Чистящие композиции, содержащие трансглюкозидазу

Чистящие композиции, содержащие трансглюкозидазу

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к композициям, содержащим фермент трансглюкозидазу и полисахарид природной камеди, где полисахарид природной камеди является субстратом для фермента трансглюкозидазы. Настоящее изобретение также относится к способам применения фермента трансглюкозидазы для разрушения полисахарида природной камеди. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления эти композиции и способы находят применение в чистке.

Известный уровень техники

Детергент и другие чистящие композиции часто включают сложную комбинацию активных ингредиентов. Например, многие чистящие продукты содержат систему поверхностно активных веществ, ферменты для чистки, отбеливающие агенты, моющие компоненты, подавители пенообразования, суспендирующие грязь агенты, высвобождающие грязь агенты, флуоресцентные осветлители, смягчающие агенты, диспергирующие агенты, соединения, ингибирующие перемещение красителей, абразивные агенты, бактерицидные агенты и отдушки. Однако, несмотря на сложность современных детергентов, существует много загрязнений, которые трудно удалить. Таким образом, в данной области техники остается потребность в композициях и способах для эффективной очистки от различных загрязнений.

Краткое изложение сущности изобретения

Настоящее изобретение относится к композициям, содержащим фермент трансглюкозидазу и полисахарид природной камеди, где полисахарид природной камеди является субстратом для фермента трансглюкозидазы. Настоящее изобретение также относится к способам применения фермента трансглюкозидазы для разрушения полисахарида природной камеди. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления композиции и способы находят применение в чистке.

В некоторых вариантах осуществления композиции включают полисахариды природной камеди, такие как ксантановые камеди. В некоторых дополнительных вариантах осуществления фермент трансглюкозидаза обладает активностью, определенной как EC 2.4.1.24, по номенклатуре IUBMB. В некоторых дополнительных вариантах осуществления фермент трансглюкозидаза обладает аминокислотной последовательностью, которая по меньшей мере приблизительно на 90% идентична ферменту трансглюкозидазе Aspergillus. В некоторых других вариантах осуществления композиция дополнительно включает по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество. В некоторых дополнительных вариантах осуществления полисахарид природной камеди присутствует на предмете как загрязнение. В некоторых особенно предпочтительных вариантах осуществления предмет представляет собой ткань.

В настоящем изобретении также предлагаются методы, включающие объединение фермента трансглюкозидазы с по меньшей мере одним полисахаридом природной камеди для разрушения полисахарида природной камеди. В некоторых вариантах осуществления фермент трансглюкозидаза обладает активностью, определенной как EC 2.4.1.24, по номенклатуре IUBMB. В некоторых вариантах осуществления полисахарид природной камеди представляет собой ксантановую камедь.

Настоящее изобретение также относится к способам очистки, включающим: контактирование предмета, загрязненного полисахаридом природной камеди, с чистящей композицией, включающей фермент трансглюкозидазу; и поддержание предмета и чистящей композиции в условиях, достаточных для эффективного разрушения полисахарида природной камеди и тем самым очистки предмета. В некоторых вариантах осуществления предмет загрязнен пищей, которая содержит по меньшей мере один полисахарид природной камеди. В некоторых дополнительных вариантах осуществления полисахарид природной камеди включает ксантановую камедь. В некоторых других вариантах осуществления предмет выбран из тканей и твердых покрытий. В некоторых дополнительных вариантах осуществления фермент трансглюкозидаза обладает аминокислотной последовательностью, которая по меньшей мере приблизительно на 90% идентична ферменту трансглюкозидазе Aspergillus. В некоторых вариантах осуществления чистящая композиция дополнительно включает по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество. В некоторых дополнительных вариантах осуществления чистящая композиция дополнительно включает по меньшей мере один фермент, выбранный из протеаз, амилаз, целлюлаз, липаз, кутиназ, маннаназ, пектиназ, пектатлиаз и оксидоредуктаз для разрушения других загрязняющих компонентов. В некоторых других дополнительных вариантах осуществления чистящая композиция имеет рН от приблизительно рН 5,0 до приблизительно рН 11,5. В некоторых других дополнительных вариантах осуществления чистящая композиция включает фермент трансглюкозидазу в концентрации в диапазоне от приблизительно 0,01 ч/млн до приблизительно 100 ч/млн.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к композициям, содержащим: фермент трансглюкозидазу; и по меньшей мере один полисахарид природной камеди; где полисахарид природной камеди является субстратом для фермента трансглюкозидазы. В некоторых вариантах осуществления полисахарид природной камеди включает ксантановую и/или гуаровую камедь. Однако не подразумевается, что настоящее изобретение ограничивается каким-либо конкретным полисахаридом камеди. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления полисахарид природной камеди присутствует в виде загрязнения на предмете (например, ткани), в то время как в других вариантах осуществления он находится в свободном состоянии в растворе. В некоторых вариантах осуществления фермент трансглюкозидаза включает аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере приблизительно на 70% идентична, по меньшей мере приблизительно на 80% идентична, по меньшей мере приблизительно на 85% идентична, по меньшей мере приблизительно на 90% идентична, по меньшей мере приблизительно на 95% идентична или по меньшей мере приблизительно на 98% идентична трансглюкозидазе Aspergillus. В некоторых вариантах осуществления композиции дополнительно содержат по меньшей мере одно поверхностно активное вещество и/или другой чистящий агент.

