Способ получения производных таксана

Способ получения производных таксана

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Настоящее изобретение относится к способу получения соединения 13-(N-Boc-β-изобутилизосеринил)-14β-гидроксибаккатин III 1,14-карбоната формулы (I):

Соединение (I), описанное в РСТ WO 01/02407, является особенно активным по отношению к опухолям молочной железы, легкого, яичников, ободочной кишки, простаты, почки и поджелудочной железы, а также по отношению к клеткам, устойчивым к известным противоопухолевым препаратам, таким как адриамицин, винбластин и некоторые производные Pt. Производные 14β-гидрокси-1,14-карбонатдеацетилбаккатина III обычно готовят, используя в качестве исходного вещества 14β-гидроксидеацетилбаккатин III, природное соединение, получаемое в небольших количествах экстракцией листьев Taxus wallichiana, как описано в ЕР 559019. Существует необходимость в альтернативных легких и эффективных способах получения производных 14β-гидрокси-1,14-карбонатдеацетилбаккатина III, в частности соединений (I).

Согласно способу настоящего изобретения в качестве исходного материала используют 10-деацетилбаккатин III, который в противоположность 14β-гидроксибаккатину III, можно легко выделить в значительных количествах из листьев Taxus baccata.

Таким образом изобретение относится к способу получения соединений формулы (I), который включает следующие стадии:

а) защиты гидроксилов 10-диацетилбаккатина III в 7- и 10-положениях:

где R и R₁, которые могут быть одинаковыми или различными, выбраны из C₁-С₁₀ алкила или арила, C₁-С₁₀ алкил- или арилкарбонила, трихлорацетила, C₁-C₄ триалкилсилила;

предпочтительно, когда R и R₁ являются одинаковыми, они представляют собой трихлорацетил, тогда как если они различные, предпочтительно, R представляет собой трихлорацетил, а R₁ является ацетилом, или R представляет собой триэтил- или триметилсилил или ВОС, а R₁ является ацетилом;

b) двухстадийного окисления, чтобы получить производное, окисленное до карбонила в положении 13 и гидроксилированное в положении 14:

c) карбоксилирования вицинальных гидроксилов в 1- и 14-положениях, чтобы получить 1,14-карбонатное производное:

d) восстановления карбонила в положении 13:

e) снятия защитных групп в 7- и 10-положениях:

f) селективного ацетилирования гидроксила в положении 10:

g) превращения 14β-гидроксибаккатин-1,14-карбоната III в производное, триэтилсилилированное в положении 7:

h) реакции соединения, полученного на стадии (g), с (4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-диметоксифенил)-4-изобутил-1-оксазолидин-5-карбоновой кислотой:

i) удаления триэтилсилильной и диметоксибензилиденовой защитных групп из соединения, полученного на стадии (h):

Процедуры селективной защиты гидроксилов в 7- и 10-положениях описываются в работе Holton et al., Tetrahedron Letters 39 (1998), 2883-2886. Селективная защита гидроксилов исходного соединения деацетилбаккатина III является возможной благодаря их различной реакционной способности. В частности, реакционная способность по отношению к ацилирующим, алкилирующим или силилирующим агентам, как было обнаружено, изменяется в порядке С(7)-ОН>C(10)-OH>C(13)-OH>C(1)-OH, поэтому группы в 7- и 10-положении можно селективно защитить, в то же время сохраняя гидроксилы в 1- и 13-положениях свободными. Более того, изменяя условия реакции, можно повернуть в противоположном направлении порядок реакционной способности гидроксилов в 7- и 10-положениях, таким образом давая возможность их дифференциального замещения. Примеры реагентов и реакционных условий, которые удобны для защиты гидроксилов в 10- и 7-положении, сообщаются в цитируемой выше публикации. Аналогичные селективности получают, используя в качестве исходного материала 14β-гидроксибаккатин-1,14-карбонат.

В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления изобретения на практике деацетилбаккатин III реагирует с трихлорацетилхлоридом в метиленхлориде в присутствии триэтиламина и с использованием диметиламинопиридина (ДМАП) в каталитических количествах. Использование защитных трихлорацетатных групп, как оказалось, является очень благоприятным на последующих стадиях окисления, карбоксилирования и восстановления (соответственно, (b), (c) и (d)). В частности, 7,10-бис-трихлорацетатное производное, которое с количественными выходами получают из исходного вещества, окисляют и карбоксилируют, затем легко восстанавливают в положении 13 с одновременным снятием защитных трихлорацетатных групп, получая 14-гидрокси-1,14-карбонат-деацетилбаккатин III. Использование ДМАП в каталитических количествах предоставляет очевидные преимущества с промышленной и экологической точки зрения, поскольку ацилирование данного вещества до настоящего времени проводили в пиридине, что приводит к проблеме удаления остаточного растворителя.

