Органические аминные соли производных аминобензойной кислоты и способ их получения

Органические аминные соли производных аминобензойной кислоты и способ их получения

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Область техники

Настоящее изобретение относится к новым активаторам рецептора тромбопоэтина, которые представляют собой органические аминные соли 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты. Химические соединения настоящего изобретения применимы в качестве терапевтических агентов для лечения заболеваний, сопровождающихся ненормальным количеством тромбоцитов, или агентов, повышающих количество тромбоцитов.

Уровень техники

3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойная кислота (далее именуемая как Соединение A) используется в качестве активатора рецептора тромбопоэтина. Соединение A раскрыто в заявке WO 04/108683 (Патентный документ 1) и в заявке JP-A-2006-527187 (Патентный документ 2) в виде химического соединения описываемого общей формулой вместе с его таутомерами, пролекарствами или их фармацевтически приемлемыми солями или сольватами. В качестве отдельного химического соединения Соединение A раскрыто в заявке US 2006/094694A1 (Патентный документ 3). Что касается солей Соединения A, то хотя соли щелочных металлов и тому подобное упомянуты в качестве фармацевтически приемлемых солей, никакие конкретные соли не раскрыты в рабочих примерах.

Документы уровня техники

Патентный документ 1: WO 04/108683.

Патентный документ 2: JP-A-2006-527187.

Патентный документ 3: US 2006/094694A1.

Раскрытие изобретения

Техническая проблема

Целью настоящего изобретения является получение новых солей 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты, которые обладают полезными свойствами, такими как улучшенные фармакокинетические свойства и стабильность, по сравнению с ее свободной формой и солями щелочных металлов, а также лекарственные средства, содержащие их в качестве активных ингредиентов. Другой целью настоящего изобретения является разработка способа получения вышеупомянутых новых солей.

Решение проблемы

В результате обширных исследований, направленных на решение вышеупомянутой проблемы, авторами настоящего изобретения были обнаружены органические аминные соли или четвертичные аммониевые соли 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты, лекарственные средства, содержащие указанные органические аминные соли или четвертичные аммониевые соли в качестве активных ингредиентов, и способ получения указанных органических аминных солей или четвертичных аммониевых солей. Неожиданно оказалось, что эти органические аминные соли или четвертичные аммониевые соли обладают преимуществами, которые проявляются при использовании их в качестве терапевтических агентов. А именно эти органические аминные соли или четвертичные аммониевые соли обладают значительно лучшими фармакокинетическими свойствами и/или стабильностью по сравнению со свободной формой и солями щелочных металлов.

В частности, настоящее изобретение относится к:

(1) Органической аминной соли или соли с четвертичным аммониевым ионом 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты.

(2) Органической аминной соли или соли с четвертичным аммониевым ионом по (1), где органический амин или четвертичная аммониевая соль представляет собой органический амин или четвертичную аммониевую соль, имеющие гидроксильную группу.

(3) Органической аминной соли или соли с четвертичным аммониевым ионом по (2), где органический амин или четвертичная аммониевая соль, имеющая гидроксильную группу, представляет собой этаноламин, трометамин или холин.

(4) Этаноламинной соли 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты.

(5) Трометаминной соли 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты.

(6) Холиновой соли 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты.

(7) Лекарственному средству, содержащему органическую аминную соль или соль с четвертичным аммониевым ионом, как определено в любом из (1)-(6), в качестве активного ингредиента.

(8) Лекарственному средству по (7), который является активатором рецептора тромбопоэтина.

(9) Лекарственному средству по (7), который является агентом, повышающим количество тромбоцитов.

(10) Способу получения органической аминной соли или соли с четвертичным аммониевым ионом 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты, который включает в себя реагирование 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты с органическим амином или четвертичной аммониевой солью в растворителе.

(11) Способу по (10), в котором реакцию проводят при температуре от 0 до 70°C, и полученную органический амин или четвертичную аммониевую соль кристаллизуют.

(12) Способу по (10) или (11), в котором органический амин или четвертичная аммониевая соль представляет собой этаноламин, трометамин или холин.