Настоящее изобретение также относится к способам, которые включают объединение фермента трансглюкозидазы с по меньшей мере одним полисахаридом природной камеди для разрушения полисахарида природной камеди. В некоторых вариантах осуществления методы включают: контактирование предмета, загрязненного полисахаридом природной камеди, с чистящей композицией, включающей фермент трансглюкозидазу; и поддержание предмета и чистящей композиции вместе в условиях, достаточных для эффективного разрушения полисахарида природной камеди и тем самым очистки предмета.

В некоторых вариантах осуществления предмет (например, ткань) загрязнен пищей, которая содержит по меньшей мере один полисахарид природной камеди (например, пищей, которая содержит по меньшей мере одну ксантановую и/или гуаровую камедь). В некоторых вариантах осуществления чистящая композиция дополнительно содержит по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество, другие чистящие агенты и/или по меньшей мере один дополнительный фермент (например, протеазу, амилазу, целлюлазу, липазу, кутиназу, оксидоредуктазу или тому подобное) для разрушения других загрязняющих компонентов. В некоторых вариантах осуществления чистящие композиции имеют рН в диапазоне от приблизительно рН 5,0 до приблизительно рН 11,5, и фермент трансглюкозидаза присутствует в чистящей композиции в концентрации в диапазоне от приблизительно 0,01 ч/млн до приблизительно м.

В некоторых вариантах осуществления способы, предлагаемые в настоящем описании, ведут к более эффективному удалению загрязнений, которые содержат полисахариды природной камеди, чем эквивалентные способы, в которых не применяется фермент трансглюкозидаза.

В некоторых дополнительных вариантах осуществления в настоящем изобретении предлагается выделенный фермент, содержащий трансглюкозидазу Aspergillus, продуцируемую клеткой-хозяином Trichoderma reesei. Настоящее изобретение также относится к чистящим композициям (например, детергентам для стирки), содержащим этот фермент, а также к способам применения этого фермента для чистки предмета (например, ткани).

Описание чертежей

Некоторые аспекты последующего подробного описания понимаются наилучшим образом при прочтении в сочетании с сопровождающими фигурами. Подчеркивается, что в соответствии с общей практикой различные детали фигур даются не в масштабе. Напротив, размеры различных деталей условно увеличены или уменьшены для ясности.

На фигуре 1 представлена карта вектора pTrex3(AGL51M).

На фигуре 2 представлена нуклеотидная последовательность экспрессионной кассеты pTrex3(AGL51M) (SEQ ID NO:1).

На фигуре 3 представлена гистограмма, демонстрирующая ферментативную активность трансглюкозидазы на 0,2% ксантане при измерении с помощью теста восстановления сахаров.

На фигуре 4 представлены гистограммы, демонстрирующие эффективность чистки Trip-TG в 50 мМ Hepes буфере (рН 7,4) и в AATCC HDL детергенте (рН 7,4) на загрязненных гуаром микрообразцах (верхняя панель) и на загрязненных салатным соусом микрообразцах (нижняя панель).

На фигуре 5 представлена гистограмма эксперимента по дозозависимости ответа, демонстрирующая, что Trip-TG активен на загрязненных салатным соусом микрообразцах в концентрации от 1 до 5 ч/млн в AATCC HDL.

