Липиды для композиций для доставки терапевтических агентов

Липиды для композиций для доставки терапевтических агентов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ НА ПОЛУЧЕНИЕ ПАТЕНТА

Настоящая заявка испрашивает приоритет согласно предварительной заявке на патент США №61/657,480, поданной 8 июня 2011 г., которая включена в настоящую заявку в полном объеме посредством ссылки.

Область изобретения

Настоящее изобретение относится к ионизируемым липидам для улучшения доставки терапевтических агентов.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Ряд методик доступен для доставки терапевтического агента в клетку, например, siPHK, нуклеиновые кислоты и т.д. Эти системы включают вирусные и невирусные трансфекционные системы. Невирусные трансфекционные системы могут включать, например, полимеры, липиды, липосомы, мицеллы, дендримеры и наноматериалы. Примеры полимеров, которые ранее были изучены для клеточной трансфекции включают катионные полимеры, такие как поли(L-лизин), полиэтиленимин ("PEI"), хитозан и поли(2-диметиламино)этилметакрилат ("pDMAEMA").

Однако вирусная и невирусная трансфекционная методика имеют недостатки. Например, вирусные системы могут давать высокую эффективность трансфекции, но могут не быть полностью безопасными. Кроме того, вирусные системы могут быть сложными и/или дорогими для получения.

Невирусные трансфекционные системы, например, применяющие катионные полимеры, были предложены для трансфекции плазмидной ДНК в клетки. Однако катионные полимеры могут быть нестабильными и могут быть токсичными для клеток.

Существует потребность в новых соединениях, композициях и способах для применения катионной композиции для улучшения доставки терапевтических агентов в клетки, ткани и организмы.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к ионизируемым липидным соединениям Формулы I

где n и m независимо равны 1, 2, 3 или 4; R₁ и R₂ независимо представляют собой C_10-18 алкил или C_12-18 алкенил; X представляет собой -CH₂-, S, O, N или отсутствует; L представляет собой C_1-4 алкилен; -S-C_1-4 алкилен; -O-C_1-4 алкилен; -O-C(O)-C_1-4 алкилен; -S(O)₂-C_1-4 алкилен; , или представляет собой ; или их форме в виде фармацевтически приемлемой соли. Композиции, фармацевтические композиции, лекарственные носители и способы применения соединений формулы I также раскрываются.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

На Фиг. 1 показана in vitro синергетическая эффективность вариантов выполнения настоящего изобретения ионизируемый липид: ионизируемый липид.

На Фиг. 2 показана in vitro синергетическая эффективность вариантов выполнения настоящего изобретения ионизируемый липид: ионизируемый липид.

На Фиг. 3 показана in vitro синергетическая эффективность вариантов выполнения настоящего изобретения ионизируемый липид: катионный липид.

На Фиг. 4 показана in vitro синергетическая эффективность вариантов выполнения настоящего изобретения ионизируемый липид: катионный липид.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЛЛЮСТРАТИВНЫХ ВАРИАНТОВ ВЫПОЛНЕНИЯ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к ионизируемым липидным соединениям, а также их применениям для доставки терапевтических агентов в клетки, ткани и организмы.

В объем настоящего изобретения входят ионизируемые липидные соединения формулы I:

где

n и m независимо равны 1, 2, 3 или 4;

R₁ и R₂ независимо представляют собой С_10-18 алкил или С_12-18 алкенил;

X представляет собой -СН₂-, S, О, N или отсутствует;

L представляет собой С_1-4 алкилен; -S-C_1-4 алкилен; -О-С_1-4 алкилен; -О-С(O)-С_1-4 алкилен;

-S(O)₂-C_1-4 алкилен; , или представляет собой ;

или их форме в виде фармацевтически приемлемой соли.

Согласно настоящему изобретению, n и m могут быть одинаковыми или различными. В предпочтительных вариантах выполнения настоящего изобретения, n и m являются одинаковыми. Особенно предпочтительными являются варианты выполнения настоящего изобретения, где n и m оба равны 1, или n и m оба равны 2.