(13) Способу по (10) или (11), в котором органический амин представляет собой этаноламин, а растворитель представляет собой ацетонитрил.

(14) Способу по (10) или (11), в котором органический амин представляет собой трометамин, а растворитель представляет собой тетрагидрофуран, и после образования органической аминной соли эту органическую аминную соль кристаллизуют путем добавления в растворитель ацетонитрила.

(15) Способу по (10) или (11), в котором органический амин представляет собой трометамин, а растворитель представляет собой смесь ацетона и воды, и после образования органической аминной соли эту органическую аминную соль кристаллизуют путем замены растворителя 1-пропанолом.

(16) Способу по (10) или (11), в котором органический амин или четвертичная аммониевая соль представляет собой холин, а растворитель представляет собой ацетонитрил.

Полезный эффект изобретения

Органические аминные соли настоящего изобретения обладают свойствами, благодаря которым они могут использоваться в качестве активного ингредиента лекарственных средств, таких как активаторы рецептора тромбопоэтина или агенты, повышающие количество тромбоцитов, такими как превосходные фармакокинетические свойства и/или стабильность.

Описание чертежей

На Фиг.1 представлен график, показывающий результаты перорального абсорбционного теста, проведенного на собаках и описанного в Примере анализа 1. Показаны профили «концентрация в плазме крови - время» уровней Соединения A (Свободная кислота), калиевой соли Соединения A (Калиевая соль), холиновой соли Соединения A (Холиновая соль), этаноламинной соли Соединения A (Этаноламинная соль) и трометаминной соли Соединения A (Трометаминная соль).

Описание вариантов осуществления

В настоящем изобретении «t» означает третичный.

Прежде всего, в настоящем изобретении будет дано описание Соединения A. Соединение A представляет собой 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойную кислоту. Структурная формула Соединения A представлена следующей формулой (II):

Формула (II)

Соединение A включает свои геометрические изомеры и таутомеры. Соединение A также включает в себя смесь, содержащую его геометрические изомеры и таутомеры в произвольном соотношении.

Несмотря на то, что Соединение A включает в себя 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойную кислоту (E изомер) и ее геометрический изомер 3-{[((2Z)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойную кислоту (Z изомер), в настоящем изобретении предпочтительным является E изомер.

Далее будут описаны органические амины настоящего изобретения.

В настоящем изобретении термин «органический амин» означает химическое соединение, полученное путем замещения по меньшей мере одного атома(ов) водорода в аммиаке углеводородной группой(ми).

Органические амины настоящего изобретения включают в себя первичные амины, имеющие одну углеводородную группу, которая может иметь заместитель, вторичные амины, имеющие две углеводородные группы, которые могут иметь заместитель, и третичные амины, имеющие три углеводородные группы, которые могут иметь заместитель.

Четвертичная аммониевая соль существует в виде соли с различными контранионами до того, как она образует соль с Соединением A и образует соль с четвертичным аммониевым ионом Соединения A путем замещения контраниона.

Далее будут описаны органические аминные соли и соль с четвертичным аммониевым ионом настоящего изобретения.

Органические аминные соли и четвертичные аммониевые соли настоящего изобретения выражаются следующей формулой (I) с использованием ионов:

A^{- +}B Формула (I)

A^- представляет собой n-валентный органический анион, полученный путем удаления n ионов водорода (где n больше 0 и не больше 4) из Соединения A и предпочтительно является органическими анионами, где n равно 1 или 2, представленными следующей формулой (III):

Формула (III)

Особенно предпочтительными являются органические анионы, где n равно 1, представленные следующей формулой (IV):

Формула (IV)

Также предпочтительным является органический анион, представленный следующей формулой (V).

Формула (V)

В формуле (I) B представляет собой первичный, вторичный или третичный амин, имеющий n аминогрупп, или четвертичную аммониевую соль, и может представлять собой комбинацию одинаковых органических аминов, различных органических аминов, одинаковых четвертичных аммониевых солей и различных четвертичных аммониевых солей. Предпочтительные конкретные примеры включают в себя органические амины, имеющие гидроксильную группу, и четвертичные аммониевые соли, имеющие гидроксильную группу, и особенно предпочтительными конкретными примерами являются диоламин, меглумин, этаноламин, трометамин и холин, и еще более предпочтительными конкретными примерами являются этаноламин, трометамин и четвертичные аммониевые соли, имеющие холиновый катион.

