Конъюгаты 4-бензиламинохинолинов с желчной кислотой и их гетероаналоги, способ их получения и лекарственные средства на основе этих соединений

Конъюгаты 4-бензиламинохинолинов с желчной кислотой и их гетероаналоги, способ их получения и лекарственные средства на основе этих соединений

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Изобретение относится к замещенным 4-бензиламинохинолинам и их гетероаналогам, а также к их фармацевтически приемлемым солям и физиологически функциональным производным.

Образование желчных камней определяется, кроме ряда факторов, по существу составом желчи, в особенности концентрацией и соотношением холестерина, фосфолипидов и желчных солей. Предпосылкой к образованию холестериновых желчных камней является наличие перенасыщенной холестерином желчи (М.С.Саrеу и D.M.Small "The physical chemistry of cholesterol solubility in bile. Relationship to gallstone formation and dissolution in man", J. Clin. Invest., 61, 998-1026 (1978)).

Желчные камни до сих пор удаляют преимущественно хирургическим путем, так что существует большая потребность в медицине в лекарственном растворении желчных камней и в профилактике образования желчных камней.

Задачей изобретения является получение соединений, которые способны предотвращать образование желчных камней, препятствуя перенасыщению желчи холестерином, замедляя образование кристаллов холестерина из перенасыщенной желчи. Изобретение относится к соединениям формулы (I):

где:

G означает:

К означает -OR(7), -NR(7)R(8), -HN-CH₂-CH₂-CO₂H, -НN-СН₂-СН₂-SО₃Н, -NH-CH₂-CO₂H, -N(СН₃) CH₂CO₂H, -HN-CHR(9)CO₂H, -OKa, причем Ка означает катион, как, например, ион щелочного или щелочноземельного металла или четвертичный аммониевый ион;

R(7), R(8), независимо друг от друга, означают атом водорода, (C₁-C₄)-алкил, фенил или бензил, причем фенильное ядро может быть вплоть до трехкратно замещено с помощью F, Сl, СF₃, метила, метоксигруппы;

R(9) означает (С₁-С₄)-алкил, бензил, -СН₂-ОН, Н₃СSСH₂СН₂-, НO₂СCН₂-, НO₂СCН₂СН₂-;

R(1)-R(6), независимо друг от друга, означают атом водорода, -OR(10), -SR(10), -NR(10)R(13), -OCOR(10), -SCOR(10), -NHCOR(10), -OPO(OR(10))₂, -OSO₂OR(10), -R(10); R(1) и R(2), R(3) и R(4), R(5) и R(6), соответственно, вместе образуют кислород карбонильной группы, причем всегда точно один из остатков R(1)-R(6) означает связь с L;

R(10), R(13), независимо друг от друга, означают атом водорода, (C₁-C₄)-алкил, фенил или бензил, причем фенильное ядро может быть вплоть до трехкратно замещено с помощью F, Cl, СF₃, метила, метоксигруппы;

L означает (C₁-C₁₅)-алкил, причем одна или несколько структурных СН₂-единиц могут быть заменены на -СН=СН-; -С≡С-, -NR(11)-, -СО-, -О-, -SО₂- или -S-;

R(11) означает атом водорода, (C₁-C₈)-алкил, R(12)-CO-, фенил, бензил;

R(12) означает атом водорода, (C₁-C₈)-алкил, фенил или бензил, причем фенильное ядро может быть вплоть до трехкратно замещено с помощью F, Cl, СF₃, метила, метоксигруппы;

Р означает:

где:

А означает N или СН;

В означает N или СН;

D означает N или СН;

Е означает N или СН;

R(16)-R(24), независимо друг от друга, означают атом водорода, F, Cl, Br, I, (C₁-C₄)-алкил, причем алкильные остатки могут быть одно- или многократно замещены фтором; CN, NO₂, NR(25)R(26), OR(25), OCOR(25), COR(25), COOR(25), CONR(25)R(26), S0₂R(25), SO₂OR(25), SO₂NR(25)R(26), причем всегда один из остатков R(16)-R(24) означает связь с L;

R(25), R(26), независимо друг от друга, означают атом водорода, (C₁-C₄)-алкил, причем алкильные остатки могут быть одно- или многократно замещеным фтором; фенил и бензил;

а также к их фармацевтически приемлемым солям и физиологически функциональным производным.

