N, С(O) и СН,

Z₂ выбирают из N и СR₄, где R₄ выбирают из группы, включающей водород и галоген, а связь между Z₁ и Z₂ выбирают из простой связи или двойной связи,

R₁ выбирают из групп С₁-С₄ алкил и С₁-С₄ алкокси, а

R₂ выбирают из группы, включающей NR₅C(O)R₆, C(O)NR₅R₆ и NR₅R₆, где R₅ независимо выбирают из группы, включающей водород и С₁-С₄ алкил, а R₆ выбирают из группы, включающей водород, С₁-С₄ алкил и С₆-С₁₂ арил, причем любой арил R₆ необязательно замещен 1-3 радикалами, независимо выбранными из группы, включающей галоген (С₁-С₄) алкил, С₅-С₁₂ гетероарил (С₀-С₄)алкил и С₃-С₁₂ гетероциклоалкил (С₀-С₄) алкил, причем любые гетероарильные или гетероциклоалкильные заместители R₆ необязательно замещены радикалом, независимо выбранным из групп С₁-С₄ алкил и С₃-С₁₂ гетероциклоалкил.

В другом варианте некоторые предпочтительные соединения выбирают из группы, включающей N-{3-[1-(3-бром-1Н-пиразоло[3,4-(d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]-4-метилфенил}-3-трифторметилбензамид, 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-трифторметилфенил]-3-[1-(9Н-пурин-6-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]бензамид, 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-трифторметилфенил]-3-[1-(1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]бензамид, N-{4-мeтил-3-[1-(6-oкco-6,7-дигидpo-5H-пиppoлo[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-имидaзoл-2-илaминo]фeнил}-3-тpифтopмeтилбeнзaмид, N-{4-метил-3-[1-(9Н-пурин-6-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]фенил}-3-трифторметилбензамид и N-{4-метил-3-[1-(1Н-пиразоло[3,4-(d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]фенил}-3-трифторметилбензамид.

Другим вариантом изобретения являются соединения формулы Iа

в котором R₁ выбирают из групп метил и метокси,

R₂ выбирают из группы, включающей NHC(O)R₆, C(O)NHR₆ и NHR₆, где R₆ выбирают из группы, включающей водород, метил и фенил, причем любой фенил R₆ необязательно замещен 1-3 радикалами, независимо выбранными из группы, включающей трифторметил, имидазолил, пиперидинил, пиперазинил и пиперазинилметил, причем любые гетероарильные или гетероциклоалкильные заместители R₆ необязательно замещены радикалом, независимо выбранным из группы, включающей метил, этил и пирролидинил.

Предпочтительные соединения выбирают из группы, включающей 4-метил-N-[4-(2-метилимидазол-1-ил)-3-трифторметилфенил]-3-[1-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]бензамид, 3-(4-метилимидазол-1-ил)-N-{4-метил-3-[1-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]фенил}-5-трифторметилбензамид, 4-(4-метилпиперазин-1-илметил)-N-{4-метил-3-[1-(7Н-пирроло[2,3- d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]фенил}-3- трифторметилбензамид, 3-(4-этилпиперазин-1-илметил)-N-{4-мeтил-3-[1-(7H-пиppoлo[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-имидaзoл-2-иламино]фенил}-5-трифторметил6ензамид, N-{4-метил-3-[1-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]фенил}-3-(4-пирролидин-1-илпиперидин-1-ил)-5-трифторметилбензамид, 3-метокси-N-[4-(2-метилимидазол-1-ил)-3-трифторметилфенил]-5-[1-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]бензамид, 3-(4-метилимидазол-1-ил)-N-{4-метил-3-[1-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]фенил}-5-трифторметилбензамид, 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-трифторметилфенил]-3-[1-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]бензамид, N-[4-(4-этилпиперазин-1-илметил)-3-трифторметилфенил]-3-метокси-5-[1-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]бензамид, N-[4-(4-этилпиперазин-1-илметил)-3-трифторметилфенил]-4-метил-3-[1-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]бензамид, 3-(4-этилпиперазин-1-ил)-N-{4-метил-3-[1-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-иламино] фенил}-5-трифторметил-бензамид, 3-[1-(5-фтор-7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]-4-метил-N-(3-трифторметилфенил)бензамид, N-{4-метил-3-[1-(7Н-пирроло[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-lH-имидaзoл-2-илaминo]фeнил}-3-тpифтopмeтилбeнзaмид, 4-метил-N-[4-(2-метилимидазол-1-ил)-3-трифторметилфенил]-3-[1-(7Н-пиppoлo[2,3-d]пиpимидин-4-ил)-1H-имидaзoл-2-илaминo]бeнзaмид, N-{3-[1-(5-хлор-7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]-4-метилфенил}-3-трифторметилбензамид, N-{4-метил-3-[1-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]фенил}бензамид, N-{4-метил-3-[1-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]фенил}ацетамид, 4-метил-N3-[1-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-ил]бензол-1,3-диамин и 3-(4-метилпиперазин-1-ил)-N-{4-метил-3-[1-(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)-1Н-имидазол-2-иламино]фенил}-5-трифторметилбензамид.