Стадию окисления (b) гидроксила в положении 13 проводят диоксидом марганца или диоксидом висмута или озоном в растворителе, выбранном из ацетонитрила, ацетона или смесей этилацетат/метиленхлорид 9:1, при энергичном перемешивании, предпочтительно озоном или диоксидом марганца в ацетонитриле или ацетоне. В реакции с озоном происходит быстрое образование соединения, окисленного в положении 13, тогда как в случае MnO₂ реакция протекает быстро, давая соединение, окисленное в положении 13, которое можно выделить из реакционной среды, поскольку более длительная реакция дает производное, окисленное в положении 13 и гидроксилированное в положении 14.

Последующую стадию карбоксилирования (с) гидроксилов в 1- и 14-положениях обычно осуществляют фосгеном или в смеси метиленхлорид/толуол в присутствии пиридина. Затем полученное в результате 1,14-карбонатное производное можно легко восстановить в положении 13, получая соответствующее 13-гидрокси производное (стадия (d)). Указанное восстановление происходит региоселективно на карбониле в 13 положении, в то время как карбонил в положении 9 остается неизменным. Данную реакцию обычно осуществляют боргидридом натрия в метаноле или боргидридом тетрабутиламмония, и она идет с высокими выходами. Последующая стадия (е) заключается в снятии защиты гидроксилов в положениях 7 и 10, давая 14β-гидрокси-1,14-карбонатдеацетилбаккатин III. Условия и реагенты, которые можно использовать при селективном снятии защиты гидроксилов в положениях 7 и 10, описывается в работах Zheng et al., Tetrahedron Lett., 1995, 36, 2001 и Datta et al., J. Org. Chem., 1995, 60, 761.

Селективное ацетилирование в положении 10 (стадия (f)) проводят уксусным ангидридом в присутствии солей церия, скандия или иттербия, предпочтительно CeCl₃·7H₂O. Затем гидроксил в положении 7 защищают силилированием (стадия (g)). Последующая стадия (h) включает реакцию конденсации 14β-гидрокси-7-Tes-1,14-карбонат-баккатина III с (4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-диметоксифенил)-4-изобутил-1-оксазолидин-5-карбоновой кислотой. Последнюю готовят способом, описанным в РСТ WO 01/02407. Реакцию проводят в сухих неполярных органических растворителях в присутствии основания и конденсирующего агента, такого как дициклогексилкарбодиимид (ДЦК).

Наконец, на стадии (i) триэтилсилильную группу можно удалить фторидом пиридиния в растворе ацетонитрил/пиридин под атмосферой азота, тогда как диметоксибензилиденовую группу можно удалить в метиленхлориде добавлением HCl в метаноле и затем NaHCO₃.

Следующие далее примеры иллюстрируют изобретение более детально.

Пример I Получение 7,10-бис-трихлорацетил-10-деацетилбаккатина III

1^я Альтернатива:

В раствор 10 г 10-деацетилбаккатина III (18,4 ммоль) в 125 мл сухого метиленхлорида и 42 мл пиридина по каплям добавляют 4,77 мл трихлоруксусного ангидрида (42,32 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 3 часов или иным способом, пока реакция не закончится, что контролируют тонкослойной хроматографией (ТСХ) на силикагеле, используя смесь н-гексан/этилацетат 1:1 в качестве элюента. После завершения реакции добавляют 5 мл метанола, чтобы ликвидировать избыток трихлоруксусного ангидрида, и затем добавляют воду. Органическую фазу тщательно промывают водой, подкисленной HCl, чтобы удалить пиридин, в то время как оставшуюся органическую фазу сушат над MgSO₄ и концентрируют до сухого состояния под вакуумом, получая бледно-желтое твердое вещество (17 г), которое после кристаллизации из хлороформа имеет: [α]_D -34^° (CH₂Cl₂ C5,8) ИК (KBr) 3517, 1771, 1728, 1240, 981, 819, 787, 675 см^-1;

¹Н-ЯМР (200 МГц): δ 8,11 (Bz С), 7,46 (Bz, ВВ'), 6,50 (с, Н-10), 5,72 (м, Н-7 Н-29), 5,02 (д, J=8 Гц, Н-5), 4,95 (8 м, Н-13), 4,37 (д, J=8 Гц, Н-20a), 4,18 (д, J=8 Гц, Н-20b), 4,02 (д, J=6 Гц, Н-3), 2,32 (с, 4-Ас), 2,22 (с, Н-18), 1,91 (с, Н-19), 1,25 и 1,11 (с, Н-16, Н-17), 1,94 (м, Н14α), 1,89 (м, Н14β).