Предпочтительны соединения формулы (I), в которых один или несколько остатков имеют следующее значение:

G означает:

К означает -OR(7), -NR(7)R(8), -HN-CH₂-CH₂-CO₂H, -HN-CH₂-CH₂-SO₃H, -NH-CH₂-CO₂H, -N(СН₃)CH₂CO₂H, -HN-CHR(9)CO₂H, -OKa, причем Ка означает катион, как, например, ион щелочного или щелочноземельного металла или четвертичный аммониевый ион;

R(7), R(8), независимо друг от друга, означают атом водорода, (C₁-C₄)-алкил, фенил или бензил, причем фенильное ядро может быть вплоть до трехкратно замещено с помощью F, Cl, СF₃, метила, метоксигруппы;

R(9) означает (C₁-C₄)-алкил, бензил, -CH₂-OH, Н₃СSСН₂СН₂-, НО₂СCН₂-, НO₂СCН₂СН₂-;

R(1), R(3), R(5), независимо друг от друга, означают атом водорода, -OR(10), -NR(10)R(13), -OCOR(10), -NHCOR(10);

R(10), R(13), независимо друг от друга, означают атом водорода, (C₁-C₄)-алкил, фенил или бензил, причем фенильное ядро может быть вплоть до трехкратно замещено с помощью F, Cl, СF₃, метила, метоксигруппы;

L означает (C₁-C₈)-алкил, причем одна или несколько структурных СН₂-единиц могут быть заменены на -СН=СН-, -С≡С-, -NR(11)-, -CO-, -О- или -SO₂-;

R(11) означает атом водорода, (C₁-C₄)-алкил, R(12)-CO-, фенил, бензил;

R(12) означает атом водорода, (C₁-C₄)-алкил, фенил или бензил, причем фенильное ядро может быть вплоть до трехкратно замещено с помощью F, Cl, СF₃, метила, метоксигруппы;

Р означает:

где:

А означает N или СН;

В означает N или СН;

R(16)-R(24), независимо друг от друга, означают атом водорода, F, Cl, Br, (C₁-C₄)-алкил, причем алкильные остатки могут быть одно- или многократно замещены фтором; NR(25)R(26), OR(25), OCOR(25), COR(25), COOR(25), CONR(25)R(26), причем всегда один из остатков R(16)-R(24) означает связь с L;

R(25), R(26), независимо друг от друга, означают атом водорода, (C₁-C₄)-алкил, причем алкильные остатки могут быть одно- или многократно замещены фтором; фенил и бензил;

а также их фармацевтически приемлемые соли и физиологически функциональные производные.

Особенно предпочтительны соединения формулы (I), в которых один или несколько остатков имеют следующее значение:

G означает:

К означает -OR(7), -NR(7)R(8), -HN-CH₂-CH₂-CO₂H, -НN-СН₂-СН₂-SО₃Н, -NH-CH₂-CO₂H, -N(СН₃)СН₂СО₂Н, -ОКа, причем Ка означает катион, как, например, ион щелочного или щелочноземельного металла или четвертичный аммониевый ион;

R(7), R(8), независимо друг от друга, означают атом водорода, (С₁-С₄)-алкил, фенил или бензил, причем фенильное ядро может быть вплоть до трехкратно замещено с помощью F, Сl, СF₃, метила, метоксигруппы;

R(1) означает атом водорода, -ОН;

L означает (C₁-C₄)-алкил, причем одна или несколько структурных СН₂-единиц могут быть заменены на -СН=СН-, -С≡С-, -NR(11)-, -СО-, -О- или -SO₂-;

R(11) означает атом водорода, (C₁-C₄)-алкил, R(12)-CO-, фенил, бензил;

R(12) означает атом водорода, (С₁-С₄)-алкил, фенил или бензил, причем фенильное ядро может быть вплоть до трехкратно замещено с помощью F, Cl, СF₃, метила, метоксигруппы;

Р означает:

R(16)-R(24), независимо друг от друга, означают атом водорода, F, Cl, (C₁-C₄)-алкил, причем алкильные остатки могут быть одно- или многократно замещены фтором; NR(25)R(26), OR(25), OCOR(25), COR(25), COOR(25), CONR(25)R(26), причем всегда один из остатков R(16)-R(24) означает связь с L;

R(25), R(26), независимо друг от друга, означают атом водорода, (C₁-C₄)-алкил, причем алкильные остатки могут быть одно- или многократно замещены фтором; фенил и бензил;

а также их фармацевтически приемлемые соли.

В высшей степени предпочтительны соединения формулы (I), в которых один или несколько остатков имеют следующее значение:

G означает:

R(1) означает атом водорода, -ОН;

L означает (С₁-С₅)-алкил, причем одна или несколько структурных СН₂ единиц могут быть заменены на -СН=СН-, -С≡С-, -NR(11)-, -CO-, -О- или -SO₂-;

Р означает:

где:

R(16)-R(24), независимо друг от друга, означают атом водорода, F, Cl, (С₁-С₄)-алкил, причем алкильные остатки могут быть одно- или многократно замещены фтором; NR(25)R(26), OR(25), OCOR(25), COR(25), COOR(25), CONR(25)R(26), причем всегда один из остатков R(16)-R(24) означает связь с L;

R(25), R(26), независимо друг от друга, означают атом водорода, (C₁-C₄)-алкил, причем алкильные остатки могут быть одно- или многократно замещены фтором; фенил и бензил; а также их фармацевтически приемлемые соли.