В некоторых вариантах выполнения настоящего изобретения, X представляет собой связь. В других вариантах выполнения настоящего изобретения, X представляет собой -CH₂-. В еще других вариантах выполнения настоящего изобретения, X представляет собой S. Также предпочтительными являются варианты выполнения настоящего изобретения, где X представляет собой О. Варианты выполнения настоящего изобретения, где X представляет собой N также входят в объем настоящего изобретения.

В некоторых вариантах выполнения настоящего изобретения, L представляет собой C_1-4 алкилен. В других вариантах выполнения настоящего изобретения, L представляет собой -S-C_1-4 алкилен. В еще других вариантах выполнения настоящего изобретения, L представляет собой -O-C_1-4 алкилен. В еще других вариантах выполнения настоящего изобретения, L представляет собой -O-C(О)-C_1-4 алкилен. Альтернативно, L представляет собой -S(O)₂-C_1-4 алкилен. Также в объем настоящего изобретения входят варианты выполнения настоящего изобретения, где L представляет собой .

В тех вариантах выполнения настоящего изобретения, где X представляет собой связь, L предпочтительно представляет собой C_1-4 алкилен. Такие примеры L включают -CH₂-, -CH₂-CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, и -CH₂CH₂CH₂CH₂-. В других вариантах выполнения настоящего изобретения, где X представляет собой связь,

L представляет собой , например, .

В тех вариантах выполнения настоящего изобретения, где X представляет собой -CH₂-, L предпочтительно представляет собой -S-C_1-4 алкилен. Такие примеры L включают -S-CH₂-, -S-CH₂-CH₂-, -S-CH₂CH₂CH₂-, и -S-CH₂CH₂CH₂CH₂-.

В других вариантах выполнения настоящего изобретения, где X представляет собой -CH₂-, L предпочтительно представляет собой -S(O)₂-C_1-4 алкилен. Такие примеры L включают -S(O)₂-CH₂, -S(O)₂-CH₂-CH₂, -S(O)₂-CH₂-CH₂-CH₂-, и S(O)₂-CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-.

В еще других вариантах выполнения настоящего изобретения, где X представляет собой -CH₂-, L представляет собой -O-С_1-4 алкилен. Такие примеры L включают -O-CH₂-, -O-CH₂-CH₂-, -O-CH₂CH₂CH₂-, и -O-CH₂CH₂CH₂CH₂-.

В тех вариантах выполнения настоящего изобретения, где X представляет собой S, L предпочтительно представляет собой C_1-4 алкилен. Такие примеры L включают -CH₂-, -CH₂-CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, и -CH₂CH₂CH₂CH₂-.

В тех вариантах выполнения настоящего изобретения, где X представляет собой O, L предпочтительно представляет собой C_1-4 алкилен. Такие примеры L включают -CH₂-, -CH₂-CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, и -CH₂CH₂CH₂CH₂-.

Согласно настоящему изобретению, R₁ и R₂ могут быть одинаковыми или различными. Предпочтительно R₁ и R₂ являются одинаковыми. Предпочтительно, R₁ и R₂ представляют собой C_10-18 алкил. Также предпочтительными являются варианты выполнения настоящего изобретения, где С_10-18 алкил представляет собой неразветвленный С_10-18 алкил. Более предпочтительными являются варианты выполнения настоящего изобретения, где R₁ и R₂ представляют собой С_12-18 алкил. Также предпочтительными являются варианты выполнения настоящего изобретения, где R₁ и R₂ представляют собой C₁₃ алкил. В наиболее предпочтительных вариантах выполнения настоящего изобретения, R₁ и R₂ оба представляют собой C₁₃ алкил.

В других вариантах выполнения настоящего изобретения, R₁ и R₂ представляют собой C_12-18 алкенил. Предпочтительно, R₁ и R₂ представляют собой C_13-17 алкенил. Более предпочтительно, R₁ и R₂ каждый представляет собой олеил:

В других вариантах выполнения настоящего изобретения, R₁ и R₂ представляют собой C_12-18 алкенил. Предпочтительно, R₁ и R₂ представляют собой C_13-17 алкенил. Более предпочтительно, R₁ и R₂ каждый представляет собой линолеоил.