2^я Альтернатива

10-ДАБ III (10 г, 18,38 ммоль) суспендируют в CH₂Cl₂ (120 мл), добавляют ДМАП (220 мг, 1,4 ммоль, 0,1 экв.) и смесь охлаждают до 0°С на ледяной бане. Затем в потоке азота в течение 5 мин добавляют Et₃N (10,26 мл, 73,6 ммоль, 4 экв.) и сразу после этого Cl₃COCl (4,12 мл, 36,8 ммоль, 2 экв.), поддерживая температуру ниже 10°С. После завершения добавления смесь продолжают перемешивать на ледяной бане в течение 15 мин, затем баню удаляют и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. После 1 ч реакцию контролируют ТСХ (AcOEt/н-гексан 2:3, R_f 10-ДАБ III = 0,05, R_f 7,10-бис-трихлорацетил-10-ДАБ III = 0,26) и добавляют Cl₃CCOCl (1 мл, 0,5 экв.). Продолжают перемешивание при комнатной температуре в течение 10 мин, затем смесь выливают в химический стакан, содержащий 160 г измельченного льда, перемешивают при комнатной температуре до равновесного состояния (примерно 1 час). После этого отделяют водную фазу и экстрагируют CH₂Cl₂ (3 х 40 мл). Объединенные органические фазы промывают 1 н. HCl (20 мл), затем насыщенным раствором NaHCO₃ (20 мл), сушат над Na₂SO₄ и растворитель выпаривают. Масса неочищенного вещества: 16,5 г. После кристаллизации из хлороформа, ИК, ¹Н-ЯМР и [α]_D спектры согласуются со спектрами соединения, полученного с использованием пиридина и трихлоруксусного ангидрида.

Пример II

Окисление 10-деацетилбаккатин III 7,10-бис-трихлорацетата в положении 13 и гидроксилирование в положении 14.

К раствору 10-деацетилбаккатин III 7,10-бис-трихлорацетата (3 г) в ацетонитриле (40 мл) добавляют 30 г активированного MnO₂, суспензию перемешивают магнитной мешалкой при комнатной температуре и реакцию контролируют ТСХ (петролейный эфир-этилацетат 5:5; R_f исходного материала примерно 0,31). Примерно через час образование 13-дегидропроизводного завершается (анализ ТСХ, R_f 13-дегидропроизводного примерно 0,50). Затем перемешивание продолжают примерно в течение 72 часов, в течение которых 13-дегидропроизводное медленно окисляется до своего 14β-гидроксипроизводного (R_f примерно 0,36). Реакционную смесь фильтруют через Celite и осадок несколько раз промывают этилацетатом. Растворитель выпаривают и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (100 мл, элюент:петролейный эфир-этилацетат 7:3), получая 170 мг 13-дегидропроизводного и 1,05 г 14β-гидрокси-13-дегидропроизводного.

13-Дегидро-14β-гидрокси-10-деацетилбаккатин III 7,10-бис-трихлорацетат: белый порошок, Т_пл=97°С; ИК (KBr диск): 3440, 1780, 1767, 1736, 1686, 1267, 1232, 1103, 1010, 854 см^-1;

¹Н-ЯМР (200 МГц, CDCl₃): δ 8,07 (Bz AA'), 7,60 (Bz, C), 7,49 (Bz, BB'), 6,52 (с, Н-10), 5,92 (д, J=6,7 Гц, Н-2), 5,70 (шир. т, J=8,0 Гц, Н-7), 4,95 (шир. д, J=8,2 Гц, Н-5), 4,37 (д, J=8,2 Гц, Н-20а), 4,31 (д, J=8,2 Гц, Н-20b), 4,17 (с, Н14), 4,02 (д, J=6,7 Гц, Н-3), 2,71 (м, Н-6), 2,29 (с, OAc), 2,17 (с, OAc), 1,96 (с, Н-18), 1,27, 1,01 (с, Н-16, Н-17 и Н-19).

Пример III

Окисление 7-триэтилсилилбаккатина III в положении 13 и гидроксилирование в положении 14.

К раствору 7-триэтилсилилбаккатина III (1,0 г) в ацетонитриле (10 мл) добавляют 10 г активированного MnO₂, суспензию перемешивают магнитной мешалкой при комнатной температуре и реакцию контролируют ТСХ (петролейный эфир-этилацетат 6:4, R_f исходного материала около 0,25). Примерно через 2 часа образование 13-дегидропроизводного завершается (анализ ТСХ, R_f 13-дегидропроизводного около 0,45). Перемешивание продолжают в течение примерно 188 часов, в течение которых добавляют дополнительное количество MnO₂ (10 г). 13-дегидропроизводное медленно окисляют до его 14β-гидроксипроизводного (R_f примерно 0,38). Реакционную смесь фильтруют через Celite и осадок промывают этилацетатом. Растворитель выпаривают и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (40 мл, элюент:петролейный эфир-этилацетат 7:3, получая 126 мг 13-дегидропроизводного, 479 мг (46%) 14β-гидрокси-13-дегидропроизводного и 189 мг их смеси.