B⁺ представляет собой органический аммоний катион, получаемый путем добавления одного иона водорода к каждой n аминогруппе, или представляет собой катионную группу в n-валентной четвертичной аммониевой соли, и может быть n-валентным катионом, состоящим из комбинации одинаковых органических аммоний катионов, различных органических аммоний катионов, одинаковых катионных групп в четвертичной аммониевой соли и различных катионных групп в четвертичных аммониевых солях. Предпочтительными конкретными примерами являются органические аммоний катионы, имеющие гидроксильную группу, и катионные группы в четвертичных аммониевых солях, имеющие гидроксильную группу. Особенно предпочтительными конкретными примерами являются органические аммоний катионы, где n равно 1, представленные следующей формулой (VI):

Формула (VI)

Еще более предпочтительными конкретными примерами являются органические аммоний катионы, представленные следующей формулой (VII):

Формула (VII)

Понятие органических аминных солей или солей с четвертичным аммониевым ионом настоящего изобретения включает в себя сольваты органических аминных солей или солей с четвертичным аммониевым ионом. Растворителем в таких сольватах может быть растворитель, используемый при получении органических аминных солей или солей с четвертичным аммониевым ионом, или сопутствующий им после получения. Конкретные примеры растворителя в таком сольвате включают в себя нитриловые растворители, такие как ацетонитрил, эфирные растворители, такие как тетрагидрофуран, кетонные растворители, такие как ацетон, спиртовые растворители, такие как метанол, и воду. Растворителями, которые могут образовывать сольваты, являются ацетонитрил, тетрагидрофуран, ацетон, метанол, 1-пропанол и вода.

Растворитель, используемый в способе получения настоящего изобретения, предпочтительно является водным растворителем, сложным эфиром уксусной кислоты или водой, хотя любой растворитель, который не ингибирует реакцию, может быть использован без особых ограничений. Более предпочтительными являются ацетонитрил, ацетон, смесь растворителей ацетон и вода, тетрагидрофуран, диметилсульфоксид, метанол, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол или этилацетат, еще более предпочтительно ацетонитрил, смеси растворителей ацетон и вода, тетрагидрофуран или 1-пропанол.

Термин «водный растворитель» означает растворитель, смешивающийся с водой в любых соотношениях.

В способе настоящего изобретения органический амин или четвертичная аммониевая соль могут быть добавлены в реакционную систему в своем первоначальном виде без растворения в растворителе или в виде раствора органического амина или четвертичной аммониевой соли. Однако для промышленного производства предпочтительным является добавление органического амина или четвертичной аммониевой соли в виде раствора ввиду простоты в обращении. Растворителем в растворе органического амина или четвертичной аммониевой соли предпочтительно является метанол, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол или вода, более предпочтительно метанол или вода.

Что касается порядка добавления компонентов в реакционную систему, то органический амин или четвертичная аммониевая соль могут быть добавлены в раствор Соединения A, или Соединение A может быть добавлено в раствор органического амина или четвертичной аммониевой соли. Однако предпочтительным является добавление органического амина или четвертичной аммониевой соли в раствор Соединения A.

В способе получения настоящего изобретения извлечение полученной соли предпочтительно осуществлять путем кристаллизации ввиду простоты в обращении при промышленном производстве и получения продукта, обладающего желательными свойствами.

Для кристаллизации может быть использован слабый растворитель. Слабый растворитель предпочтительно представляет собой этилацетат, ацетонитрил, 1-пропанол или 2-пропанол, более предпочтительно ацетонитрил, 1-пропанол или 2-пропанол. Слабый растворитель предпочтительно добавляют постепенно небольшими порциями. Использование растворителя, который хорошо растворяет Соединение A и органический амин или четвертичную аммониевую соль, но плохо растворяет получаемую органическую аминную соль или соль с четвертичным аммониевым ионом, позволяет проводить кристаллизацию продукта одновременно с его образованием и получать продукт в виде кристаллов.