Если соединения формулы (I) содержат один или несколько асимметрических центров, то они могут иметь как S-, так и также R-конфигурацию. Соединения могут находиться в виде оптических изомеров, в виде диастереомеров, в виде рацематов или в виде их смесей.

Выражение "причем алкильный остаток может быть одно- или многократно замещен фтором" включает также перфорированные алкильные остатки.

Указанные алкильные остатки могут быть как линейными, так и также разветвленными.

Фармацевтически приемлемые соли благодаря их более высокой растворимости в воде, по сравнению с исходными или базовыми соединениями, особенно пригодны для применения в медицине. Эти соли должны содержать фармацевтически приемлемый анион или катион. Пригодными фармацевтически приемлемыми аддитивными солями предлагаемых согласно изобретению соединений с кислотами являются соли неорганических кислот, как соляная кислота, бромоводородная кислота, фосфорная кислота, метафосфорная кислота, азотная кислота, сульфокислота или серная кислота, а также органических кислот, как, например, уксусная кислота, бензолсульфокислота, бензойная кислота, лимонная кислота, этансульфокислота, фумаровая кислота, глюконовая кислота, гликолевая кислота, изетионовая кислота, молочная кислота, лактобионовая кислота, малеиновая кислота, яблочная кислота, метансульфокислота, янтарная кислота, п-толуолсульфокислота, винная кислота и трифторуксусная кислота. Для медицинских целей особенно предпочтительно используют хлорид. Пригодными фармацевтически приемлемыми основными солями являются аммониевые соли, соли щелочных металлов (как соли натрия и калия) и соли щелочноземельных металлов (как соли магния и кальция).

Соли с фармацевтически неприемлемым анионом также входят в рамки изобретения в качестве полезных промежуточных продуктов для получения или очистки фармацевтически приемлемых солей и/или для использования в случае нетерапевтических, например in vitro, применений.

Используемое в настоящем описании понятие "физиологически функциональное производное" обозначает любое физиологически приемлемое производное предлагаемого согласно изобретению соединения формулы (I), например сложный эфир, которое при введении млекопитающему, как, например, человек, способно (прямо или косвенно) образовывать соединение формулы (I) или его активный метаболит.

К физиологически функциональным производным относятся также пролекарства на основе предлагаемых согласно изобретению соединений. Такие пролекарства in vivo могут метаболизироваться до предлагаемого согласно изобретению соединения. Эти пролекарства сами могут быть активными или нет.

Предлагаемые согласно изобретению соединения могут находиться также в различных полиморфных формах, например в виде аморфных и кристаллических полиморфных форм. Все полиморфные формы предлагаемых согласно изобретению соединений входят в рамки изобретения и составляют дальнейший аспект изобретения.

Ниже все ссылки на "соединение (соединения) согласно формуле (I)" относятся к соединению (соединениям) формулы (I), как описанные выше, а также к их солям, сольватам и физиологически функциональным производным.

Количество соединения согласно формуле (I), которое является необходимым для достижения желательного биологического эффекта, зависит от ряда факторов, как, например, выбранное специфическое соединение, указанное целевое применение, способ введения и клиническое состояние пациента.

В общем, суточная доза составляет величину в области от 0,1 мг до 100 мг (обычно от 0,1 мг до 50 мг) в сутки на килограмм массы тела, например 0,1-10 мг/кг/сутки. Таблетки или капсулы, например, могут содержать от 0,01 мг до 100 мг, обычно от 0,02 мг до 50 мг. В случае фармацевтически приемлемых солей вышеуказанные массовые данные относятся к массе соли соединения формулы (I). Для профилактики или терапии вышеуказанных состояний соединения согласно формуле (I) можно использовать индивидуально в виде соединения, однако, предпочтительно они находятся вместе с приемлемым носителем в виде фармацевтической композиции. Носитель, разумеется, должен быть приемлемым, т.е. совместимым с другими компонентами композиции и не являться вредным для здоровья пациента. Носитель может представлять собой твердое вещество или жидкость, или то и другое и предпочтительно его используют вместе с соединением для приготовления лекарственной формы в виде разовой дозы, например, в виде таблетки, которая может содержать 0,05-95 мас.% биологически активного вещества. Также могут присутствовать другие фармацевтически активные вещества, включая другие соединения согласно формуле (I). Предлагаемые согласно изобретению фармацевтические композиции можно получать по одному из известных фармацевтических способов, которые по существу состоят в том, что компоненты смешивают с фармакологически приемлемыми носителями и/или вспомогательными веществами.