Другие предпочтительные соединения по изобретению подробно описаны в примерах и приведены ниже в таблице 1.

Фармакология и промышленная применимость

Соединения по изобретению модулируют активность киназ и как таковые используются для лечения заболеваний или нарушений, при которых киназы принимают участие в развитии патологии и/или симптомов заболевания. Примеры киназ, которые ингибируются соединениями и композициями, описанными в данном контексте и для подавления которых используются методы, описанные в данном контексте, включают, без ограничения перечисленным, Abl, Всr-Аbl (дикий тип и мутантные формы), ВМХ, ВТК, СНК2, c-RAF, CSK, c-SRC, Fes, FGFR3, F1t3, IKKα, IKKβ, JNK2α2, Lck, Met, MKK4, MKK6, MCST2, NEK2, p70S6K, PDGFRβ, PKA, PKBβ, PKD2, Rsk1, SAPK2α, SAPK2β, SAPK3, SGK, Tie2 и TrkB.

Тирозинкиназа Абельсона (т.е. Abl, c-Abl) принимает участие в регуляции клеточного цикла, в клеточном ответе на генотоксический стресс и в передаче информации о клеточном окружении через интегриновый сигнал. Таким образом белок Аb1 выполняет сложную функцию в качестве клеточного модуля, который интегрирует сигналы от различных межклеточных и внутриклеточных источников, что оказывает влияние на развитие клеточного цикла и апоптоза. Тирозинкиназа Абельсона включает подтипы, такие как химерный гибридный белок (онкопротеин) BCR-Аbl с разрегулированной тирозинкиназной активностью или v-Abl. BCR-Abl играет решающую роль в патогенезе в 95% случаев хронического миелогенного лейкоза (CML) и в 10% случаев острого лимфолейкоза STI-571 (Gleevec) является ингибитором онкогенной тирозинкиназы BCR-Abl и используется при лечении хронического миелоидного лейкоза (CML). Однако у некоторых пациентов на стадии бластного криза CML наблюдается устойчивость к STI-571 из-за мутаций в киназс BCR-Abl. К настоящему времени идентифицировано 22 мутации, наиболее распространенными из которых являются G250E, E255V, Т3151, F317L и М351Т.

Соединения по настоящему изобретению ингибируют киназу аb1, прежде всего киназу v-abl. Соединения по настоящему изобретению также ингибируют киназу BCR-Abl дикого типа и мутантные формы киназы BCR-Abl и, следовательно, пригодны для лечения Всr-аbl-позитивного рака и опухолевых заболеваний, таких как лейкоз (прежде всего хронический миелоидный лейкоз и острый лимфолейкоз, развитие которых сопровождается, прежде всего, апоптотическим механизмом действия), а также оказывают действие на подгруппу лейкозных стволовых клеток и могут использоваться для очистки этих клеток in vitro после их удаления из организма (например, при удалении костного мозга) и реплантации популяции клеток, очищенных от опухолевых клеток (например, реплантации очищенных клеток костного мозга).