Для кристаллизации могут быть добавлены затравочные кристаллы. Затравочные кристаллы могут быть получены способами, известными в данной области техники, например путем натирания шпателем внутренней стенки сосуда, содержащего раствор целевого химического соединения.

В частности, когда органический амин или четвертичная аммониевая соль представляет собой этаноламин или холин, этаноламинную соль или холиновую соль Соединения A в виде кристаллов возможно получить, используя в качестве растворителя ацетонитрил. Когда органический амин представляет собой трометамин, трометаминную соль Соединения A в виде кристаллов возможно получить, используя в качестве растворителя тетрагидрофуран и добавляя в растворитель ацетонитрил после образования соли, или используя смесь растворителей ацетон и вода и заменяя эту смесь растворителей 1-пропанолом после образования соли.

Реакцию между Соединением A и органическим амином или четвертичной аммониевой солью можно проводить в реакционном растворе или суспензии при температуре между точкой замерзания и точкой кипения растворителя, при которой протекает реакция, предпочтительно при внутренней температуре от -78°C до 80°C, более предпочтительно при внутренней температуре от 0°C до 70°C, особенно предпочтительно при внутренней температуре от 10°C до 60°C. Кристаллизация органической аминной соли или соли с четвертичным аммониевым ионом может быть осуществлена в растворе или суспензии при температуре между точкой замерзания и точкой кипения растворителя, при которой протекает кристаллизация, предпочтительно при внутренней температуре от -78°C до 50°C, более предпочтительно при внутренней температуре от -10°C до 40°C, особенно предпочтительно при внутренней температуре от 0°C до 30°C.

Соединение A и органический амин или четвертичная аммониевая соль могут реагировать в течение любого периода времени, пока не происходит разложение, но время реакции предпочтительно составляет от 1 минуты до 5 часов, более предпочтительно, от 1 минуты до 3 часов. Для того чтобы кристаллизовать органическую аминную соль или соль с четвертичным аммониевым ионом, соль можно перемешивать в течение любого периода времени, пока не происходит разложение и происходит кристаллизация, но время перемешивания предпочтительно составляет от 1 часа до 48 часов, более предпочтительно, от 2 часов до 24 часов.

В способе настоящего изобретения в качестве исходного материала может быть использован сольват Соединения A. Конкретные примеры такого сольвата включают в себя сольваты с метанолом, 2-пропанолом, 2-бутанолом и тому подобное.

Конкретные примеры лекарственного средства настоящего изобретения включают в себя пероральные лекарственные средства, такие как таблетки, капсулы, порошки, гранулы, пилюли и сироп, ректальные лекарственные средства, чрескожные лекарственные средства и инъекции.

Лекарственное средство настоящего изобретения может применяться в сочетании с другим терапевтическим агентом и может вводиться в виде смешанного агента.

Лекарственное средство настоящего изобретения содержит органическую аминную соль или соль с четвертичным аммониевым ионом Соединения A в качестве активного ингредиента.

Лекарственное средство настоящего изобретения может содержать только органическую аминную соль или соль с четвертичным аммониевым ионом Соединения A. Однако лекарственное средство настоящего изобретения предпочтительно является композицией, содержащей органическую аминную соль или соль с четвертичным аммониевым ионом Соединения A в качестве активного ингредиента и другие компоненты.

Такие композиции могут быть приготовлены традиционными способами с использованием терапевтически приемлемых носителей. В частности, в случае пероральных лекарственных средств могут быть использованы обычные носители, такие как наполнители, скользящие вещества, связующие вещества, разрыхлители, увлажнители, пластификаторы и покрывающие агенты. Жидкие пероральные средства могут быть в виде водных или масляных суспензий, растворов, эмульсий, сиропов или эликсиров, или могут быть приготовлены в виде сухих сиропов, которые перед применением необходимо смешивать с водой или другими подходящими растворителями. Такие жидкие средства могут содержать обычные добавки, такие как суспендирующие агенты, ароматизаторы, разбавители и эмульгаторы. В случае ректального введения они могут быть введены в виде суппозиториев.