13-Дегидро-7-триэтилсилилбаккатин III: белый порошок, Т_пл=168°С [α]_D ²⁵ -35 (CH₂Cl₂, C 0,67) ИК (KBr): 3488, 1726, 1711, 1676, 1373, 1269, 1244, 1230, 1105 см^-1; ¹Н-ЯМР (200 МГц, CDCl₃): δ 8,07 (Bz AA'), 7,60 (Bz, C), 7,49 (Bz, BB'), 6,59 (с, Н-10), 5,69 (д, J=6,9 Гц, Н-2), 4,92 (д, J=8,2 Гц, Н-5), 4,48 (дд, J=10,6 Гц, Н-7), 4,33 (д, J=8,0 Гц, Н-20а), 4,12 (д, J=8,0 Гц, Н-20b), 3,91 (д, J=6,9 Гц, Н-3), 2,96 (д, J=20 Гц, Н-14а), 2,65 (д, J=20 Гц, Н-20b), 2,50 (м, Н-6α), 2,23 (с, OAc), 2,19 (с, ОАс + Н-18), 1,67, 1,28, 1,19 (с, Н-16, Н-17 и Н-19), 0,19 (м, TES).

13-Дегидро-14β-гидрокси-10-деацетилбаккатин III 7,10-бис-трихлорацетат: белый порошок, Т_пл.=153 ^°С [α]_D ²⁵ +20(CH₂Cl₂, C 0,75) ИК (KBr): 3431, 1723, 1692, 1371, 1269, 1242, 1223, 1096 см^-1; ¹Н-ЯМР (200 МГц, CDCl₃): δ 8,06 (Bz AA'), 7,60 (Bz, C), 7,48 (Bz, BB'), 6,51 (с, Н-10), 5,88 (д, J=6,9 Гц, Н-2), 4,90 (д, J=8,2 Гц, Н-5), 4,47 (дд, J=10,6 7 Гц, Н-7), 4,30 (д, J=8,0 Гц, Н-20а), 4,28 (д, J=8,2 Гц, Н-20b), 4,13 (шир. д, J=2 Гц, Н-14), 3,84 (д, J=6,9 Гц, Н-3), 3,69 (шир. д, J=2 Гц, 14-ОН), 3,62 (с, 1-ОН) 2,52 (м, Н-6α), 2,24 (с, ОАс), 2,21 (с, ОАс), 2,11 (с, Н-18), 1,92 (м, Н-6β), 1,74, 1,56, 1,28 (c, H-16, H-17 и Н-19), 0,94 (м, TES), 0,59 (м, TES). HRNS: 714,3092 (рассчитано для С₃₇H₅₀O₁₂Si 714,3092).

Пример IV

Получение 1,14-карбонат-13-дегидро-7-TES-14β-гидрокси-баккатина III.

К раствору фосгена (1,8 мл 20% раствора в толуоле, 3,4 ммоль, 20 мол. экв.) и пиридина (0,56 мл, 6,8 ммоль, 20 мол. экв.) в CH₂Cl₂ (2 мл) по каплям в течение 5 мин добавляют раствор 13-дегидро-14β-гидрокси-7-триэтилсилилбаккатина III (124 мг, 1,17 ммоль) в CH₂Cl₂ (1 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа, затем гасят избыток фосгена, добавляя насыщенный раствор NaHCO₃, и экстрагируют CH₂Cl₂. Органическую фазу промывают насыщенным раствором NaHCO₃, насыщенным солевым раствором и сушат (Na₂SO₄). Растворитель выпаривают, получая красноватый остаток, который очищают на короткой силикагелевой колонке (примерно 5 мл, элюент гексан/этилацетат 8:2), получая 118 мл (92%) карбоната. Если реакцию проводят, используя в качестве основания триэтиламин и без обратного добавления, то получают смесь 1:15 1,17-карбоната и 2-дебензоил-1,2-карбонат-14-бензоата.

13-Дегидро-14β-гидрокси-7-триэтилсилилбаккатин III 1,14-карбонат. Белый порошок, Т_пл = 153°С [α]_D ²⁵ +23 (CH₂Cl₂, C 0,75) ИК (KBr) ОН полоса отсутствует 1834, 1734, 1709, 1373, 1242, 1225, 1088, 1057 см^-1; ¹Н-ЯМР (200 МГц CDCl₃): δ 7,99 (Bz AA'), 7,60 (Bz, C), 7,48 (Bz, BB'), 6,51 (с, Н-10), 6,12 (д, J=6,9 Гц, Н-2), 4,90 (д, J=8,2 Гц, Н-5), 4,78 (с, Н-14), 4,44 (дд, J=10,7 Гц, Н-7), 4,34 (д, J=8 Гц, Н-20а), 4,19 (д, J=8,2 Гц, Н-20b), 3,80 (д, J=6,9 Гц, Н-3), 2,50 (м, Н-6α), 2,23 (с, ОАс), 2,22 (с, ОАс), 2,19 (с, Н-18), 1,92 (м, Н-6β), 1,72, 1,39, 1,26 (c, H-16, H-17 и Н-19), 0,90 (м, TES), 0,56 (м, TES). HRNS: 740,2851 (рассчитано для С₃₈H₄₈O₁₃Si 740,2864).