Также в объем настоящего изобретения входят композиции, содержащие соединение формулы I в липосоме, где липосома содержит бислой липидных молекул. Тогда как соединение формулы I может содержать любой мольный процент липидных молекул в таких композициях, предпочтительно, когда соединение формулы I составляет от около 5 до около 50 мол. % от липидных молекул композиций согласно настоящему изобретению.

Композиции согласно настоящему изобретению, содержащие соединение формулы I в липосоме, могут содержать более одного соединения формулы I. В предпочтительных вариантах выполнения настоящего изобретения, такие композиции согласно настоящему изобретению включают два соединения формулы I. В этих вариантах выполнения настоящего изобретения, предпочтительно, когда мольное отношение двух соединений формулы I составляет от около 10:30 до около 30:10.

Композиции согласно настоящему изобретению, содержащие соединение формулы I в липосоме, могут, кроме того, сдержать катионный липид. В таких вариантах выполнения настоящего изобретения, катионный липид составляет от около 5 до около 40 мол. % от липидных молекул композиции. Также в этих вариантах выполнения настоящего изобретения, содержащих соединение формулы I в липосоме с катионным липидом, мольное отношение соединения формулы I к катионному липиду составляет от около 5:35 до около 35:5. Более предпочтительно, отношение составляет от около 10:30 до около 30:10.

Согласно настоящему изобретению, любые композиции согласно настоящему изобретению могут, кроме того, содержать жидкую среду. Предпочтительно, жидкая среда является подходящей для инъекции в живой организм. В некоторых вариантах выполнения настоящего изобретения, жидкая среда содержит органический растворитель. Альтернативно, жидкая среда, применяемая в определенных вариантах выполнения настоящего изобретения, содержит воду и органический растворитель. В других вариантах выполнения настоящего изобретения, жидкая среда может, кроме того, содержать неводную среду.

Также согласно настоящему изобретению, любые композиции согласно настоящему изобретению могут, кроме того, содержать по меньшей мере один фосфолипид.

В других вариантах выполнения настоящего изобретения, любые композиции согласно настоящему изобретению могут, кроме того, содержать по меньшей мере один ПЭГ-конъюгированный липид.

Также в объем настоящего изобретения входят специфичные к звездчатым клеткам лекарственные носители. Эти варианты выполнения настоящего изобретения включают любые вышеуказанные композиции, а также специфичное для звездчатых клеток количество нацеливающей молекулы, содержащей (ретиноид)_n-линкер-(ретиноид)_n, где n=0, 1, 2 или 3; и где линкер содержит полиэтиленгликоль (ПЭГ) или ПЭГ-подобную молекулу.

В предпочтительных вариантах выполнения настоящего изобретения лекарственные носители согласно настоящему изобретению дополнительно содержат молекулу siPHK.

Также в объем настоящего изобретения входят фармацевтические композиции. Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению включают любой вышеуказанный лекарственный носитель согласно настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель. Предпочтительно, когда в таких композициях siPHK инкапсулирована липосомой композиций согласно настоящему изобретению.

Также в объем настоящего изобретения входят способы доставки лекарственного средства пациенту, нуждающемуся в лечении. Эти способы содержат обеспечение фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению и введение фармацевтической композиции пациенту.

Определения

Следующие термины применяются в описании настоящего изобретения.

Как применяется в описании настоящего изобретения, термин «катионный липид» относится к соединению, которое включает по меньшей мере одну липидную составляющую и положительно заряженный четвертичный азот, связанный с противоионом. «Липиды», как понимается в данной области техники, должны содержать гидрофобную алкильную или алкенильную составляющую и карбоновую кислоту или сложноэфирную составляющую. Предпочтительные катионные липиды для применения в настоящем изобретении включают:

и

Как применяется в описании настоящего изобретения, термин «ионизируемый липид» относится к соединению формулы I согласно настоящему изобретению. Эти соединения способны образовывать заряженные частицы при контакте с подходящими противоионами, как например, частицы, которые включают ионизируемый атом водорода.