В качестве основы для суппозиториев могут использоваться подходящие вещества, такие как какао-масло, лауриновый жир, макрогол, глицерожелатин, Витепсол, стеарат натрия и их смеси. При необходимости суппозитории могут содержать эмульгатор, суспендирующий агент, консервант и тому подобное. Для инъекций фармацевтические ингредиенты, такие как дистиллированная вода для инъекций, физиологический раствор, 5% раствор глюкозы, пропиленгликоль и другие растворители или солюбилизирующие агенты, регулятор значения pH, изотонический агент и стабилизатор могут быть использованы для получения водных лекарственных форм или лекарственных форм, которые перед применением необходимо растворять.

Понятие «лекарственное средство, содержащее органическую аминную соль или соль с четвертичным аммониевым ионом в качестве активного ингредиента» настоящего изобретения, может также быть сформулировано как «органические аминные соли или соли с четвертичным аммониевым ионом для применения в качестве лекарственных средств» или как « способ лечения с применением органических аминных солей или солей с четвертичным аммониевым ионом».

Когда лекарственное средство представляет собой активатор рецептора тромбопоэтина, то в настоящем изобретении он может также упоминаться как «органические аминные соли или соли с четвертичным аммониевым ионом для применения в качестве активаторов рецептора тромбопоэтина» или как «способ лечения путем активации рецептора тромбопоэтина органической аминной солью или солью с четвертичным аммониевым ионом».

Когда лекарственное средство представляет собой агент, повышающий количество тромбоцитов, то в настоящем изобретении он может также упоминаться как «органические аминные соли или соли с четвертичным аммониевым ионом для применения в качестве агентов, повышающих количество тромбоцитов» или как «способ лечения путем повышения количества тромбоцитов органической аминной солью или солью с четвертичным аммониевым ионом».

Когда лекарственное средство представляет собой терапевтический агент для лечения тромбоцитопении, то в настоящем изобретении он может также быть описан как «органические аминные соли или соли с четвертичным аммониевым ионом для применения в качестве терапевтических агентов для лечения тромбоцитопении» или как «способ лечения тромбоцитопении путем применения органической аминной соли или соли с четвертичным аммониевым ионом».

Доза лекарственного средства настоящего изобретения для введения человеку, как правило, составляет примерно от 0,1 до 1000 мг/человек/сутки в случае пероральных средств или ректального введения, или примерно 0,05 мг до 500 мг/человек/сутки в случае инъекций, хотя она зависит от возраста и состояния пациента. Вышеуказанные диапазоны приведены только в качестве примеров, и дозу необходимо определять с учетом заболевания пациента.

Органические аминные соли или соли с четвертичным аммониевым ионом настоящего изобретения и лекарственные средства, содержащие органическую аминную соль или соль с четвертичным аммониевым ионом в качестве активных ингредиентов, применяются в тех случаях, когда ожидается, что применение химического соединения, обладающего сродством к рецептору тромбопоэтина и действующего как агонист рецептора тромбопоэтина, улучшит патологическое состояние, а именно предотвратит, излечит или облегчит заболевания, против которых активация рецептора тромбопоэтина является эффективной. Конкретные примеры таких заболеваний включают в себя нарушения со стороны системы кроветворения, сопровождающиеся ненормальным количеством тромбоцитов. В частности, они являются эффективными для лечения и предупреждения заболеваний человека и млекопитающих, вызванных ненормальным мегакариопоэзом, особенно тех, которые сопровождаются тромбоцитопенией. Примеры таких заболеваний включают в себя тромбоцитопению, сопровождающую химиотерапию и/или радиотерапию рака, тромбоцитопению, сопровождающую противовирусную терапию таких заболеваний, как гепатит C, тромбоцитопению, вызванную трансплантацией костного мозга, хирургическими вмешательствами и тяжелыми инфекциями или желудочно-кишечными кровотечениями, но такие заболевания не ограничиваются вышеупомянутыми. Типичные тромбоцитопении, такие как апластическая анемия, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, миелодиспластический синдром, заболевание печени, ВИЧ инфекция и дефицит тромбопоэтина также являются объектами воздействия лекарственного средства настоящего изобретения. Настоящее изобретение может применяться в качестве мобилизатора периферийных стволовых клеток, индуктора дифференциации клеток при мегакариобластном или мегакариоцитарном лейкозе и агента, повышающего количество тромбоцитов у доноров тромбоцитов. Кроме того, возможные применения включают в себя терапевтический ангиогенез, основанный на дифференциации и пролиферации эндотелиальных клеток сосудистой стенки и эндотелиальных клеток-предшественников, предупреждение и лечение атеросклероза, инфаркта миокарда, нестабильной стенокардии, окклюзионного заболевания периферических артерий, но не ограничиваются этим перечнем.