13-Дегидро-14β-гидроксибаккатин III 1,14-карбонат. Белый порошок, 240°С [α]_D ²⁵ - 2,5 (CH₂Cl₂, C 0,4) ИК (KBr) 3539, 1831, 1736, 1240, 1088, 1068, 1057, 1024 см^-1; ¹Н-ЯМР (200 МГц CDCl₃): δ 7,98 (Bz AA'), 7,61 (Bz, C), 7,50 (Bz, BB'), 6,39 (с, Н-10), 6,14 (д, J=6,9 Гц, Н-2), 4,98 (д, J=8,2 Гц, Н-5), 4,80 (с, Н-14), 4,43 (дд, J=10,7 Гц, Н-7), 4,35 (д, J=8 Гц, Н-20а), 4,24 (д, J=8,2 Гц, Н-20b), 3,80 (д, J=6,9 Гц, Н-3), 2,50 (м, Н-6α), 2,30 (с, ОАс), 2,20 (с, ОАс), 2,15 (с, Н-18), 1,90 (м, Н-6β), 1,74, 1,34, 1,25 (c, H-16, H-17 и Н-19). HRNS: 626,2005 (рассчитано для С₃₃H₃₄O₁ 626, 1999).

Пример V

Получение 1,14-карбонат-7-О-триэтилсилилбаккатина III.

К раствору 13-дегидро-14β-гидрокси-7-триэтилсилилбаккатин III 1,14-карбоната (50 мг) в метаноле (5 мл) небольшими частями добавляют избыточное количество NaBH₄ (примерно 20 мг). Через 30 мин в реакционную смесь добавляют насыщенный раствор NH₄Cl, экстрагируют этилацетатом, промывают соляным раствором и сушат над Na₂SO₄. Растворитель выпаривают и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (примерно 5 мл, элюирование смесью гексан/этилацетат 8:2), получая 35 мг 13α-гидроксипроизводного и 9 мг 13β-гидроксипроизводного.

14β-гидрокси-7-триэтилсилилбаккатин III 1,14-карбонат [α]_D ²⁵ - 35 (CH₂Cl₂, C 0,60) ИК (KBr) 3054, 1819, 1736, 1603, 1371, 1261, 1238, 1090, 1069 см^-1; ¹Н-ЯМР (200 МГц CDCl₃): δ 8,06 (Bz AA'), 7,65 (Bz, C), 7,50 (Bz, BB'), 6,47 (с, Н-10), 6,12 (д, J=6,9 Гц, Н-2), 5,05 (шир. д, J=5,5 Гц, Н-13), 4,98 (шир. д, J=9 Гц, Н-5), 4,83 (д, J= 5 Гц, Н-14), 4,50 (дд, J=10,7 Гц, Н-7), 4,34 (д, J=8,0 Гц, Н-20а), 4,23 (д, J=8 Гц, Н-20b), 3,75 (д, J=6,9 Гц, Н-3), 2,56 (м, Н-6α), 2,34 (с, ОАс), 2,22 (с, ОАс), 1,78 (м, Н-6β), 1,35 (с, Н-18), 1,75, 1,18, 0,95 (c, H-16, H-17 и Н-19), 0,90 (м, TES), 0,62 (м, TES).

14β-гидрокси-7-триэтилсилил-13-эпибаккатин III 1,14-карбонат.

Аморфный, [α]_D ²⁵ - 13 (CH₂Cl₂, C 0,60) ИК (KBr) 3630, 1825, 1734, 1603, 1375, 1262, 1091, 1071, 1049 см^-1; ¹Н-ЯМР (200 МГц CDCl₃): δ 8,01 (Bz AA'), 7,63 (Bz, C), 7,48 (Bz, BB'), 6,44 (с, Н-10), 6,12 (д, J=7,2 Гц, Н-2), 4,90 (шир. д, J=9 Гц, Н-5), 4,81 (д, J= 8 Гц, Н-14), 4,48 (шир. д, J=8, Н-13), 4,50 (дд, J=10,7 Гц, Н-7), 4,41 (д, J=8 Гц, Н-20а), 4,31 (д, J=8 Гц, Н-20b), 3,68 (д, J=7,2 Гц, Н-3), 2,60 (м, Н-6α), 2,32 (с, ОАс), 2,26 (с, Н-18), 2,21 (с, ОАс), 1,80 (м, Н-6β), 1,72, 1,43, 1,27 (c, H-16, H-17 и Н-19), 0,93 (м, TES), 0,61 (м, TES).