На фигуре 6 представлена гистограмма, демонстрирующая чистящую активность Trip-TG на загрязненных салатным соусом микрообразцах в сверхмощном твердом детергенте (HDD).

На фигуре 7 представлена гистограмма, демонстрирующая чистящую активность Trip-TG на загрязнении джемом в Tergotometer тесте с использованием 0,15% AATCC HDL.

Описание изобретения

Настоящее изобретение относится к композициям, содержащим фермент трансглюкозидазу и полисахарид природной камеди, где полисахарид природной камеди является субстратом для фермента трансглюкозидазы. Настоящее изобретение также относится к способам применения фермента трансглюкозидазы для разрушения полисахарида природной камеди. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления композиции и способы находят применение в чистке.

Перед тем как экспериментальные варианты осуществления будут описаны более подробно, должно быть понятно, что это изобретение не ограничивается конкретными описываемыми вариантами осуществления и в качестве такового может, конечно, варьировать. Должно быть понятно также, что используемая в настоящем описании терминология предназначена для описания только конкретных вариантов осуществления и не рассматривается как лимитирующая.

При использовании в настоящем описании, когда предлагается диапазон величин, должно быть понятно, что каждая промежуточная величина до десятой части единицы нижнего предела, если в контексте ясно не указано иначе, между верхним и нижним пределами этого диапазона также конкретно раскрывается. Каждый более мелкий диапазон между любой установленной величиной или промежуточной величиной в установленном диапазоне и любая другая установленная или промежуточная величина в этом установленном диапазоне охватывается изобретением. Верхние и нижние пределы этих более мелких диапазонов в диапазоне могут быть независимо включены в диапазон или исключены из него, и каждый диапазон, где тот или другой, ни тот, ни другой или оба предела включены в более мелкие диапазоны, также охватывается изобретением в зависимости от любого конкретно исключаемого предела в установленном диапазоне. Когда установленный диапазон включает один или оба предела, диапазоны, исключающие тот или другой, или оба из этих включенных пределов, также включаются в изобретение.

Хотя любые методы и материалы, сходные или эквивалентные описываемым в настоящем документе, могут быть использованы в методах или тестировании настоящего изобретения, далее будут описываться иллюстративные методы и материалы. Все приводимые в настоящем описании патенты и публикации включены в настоящий документ в качестве ссылок для раскрытия и описания методов и/или материалов, включая последовательности, в связи с которыми, цитируются публикации. Любые номера поступления в базу данных GENBANK®, перечисленные в настоящем описании, включены в качестве ссылки в их полном объеме, включая указанные там последовательности нуклеиновых кислот и белков и комментарии к этим последовательностям, начиная с наиболее ранней даты подачи этой патентной заявки.

Публикации, обсуждаемые в настоящем описании, предлагаются единственно из-за их раскрытия до даты подачи настоящей заявки. Ничего в настоящем описании не должно истолковываться как допущение того, что настоящее изобретение не дает право датировать задним числом такую публикацию на основании предшествующего изобретения. Далее, даты предоставленной публикации могут отличаться от действительных дат публикации, что может нуждаться в независимом подтверждении.

Если в настоящем описании не указано иначе, все технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют то же значение, что и обычно понимаемое специалистом в той области техники, к которой принадлежит это изобретение. Хотя многие методы и материалы, сходные или эквивалентные описываемым в настоящем документе, находят применение в методах или тестировании настоящего изобретения, некоторые из предпочтительных методов и материалов описываются в настоящем документе. Цифровые диапазоны включают цифры, задающие диапазон, также как и каждую цифру между ними.

Определения

При использовании в настоящем описании и прилагаемой формуле изобретения единственное число включает ссылку на множественное, если в контексте ясно не указано иначе. Таким образом, например, ссылка на «клетку-хозяина» включает множество таких клеток-хозяев.

Если не указано иначе, нуклеиновые кислоты представлены слева направо в ориентации от 5'- к 3'-концу; аминокислотные последовательности представлены слева направо в ориентации от амино- к карбоксильному концу, соответственно. Предлагаемые в настоящем описании главы не ограничивают различных аспектов вариантов осуществления изобретения, которые можно получить с помощью ссылки на описание в целом. Соответственно, термины, определяемые непосредственно ниже, более полно определяются при ссылке на описание в целом.