Как применяется в описании настоящего изобретения, термин "алкил" относится к неразветвленной или разветвленной полностью насыщенной (нет двойных или тройных связей) углеводородной группе, например, группе, имеющей общую формулу -C_nH2_n+1. Алкильная группа может содержать от 1 до 50 атомов углерода (во всех случаях, когда она появляется в настоящем описании, числовой диапазон, такой как «1-50» относится к каждому целому числу в данном диапазоне; например, термин «1-50 атомов углерода» означает, что алкильная группа может состоять из 1 атома углерода, 2 атомов углерода, 3 атомов углерода и т.д., до 50 атомов углерода включительно, несмотря на то, что настоящее определение также предусматривает появление термина «алкил», где числовой диапазон не указан). Алкильная группа может также представлять собой алкил среднего размера, содержащий от 1 до 30 атомов углерода. Алкильная группа может также представлять собой низший алкил, содержащий от 1 до 5 атомов углерода. Алкильная группа соединений может быть обозначена «С₁-С₄ алкил» или схожими обозначениями. Только в качестве примера, термин «С₁-С₄ алкил» означает, что алкильная цепь содержит от одного до четырех атомов углерода, т.е. алкильная цепь выбрана из группы, включающей метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил. Типичные алкильные группы включают, но никоим образом не ограничиваются ими, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, третичный бутил, пентил, гексил и тому подобное.

Как применяется в описании настоящего изобретения, термин «алкилен» относится к алкандиильной функциональной группе, например, -CH₂-, -CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂CH₂- и тому подобное.

Как применяется в описании настоящего изобретения, термин "алкенил" относится к алкильной группе, содержащей в линейной или разветвленной углеводородной цепи одну или более двойных связей. Алкенильная группа может не содержать заместители или содержать заместители. В случае, когда алкенильная группа содержит заместители, заместитель (заместители) может быть выбран из тех же групп, описанных выше относительно замещения алкильной группы, если не указано иное. Олеил является примером такой алкенильной группы.

Как применяется в описании настоящего изобретения, термин «фармацевтический носитель» относится химическому соединению, облегчающему введение соединения в клетки или ткани. Например, диметилсульфоксид (ДМСО) представляет собой широко используемый носитель, т.к. он облегчает поглощение многих органических соединений клетками или тканями организма.

Как применяется в описании настоящего изобретения, Как применяется в описании настоящего изобретения, термин «разбавитель» относится к химическим соединениям, разведенным в воде, которые будут растворять представляющую интерес композицию (например, композиция, которая может содержать соединение, ретиноид, второй липид, стабилизирующий агент и/или терапевтический агент), а также стабилизировать биологически активную форму соединения. Соли, растворенные в буферных растворах, используют в качестве разбавителей в данной области техники. Один из широко используемых буферных растворов представляет собой фосфатный буферный раствор, т.к. он имитирует солевые условия крови человека. Поскольку буферные соли могут контролировать pH раствора в низких концентрациях, буферный разбавитель редко модифицирует биологическую активность соединения. В настоящем описании термин «эксципиент» относится к инертному веществу, которое добавляют в композицию для придания, без ограничения, объема, консистенции, стабильности, связывающей способности, смазывания, способности к распаду и т.д. указанной композиции. «Разбавитель» представляет собой вид экциаиента.

«Органические растворители», применяемые согласно настоящему изобретению, по существу известны в данной области техники и включают, например, C_1-4 алкиловые спирты, диметилсульфоксид ("ДМСО") и тому подобное.

Как применяется в описании настоящего изобретения, термин "терапевтический агент" относится к соединению, которое после введения млекопитающему в терапевтически эффективном количестве обеспечивает полезный терапевтический эффект для указанного млекопитающего. В настоящем описании терапевтический агент может называться лекарственным средством. Для специалиста в данной области техники очевидно, что термин «терапевтический агент» не ограничен лекарственными средствами, которые были одобрены регулирующим органом. «Терапевтический агент» может быть функционально связан с соединением согласно настоящему изобретению, ретиноидом и/или вторым липидом. Например, второй липид согласно настоящему изобретению может формировать липосому, и терапевтический агент может быть функционально связан с липосомой, например, как описано в настоящей заявке.