Пример VI

Получение 13-дегидро-14β-гидрокси-7,10-бистрихлорацетил-баккатин III 1,14-карбоната.

Раствор 13-дегидро-14β-гидрокси-7,10-бистрихлорацетил-баккатина III (200 мг) в CH₂Cl₂ (2 мл) добавляют в течение 5 мин к раствору фосгена (20% в толуоле, 3,6 мл, 20 экв.) и пиридина (1,12 мл, 20 экв.) в CH₂Cl₂ (2 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа, затем избыток фосгена гасят насыщенным раствором NaHCO₃ (3 мл). Смесь экстрагируют CH₂Cl₂, органическую часть промывают насыщенным раствором NaHCO₃, затем насыщенным раствором NaCl и сушат над Na₂SO₄. Растворитель выпаривают и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюент:гексан/AcOEt 9:1), получая 175 мг (89%) карбоната.

13-дегидро-14β-гидрокси-7,10-бис-трихлорацетилбаккатин III 1,14-карбонат. Белое аморфное твердое вещество. ИК (KBr) 1834, 1771, 1735, 1709, 1232, 1103, 1010, 854 см^-1.

¹Н-ЯМР (200 МГц, CDCl₃): δ 8,03 (Bz AA'), 7,60 (Bz, C), 7,50 (Bz, BB'), 6,52 (с, Н-10), 5,92 (д, J=6,7 Гц, Н-2), 5,70 (шир. т, J=8,0 Гц, Н-7), 4,95 (шир. д, J=8,2 Гц, Н-20b), 4,77 (c, Н-14), 4,02 (д, J=6,7 Гц, Н-3), 2,71 (м, Н-6), 2,29 (с, OAc), 1,96 (с, Н-18), 1,27- 1,01 (м, Н-16, Н-17 и Н-19).

Пример VII

Получение 14β-гидрокси-10-деацетилбаккатин III 1,14-карбоната.

Раствор 13-дегидро-14β-гидрокси-7,10-бис-трихлорацетил-баккатин III 1,14-карбоната (500 мг) в MeOH (8 мл) охлаждают до 0°С на ледяной бане и к нему в течение 5 мин добавляют твердый NaBH₄ (44 мг). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа, затем охлаждают до 0°С, в течение 5 мин добавляют ацетон (2 мл) и концентрируют при умеренном вакууме, затем добавляют AcOEt (10 мл) и фильтруют через Celite. Прозрачный раствор промывают насыщенным раствором NaCl и сушат над Na₂SO₄. Растворитель выпаривают, остаток (смесь С13 эпимеров 4,5:1) очищают хроматографией на силикагелевой колонке (элюент:гексан/AcOEt), получая 251 мг указанного в заголовке соединения и 55 мг 13-эпимера (88% от общего) карбоната со снятыми защитными группами.

14β-гидрокси-10-деацетилбаккатин III 1,14-карбонат. Белое аморфное твердое вещество. ИК (KBr): 3520 (ОН), 1834, 1709, 1232, 1103, 1010, 854 см^-1.

¹Н-ЯМР (200 МГц, CDCl₃): δ 8,03 (Bz AA'), 7,60 (Bz, C), 7,50 (Bz, BB'), 6,27 (с, Н-10), 5,92 (д, J=6,7 Гц, Н-2), 4,95 (шир. д, J=8,2 Гц, Н-20b), 4,85 (м, Н-13), 4,77 (c, Н-14), 4,42 (шир. т, J=8,0 Гц, Н-7), 4,02 (д, J=6,7 Гц, Н-3), 2,71 (м, Н-6), 2,29 (с, OAc), 1,96 (с, Н-18), 1,27- 1,01 (м, Н-16, Н-17 и Н-19).

Пример VIII

Получение 13-(N-Boc-β-изобутилизосеринил)-14β-гидроксибаккатин III 1,14-карбоната

К раствору 14β-гидрокси-10-деацетилбаккатин III 1,14-карбоната (126 мг) в 3 мл сухого тетрагидрофурана добавляют 7,5 мг CeCl₃·7H₂O и 0,078 мл уксусного ангидрида. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов, в течение которых реакционная смесь становится гомогенной. Добавляют 1,5 г льда, продолжая перемешивание в течение 1 часа. Органический растворитель выпаривают под вакуумом и остаток разбавляют 5 мл Н₂О. Образовавшийся осадок отфильтровывают и сушат отсосом под разрежением в течение 18 часов. Полученный в результате продукт (белый порошок, 135 мг) имеет следующие характеристики:¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ_м.д = 1,25, 1,11 (с, Н-16 и Н-17), 1,66 (с, Н-19), 2,04 (С,Н-18), 2,22 (с, ОАс), 2,29 (с, ОАс), 3,89 (д, J=0,9 Гц, Н-3), 4,06 (д, J=7 Гц, С20b), 4,20 (д, J=7 Гц, Н-20a), 4,41 (м, Н-7), 4,77 (д, J=4 Гц, Н-14), 4,85 (шир. д, J=4 Гц, Н-13), 4,97 (шир. д, J=8 Гц, Н-5), 5,8 (д, J=7 Гц, Н-2), 6,31 (с, Н-10), 7,44 (т, J (Гц, Bz), 7,55 (д, J=8 Гц, Bz), 8,07 (д, J=8 Гц, Bz).