Сигнальный путь Ras-Raf-MEK-ERK опосредует клеточный ответ на ростовые сигналы. Ras мутирован в онкогенную форму в ~15% случаев рака человека. Семейство Raf относится к семейству серин/треонинпротеинкиназ и включает три члена семейства A-Raf, B-Raf и c-Raf (или Raf-1). Исследование Raf как мишени лекарственных средств направлено на изучение действия Raf как подавляющего эффектора на Ras. Однако последние результаты свидетельствуют о том, что B-Raf выполняет важную функцию в образования некоторых опухолей без обязательного участия активированной аллели Ras (Nature, 417, 949-954 (1 июля 2002). Мутации B-Raf, прежде всего, обнаружены в большинстве злокачественных меланом.

Существующие методы лечения меланомы характеризуются недостаточной эффективностью, прежде всего на поздней стадии заболевания. Соединения по настоящему изобретению ингибируют также клеточные процессы с участием киназы b-Raf и представляют собой новый терапевтический подход к лечению рака человека, прежде всего меланомы.

Соединения по настоящему изобретению, кроме того, ингибируют клеточные процессы с участием киназы c-Raf. c-Raf активируется онкогеном ras, который мутирован при многих видах рака человека. Следовательно, ингибирование киназной активности c-Raf представляет собой перспективный способ предотвращения роста опухоли, опосредованного геном ras (Campbell S.L., Oncogene, 17, 1395 (1998)).

PDGF (фактор роста тромбоцитов) представляет собой очень распространенный ростовой фактор, который играет важную роль как в процессе нормального роста, так и в патологической клеточной пролиферации, например, которая наблюдается при онкогенезе и при заболеваниях гладкомышечных клеток кровеносных сосудов, например при атеросклерозе и тромбозе. Соединения по изобретению ингибируют активность рецептора PDGF (PDGFR) и, следовательно, могут использоваться при лечении опухолевых заболеваний, таких как глиома, саркома, рак предстательной железы и рак ободочной кишки, молочной железы и яичника.

Соединения по настоящему изобретению можно использовать не только в качестве подавляющих опухоль агентов, например при мелкоклеточном раке легких, но и в качестве средств лечения незлокачественных пролиферативных нарушений, таких как атеросклероз, тромбоз, псориаз, склеродерма и фиброз, а также для защиты стволовых клеток, например для защиты от гемотоксического действия химиотерапевтических агентов, таких как 5-фторурацил, и лечения астмы. Соединения по изобретению прежде всего можно использовать для лечения заболеваний, которые чувствительны к ингибированию рецепторной киназы PDGF.

Соединения по настоящему изобретению оказывают благоприятное действие при лечении нарушений, возникающих в результате трансплантации, например аллогенной трансплантации, прежде всего при отторжении тканей, таких как, прежде всего облитерирующий бронхиолит (OВ), т.е. хроническое отторжение аллогенных трансплантатов легкого. В отличие от пациентов, не страдающих от ОВ, у пациентов с диагнозом ОВ часто наблюдается повышенная концентрация PDGF в бронхоальвеолярной промывной жидкости.

Соединения по настоящему изобретению также являются эффективными при заболеваниях, ассоциированных с миграцией и пролиферацией гладкомышечных клеток сосудов (при которых PDGF и PDGF-R часто играют заметную роль), таких как рестеноз и атеросклероз. Такое воздействие и его последующее влияние на пролиферацию и миграцию гладкомышечных клеток сосудов in vitro и in vivo можно продемонстрировать при введении соединений по настоящему изобретению, а также при исследовании их воздействия на утолщение внутренней интимы сосудов после механического повреждения in vivo.