Предлагаемые согласно изобретению фармацевтические композиции представляют собой такие, которые пригодны для орального и перорального (например, подъязычного) введения, хотя наиболее пригодный способ введения в каждом отдельном случае зависит от рода и тяжести излечиваемого состояния и от рода используемого в каждом случае соединения согласно формуле (I). В рамки настоящего изобретения также входят дражированные лекарственные формы и дражированные пролонгированные лекарственные формы. Предпочтительны кислотоустойчивые и устойчивые к желудочному соку лекарственные формы. Пригодные, устойчивые к желудочному соку покрытия включают ацетатфталат целлюлозы, поливинилацетатфталат, гидроксипропилметилцеллюлозофталат и анионные полимеры метакриловой кислоты и метилового эфира метакриловой кислоты.

Пригодные фармацевтические соединения для орального введения могут находиться в виде отдельных единиц, как, например, капсулы, оболочки облаток, таблетки для сосания или таблетки, которые содержат, соответственно, определенное количество соединения согласно формуле (I); в виде порошков или гранулятов; в виде раствора или суспензии в водной или неводной жидкости; или в виде эмульсии масло-в-воде или вода-в-масле. Эти композиции, как уже указано, можно получать любым пригодным фармацевтическим способом, который включает стадию, в которой биологически активное вещества и носитель (который может состоять из одного или нескольких дополнительных компонентов) вводят в контакт. В общем, композиции получают путем равномерного и гомогенного смешения биологически активного вещества с жидким и/или тонкодисперсным твердым носителем, после чего продукт, если необходимо, формуют. Так, например, таблетку можно получать тем, что порошок или гранулят соединения прессуют или формуют, в случае необходимости, вместе с одним или несколькими дополнительными компонентами. Прессованные таблетки можно получать путем таблетирования в пригодном устройстве соединения в свободно текучей форме, как, например, в виде порошка или гранулята, в случае необходимости, смешанного со связующим, придающим скользкость веществом, инертным разбавителем и/или одним (несколькими) поверхностно-активным веществом и/или диспергатором. Формованные таблетки можно получать путем формования в пригодном устройстве порошкообразного, увлажненного инертным жидким разбавителем соединения.

Фармацевтические композиции, которые пригодны для перорального (подъязычного) введения, включают таблетки для сосания, которые содержат соединение согласно формуле (I) вместе со вкусовым веществом, обычно сахарозой и гуммиарабиком или трагантом, и пастилки, которые включают соединение в инертной основе, как желатина и глицерин или сахароза и гуммиарабик.

Изобретение относится, далее, к двум способам получения соединений формулы (I).

Способ А)

В случае этого способа в катализируемую с помощью Pd(0) реакцию сочетания вводят соединение формулы (IIId), в которой Х означает, например, бром или иод, и соединение формулы (IId). Высвобождающийся при этом НХ улавливают с помощью вспомогательного основания (как, например, триэтиламин или пиридин).

где R1, R2, R3, R4, R5, К и Р имеют вышеуказанное значение. Ацетиленовые производные желчной кислоты формулы (IId) получают из пригодных кетонов желчной кислоты. Для этого ацетилид лития аналогично известным способам (патент США 5641767) присоединяют к кетожелчным кислотам.

Способ В)

Карбоновые кислоты формулы (IIIe) (R=ОН) в присутствии пригодных реагентов реакции сочетания, как, например, TOTU (Chemiker Zeitung, 98, 817 (1974)), DCC/HOBt (J. Am. Chem. Soc., 77, 1067 (1955)) или CMC/HOBt (J. Org. Chem., 21, 439(1956)) (см. сокращения) известным образом вводят во взаимодействие с соединениями формулы (IIе), благодаря чему образуется амидная связь. Точно также указанные амиды карбоновых кислот формулы (I) можно получать известным специалисту образом путем введения во взаимодействие активированных производных карбоновых кислот формулы (IIIe) с соединениями формулы (IIе) в присутствии вспомогательного основания (как, например, триэтиламин или пиридин). В качестве активированных производных карбоновых кислот следует назвать, например, соответствующие хлорангидриды (R=Сl), имидазолиды (R=1-имидазолил; Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 351 (1962)) или смешанные ангидриды с Cl-COOC₂H₅ или тозилхлоридом.

где R1, R2, R3, R4, R5, К и Р имеют вышеуказанное значение. Компоненты 3-этаноламин-желчная кислота формулы (IIе) при этом получают по известным способам (Tetrahedron Lett., 34, 817 (1993)).

Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли и физиологически функциональные производные отличаются благоприятным влиянием на состав желчи и предотвращают образование желчных камней, препятствуя перенасыщенности желчи холестерином или замедляя образование кристаллов холестерина из перенасыщенной желчи.

Соединения можно использовать индивидуально или в комбинации со снижающими уровень липидов в крови биологически активными веществами (см. Красный список, глава 58). Соединения в особенности пригодны для профилактики, а также для обработки желчных камней.

Предлагаемые согласно изобретению соединения формулы (I) попадают в гепатожелчную систему и действуют в этих тканях. Так, тормозится водопоглощение из желчного пузыря путем ингибирования апикального NHE-антипорта подтипа 3 эпителия желчного пузыря, следствием которого является разбавленная желчная жидкость.