Термин «рекомбинантный» обозначает полинуклеотид или полипептид, который в природе не существует в клетке-хозяине. В некоторых вариантах осуществления рекомбинантные молекулы содержат две или более природных последовательности, которые связаны друг с другом таким способом, который не существует в природе. Рекомбинантная клетка содержит рекомбинантный полинуклеотид или полипептид.

Термин «гетерологичные» обозначает элементы, которые в норме не связаны друг с другом. Например, если клетка-хозяин продуцирует гетерологичный белок, этот белок в норме не продуцируется в этой клетке-хозяине. Таким же образом промотор, который оперативно связан с гетерологичной кодирующей последовательностью, представляет собой промотор, который оперативно связан с кодирующей последовательностью, с которой он обычно не является оперативно связанным в клетке-хозяине дикого типа. Термин «гомологичный» со ссылкой на полинуклеотид или белок обозначает полинуклеотид или белок, который существует в клетке-хозяине в природе.

Термины «белок» и «полипептид» используются в контексте настоящего описания взаимозаменяемо.

«Сигнальная последовательность» представляет собой последовательность аминокислот, присутствующую на N-концевой части белка, облегчающую секрецию зрелой формы белка из клетки. Определение сигнальной последовательности является функциональным. У зрелой формы внеклеточного белка отсутствует сигнальная последовательность, которая отщепляется в процессе секреции.

«Кодирующая последовательность» представляет собой сегмент ДНК, который кодирует полипептид.

Термин «нуклеиновая кислота» охватывает ДНК, РНК, одноцепочечные или двухцепочечные, и их химические модификации. Термины «нуклеиновая кислота» и «полинуклеотид» используются в контексте настоящего описания взаимозаменяемо.

«Вектор» обозначает полинуклеотид, созданный для введения нуклеиновых кислот в одну или более клеток-хозяев. Подходящие векторы автономно реплицируются в различных клетках-хозяевах и включают: клонирующие векторы, экспрессионные векторы, челночные векторы, плазмиды, фаговые частицы, кассеты и тому подобное.

Используемый в настоящем описании термин «экспрессионный вектор» обозначает конструкт ДНК, включающий область, кодирующую белок, которая оперативно связана с подходящей контролирующей последовательностью, способной влиять на экспрессию белка в подходящей клетке-хозяине. В некоторых вариантах осуществления такие контролирующие последовательности включают промотор, воздействующий на транскрипцию, необязательную операторную последовательность, контролирующую транскрипцию для продукции мРНК, последовательность, кодирующую подходящие сайты связывания рибосом на мРНК, а также энхансеры и другие последовательности, которые контролируют терминацию транскрипции и трансляции.

«Промотор» представляет собой регуляторную последовательность, которая инициирует транскрипцию нижележащей нуклеиновой кислоты.

Термин «оперативно связанный» обозначает расположение элементов, которое позволяет им быть функционально связанными. Например, промотор является оперативно связанным с кодирующей последовательностью, если он контролирует транскрипцию последовательности.

Термин «селективный маркер» относится к белку, способному к экспрессии в хозяине, что дает возможность легко отобрать тех хозяев, которые содержат введенную нуклеиновую кислоту или вектор. Примеры селективных маркеров включают, но не ограничиваются этим, гены устойчивости к антибиотикам (например, гигромицину, блеомицину или хлорамфениколу) и/или гены, которые придают метаболическое преимущество, такое как преимущество в питании клетки-хозяина.

Термин «происходящий» охватывает термины «происходящий из», «полученный», «получаемый из» и «выделенный из» и относится к источнику последовательности и/или белка.

«Непатогенный» организм представляет собой организм, который не является патогенным для человека и/или других животных.

Используемые в настоящем описании термины «выделять», «изолировать» и «отделять» относятся к белку, клетке, нуклеиновой кислоте или аминокислоте, которые выделяются из по меньшей мере одного компонента, с которым они связаны в природе.

Используемые в настоящем описании термины «трансформированная» и «трансгенная», используемые в отношении клетки, обозначают, что клетка обладает неприродной (например, гетерологичной) последовательностью нуклеиновой кислоты, интегрированной в ее геном или находящейся в виде эписомальной плазмиды, существование которой поддерживается на протяжении многих генераций.

