Имидазо-аннелированные изо- и гетероциклы и способ их получения

Имидазо-аннелированные изо- и гетероциклы и способ их получения

Реферат

 

Использование в качестве высокоэффективных антагонистов рецепторов ангиотензина-2. Сущность изобретения: имидазо-аннелированные изо- и гетероциклы и способ их получения алкилированием соответствующего имидазопроизводного подходящим алкилирующим агетом. 2 с. и 1 з.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к имидазо- аннелированному изо- и гетероциклам, способу их получения и к средствам на их основе.

Из ЕР-А 399 731, ЕР-А 399 732, ЕР-А 400 835 и ЕР-А 434 038 известны имидазо- аннелированные, ароматические соединения такие как антагонисты рецепторов ангиотензина II. Однако ни в одной из этих публикаций не описаны соединения, которые одновременно имеют циклически замещенное фенильное кольцо, в качестве заместителя у азота имидазольного кольца и гетероцикл, аннелированный с имидазольным кольцом, точно так же мало известны соединения, несущие аннелированные с имидазолом гомоароматические углеводороды и одновременно бифенильную группу на атоме азота имидазола; так же неизвестны никакие соединения, которые на бифенильной группе несут остаток сульфонилмочевины или сульфонилуретановый остаток.

В настоящее время найдены производные имидазола, которые неожиданным образом являются высокоэффективными антагонистами рецепторов ангиотензина-II, как ин виво, так и также ин витро.