Биологическое тестирование предлагаемых согласно изобретению соединений осуществляли путем установления ингибирования натрий/протонного обмена подтипа 3.

1. Описание теста

Для определения остаточной активности человеческого протеина NHE-3 (экспрессируемого в LAP1-линии клеток) определяли восстановление внутриклеточного pH_s (pH_i) после подкисления, которое используют в случае функциональноспособного NHE также в условиях отсутствия гидрокарбоната. Для этого определяли pH_i с помощью чувствительного к рН флуоресцентного красителя BCECF (Calbiochem; используется предшественник BCECF-AM). Клетки сначала нагружали с помощью BCECF. Флуоресценцию BCECF определяли на "Ratio Fluorescence Spectrometer" (Photon Technology International, South Brunswick, N. J., США) при длинах волн возбуждения 505 нм и 440 нм и длине волны эмиссии 535 нм и пересчитывали с помощью калибровочных кривых в значения pH_i. Клетки инкубировали уже при BCECF-нагрузке в NН₄Сl-буфере (рН 7,4) (NН₄Сl-буфер: 115 ммоль NaCl, 20 ммоль NH₄Cl, 5 ммоль КСl, 1 ммоль CaCl₂, 1 ммоль MgSO₄, 20 ммоль Гепес, 5 ммоль глюкозы, 1 мг/мл бычьего сывороточного альбумина; с помощью 1М раствора NaOH устанавливают рН 7,4). Внутриклеточное подкисление индуцировали путем добавления 975 мкл не содержащего NH₄Cl буфера (см. выше) к составляющей 25 мкл аликвоте инкубированных в NН₄Сl-буфере клеток. Последующую скорость восстановления рН регистрировали в течение 3 минут. Для расчета ингибирующей способности тестируемых веществ сначала клетки исследовали в буферах, в которых не происходило полное восстановление рН, соответственно, вообще не происходило никакого восстановления рН. Для полного восстановления рН (100%) клетки инкубировали в содержащем Nа⁺ буфере (133,8 ммоль NaCl, 4,7 ммоль КСl, 1,25 ммоль CaCl₂, 1,25 ммоль MgCl₂, 0,97 ммоль Na₂HPO₄, 0,23 ммоль NaH₂PO₄, 5 ммоль Гепес, 5 ммоль глюкозы; с помощью 1М раствора NaOH устанавливают рН 7,0). Для определения значения 0% клетки инкубировали в не содержащем Na⁺ буфере (133,8 ммоль холинхлорида, 4,7 ммоль КСl, 1,25 ммоль CaCl₂, 1,25 ммоль MgCl₂, 0,97 ммоль К₂НРO₄, 0,23 ммоль KH₂PO₄, 5 ммоль Гепес, 5 ммоль глюкозы; с помощью 1М раствора NaOH устанавливают рН 7,0). Тестируемые вещества помещали в Nа⁺-содержащий буфер. Восстановление внутриклеточного pH_s при тестируемой концентрации вещества выражали в виде процента максимального восстановления.

Результаты:

пример 1: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 26%

пример 2: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 33%

пример 3: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 22%

пример 4 остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 87%

пример 5: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 98%

пример 6: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 39%

пример 7: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 96%

пример 8: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 86%

пример 9: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 95%

пример 10: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 82%

пример 11: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 61%

пример 12: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 91%

пример 13: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 40%

пример 14: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 52%

пример 15: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 65%

пример 16: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 27%

пример 17: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 36%

пример 18: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 36%

пример 19: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 86%

пример 20: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 56%

пример 21: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 72%

пример 22: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 90%

пример 23: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 16%

пример 24: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 29%

пример 25: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 18%

пример 26: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 52%

пример 27: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 54%

пример 28: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 69%

пример 29: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 61%

пример 30: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 48%

пример 31: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 69%

пример 32: остаточная активность hNHE3 при 30 мкмоль = 90%

Список сокращений:
Me	метил;	LAH литийалюминийгидрид;
DMF	N,N-диметилформамид;	EI электронный удар;
CI	химическая ионизация;	RT комнатная температура;
ЕЕ	этилацетат;	т.пл. температура плавления;
НЕР	н-гептан;	DME диметоксиэтан;
ES	ионизация электронным распылением;
FA	бомбардировка быстрыми атомами;
THF	тетрагидрофуран;	экв. эквивалент;
TOTU	O-[(этоксикарбонил)цианметиленамино]-N,N,N’,N’-тетраметилуроний-тетрафторборат
HOBt	1-гидроксибензтриазол
CMC	N-циклогексил-N’-(2-морфолиноэтил)карбодиимидметил-п
	толуолсульфонат
DCC	дициклогексилкарбодиимид

Нижеследующие примеры служат для более подробного пояснения изобретения, не ограничивая его описанными в примерах продуктами и конструктивными формами.