Используемый в настоящем описании термин «экспрессия» относится к процессу, с помощью которого на основе последовательности нуклеиновой кислоты гена продуцируется полипептид. Процесс включает как транскрипцию, так и трансляцию.

Термин «введенная» в контексте введения последовательности нуклеиновой кислоты в клетку относится к «трансфекции», «трансформации» или «трансдукции» и включает ссылку на введение последовательности нуклеиновой кислоты в эукариотную или прокариотную клетку, где последовательность нуклеиновой кислоты может быть введена в геном клетки (например, в хромосому, плазмиду, пластиду или митохондриальную ДНК), превращена в автономный репликон или временно экспрессирована (например, трансфецированная мРНК).

Термин «гибридизация» относится к процессу, с помощью которого цепь нуклеиновой кислоты соединяют с комплементарной цепью путем образования пар оснований, как известно в данной области техники. Нуклеиновая кислота рассматривается как являющаяся «селективно гибридизуемой» с реперной последовательностью нуклеиновой кислоты, если две последовательности специфично гибридизуются одна с другой в условиях от умеренной до высокой жесткости гибридизации и отмывки. Условия умеренной и высокой жесткости гибридизации известны специалистам в данной области техники. Один пример условий высокой жесткости включает гибридизацию при приблизительно 42°С в 50% формамиде, 5X SSC, 5X раствор Денхардта, 0,5% SDS и 100 мкг/мл денатурированной ДНК-носителя с последующим отмыванием два раза в 2X SSC и 0,5% SDS при комнатной температуре и дополнительно два раза в 0,1 X SSC и 0,5% SDS при 42°С.

Используемые здесь термины «чистящая композиция» и «чистящий состав» относятся к композиции, которая находит применение в удалении нежелательных соединений (например, «загрязнений») с предметов, подвергаемых чистке, таких как ткани, посуда, контактные линзы, другие твердые субстраты, волосы (шампуни), кожа (мыло и кремы), зубы (ополаскиватели рта и зубные пасты). Термин охватывает любые материалы/соединения, выбранные для конкретного типа чистящей композиции в желаемой форме продукта (например, жидкость, гель, гранулы или композицию в виде спрея), при условии, что композиция совместима с испытываемым ферментом в композиции. Конкретный выбор материалов чистящей композиции легко осуществляется при рассмотрении поверхности, предметов и/или ткани, подвергаемых чистке, и желаемой формы композиции при использовании для условий чистки.

Подразумевается, что термины включают, но не ограничиваются этим, композиции детергентов (например, жидкие детергенты, детергенты в виде геля и/или твердые детергенты для стирки и детергенты для тонких тканей; чистящие составы для твердых поверхностей, таких как стеклянные, деревянные, керамические и металлические поверхности прилавка и окна; чистящие составы для ковров; чистящие составы для духовки; освежители тканей; смягчители тканей; и предварительные пятновыводители для текстиля и белья для стирки, а также детергенты для посуды).

Используемый в настоящем описании термин «чистящая композиция» включает, если не указано иначе, гранулированные, таблетированные моющие агенты или моющие агенты в форме порошка для всех целей, или сверхмощные моющие агенты, особенно чистящие детергенты; моющие агенты в виде жидкости, геля или в форме пасты для всех целей, особенно так называемые сверхмощные жидкие типы (HDL); жидкие детергенты для тонких тканей; агенты для мытья посуды вручную или агенты для мытья посуды в облегченном режиме, включая тип агентов с высоким пенообразованием; моющие агенты для посудомоечной машины, включая различные таблетированные, гранулированные, жидкие типы и типы ополаскивателей для отсутствия капель на посуде для использования в домашних условиях и учреждениях; жидкие чистящие и дезинфекционные агенты, включая антибактериальные типы для мытья вручную, чистящие бруски, жидкости для полоскания рта, чистящие агенты для зубных протезов, шампуни для машин или ковров, чистящие агенты для ванных комнат; шампуни для волос и ополаскиватели для волос; гели для душа и пену для ванн; чистящие агенты для металла; а также чистящие вспомогательные агенты, такие как отбеливающие добавки и добавки типа «наклеек на пятна», типы добавок для предварительной обработки или стирки.