Семейство trk нейтрофиновых рецепторов (trkA, trkB, trkC) стимулирует выживание, рост и дифференциацию нейронных и ненейронных тканей. Белок TrkB экспрессируется в клетках нейроэндокринного типа в тонкой кишке и ободочной кишке, в α-клетках поджелудочной железы, в моноцитах и макрофагах лимфатических узлов и селезенки и в гранулярных слоях эпидермиса (Shibayama и Koizumi, 1996). Экспрессия белка TrkB ассоциируется с неблагоприятной прогрессией опухолей Вильямса и нейробластомы. Более того, TkrB экспресеируется в злокачественных клетках предстательной железы, но не обнаруживается в нормальных клетках. Сигнальный путь подавления рецепторов trk включает каскад активации МАРК с участием Shc, активированного генами Ras, ERK-1 и ERK-2, и пути передачи сигнала PLC-γ (Sugimoto и др., 2001).

Киназа c-Src передает онкогенные сигналы многих рецепторов. Например, сверхэкспрессия EGFR или HER2/neu в опухолях приводит к конститутивной активации c-src, что является характеристикой злокачественных клеток, но не наблюдается в нормальных клетках. С другой стороны, мыши с дефицитом экспрессии c-src представляют собой фенотип с «мраморной болезнью», что свидетельствует о ключевой роли c-src в функционировании остеокластов и возможном участии в развитии ассоциированных нарушений.

Киназа семейства Tec, Bmx, нерецепторная протеинтирозинкиназа, контролирует пролиферацию эпителиальных опухолевых клеток молочной железы.

Установлено, что рецептор 3 фактора роста фибробластов обладает отрицательным регуляторным действием на рост костной ткани и подавляет пролиферацию хондроцитов. Летальная дисплазия вызывается различными мутациями в рецепторе 3 фактора роста фибробластов, а одна мутация, TDII FGFR3, обладает конститутивной тирозинкиназной активностью, которая активирует фактор транскрипции Stat1, что приводит к экспрессии ингибитора клеточного цикла, остановке роста и аномальному развитию костной ткани (Su и др.. Nature, 386, 288-292 (1997)). Кроме того, FGFR3 в большинстве случаев экспрессируется в опухолях типа множественной миеломы. Ингибиторы активности FGFR3 можно использовать для лечения воспалительных или аутоиммунных заболеваний, опосредованных Т-клетками, включающих, без ограничения перечисленным, ревматоидный артрит (RA), коллагеновый артрит II, рассеянный склероз (МС:), системную красную волчанку (SLE), псориаз, юношеский диабет, болезнь Шенгрена, заболевание щитовидной железы, саркоидоз, аутоиммунный увеит, воспалительное заболевание кишечника (болезнь Крона и язвенный колит), глютеновую болезнь и тяжелую псевдопаралитическую миастению.

Активность сывороточной и глюкокортикоид-регулируемой киназы (SGK) коррелирует с активностями возбужденных ионных каналов, прежде всего активностью натриевых и/или калиевых каналов, и соединения по изобретению можно использовать для лечения гипертензии.

В работах Lin и др., J. CHn. Invest. 100, 8, 2072-2078 (1997) и Р. Lin, PNAS, 95, 8829-8834 (1998) описано подавление роста опухоли и васкуляризации, а также снижение метастазирования в легких при аденовирусных инфекциях или при инъекциях внеклеточного домена Tie-2 (Tek) в модели опухоли молочной железы и модели ксенотрансплантата меланомы. Ингибиторы Tie2 можно использовать в случаях, при которых наблюдается аномальная неоваскуляризация (например, при диабетической ретинопатии, хроническом воспалении, псориазе, саркоме Капоши, хронической неоваскуляризации при дегенерации желтого пятна, ревматоидном артрите, детской гемангиоме и раке).

Lck принимает участие в передаче сигнала Т-клетками. У мышей с отсутствием гена Lck наблюдается низкий уровень тимоцитов. Функция Lck в качестве положительного активатора передачи сигнала Т-клетками свидетельствует о том, что ингибиторы Lck можно использовать для лечения аутоиммунного заболевания, такого как ревматоидный артрит.