Пример 1

2-Метил-3-(ацет-1-ил)-4-{4-[1-(3α,7α,12α-тригидрокси-10β,13β-диметил-17β-((пентановая кислота)-4-ил)гексадекагидроциклопента[a]фенантрен-3-ил)этин-2-ил]бензил}аминохинолин

Получение промежуточных продуктов:

Промежуточный продукт 1: 3β-Ацетиленхолевая кислота

Методика синтеза:

а) Метиловый эфир 3,7,12-триацетилхолевой кислоты

90 г Метилового эфира холевой кислоты и 3,0 г диметиламинопиридина растворяют в 500 мл пиридина, смешивают с 500 мл ацетангидрида и перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Выливают в воду со льдом и экстрагируют 3 раза этилацетатом. Высушиванием над сульфатом магния и выпариванием органической фазы получают 92 г метилового эфира 3,7,12-триацетилхолевой кислоты.

Масс-спектр (FAB): M⁺+Li=555.

b) Метиловый эфир 7,12-диацетилхолевой кислоты

При температуре 5°С 150 мл ацетангидрида медленно добавляют по каплям к 1,5 л метанола. Спустя 15 минут добавляют 92 г метилового эфира 3,7,12-триацетилхолевой кислоты и перемешивают в течение 1 часа при комнатной температуре. Выливают в воду со льдом и экстрагируют 3 раза этилацетатом. Органическую фазу промывают 1н раствором карбоната натрия, сушат над сульфатом магния и выпаривают. Получают 85 г сырого продукта.

Масс-спектр (FAB): М⁺+Li=513.

c) Метиловый эфир 3-кето-7,12-диацетилхолевой кислоты 85 г (168 ммоль) Метилового эфира 7,12-диацетилхолевой кислоты, 183,7 г пиридинийхлорхромата и 175 г молекулярного сита в 2,5 л дихлорметана перемешивают в течение 2 часов при комнатной температуре. Выливают в 7 л диэтилового эфира, твердые вещества отфильтровывают. Растворитель выпаривают и остаток растворяют в этилацетате. После хроматографии на Florisil-колонке получают 59,6 г продукта.

Масс-спектр (FAB): М⁺+Li=511.

d) Метиловый эфир 3β-ацетилен-7,12-диацетилхолевой кислоты

В 750 мл абсолютного тетрагидрофурана при температуре -55°С в атмосфере аргона в течение 25 минут вводят ацетилен. К этому раствору добавляют по каплям 145 мл 15%-ного раствора н-бутиллития в гексане и дополнительно перемешивают в течение 10 минут. Затем добавляют 45 г (89 ммоль) метилового эфира 3-кето-7,12-диацетилхолевой кислоты и перемешивают в течение 1,5 часов при температуре -40°С. С целью обработки добавляют 500 мл насыщенного водного раствора хлорида аммония и экстрагируют 3 раза этилацетатом, органическую фазу сушат над сульфатом магния и выпаривают. Остаток хроматографируют на силикагеле (н-гептан/этилацетат в соотношении 1:1). Получают 35,3 г продукта.

Масс-спектр (FAB): М⁺+Li=537.

e) 3β-Ацетиленхолевая кислота

35,2 г (66 ммоль) Продукта из стадии d) растворяют в 1 л метанола, смешивают с 300 мл 2н раствора гидроксида натрия и кипятят с обратным холодильником в течение 25 часов. Растворитель выпаривают, остаток растворяют в воде и подкисляют с помощью 2н соляной кислоты до значения рН, равного 2. Осадок отфильтровывают и промывают водой до нейтральной реакции. Высушиванием остатка получают 14,6 г продукта.

Масс-спектр (FAB): М⁺+Li=439.

Промежуточный продукт 2: 2-Метил-3-(ацет-1-ил)-4-(4-бромбензил)аминохинолин

Методика синтеза:

a) 2-(1-Метил-3-оксобут-1-ениламино) бензонитрил получают согласно стандартным методам из 2-аминобензонитрила (Eur. Pat. Appl., C 07 D 215/42; J. Med. Chem., 31, 1278 (1988)); твердое вещество желтого цвета; т.пл.: 100°С. Масс-спектр (Cl): М⁺+Н=201.

b) 1-(4-Амино-2-метилхинолин-3-ил)этанон можно получать, исходя из 2-(1-метил-3-оксобут-1-ениламино)бензонитрила путем циклизации с помощью CuCl и К₂СО₃ (J. Med. Chem., 31, 1278 (1988)) или посредством NaOMe (Eur. Pat. Appl., C 07 D 215/42) согласно известному способу; желтоватое твердое вещество.