Используемые здесь термины «композиция детергентов» и «состав детергентов» используются в отношении композиций, которые составлены для использования в моющей среде для очистки загрязненных предметов. В конкретных вариантах осуществления термин используется в отношении подвергаемых стирке тканей и/или предметов одежды (например, «детергенты для стирки»). В альтернативных вариантах осуществления термин относится к другим детергентам, таким как детергенты, используемые для мытья посуды, столовых приборов и т.д. (например, «детергенты для мытья посуды»). Не подразумевается, что настоящее изобретение ограничивается каким-либо конкретным составом или композицией детергентов. Действительно, подразумевается, что в дополнение к испытываемому ферменту композиция детергента может также включать поверхностно-активные вещества, трансферазу(зы), гидролитические ферменты, оксидоредуктазы, моющие компоненты, отбеливающие агенты, активаторы отбеливания, подсинивающие агенты и флуоресцентные красители, ингибиторы слеживания, маскирующие агенты, активаторы ферментов, антиоксиданты и/или солюбилизаторы и т.д.

Используемый в настоящем описании термин «усиленная эффективность» в чистящей композиции определяется как усиленная очистка (например, удаление и/или обесцвечивание) пятен (особенно пятен, включающих полисахариды природной камеди, таких как шоколадный крем, салатный соус, гуар и т.д.) при определении с помощью обычной оценки после стандартного цикла стирки.

Используемый в настоящем описании термин «чистящая композиция для твердой поверхности» относится к детергентным композициям для очистки твердых поверхностей, таких как полы, стены, кафель, ванна и кухонные приборы и тому подобное. Такие композиции предлагаются в любой форме, включая, но не ограничиваясь этим, твердые агенты, жидкости, эмульсии и т.д.

Используемый в настоящем описании термин «композиция для мытья посуды» относится ко всем формам композиций для мытья посуды, включая, но не ограничиваясь этим, форму геля, гранулированные и жидкие формы.

Используемый в настоящем описании термин «чистящая композиция для тканей» относится ко всем формам детергентных композиций для чистки тканей, включая, но не ограничиваясь этим, форму геля, гранулированные, жидкие формы и форму бруска.

Используемый в настоящем описании термин «текстиль» относится к текстильным тканям, а также к штапельным волокнам и нитям, подходящим для превращения в пряжу или для использования в качестве пряжи, текстильных, вязаных и нетекстильных тканей. Термин охватывает пряжу, изготовленную из природных, а также из синтетических (например, обработанных) волокон.

Используемый в настоящем описании термин «ткань» охватывает любой текстильный материал. Таким образом, подразумевается, что термин охватывает предметы одежды, а также ткани, пряжу, волокна, нетекстильные материалы, природные материалы, синтетические материалы и любой другой текстильный материал.

Используемый в настоящем описании термин «эффективное количество трансглюкозидазы» относится к количеству фермента трансглюкозидазы, необходимому для достижения ферментативной активности, требуемой для конкретного применения (например, в чистящей композиции и т.д.). Такие эффективные количества легко устанавливаются специалистом в данной области техники и основываются на многих факторах, таких как используемый конкретный вариант фермента, применение чистки, конкретный состав чистящей композиции и потребности в жидкой или сухой (например, гранулированной, брусочной) композиции и тому подобное.

Термин «трансглюкозидаза» относится к ферменту, который переносит остаток D-глюкозила в 1,4-α-D-глюкане на первичную гидроксильную группу глюкозы, свободную или соединенную с 1,4-α-D-глюканом. Описанная в настоящем документе трансглюкозидаза обладает активностью, описанной как EC 2.4.1.24, в соответствии с номенклатурой ферментов IUBMB. Систематическим названием описанной в настоящем документе трансглюкозидазы является 1,4-α-D-глюкан:1,4-α-D-глюкан(D-глюкоза)-6-α-D-глюкозилтрансфераза. Этот фермент может быть обозначен в некоторых публикациях как α-глюкозидаза.

Термин «загрязненный предмет» относится к предмету (например, ткани или посуде), который загрязнен (например, «окрашен») второй композицией. Термином «загрязненный предмет» охватываются грязные ткани, такие как грязная одежда, белье и ткани, окрашенные продуктами питания, содержащими полисахарид природной камеди. В некоторых вариантах осуществления при загрязнении проявляется видимое окрашивание, в то время как в других вариантах осуществления видимое окрашивание не проявляется.