14β-гидроксибаккатин III 1,14-карбонат (130 мг) растворяют в диметилформамиде (4 мл) и добавляют N-метилимидазол (0,07 мл). Через 1 час к данному раствору, интенсивно перемешиваемому при комнатной температуре, добавляют триэтилхлорсилан (0,042 мл). Затем смесь выливают в 10 мл Н₂О при интенсивном перемешивании. Суспензию оставляют при 4°С на 18 часов, образовавшийся белый осадок отфильтровывают и промывают Н₂О (5 мл), затем гексаном (2х3 мл). Полученное в результате белое твердое вещество (150 мг) имеет такие же спектроскопические характеристики, как соединение, полученное в примере V.

В 1 л круглодонную колбу помещают 20 г 14β-гидрокси-7-Tes-1,14-карбонатбаккатина III вместе с 300 мл тщательно осушенного толуола; затем добавляют 10 г (4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-диметоксифенил)-4-изобутил-1-оксазолидин-5-карбоновой кислоты, 2 г N,N-диметиламинопиридина (ДМАП) и 9,5 г дициклогексилкарбодиимида (ДЦК), растворенного в СН₂Cl₂. Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 3 часов, затем охлаждают и удаляют осажденный продукт ацетилмочевины. Маточные растворы промывают насыщенным раствором NaHCO₃ для удаления непрореагировавшей кислоты, затем разбавленной хлористоводородной кислотой для удаления ДМАП, затем снова NaHCO₃ до нейтральности. Органическую фазу концентрируют до сухого состояния, получая 41,5 г продукта, который можно использовать в последующей стадии без очистки.

40 г данного соединения подвергают реакции снятия защиты двумя стадиями, сначала удаляя Tes и затем 2,4-диметоксибензальдегид, 40 г данного соединения растворяют в 100 мл смеси ацетонитрил/пиридин (80:100) под атмосферой азота и смесь охлаждают до 0°С, затем добавляют 13 мл фторида пиридиния и продолжают перемешивание в течение 24 часов. Раствор выливают в 2 л воды, продукт отфильтровывают и сушат под вакуумом.

Остаток растворяют в 60 мл метиленхлорида, данный раствор энергично перемешивают при 0°С и к нему добавляют 40 мл 0,6 н. раствора HCl в метаноле. Реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов, затем разбавляют 150 мл метиленхлорида и взбалтывают с раствором NaHCO₃, регулируя рН до 6-7. Органическую фазу концентрируют до сухого состояния, остаток кристаллизуют из смеси ацетон/гексан и сушат, получая 16 г 13-(N-Boc-β-изобутилизосеринил)-14β-гидроксибаккатин-1,14-карбоната, имеющего следующие физико-химические и спектроскопические характеристики:

Формула:C₄₄H₅₇NO₁₇

Внешний вид: белый порошок

Температура плавления: 245°С

Таблица 1Химические сдвиги (м.д) 1Н-ЯМР в растворе CDCl3 (200 МГц)
Н	м.д мультиплетность (Гц)	Н	м.д мультиплетность (Гц)
2	6,09-д (7,8)	2'	4,30-дд (6,4; 3,2)
3	3,68-д (7,4)	3'	4,08-м
5	4,91-дд (9,7;2,5)	4'a	1,21-м
6α	2,52-ддд (14,8; 9,8; 6,9)	4'b	1,43-м
6β	1,86-м	5'	1,65-м
7	4,37-м	6'	0,96-д (6,3)
10	6,25-с	7'	0,95-д (6,3)
13	6,44-д (широкий, 6,9)	4-OCOCH3	2,40-с
14	4,84-д (6,9)	10-OCOCH3	2,22-с
16	1,25-с	Boc	1,35-с
Продолжение таблицы 1
17	1,32-с	о-бензоил	8,01-м
18	1,87-д (1,6)	м-бензоил	7,46-м
19	1,69-с	п-бензоил	7,58-м
20α	4,27-д (8,4)	3'-NH	4,72-д (9,0)
20β	4,20-д (8,4)