Как применяется в описании настоящего изобретения, термин "ретиноид" означает представителя класса соединений, состоящих из четырех изопреноидных звеньев, соединенных в конфигурации голова-к-хвосту, см. G.P. Moss, «Biochemical Nomenclature and Related Documents,» 2nd Ed. Portland Press, pp. 247-251 (1992). «Витамин A» представляет собой родовой дескриптор для ретиноидов, проявляющих в качественном отношении биологическую активность ретинола. Как применяется в описании настоящего изобретения, термин «ретиноид» относится к природным и синтетическим ретиноидам, включая ретиноиды первого поколения, второго поколения и третьего поколения.. Примерами встречающихся в природе ретиноидов являются, но без ограничения к этому, (1) 11-цис-ретиналь, (2) полностью транс-ретинол, (3) ретинилпальмитат, (4) полностью транс-ретиноевую кислоту и (5) 13-цис-ретиноевые кислоты. Кроме того, термин «ретиноид» включает ретинолы, ретинали, ретиноевые кислоты, рексиноиды и их производные.

Как применяется в описании настоящего изобретения термин "конъюгат ретиноида" относится к молекуле, которая включает по меньшей мере одну ретиноидную составляющую. В предпочтительных вариантах выполнения настоящего изобретения конъюгат ретиноида присутствует при концентрации от около 0.3 до около 30 мас. %, на основе общей массы композиции или состава, что эквивалентно от около 0.1 до около 10 моль. %, что эквивалентно мольному отношению от около 0.1 до около 10. Предпочтительно, конъюгат ретиноид представляет собой молекулу ретиноид-линкер-липид или молекулу ретиноид-линкер-ретиноид.

Пример конъюгата ретиноида включает соединения формулы II:

где q, r, и s каждый независимо равен 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10, и их энантиомеры и диастереомеры.

Предпочтительные соединения формулы II включают те, в которых q, r, и s каждый независимо равен 1, 2, 3, 4, 5, 6 или 7. Более предпочтительными являются соединения формулы II, в которых q, r, и s каждый независимо равен 3, 4 или 5. Наиболее предпочтительными являются соединения формулы II, в которых q равно 3, r равно 5, и s равно 3. Одним примером соединения формулы II является

DiVA-irar-DiVA включают стереоизомеры и все энантиомеры и диастереомеры, и должны рассматриваться в объеме настоящего изобретения.

Как применяется в описании настоящего изобретения, термин "молекула ретиноид-линкер-липид" относится к молекуле, которая включает по меньшей мере одну ретиноидную составляющую, прикрепленную к по меньшей мере одной липидной составляющей через по меньшей мере один линкер, такой как, например, ПЭГ составляющая.

Как применяется в описании настоящего изобретения, термин "молекула ретиноид-линкер-ретиноид" относится к молекуле, которая включает по меньшей мере одну ретиноидную составляющую, присоединенную к другой ретиноидной составляющей (которая может быть такой же или отличной) через по меньшей мере один линкер, такой как, например, ПЭГ составляющая.

Как применяется в описании настоящего изобретения, термины "липид" и "липофильный" применяются в описании настоящего изобретения согласно их общеизвестным значениям, как понимается специалистами в данной области техники. Неограничивающие примеры липидов и липофильных групп включают жирные кислоты, стиролы, С₂-С₅₀ алкил, С₂-С₅₀ гетероалкил, С₂-С₅₀ алкенил, С₂-С₅₀ етероалкенил, С₅-С₅₀ арил, С₅-С₅₀ гетероарил, С₂-С₅₀ алкинил, С₂-С₅₀ гетероалкинил, С₂-С₅₀ карбоксиалкенил и С₂-С₅₀ карбксигетероалкенил. Жирной кислотой является насыщенная или ненасыщенная длинноцепочечная монокарбоновая кислота, которая содержит, например, 12-24 атомов углерода Липид характеризуется как являющийся по существу не растворимым в воде, имеющим растворимость в воде менее около 0.01% (массовая основа). Согласно настоящему изобретению термины "липидная составляющая" и "липофильная составляющая" относятся к липиду или его части, которая присоединяется к другой группе. Например, липидная группа может присоединяться к другому соединению (например, мономеру) посредством химической реакции между функциональной группой (такой как группа карбоновой кислоты) липида и соответствующей функциональной группой мономера.