ПРИМЕРЫ

Далее настоящее изобретение будет описано более подробно путем приведения Примеров синтеза, Примеров анализа и Примеров средства. Однако следует понимать, что настоящее изобретение ни в какой мере не ограничивается этими конкретными примерами.

В этих Примерах ЖХ означает жидкостная хромотография, ВЭЖХ означает высокоэффективная жидкостная хроматография, МС означает масс-спектроскопия, ЖХ/МС означает жидкостная хроматография с масс-спектрометрией, ЖХ/МС/МС означает жидкостная хроматография с тандемной масс-спектрометрией, ТГ означает термогравиметрия, C_max означает максимальная концентрация в плазме крови, T_max означает время максимальной концентрации в плазме крови и ППК означает площадь под кривой «концентрация в плазме - время».

Инструментальные анализы проводились в следующих условиях на следующем оборудовании:

¹H ЯМР измеряли при 300 МГц.

ТГ проводили с помощью анализатора TG8120, производства фирмы Rigaku Corporation.

Ссылочный пример синтеза 1

3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойная кислота

3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойную кислоту получали в соответствии с заявкой US 2006094694.

Ссылочный пример синтеза 2

Калиевая соль 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты

Калиевую соль 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты получали в соответствии с заявкой US 2006094694.

Пример синтеза 1

Этаноламинная соль 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты

Суспензию 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты (10,25 г, 21,92 ммоль) в ацетонитриле (218 мл) перемешивали в растворе этаноламина (1,47 г, 24,07 ммоль) в метаноле (24,0 мл) при комнатной температуре в течение 2 часов и 50 минут. Полученный осадок собирали фильтрацией, промывали ацетонитрилом и сушили при пониженном давлении, чтобы получить 10,88 г желаемого продукта (выход 94%).

Морфология: бледно-желтое твердое вещество.

¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆): δ 1,30 (9Н, с), 2,39 (3Н, с), 2,84 (2H, т, J=5,0 Гц), 3,56 (2H, т, J=5,0 Гц), 7,27 (1Н, дд, J=8,0 и 7,5 Гц), 7,40 (2Н, д, J=8,5 Гц), 7,46 (1Н, д, J=7,5 Гц), 7,62 (1Н, с), 7,73 (2Н, д, J=8,5 Гц), 7,91 (1Н, д, J=8,0 Гц), 8,50 (1Н, с).

Пример синтеза 2

Трометаминная соль 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты

Раствор 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты (9,4 г, 20,1 ммоль) в тетрагидрофуране (100 мл) перемешивали с водным раствором (20 мл) трометамина (2,7 г, 22,3 ммоль) и затем с ацетонитрилом (400 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 дня. Полученный осадок собирали фильтрацией, промывали ацетонитрилом и сушили при пониженном давлении, чтобы получить 11,3 г желаемого продукта (выход 95%).

Морфология: бледно-желтое твердое вещество.

¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆): δ 1,30 (9Н, с), 2,38 (3Н, с), 3,45 (6Н, с), 7,29 (1Н, дд, J=8,0 и 7,5 Гц), 7,40 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,47 (1Н, д, J=7,5 Гц), 7,64 (1Н, с), 7,72 (2Н, д, J=8,5 Гц), 7,89 (1Н, д, J=8,0 Гц ), 8,51 (1Н, с).