Масс-спектр (Cl): М⁺+Н=201.

c) 1-(4-(4-Бромбензиламино-2-метилхинолин-3-ил)этанон

В двухфазной системе из 75 мл CH₂Cl₂ и 55 мл 50%-ного раствора NaOH смешивают 1,8 г 1-(4-амино-2-метилхинолин-3-ил)этанона с 0,15 экв. тетрабутиламмонийгидросульфата и интенсивно перемешивают в течение 30 минут при комнатной температуре. Затем добавляют 1,1 экв. 4-бромбензилбромида и интенсивно перемешивают в течение 4-5 часов при комнатной температуре. С целью обработки обе фазы разделяют, водную фазу экстрагируют еще 2 раза с помощью CH₂Cl₂ и объединенные органические фазы промывают еще 2 раза с помощью воды и сушат над сульфатом магния. Растворитель отгоняют и остаток очищают на силикагеле (300 г; СН₂Сl₂/метанол в соотношении 98:2), причем получают указанное целевое соединение в виде бесцветного стекловидного твердого вещества.

Масс-спектр (ES+): М⁺+Н=369.

Общая методика катализируемой Pd(0) реакции сочетания

Бромарильное соединение в количестве 1 экв. и компонент желчная кислота-ацетилен в количестве 1,5 экв. вносят в смесь диметилформамида и триэтиламина в соотношении 2:1 и раствор дегазируют. После продувки аргоном добавляют по 0,1 экв. Рd(РРh₃)₂Сl₂ и CuI и реакционный раствор нагревают при температуре 80°С. В зависимости от протекания реакции может быть целесообразным добавление дальнейшего количества катализатора или еще повышение температуры, причем можно достигать температуры вплоть до 100°С. С целью обработки растворитель удаляют и таким образом полученный сырой продукт очищают на силикагеле с помощью смеси СН₂Сl₂/метанол. 2-Метил-3-(ацет-1-ил)-4-{4-[1-(3α,7α,12α-тригидрокси-10β, 13β-диметил-17β-((пентановая кислота)-4-ил)гексадекагидроциклопента[a]фенантрен-3-ил)этин-2-ил]-бензил}аминохинолин.

Осуществление реакции по общей методике спустя 21 час выдерживания при температуре 100°С приводит к получению твердого вещества желто-оранжевого цвета; т.пл.: 178°С (разложение). Масс-спектр (ES+): М⁺+Н=772.

Пример 2

2-Метил-3-(ацет-1-ил)-4-{4-[1-(3α,7α,12α-тригидрокси-10β,13β-диметил-17β-((пентановая кислота)-4-ил)гексадекагидроциклопента[a]фенантрен-3-ил)эт-2-ил]бензил}аминохинолин

Полученный выше в примере 1 продукт растворяют в смеси этанола и метанола в соотношении 1:1, смешивают с 10%-ным Pd/C и встряхивают в атмосфере водорода вплоть до полного превращения. Отфильтровывание Рd-катализатора и отгонка растворителя приводят к получению гидрированного продукта в виде желтоватого кристаллического твердого вещества. Т.пл.: 172°C (разложение).

Масс-спектр (ES+): М⁺+Н=726.

Пример 3

N-{2-O-[7α,12α-Дигидрокси-10β,13β-диметил-17β-((метиловый эфир пентановой кислоты)-4-ил)гексадекагидроциклопента-[a]фенантрен-3β-ил]}этиламид 2-метил-4-аминобензилхинолин-3-карбоновой кислоты

Получение промежуточных продуктов:

Промежуточный продукт 1: Метиловый эфир 3β-O-(1-аминоэт-2-ил)холевой кислоты.

Указанное целевое соединение можно получать известным из литературы способом, исходя из холевой кислоты, в шесть стадий (Tetrahedron Lett., 33, 195 (1992); Tetrahedron Lett., 34, 817 (1993)).

Промежуточный продукт 2: 4-Бензиламино-2-метилхинолин-3-карбоновая кислота.

Методика синтеза:

a) Метиловый эфир 4-амино-2-метилхинолин-3-карбоновой кислоты получают согласно известной специалисту методике (Tetrahedron, 53, 12277 (1995)).

Масс-спектр (Cl): М⁺+Н=217.

b) Метиловый эфир 4-бензиламино-2-метилхинолин-3-карбоновой кислоты синтезируют таким же способом, как описано для получения 1-(4-(4-бромбензиламино-2-метилхинолин-3-ил)этанона (пример 1, промежуточный продукт 2с), исходя из метилового эфира 4-амино-2-метилхинолин-3-карбоновой кислоты и бензилбромида.

Масс-спектр (ES+): М⁺+Н=307.

c) 4-Бензиламино-2-метилхинолин-3-карбоновую кислоту получают путем омыления сложного метилового эфира с помощью 5 экв. КОН в этанольном растворе. После полного превращения растворитель удаляют и сырой продукт обрабатывают с помощью 2н раствора NaOH. Водный раствор экстрагируют с помощью CH₂Cl₂, фазы разделяют и водную фазу нейтрализуют с помощью 2н соляной кислоты, причем в осадок выпадает целевое соединение. Отфильтровыванием и высушиванием получают бесцветное твердое вещество.