Таблица 2:Химические сдвиги (м.д 13С ЯМР в растворе CDCl3 (50.308 МГц)
С	м.д мультиплетность	С	м.д мультиплетность
9	201,8-c	8	58,2-c
1'	172,6-с	3'	51,2-д
4-OCOCH3	170,5-с	3	44,6-д
10-OCOCH3	170,2-с	15	41,3-с
2-COPh	164,3-с	4'	39,9-т
C=O (Boc)	155,8-с	6	34,9-т
C=O (карбонат)	151,4-с	(CH3)3CBoc	27,7-к
12	139,4-с	17	25,5-к
11	133,1-с	16	22,6-к
(Me)3C(Boc)	80,0-с	4-OCOCH3	22,0-к
5	83,8-д	10-OCOCH3	20,2-к
1	87,7-с	5'	24,3-д
4	80,0-с	6'	22,7-к
2	69,0-д	7'	21,6-к
20	75,5-т	18	14,6-к
2'	73,3-д	19	9,8-к
7	71,2-д	q-бензоил	127,5-с
10	74,3-д	о-бензоил	129,5-д
13	74,1-д	м-бензоил	128,6-д
14	79,1-д	п-бензоил	133,7-д

Масс-спектр: (NH₃, быстрый нагрев на проволоке/хим. иониз., положительные ионы): (m/z) 889 [(MNH₄)⁺], 832 [(MNH₄-(CH₃)₃C)⁺, 772 [(MNH₄-BocNH₂)⁺];

(NH₃, быстрый нагрев на проволоке/хим. иониз., отрицательные ионы): (m/z) 871 (М^-), 260 (боковая цепь).

Инфракрасный спектр (KBr таблетка): 3521, 3321, 2971, 2953, 1826, 1762, 1706, 1526, 1366, 1238, 1165, 1072, 723 см^-1.

УФ-спектр (МеОН): 231, 276 и 284 нм.

-Е_1% при 231 нм = 180,99.

-Е_1% при 276 нм = 14,094.

-Е_1% при 284 нм = 12,182.

1. Способ получения соединения 13-(N-Boc-β-изобутилизосеринил)-14β-гидроксибаккатин III 1,14-карбоната формулы (I)

который включает:

а) защиту гидроксилов 10-деацетилбаккатина III в 7- и 10-м положениях:

где R и R₁, которые могут быть одинаковыми или различными, выбраны из C₁-С₁₀ алкила или арила, C₁-С₁₀ алкил- или арилкарбонила, трихлорацетила, C₁-C₄ триалкилсилила;

b) двухстадийное окисление, чтобы получить производное, окисленное до карбонила в положении 13 и гидроксилированное в положении 14:

с) карбоксилирование вицинальных гидроксилов в 1- и 14 -м положениях, чтобы получить 1,14-карбонатное производное:

d) восстановление карбонила в положении 13:

е) снятие защитных групп в 7- и 10-м положениях:

f) селективное ацетилирование гидроксила в положении 10:

g) превращение 14β-гидроксибаккатин-1,14-карбоната III в производное, содержащее триэтилсилильную группу в положении 7:

h) реакцию соединения, полученного на стадии (g), с (4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-диметоксифенил)-4-изобутил-1-оксазолидин-5-карбоновой кислотой:

i) удаление триэтилсилильной и диметоксибензилиденовой защитных групп из соединения, полученного на стадии (h):

2. Способ по п.1, где R=R₁=трихлорацетил.

3. Способ по п.1, где R и R₁ являются различными и R представляет собой трихлорацетил, а R₁ представляет собой ацетил, или R представляет собой триэтил- или триметилсилил, а R₁ представляет собой ацетил.

4. Способ по п.1, где стадию снятия защиты (а) гидроксилов в 7- и 10-м положениях проводят трихлорацетилхлоридом в метиленхлориде в присутствии триэтиламина и каталитических количеств диметиламинопиридина.

5. Способ по п.1, где стадию окисления (b) гидроксила в положении 13 и гидроксилирования в положении 14 проводят диоксидом марганца или диоксидом висмута или озоном в растворителе, выбранном из ацетонитрила, ацетона или смеси этилацетат/метиленхлорид.

6. Способ по п.1, где стадию карбоксилирования (с) гидроксилов в 1- и 14-м положениях проводят фосгеном в смеси метиленхлорид/толуол в присутствии пиридина.

7. Способ по п.1, где стадию восстановления (d) до 13-гидрокси проводят боргидридом натрия в метаноле.

8. Способ по п.1, где стадию ацетилирования (f) гидроксила в положении 10 проводят ацетилхлоридом.

9. Способ по п.8, где стадию силилирования (g) проводят триэтилхлорсиланом.

10. Способ по п.1, где реакционную стадию (h) проводят в сухих неполярных органических растворителях в присутствии основания и конденсирующего агента дициклогексилкарбодиимида (ДЦК).

11. Способ по п.1, где триэтилсилильную защитную группу удаляют на стадии (i) фторидом пиридиния в растворе ацетонитрил/пиридин под атмосферой азота, а диметоксибензилиденовую защитную группу удаляют в растворителе метиленхлориде добавлением HCl в метаноле и затем NaHCO₃.