Пример синтеза 3

Трометаминная соль 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты

Раствор 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты (4,7 г, 10,0 ммоль) в смеси ацетона (130 мл) и воды (5,2 мл) перемешивали с водным раствором (4,7 мл) трометамина (1,27 г, 10,5 ммоль) при температуре 50°C в течение 30 минут. Растворитель заменяли 1-пропанолом, и полученный осадок собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении, чтобы получить 5,14 г желаемого продукта (выход 91%).

Морфология: бледно-желтое твердое вещество.

Пример синтеза 4

Холиновая соль 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты

Суспензию 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты (9,40 г, 20,11 ммоль) в ацетонитриле (300 мл) перемешивали в 3,5 М растворе холина в метаноле (6,11 мл, 21,39) при комнатной температуре в течение 40 минут, а затем с затравочными кристаллами (примерно 10 мг) при комнатной температуре в течение 15 часов. Полученный осадок собирали фильтрацией, промывали ацетонитрилом и сушили при пониженном давлении, чтобы получить 10,05 г желаемого продукта (выход 82,3%).

Морфология: бледно-желтое твердое вещество.

¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆): δ 1,30 (9Н, с), 2,39 (3Н, с), 3,10 (9Н, с), 3,37-3,40 (2Н, м), 3,80-3,85 (2H, м), 7,24 (1Н, дд, J=8,1 и 7,5 Гц), 7,38-7,41 (3Н, м), 7,55 (1Н, с), 7,74 (2Н, д, J=8,4 Гц), 7,92 (1Н, д, J=8,1 Гц), 8,61 (1Н, с).

Пример анализа 1

Пероральный абсорбционный тест на собаках

Свободную форму (Соединение A), калиевую соль, органические аминные соли (этаноламинную соль и трометаминную соль) и соль с четвертичным аммониевым ионом (холиновую соль) 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты в капсуле перорально вводили собакам породы бигль в дозе 360 мг на каждое животное. Через 0,5, 1, 2, 4, 6, 8 и 24 часа после введения отбирали кровь, чтобы получить образцы плазмы. Концентрацию средств в плазме крови собак определяли при помощи ЖХ/МС/МС. Используя полученные значения концентраций в плазме, вычисляли максимальную концентрацию в плазме крови (C_max), время максимальной концентрации в плазме крови (T_max) и площадь под кривой «концентрация в плазме - время». На Фиг.1 показаны профили «концентрация в плазме крови - время» для Соединения A, калиевой соли и разных органических аминных солей и соли с четвертичным аммониевым ионом после перорального введения собакам в дозе 360 мг на животное.

На Фиг.1 * представляет Соединение A (Свободная кислота), ♦ представляет калиевую соль (Калиевая соль), □ представляет холиновую соль (Холиновая соль), ▲ представляет этаноламинную соль (Этаноламинная соль) и ○ представляет трометаминную соль (Трометаминная соль).

Органические аминные соли и соль с четвертичным аммониевым ионом настоящего изобретения показали намного лучшие фармакокинетические свойства по сравнению с Соединением A и калиевой солью, раскрытыми в заявке WO04/108683. В частности, по показателю максимальная концентрация в плазме, хотя калиевая соль оказалась в 7,2 раза лучше, чем Соединение A, органические аминные соли и соль с четвертичным аммониевым ионом настоящего изобретения показали заметное улучшение и оказались от 1,7 до 2,2 раз лучше, чем калиевая соль, и от 12,0 до 15,7 раз лучше, чем Соединение A. По показателю площадь под кривой «концентрация в плазме - время», хотя калиевая соль оказалась в 6,3 раза лучше, чем Соединение A, органические аминные соли и соль с четвертичным аммониевым ионом настоящего изобретения показали значительное улучшение и оказались от 2,9 до 4,4 раз лучше, чем калиевая соль, и от 18,4 до 27,6 раз лучше, чем Соединение A. Заметно улучшенные фармакокинетические свойства, как описано выше, органических аминных солей и солей с четвертичным аммониевым ионом (особенно холиновой соли, этаноламинной соли и трометаминной соли) оказались неожиданными даже для специалистов в данной области техники, и полученные данные свидетельствуют о полезности настоящего изобретения.