JNK и другие МАРК принимают участие в индукции клеточного ответа на рак, тромбин-индуцированную агрегацию тромбоцитов, на нарушения типа иммунодефицита, аутоиммунные заболевания, гибель клеток, аллергию, остеопороз и болезнь сердца. Терапевтические мишени, связанные с активацией пути JNK, включают хронический миелогенный лейкоз (CML), ревматоидный артрит, астму, остеоартрит, ишемию, рак и нейродегенеративные заболевания. В связи с активацией JNK, ассоциированной с заболеванием печени или приступами печеночной ишемии, соединения по изобретению можно также использовать для лечения различных нарушений функции печени. Сообщается также об участии JNK в развитии сердечно-сосудистого заболевания, такого как инфаркт миокарда или застойная сердечная недостаточность, а также установлено, что JNK опосрсдует гипертрофические ответные реакции на различные формы сердечного стресса. Установлено, что каскад JNK принимает участие в активации Т-клеток, включая активацию промотора IL-2. Таким образом, ингибиторы JNK могут оказывать лечебное действие при коррекции патологических ответных иммунных реакций. Установлена также роль активации JNK при развитии различных видов рака, что свидетельствует о возможности эффективного использования ингибиторов JNK для лечения рака. Например, конститутивно активируемая JNK ассоциируется с онкогенезом, опосредованным HTLV-1 (Oncogene, 13, 135-142 (1996)]. JNK принимает участие в развитии саркомы Капоши (KS). Пролиферативное действие других цитокинов, принимающих участие в пролиферации KS, таких как эндотелиальный фактор роста сосудов (VEGF), IL-6 и TNFα, также может оказаться опосредованным JNK. Кроме того, регуляция гена c-jun в клетках р210, трансформированных BCR-ABL, соответствует активности JNK, что свидетельствует о возможности применения ингибиторов JNK при лечении хронического миелогенного лейкоза (CML) (Blood 92, 2450-2460 (1998)).

Принято считать, что некоторые аномальные пролиферативные состояния ассоциированы с экспрессией raf и, следовательно, чувствительны к ингибированию экспрессии raf. Аномально высокие уровни экспрессии белка raf также связаны с трансформацией и аномальной пролиферацией клеток. Предполагается также, что указанные аномальные пролиферативные состояния чувствительны к ингибированию экспрессии raf. Например, предполагается, что экспрессия белка c-raf играет роль в аномальной клеточной пролиферации, поскольку сообщается, что 60% всех клеточных линий карциномы легкого обычно экспрессируют высокий уровень мРНК и белка c-raf. Другими примерами аномальных пролиферативных состояний являются гиперпролиферативные нарушения, такие как рак, опухоли, гиперплазия, фиброз легких, ангиогенез, псориаз, атеросклероз и пролиферация гладкомышечных клеток кровеносных сосудов, такие как стеноз или рестеноз после пластической операции на сосудах. Клеточный сигнальный путь, частью которого является raf, также принимает участие в воспалительных нарушениях, характеризующихся пролиферацией Т-клеток (активация и рост Т-клеток), таких, например, как отторжение тканевого трансплантата, эндотоксиновый шок и гломерулярный нефрит.

Стресс-активируемые протеинкиназы (SAPK) представляют собой семейство протеинкиназ, которые принимают участие на предпоследней стадии пути передачи сигнала, при этом происходит активация фактора транскрипции с-jun и экспрессия генов, регулируемых c-jun. Прежде всего, c-jun принимает участие в транскрипции генов, которые кодируют белки, связанные с репарацией ДНК, поврежденной вследствие генотоксического действия. Следовательно, агенты, которые ингибируют активность SAPK в клетке, предотвращают репарацию ДНК и сенсибилизируют клетку к агентам, которые индуцируют повреждение ДНК или ингибируют синтез ДНК и индуцируют апоптоз клетки, или к агентам, которые ингибируют клеточную пролиферацию.