Как применяется в описании настоящего изобретения, термин «стволовая клетка» включает звездчатые клетки печени.

Как применяется в описании настоящего изобретения, термин "siPHК" относится к малой интерферирующей РНК, также известной в данной области техники как короткая интерферирующая РНК или сайлесинг РНК. siPHК является классом двухнитиевых молекул РНК, которые оказывают многообразие эффектов, известных в данной области техники, наиболее значимым является влияние на экспрессию специфических генов и экспрессию белка.

Термин "липосома" применяется в настоящей заявке в его общеизвестном значении, как понимается специалистами в данной области техники, и относится к структуре липидного бислоя, который содержит липиды, присоединенные к полярным, гидрофильным группам, которые образуют по существу закрытую структуру в водной среде. В некоторых вариантах выполнения настоящего изобретения, липосома может быть функционально связана с одним или более соединениями, такими как терапевтический агент и ретиноид или конъюгат ретиноида. Липосома может состоять из одного липидного бислоя (то есть униламеллярная), или она может состоять из двух или более сосредоточенных липидных бислоев (то есть мультиламеллярная). Тогда как внутренняя часть липомомы может состоять из множества соединений, внешняя часть липосомы доступна для водной композиции, содержащей липосому. Липосома может быть приблизительно сферической или эллипсоидной по форме.

В некоторых вариантах выполнения настоящего изобретения, siPHK инкапсулируется липосомой, так что siPHK недоступна для водной среды. При инкапсулировании siPHK, липосома будет иметь твердое ядро; такие липосомы, инкапсулирующие siPHK и имеющие твердое ядро, называются в настоящей заявке термином «липидные наночастицы». В других вариантах выполнения настоящего изобретения, siPHK неинкапсулирована липосомой. В таких вариантах выполнения настоящего изобретения, siPHK может быть объединена с внешней поверхностью липосомы путем смешивания предварительно образованных липосом с РНК в водном растворе. В этих вариантах выполнения настоящего изобретения, siPHK доступна для водной среды. Липосомы, имеющие siPHK, связанную только с их внешней поверхностью, называются в настоящей заявке термином «липоплексы».

Композиции согласно настоящему изобретению также могут включать ПЭГ-конъюгированные липиды. ПЭГ-конъюгированные липиды в объем настоящего изобретения включают, среди прочего, известные из уровня техники. Подходящие ПЭГ-липиды включают ПЭГ-фосфолипиды и ПЭГ-церамиды, такие как, например, ПЭГ2000-DSPE, ПЭГ2000-DPPE, ПЭГ2000-DMPE, ПЭГ2000-DOPE, ПЭГ1000-DSPE, ПЭГ1000-DPPE, ПЭГ1000-DMPE, ПЭГ1000-DOPE, ПЭГ550-DSPE, ПЭГ550-DPPE, ПЭГ-55DMPE, ПЭГ-1000DOPE, ПЭГ-ВМл, ПЭГ-холестерин. ПЭГ2000-Церамид, ПЭГ1000-Церамид, ПЭГ750-Церамид, ПЭГ550-Церамид.

Вышеизложенные композиции согласно настоящему изобретению могут включать один или более фосфолипидов, таких как, например, 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфохолин ("DSPC"), дипальмитоилфосфатидилхолин ("DPPC"), 1,2-дипальмитоил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин ("DPPE"), и 1,2-диолеоил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин ("DOPE"). Предпочтительно, вспомогательным липидом является DOPE.

Также в объем настоящего изобретения входят фармацевтические композиции, которые включают любые вышеуказанные композиции, а также фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель. Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению будут включать по меньшей мере один терапевтический агент. Предпочтительно, терапевтический агент представляет собой siPHK. Предполагается, что любая молекула siPHK может применяться согласно настоящему изобретению. Например, siPHK может включать:

и

В предпочтительных композициях согласно настоящему изобретению, включающих siPHK, siPHK инкапсулирована липосомой. В других вариантах выполнения настоящего изобретения, siPHK может находиться вне липосомы. В этих вариантах выполнения настоящего изобретения, siPHK может объединяться с внешней стороной липосомы.