Термин «полисахарид природной камеди» относится к полисахариду природного происхождения, не являющемуся крахмалом, который способен вызывать значительное повышение вязкости раствора при низкой концентрации. Такие полисахариды обычно применяются в пищевой промышленности и используются в качестве загустителей, желирующих агентов, эмульгаторов и стабилизаторов во многих продуктах питания (например, в соусах, кремах, молочных продуктах, мороженом, муссах, молочных коктейлях, салатных соусах и т.д.). Гуаровая камедь (пищевая добавка E412), съедобный загуститель, экстрагируемый из стручковых бобов кустов гуара, и ксантановая камедь (пищевая добавка E415), полисахарид, который продуцируется путем ферментации глюкозы или сахарозы (например, с помощью Xanthomonas campestris), являются примерами полисахаридов природной камеди. Другие полисахариды природной камеди включают, но не ограничиваются этим, агар (E406), альгиновую кислоту (E400), β-глюкан, каррагенин (E407), камедь натурального каучука, даммаровую камедь, геллановую камедь (E418), глюкоманнан (E425), гуммиарабик (E414), камедь гхати, камедь трагаканта (E413), камедь карайа (E416), камедь бобов робинии (E410), камедь мастичной фисташки, альгинат натрия (E401), еловую камедь и камедь тары (E417).

Термин «фермент, разрушающий пищевой полисахарид, не являющийся крахмалом» обозначает фермент, который разрушает полисахариды пищи, не являющиеся крахмалом. Примеры ферментов включают, но не ограничиваются этим, гемицеллюлазу, манназу, пектиназу, ксиланазу, β-галактозидазу и α-галактозидазу.

Термин «рабочий рН» обозначает рН детергента в процессе его применения. Например, рабочий рН детергента для стирки представляет собой рН детергента, когда он используется для стирки тканей в стиральной машине и/или при ручной стирке белья. Сходно, рабочий рН детергента для мытья посуды представляет собой рН этого детергента в момент использования его в посудомоечной машине и/или при ручном мытье посуды. В некоторых вариантах осуществления детергенты, которые находятся в концентрированной или твердой форме, разводят или растворяют перед тем, как рН этого детергента становится его рабочим рН.

Термин «рабочая концентрация» относится к концентрации фермента в детергенте в процессе его использования. Например, рабочая концентрация фермента в детергенте для стирки представляет собой концентрацию этого фермента при использовании детергента для стирки в процессе стирки тканей в стиральной машине и/или при ручной стирке белья. Сходным образом, рабочая концентрация фермента в детергенте для мытья посуды представляет собой концентрацию этого фермента в детергенте в момент использования его в посудомоечной машине и/или при ручном мытье посуды. В некоторых вариантах осуществления детергенты, которые находятся в концентрированной или твердой форме, разводят или растворяют перед тем, как концентрация фермента в детергенте становится его рабочей концентрацией.

Подробное описание изобретения

Настоящее изобретение относится к композициям, содержащим фермент трансглюкозидазу и полисахарид природной камеди, где полисахарид природной камеди является субстратом для фермента трансглюкозидазы. Настоящее изобретение также относится к способам применения фермента трансглюкозидазы для разрушения полисахарида природной камеди. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления композиции и методы находят применение в очистке. Действительно, настоящее изобретение относится к различным композициям, содержащим ферменты трансглюкозидазы, а также к способам применения композиций.

Содержащие фермент трансглюкозидазу композиции

Как отмечалось выше, настоящее изобретение относится к композициям, содержащим трансглюкозидазу. В некоторых вариантах осуществления композиция включает по меньшей мере один фермент трансглюкозидазу и полисахарид природной камеди, где полисахарид природной камеди является субстратом для фермента трансглюкозидазы.

Как отмечалось выше, фермент трансглюкозидаза обычно обладает активностью, определяемой как EC 2.4.1.24 согласно номенклатуре ферментов IUBMB, причем эта активность переносит гликозильные остатки в определенных гликанах на первичную гидроксильную группу глюкозы. В некоторых вариантах осуществления фермент может также обладать активностью, которая разрушает полисахарид природной камеди (например, ксантан и содержащие галактоманнан полисахариды, такие как гуаровая смола или смола лимской фасоли) путем отрезания боковых цепей сахара или расщепления внутренних связей для разрушения остова полисахарида.