Митоген-активируемые протеинкиназы (МАРК) являются членами консервативных путей передачи сигнала, которые активируют факторы транскрипции, факторы трансляции и другие молекулы-мишени в ответ на различные внеклеточные сигналы. МАРК активируются митоген-активируемыми протеинкиназами (МКК) за счет двойного фосфорилирования последовательности Thr-X-Tyr. У высших эукариотов физиологическая роль передачи сигнала МАРК коррелирует с клеточными процессами, такими как пролиферация, онкогенез, развитие и дифференциация. Соответственно способность регулировать передачу сигнала по указанным путям (прежде всего с участием МКК4 и МКК6) можно использовать при разработке способов лечения и профилактики заболеваний человека, ассоциированных с передачей сигнала МАРК, таких как воспалительные заболевания, аутоиммунные заболевания и рак.

Семейство протенкиназ рибосомального белка S6 человека включает по меньшей мере 8 членов (RSK1, RSK2, RSK3, RSK4, MCSK1, MCSK2, p70S6K и p70S6 Kb). Протенкиназы рибосомального белка S6 выполняют важные плеотропные функции, в том числе играют ключевую роль в регуляции трансляции мРНК при биосинтезе белка (Eur. J. Biochem., 267(21), 6321-6330 (2000, ноябрь); Exp Cell Res., 253 (1), 100-109 (1999, 25 ноября); Mol Cell Endocrinol., 151(l-2), 65-77 (1999, 25 мая)). Кроме того, фосфорилирование рибосомального белка S6 киназой p70S6 связано с регуляцией клеточной подвижности (Immunol. Cell Biol., 78(4), 447-451 (2000, август)) и клеточного роста (Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol., 65, 101-127 (2000)), и, следовательно, является важным фактором при метастазировании опухоли, иммунном ответе и репарации ткани, а также при других патологических состояниях.

Киназы SAPK (называемые также "N-концевые киназы jun" или "JNK") представляют собой семейство протеинкиназ, которые принимают участие на предпоследней стадии пути передачи сигнала, при этом происходит активация фактора транскрипции c-jun и экспрессия генов, регулируемых c-jun. Киназа с-jun принимает участие прежде всего в транскрипции генов, которые кодируют белки, связанные с репарацией ДНК, поврежденной вследствие генотоксического действия. Агенты, которые ингибируют активность SAPK в клетке, предотвращают репарацию ДНК и сенсибилизируют клетку к таким терапевтическим противоопухолевым агентам, которые оказывают действие за счет индукции повреждения ДНК.

ВТК играют важную роль в развитии аутоиммунного и/или воспалительного заболевания, такого как системная красная волчанка (SLE), ревматоидный артрит, рассеянный васкулит, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (IТР), тяжелая псевдопаралитическая миастения и астма. Благодаря участию ВТК в активации В-клеток ингибиторы ВТК можно использовать для подавления патогенных состояний, опосредованных В-клетками, таких как продуцирование аутоантител, и при лечении лимфомы В-клеток и лейкоза.

СНК2 является киназой контрольных точек семейства серин/треонинпротеинкиназ и принимает участие в механизме контроля повреждений ДНК, таких как повреждения, вызванные мутагенами окружающей среды и эндогенными видами активного кислорода. В результате ее можно использовать в качестве супрессора опухоли и мишени при онкотерапии.

CSK влияет на метастазирующую активность опухолевых клеток, прежде всего рака ободочной кишки.

Fes является нерецепторной протеинтирозинкиназой, которая принимает участие в ряде путей передачи сигнала с участием цитокинов, а также дифференциации миелоидных клеток. Fes является также ключевым компонентом в механизме дифференциации гранулоцитов.

Рецепторная тирозинкиназа F1t3 принимает участие в развитии лейкоза и миелодиспластического синдрома. Приблизительно 25% клеток лейкоза AML экспрессируют конститутивно активную форму аутофосфорилированной тирозинкиназы (ф)FLT3 на клеточной поверхности. Активность ф-FLT3 обеспечивает рост и выживание предпочтительно лейкозных клеток. Пациентов с острым лейкозом, у которых лейкозные клетки экспрессируют киназу ф-FLT3, в основном характеризуют неблагоприятным клиническим прогнозом. Ингибирование киназы ф-FLT3 индуцирует апоптоз (программируемую гибель клеток) лейкозных клеток.