В следующих Примерах анализа 2-4 стабильность этаноламинной соли (1), трометаминной соли (2), холиновой соли (3) и калиевой соли (4) 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты под действием температуры, влажности и света оценивали по увеличению количества родственных примесей (%), изменению массы (%) или изменению ТГ потери массы (%) при соответствующем выборе.

Увеличение количества родственных примесей (%)

Каждый образец анализировали при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии до и после обработки и вычисляли сумму площадей в процентах для аналогов в каждом образце.

Колонка: L-колонка ODS (Институт анализа и исследования химических веществ, Япония, внутренний диаметр 4,6 мм, длина 250 мм).

Детектор: УФ абсорбциометр (длина волны 254 нм).

Температура колонки: 40°C.

Скорость потока: 1,0 мл/мин.

Объем вводимой пробы: 10 мкл.

Подвижная фаза: (a) 0,01 М формиатно-аммониевый буфер (pH 3,0), (b) ацетонитрил.

Измерения проводились с градиентом между вышеуказанными (a) и (b) растворами.

Увеличение количества родственных примесей по сравнению с первоначальным значением свидетельствует о возможной деградации химического соединения, и, следовательно, увеличение количества родственных примесей является показателем стабильности химического соединения.

Изменение массы (%):

Каждый образец взвешивали до и после обработки, и увеличение массы вычисляли в процентах от разницы в массе. Величина изменения массы во время обработки является показателем стабильности химического соединения.

Изменение ТГ потери массы (%)

Примерно 5 мг каждого образца взвешивали до и после обработки и помещали в алюминиевую емкость, ТГ измерения проводили при открытой емкости. Скорость ТГ потери каждого образца вычисляли в процентах (%). Условия измерения приведены ниже.

Условия измерения:

Прибор: TG8120 (Rigaku Corporation).

Диапазон измерений: от комнатной температуры до 105°C.

Скорость нагрева: 5°C /мин.

Атмосфера: воздух 50 мл/мин.

Увеличение ТГ потери по сравнению с первоначальным значением свидетельствует о возможных поглощении влаги и деградации химического соединения. Таким образом, величина изменения в ТГ потере является показателем стабильности химического соединения.

Первоначальные значения ТГ потери и количества родственных примесей для каждого образца приведены в Таблице 1.

Таблица 1
	(1)	(2)	(3)	(4)
Количество родственных примесей (%)	0,34	0,07	0,34	1,86
ТГ потери (%)	0,64	0,11	1,19	3,18

Пример анализа 2

Испытание на термостабильность

Термостабильность этаноламинной соли (1), трометаминной соли (2), холиновой соли (3) и калиевой соли (4) 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты оценивали следующим образом.

Обработка

Каждый образец помещали в сосуд из коричневого стекла, и этот сосуд выдерживали при температуре 60°C в течение 2 недель без контроля влажности. Через 2 недели образец извлекали и оценивали увеличение количества родственных примесей (%).

Результаты приведены в Таблице 2.

Таблица 2
	(1)	(2)	(3)	(4)
Увеличение количества родственных примесей (%)	0,16	-0,01	-0,01	2,46

Органические аминные соли и четвертичная аммониевая соль настоящего изобретения показали намного меньшее увеличение количества родственных примесей по сравнению с калиевой солью и значительную стабильность в условиях, используемых в испытании на термостабильность.

Пример анализа 3

Испытание на гидростабильность

Гидростабильность этаноламинной соли (1), трометаминной соли (2), холиновой соли (3) и калиевой соли (4) 3-{[((2E)-2-{1-[5-(4-t-бутилфенил)-4-гидрокси-3-тиенил]этилиден}гидразино)карбонотиоил]амино}бензойной кислоты оценивали следующим образом.

Обработка

Примерно 1 г каждого образца помещали в сосуд из прозрачного стекла и выдерживали при температуре 25°C и относительной влажности 90% в течение 2 недель в открытом сосуде. Через 2 недели образец извлекали и оценивали увеличение количества родственных примесей (%), из