Также в объем настоящего изобретения входят способы доставки терапевтического агента в организм пациента. Эти способы включают обеспечение фармацевтической композиции, включающей любую вышеуказанную композицию и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель; и введение фармацевтической композиции пациенту.

Другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, содержащая один или более физиологически приемлемых поверхностно-активных агентов, фармацевтических носителей, разбавителей, эксципиентов и суспендирующих агентов или их комбинацию; и к композиции (например композиция, которая может включать соединение, ретиноид, второй липид, стабилизирующий агент и/или терапевтический агент), как раскрывается в настоящей заявке. Приемлемые дополнительные фармацевтические носители или разбавители для терапевтического использования хорошо известны в фармации и описаны, например, в Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA (1990), полностью включенном в настоящее описание посредством ссылки. Консерванты, стабилизаторы, красители и тому подобное, могут быть включены в фармацевтическую композицию. Например, бензоат натрия, аскорбиновая кислота и эфиры п-гидроксибензойной кислоты могут быть добавлены в качестве консервантов. Кроме того, могут быть использованы антиоксиданты и суспендирующие агенты. В различных вариантах выполнения настоящего изобретения спирты, эфиры, сульфатированные алифатические спирты и т.д. могут быть использованы в качестве поверхностно-активных агентов; сахароза, глюкоза, лактоза, крахмал, кристаллическая целлюлоза, маннит, легкий безводный силикат, алюминат магния, метасиликат-алюминат магния, синтетический силикат алюминия, карбонат кальция, кислый карбонат натрия, гидрофосфат кальция, карбоксиметилцеллюлоза кальция и т.д. могут быть использованы в качестве эксципиентов; кокосовое масло, оливковое масло, кунжутное масло, арахисовое масло, соевое масло могут быть использованы в качестве суспендирующих агентов или смазывающих веществ; ацетатфталат целлюлозы в качестве производного углевода, такого как целлюлоза или сахар, или сополимер метилацетат-метакрилат в качестве производного поливинила могут быть использованы в качестве суспендирующих агентов; и пластификаторы, такие как эфир-фталаты и т.д. могут быть использованы в качестве суспендирующих агентов.

Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению могут быть введены пациенту-человеку как таковые или в фармацевтических композициях, в которых их смешивают с другими активными компонентами, как в комбинированной терапии, или подходящими фармацевтическими носителями или эксципиентом (эксципиентами). Способы получения и введения соединений согласно настоящей заявке могут быть найдены в "Remington's Pharmaceutical Sciences," Mack Publishing Co., Easton, PA, 18th edition, 1990.

Подходящие пути введения могут включать, например, парентеральную доставку, включающую внутримышечные, подкожные, внутривенные, интрамедуллярные инъекции, а также интратекальные, прямые интравентрикулярные, интраперитонеальные, интраназальные или интраокулярные инъекции. Композиция (например, композиция, которая может включать соединение, ретиноид, второй липид, стабилизирующий агент и/или терапевтический агент) также может вводиться в лекарственных формах с замедленным или контролируемым высвобождением, включающих инъекции веществ замедленного всасывания, осмотические помпы и тому подобное для пролонгированного и/или рассчитанного по времени, импульсного введения с заданной скоростью. Кроме того, путь введения может быть местным или системным.

Фармацевтические композиции могут быть изготовлены известным способом, например, способами традиционного смешивания, растворения, гранулирования, получения драже, растирания в порошок, эмульгирования, инкапсулирования, «захвата» или таблетирования

Фармацевтические композиции могут быть изготовлены любым традиционным способом с использованием одного или более физиологически приемлемых фармацевтических носителей, включающих эксципиенты и вспомогательные вещества, облегчающие переработку активных соединений в препараты, которые могут быть фармацевтически использованы. Подходящий состав зависит от выбранного пути введения. Любые из хорошо известных способов, фармацевтических носителей и эксципиентов могут быть использованы в качестве подходящих и понятных в данной области техники; например, в Remington's Pharmaceutical Sciences, выше.