Ингибиторы IККα и IKKβ (1 и 2) являются лекарственными средствами для лечения заболеваний, включающих ревматоидный артрит, отторжение трансплантата, воспалительное заболевание кишечника, остеоартрит, астму, хроническое обструктивное заболевание легких, атеросклероз, псориаз, рассеянный склероз, инсульт, системную красную волчанку, болезнь Альцгеймера, ишемию головного мозга, травматическое повреждение мозга, болезнь Паркинсона, боковой амиотрофический склероз, субарахноидальное кровоизлияние и другие заболевания или нарушения, ассоциированные с избыточным продуцированием воспалительных медиаторов в головном мозге и центральной нервной системе.

Met ассоциируется с большинством типов основных раков человека, и экспрессия этого фермента часто коррелирует с неблагоприятным прогнозом и метастазированием. Ингибиторы Met являются лекарственными средствами для лечения заболеваний, включающих различные виды рака, такие как рак легких, NSCLC (немелкоклеточный рак легких), рак костной ткани, рак поджелудочной железы, рак кожи, рак головы и шеи, кожная и внутриглазная меланома, рак матки, рак яичника, ректальный рак, рак анальной области, рак желудка, рак ободочной кишки, рак молочной железы, гинекологические опухоли (например, саркома матки, карцинома маточных труб, карцинома эндометрия, карцинома шейки матки, карцинома влагалища или карцинома вульвы), болезнь Ходжкина, рак пищевода, рак тонкой кишки, рак эндокринной системы (например, рак щитовидной железы, паратиреоидный рак или рак надпочечников), саркомы мягких тканей, рак мочеиспускательного канала, рак пениса, рак предстательной железы, хронический или острый лейкоз, детские солидные опухоли, лимфоцитарные лимформы, рак мочевого пузыря, рак почек или мочеточника (например, почечно-клеточный рак, карцинома почечного пелвиса), детские злокачественные заболевания, опухоли центральной нервной системы (например, первичная лимфома ЦНС, опухоли позвоночника, глиома мозгового ствола или гипофизарная аденома), рак крови, такой как острый миелоидный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз и т.п., язва пищевода Баррета (предраковый синдром), неопластическое заболевание кожи, псориаз, грибовидные микозы и доброкачественная гипертрофия предстательной железы, заболевания, ассоциированные с диабетом, такие как диабетическая ретинопатия, ретинальная ишемия и ретинальная неоваскуляризация, цирроз печени, сердечно-сосудистые заболевания, такие как атеросклероз, иммунологические заболевания, такие как аутоиммунное заболевание и почечное заболевание. Предпочтительно заболевание означает рак, такой как острый миелоидный лейкоз и колорсктальный рак.

Nima-ассоциированная киназа 2 (Nek2) является протеинкиназой, регулирующей клеточный цикл, причем фермент локализуется в центросоме и обладает максимальной активностью на стадии митоза. Функциональные исследования свидетельствуют об участии Nek2 в регуляции разделения центросомы и образовании веретена. Повышенное содержание белка Nek2 (в 2-5 раз) наблюдается в клеточных линиях, полученных из некоторых опухолей человека, таких как рак шейки матки, яичника, предстательной железы и прежде всего рака молочной железы.

Заболевания или состояния, опосредованные p70S6K, включают, без ограничения перечисленным, пролиферативные нарушения, такие как рак и туберозный склероз.

В соответствии с вышеизложенным в настоящем изобретении предлагается также способ профилактики или лечения любых заболеваний или нарушений, указанных выше, у субъекта, который нуждается в таком лечении, причем указанный способ заключается в том, что указанному субъекту вводят терапевтически эффективное количество (см. ниже в разделе Способы введения и фармацевтические композиции) соединения формулы 1 или его фармацевтически приемлемой соли. При любом вышеуказанном применении требуемые дозы могут изменятьс