В настоящем изобретении находит применение любой подходящий фермент трансглюкозидаза (см., например, Pazur et al., Carbohydr. Res. 1986 149:137-47 [1986]; и Nakamura et al., J. Biotechnol., 53:75-84 [1997]). В некоторых вариантах осуществления находящие применение в настоящем изобретении ферменты трансглюкозидазы имеются в продаже (например, но не ограничиваясь этим, ферменты, поставляемые Megazyme, Wicklow, Ireland; или Danisco US Inc., Genencor Division, Palo Alto, CA). В некоторых вариантах осуществления фермент представляет собой трансглюкозидазу Aspergillus niger, продуцируемую клетками Trichoderma reesei. В некоторых дополнительных вариантах осуществления трансглюкозидаза является грибковой трансглюкозидазой дикого типа (например, но не ограничиваясь этим, грибковой трансглюкозидазой, имеющей аминокислотную последовательность, депонированную в базе данных NCBI's GENBANK® с регистрационными номерами: D45356 (GID:2645159; Aspergillus niger), BAD06006.1 (GID:4031328; Aspergillus awamori), BAA08125.1 (GID:1054565; Aspergillus oryzae), XP_001210809.1 (GID:115492363; Aspergillus terreus), XP_001271891.1 (GID:121707620; Aspergillus clavatus), XP_001266999.1 (GID:119500484; Neosartorya fischeri), XP_751811.1 (GID:70993928; Aspergillus fumigatus), XP_659621.1 (GID:67523121; Aspergillus nidulans), XP_001216899.1 (GID:115433524; Aspergillus terreus) и XP_001258585.1 (GID:119473371; Neosartorya fischeri)), или ее вариантом, который имеет аминокислотную последовательность, являющуюся по меньшей мере приблизительно на 70%, по меньшей мере приблизительно на 80%, по меньшей мере приблизительно на 85%, по меньшей мере приблизительно на 90%, по меньшей мере приблизительно на 95% или по меньшей мере приблизительно на 98% идентичной грибковой трансглюкозидазе дикого типа.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления фермент обычно присутствует в композиции в диапазоне концентраций от приблизительно 0,01 ч/млн (частей на миллион, масс/об) до приблизительно 100 ч/млн (например, от приблизительно 0,01 ч/млн до приблизительно 0,05 ч/млн, от приблизительно 0,05 ч/млн до приблизительно 0,1 ч/млн, от приблизительно 0,1 ч/млн до приблизительно 0,5 ч/млн, от приблизительно 0,5 ч/млн до приблизительно 1 ч/млн, от приблизительно 1 ч/млн до приблизительно 5 ч/млн, от приблизительно 5 ч/млн до приблизительно 10 ч/млн, от приблизительно 10 ч/млн до приблизительно 100 ч/млн).

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления композиция представляет собой чистящую композицию. В некоторых особенно предпочтительных вариантах осуществления композиция дополнительно содержит по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество, чистящие агенты и/или другие агенты по уходу за тканью, описанные подробнее ниже.

В некоторых вариантах осуществления полисахарид природной камеди находится в водном растворе, тогда как в других вариантах осуществления он приклеен к предмету (например, в виде пятна, которое находится на поверхности предмета, такого как ткань или твердая поверхность). В некоторых вариантах осуществления полисахарид природной камеди находится в высушенной форме. Поскольку полисахариды природной камеди широко используют во множестве пищевых продуктов, в некоторых вариантах осуществления предмет загрязнен пищевым продуктом, который содержит полисахарид природной камеди. Типичные пищевые продукты, которые содержат полисахарид природной камеди, включают, но не ограничиваются этим, соусы, кремы, молочные продукты, мороженое, муссы, молочные коктейли, салатные соусы, напитки с фруктовыми соками, фруктовые консервы, желе, соевый соус, устричный соус, расфасованные продукты, сыр и хлебопекарные продукты. В некоторых вариантах осуществления полисахарид природной камеди находится в пищевом продукте в концентрации от приблизительно 0,1% до приблизительно 1,5%, от приблизительно 0,1% до