Т.пл.: 190°С. Масс-спектр (CI): M⁺+Н=293; M⁺-CO₂=249.

N-{2-O-[7α,12α-Дигидрокси-10β,13β-диметил-17β-((метиловый эфир пентановой кислоты)-4-ил)гексадекагидроциклопента-[a]фенантрен-3β-ил]}этиламид 2-метил-4-аминобензилхинолин-3-карбоновой кислоты в виде трифторацетата

Промежуточный продукт 1 в количестве 1,0 экв. и промежуточный продукт 2 в количестве 1,0 экв. вносят в диметилформамид, добавляют 1,0 экв. HOBt и при температуре 0°С смешивают с раствором 1,1 экв. CMC в диметилформамиде. Если необходимо, добавляют дополнительное количество CMC и/или повышают температуру, причем можно достигать температуры 60°С. С целью обработки освобождаются от растворителя, остаток обрабатывают этилацетатом и промывают 2 раза насыщенным раствором NаНСО₃. NaHCO₃-фазы экстрагируют еще один раз этилацетатом и объединенные органические экстракты промывают еще 2 раза водой, сушат над сульфатом магния и концентрируют в роторном выпарном аппарате. Таким образом полученный сырой продукт очищают путем препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), причем получают целевое соединение в виде слегка желтоватого твердого вещества.

Т.пл.: 102°С. Масс-спектр (ES+): М⁺+Н=741.

Пример 4

N-{2-O-[7α,12α-Дигидрокси-10β,13β-диметил-17β-((пентановая кислота)-4-ил)гексадекагидроциклопента[a]фенантрен-3β-

ил]}этиламид 2-метил-4-аминобензилхинолин-3-карбоновой кислоты

Полученный в примере 3 продукт смешивают с 5,0 экв. КОН в смеси метанола и воды и перемешивают при температуре в диапазоне от комнатной температуры до температуры 50°С. Если необходимо, добавляют дополнительное количество КОН вплоть до достижения полного превращения. Затем освобождаются от растворителя, остаток обрабатывают водой и нейтрализуют с помощью 1н соляной кислоты. Образовавшийся осадок отфильтровывают и высушивают, причем получают продукт в виде бесцветного твердого вещества. Т.пл.: 143°С.

Масс-спектр (ES+): М⁺+Н=727.

Пример 5

N-{2-O-[7α,12α-Дигидрокси-10β,13β-диметил-17β-((N-(2-сульфокислота)этиламид пентановой кислоты)-4-ил)гексадекагидроциклопента[a]фенантрен-3β-ил]}этиламид 2-метил-4-аминобензилхинолин-3-карбоновой кислоты в виде трифторацетата

85 мг Полученного в примере 3 продукта растворяют в 5 мл абсолютного диметилформамида. При температуре 0°С добавляют раствор 0,016 мл триэтиламина в 1 мл абсолютного диметилформамида и добавляют по каплям раствор 1,0 экв. TOTU в 1 мл абсолютного диметилформамида. После перемешивания в течение 1 часа при температуре в диапазоне от 0°С до комнатной температуры таким образом полученный раствор добавляют к смеси из 1,0 экв. таурина, 1 мл триэтиламина, 2 мл воды, а также 2 мл диметилформамида и перемешивают дальше. С целью обработки реакционную смесь концентрируют и очищают путем препаративной ВЭЖХ, причем получают целевое соединение в виде желтоватого твердого вещества.

Т.пл.: 180°С. Масс-спектр (ES+):М⁺+Н=834.

Пример 6

Метиловый эфир 2-метил-4-{4-[1-(3α,7α,12α-тригидрокси-10β,13β-диметил-17β-((пентановая кислота)-4-ил)гексадекагидроциклопента[a]фенантрен-3-ил)этин-2-ил]бензил}аминохинолин-3-карбоновой кислоты

Получение промежуточных продуктов:

Промежуточный продукт 1: 3β-Ацетиленхолевая кислота

Получение см. пример 1.

Промежуточный продукт 2: Метиловый эфир 4-(4-бромбензиламино)-2-метилхинолин-3-карбоновой кислоты

Методика синтеза:

a) Метиловый эфир 4-амино-2-метилхинолин-3-карбоновой кислоты можно получать известным специалисту образом (Tetrahedron, 51, 12277 (1995)).

b) Метиловый эфир 4-(4-бромбензиламино)-2-метилхинолин-3-карбоновой кислоты синтезируют согласно такому же способу, как уже описано для получения 1-(4-(4-бромбензиламино-2-метилхинолин-3-ил)этанона (пример 1, промежуточный продукт 2с), исходя из метилового эфира 4-амино-2-метилхинолин-3-карбоновой кислоты и 4-бромбензилбромида. Т.пл.: 89°С.