Лекарственные средства для инъекций могут быть получены в традиционных формах, либо в виде жидких растворов или суспензий, твердых форм, подходящих для растворения или суспендирования в жидкости перед инъекцией, либо в виде эмульсий. Подходящие эксципиенты представляют собой, например, воду, физиологический раствор, декстрозу, маннит, лактозу, лецитин, альбумин, глутамат натрия, гидрохлорид цистеина и т.д. Кроме того, при необходимости фармацевтические композиции для инъекций могут содержать небольшие количества нетоксичных вспомогательных веществ, таких как смачивающие агенты, pH буферные агенты и т.д. Физиологически совместимые буферы включают, но не ограничиваются следующими: раствор Хенкса, раствор Рингера или физиологический буферный раствор. При необходимости, могут быть использованы усиливающие абсорбцию препараты.

Фармацевтические составы для парентерального введения, например, путем болюсной инъекции или непрерывной инфузии, включают водные растворы активных композиций (например, композиция, которая может включать соединение, ретиноид, второй липид, стабилизирующий агент и/или терапевтический агент) в водорастворимой форме. Кроме того, суспензии активных соединений могут быть получены в виде подходящих масляных суспензий для инъекций. Водные суспензии для инъекций могут содержать вещества, повышающие вязкость суспензии, такие как натрий-карбоксиметилцеллюлоза, сорбит или декстран. Возможно, суспензия также может содержать подходящие стабилизаторы или агенты, повышающие растворимость соединений, что позволяет получать высококонцентрированные растворы. Составы для инъекции могут находиться в дозированной лекарственной форме, например в ампулах или в многодозовых контейнерах с добавленным консервантом. Композиции могут находиться в таких формах, как суспензии, растворы или эмульсии в масляных или водных растворителях, и могут содержать вспомогательные вещества, такие как суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие агенты. В качестве альтернативы активный компонент может находиться в форме порошка для разбавления подходящим растворителем, например, стерильной апирогенной водой перед применением.

В дополнение к составам, описанным ранее, композиции также могут быть изготовлены в виде депо-препарата. Указанные составы длительного действия могут быть введены путем имплантации (например, подкожно или внутримышечно) или путем внутримышечной инъекции. Таким образом, например, композиции (например, композиция, которая может включать соединение, ретиноид, второй липид, стабилизирующий агент и/или терапевтический агент) могут быть изготовлены совместно с подходящими полимерными или гидрофобными веществами (например, в виде эмульсии в подходящем масле), или ионообменными смолами, или в виде умеренно растворимых производных, например, в виде умеренно растворимой соли.

Композиции и составы согласно настоящему изобретению могут также быть приготовлены для местной доставки и могут наноситься на кожу субъекта с применением с применением любых подходящих способов нанесения средства для местной доставки. Например, композиция может наноситься вручную, с применением аппликатора или способом, который включает и то и другое. После нанесения композиция может вводиться в кожу субъекта, например, путем втирания. Нанесение может осуществляться множество раз каждый день или один раз каждый день. Например, композиция может наноситься на кожу субъекта один раз в день, дважды в день или множество раз в день или может наноситься один раз каждые два дня, один раз каждые три дня или около одного раза каждую неделю, один раз за каждые две недели или один раз за каждые несколько недель.

Некоторые варианты выполнения настоящего изобретения направлены на способ доставки терапевтического агента в клетку. Например, некоторые варианты выполнения настоящего изобретения направлены на способ доставки терапевтического агента, такого как siPHK, в клетку. Подходящие клетки для применения согласно способам, описанным в настоящей заявке, включают прокариоты, дрожи или высшие эукариотические клетки, включая растительные и животные клетки (например, клетки млекопитающих). В некоторых вариантах выполнения настоящего изобретения, клетками могут быть клетки фибросаркомы человека (например, НТ1080 клеточная линия). В других вариантах выполнения настоящего изобретения клетками могут быть раковые клетки. Клеточные линии, которые являются модельными системами для рака, могут применяться, включая, но без ограничения к этому, рак молочной железы (MCF-7, MDA-MB-438 клеточные линии), U87 клеточная линия глиобластомы, B16F0 клетки (меланома), HeLa клетки (рак шейки матки), А549 клетки (рак легких), и клеточная линия опухоли крысы GH3 и 9L. В этих вариантах выполнения настоящего изобретения композиции, опис