Изобретение касается соединений формулы символы имеют следующее значение: Х означает моноциклический остаток с 3, 4 или 5 атомами в кольце или бициклический остаток с 8-10 атомами в кольце, который частично или полностью может быть гидрирован и в котором одна или несколько СН- или СН₂-групп могут быть замещены N, NH или О; R(1) 1. (С₁-C₁₀)-алкил, 2. (С₃-C₁₀)-алкенил, 3. (С₃-C₁₀)-алкинил, 4. OR (6) 5. (С₃-C₈)-циклоалкил, 6. (С₄-C₁₀)-циклоалкилалкил, 7. (С₅-C₁₀)-циклоалкилалкенил, 8. (С₅-C₁₀)-циклоалкилалкинил, 9. (CH₂/_m-B-(CH₂)_n-R(7) 10. бензил, 11. остаток, определяемый под номерами 1. 2. 3 или 9, который монозамещен с помощью СО₂R(6) 12. Остаток, определяемый под номером 1. 2. 3, или 9, где от 1 вплоть до всех Н-атомов замещены фтором, или 13. Остаток, определяемый под номером 10, который у фенила замещен 1 или 2 одинаковыми или различными остатками из ряда включающего галоген, (С₁-C₄)-алкоксил и нитро; R(2), R(3), R(4) и R(5) одинаковые или различные и означают: 1. водород, галоген, гидроксил, циано, сульфо, формил, бензоил, (С₁-C₈)-ацил, (С₁-C₈)-ацилокси, меркапто, карбоксил, (С₁-C₄)-алкоксикарбонил; 2. линейный или разветвленный, в случае необходимости замещенный, содержащий вплоть до 6 С-атомов алкильный, алкенильный, алкоксильный или аллилтио- остаток; 3. арильный, арилалкильный или арилалкенильный остаток, в котором алкильный или алкенильный заместитель, неразветвленный или разветвленный, имеет вплоть до 6 С-атомов, а арильный заместитель означает моноциклический остаток с 5 или 6 атомами в кольце или конденсированные кольца с 8 до 14 атомами в кольце, в которых содержатся один или несколько гетероатомов, как 0, N или S, и которые могут быть в случае необходимости замещены, R(6) 1. водород, 2. (С₁-C₈)-алкил, 3. (С₃-C₈-циклоалкил, 4. фенил, 5. бензил или 6. определяемый в п.2 остаток, в котором от 1 вплоть до всех Н-атомов замещены фтором; 1(7) 1. водород, 2. (С₁-C₈)-алкил, 3. (С₃-C(₈)-циклоалкил, 4. (С₂-C₄)-алкенил или 5. (С₂-C₄)-алкинил; R(8) и R(9) или R(10) и R(11) или одинаковые или разные, и означают: 1. водород, 2. (С₁-C₆)-алкил или (С₁-C₆)-алкенил, незамещенный или замещенный галогеном, гидроксилом или (С₁-C₆)-алкоксилом; 3. арил или (С₁-C₆)-алкиларил, где алкильный остаток- моноциклический с 5 или 6 атомами в кольце или бициклический с 8-10 атомами в кольце, в случае необходимости содержит один или несколько гетероатомов, как О, N и S, и замещен 1-им или 2-мя одинаковыми или разными остатками из ряда: галоген, гидрокси, гидроксил, нитро, (C₁-C₆)-алкил, (С₁-C₆)-алкенил, (С₁-C₄)-алканоил, (С₁-C₄)-алканоилокси и СО₂/R (6); или R(8) и R(9) или R(10) и R(11) вместе с несущим их N-атомом образуют 2- до 8-членное кольцо, которое насыщено или ненасыщенно, может содержать другой гетероатом, выбираемый из группы: N, O и S, и незамещенный или замещенный галогеном, гидроксилом, (С₁-C₄)-алкилом, (С₁-C₄)алкенилом, (C₁-C₄)-алкилокси и СО₂R(6), или R(10) и R(11), или одинаковые или разные, означают ацильный остаток, содержащий до 6 C-атомов, или (С₁-C₆)-алкильный или (С₆-C₁₂)-арильный остаток, которые могут быть в случае необходимости замещены галогеном или (C₁-C₆)-алкильными остатками; L (C₁-C₃) алкандиил; R(12)- и R(13)-одинаковые или различные, и означают: 1. водород, 2. галоген, 3. нитро, 4. (C₁-C₄)-алкил или 5. (С₁-C₂ алкоксил; q 0 или 1; А означает или: 1. остаток гетероцикла с 5-10 атомами в кольце; который может быть моноциклическим или бициклическим, и где вплоть до 9 атомов кольца являются С-атомами; который замещен или замещен вплоть до 6 преимущественно до 3-х, одинаковыми или различными остатками R(14) и R(15), или 2. бифенильный остаток, который не замещен или замещен вплоть до 4-х, преимущественно до 2-х, одинаковыми или разными остатками R(14) и R(15), причем "А" однако обязательно замещен, по меньшей мере, одним остатком, определяемом для R(15) в п.п. 18. 19. 28. 40 или 42, а q нулю, R(14)-1. галоген, 2. оксо, 3. нитрозо, 4. нитро, 5. амино, 6. циано, 7. гидроксил, 8. (C₁-C₆)-алкил, 9. (C₁-C₄)-алканоил, 10. (С₁-C₄)-алкакноилоксил, 11. СО₂R(6), 12. метансульфониламино, 13. трифторметансульфониламино, 14. -СО-NH-OR (16) 15. -CO₂-NR (17)R (18), 16. -СН₂-OR (18), 17. (С₁-C₄)-гетероарил-(СН₂)_q-, преимущественно 1-тетразолил, 18. (C₇-C₁₃)-ароил, 21. (С₆C₁₂)-арил; R₁₅ означает: 1. водород, 2. (С₁-C₆)-алкил, 3. (С₃-C₈)-циклоалкил 4. (С₆-C₁₂)-арил, 5. (С₇-C₁₃)-ароил, 6. (С₁-C₄)-алкокси, 7. (С₁-C₄)-алканоилокси, 8. (C₁-C₉)-гетероарил, 9. СО₂R (6)- 10. галоген, 11. циано, 12. нитро, 13. NR (17) R (18), 14. гидроксил, 15. -СО-NH-chr (19) -СO₂R (6), 16. сульфо, 17. -SO₃R (6), 18. -SO₂-NR (18)-CO-NR (17) R (16), -SO₂0-NR (18) -CO-O-R (17), -SO₂N(CO-O-R) (17))₂ или -SO₂-NR (18) -CS -R (17) R (16) 19. -NR (18) -CO-NR (17) -SO₂-CH₂-R (18), 20. -С(CF₃)₂ОН, 21. фосфоноокси, 22. -РО₃H₂, 23. -NH-PO(OH)₂, 24. -S(O)_L R (17), 25. -CO-R (20), 31. 5-тетразолил-NH-СО-, 32. -СО-NH-NH-SO₂CF₃, 39. -CO-NH-SO₂-R (6), 40. -SO₂-NH-CO-R (17), 41. определяемый в п.4 остаток, замещенный 1-м или 2-мя одинаковыми или разными, остатками из ряда: галоген, циано, нитро, R (17) R (18) и гидроксил; 42. R вместе с R (14) означает -СО-NH-SO₂-; R (16), R (17) - одинаковые или различные 1. водород, 2. (C₁-C₆)-алкил, 3. (C₃)-С₈)-циклоалкил, 4. (C₆)-C₁₂)-арил, преимущественно фенил, 5. (С₆-С₁₀)-арил-(С₁-C₄)-алкил, 6. (С₁-C₉)-гетероарил, который частично или полностью может быть гидрирован, преимущественно 2-пиримидинил, 1-пиперидинил или хинуклидинил; 7. (С₃-C₆)-алкеноил; 8. определяемый под номерами в п.п. 4. 5. 6. 9. 14. 15. 16. 18. 19. или 20, остаток, замещенный 1-м или 2-мя одинаковыми или различными остатками из ряда: гидроксил, метокси, нитро, циано, СО₂R (6), трифторметил, -NR (25) R (26) 9. (С₁-С₉-гетероарил- (С₁-C₃)-алкил, причем гетероарильная часть частично или полностью может быть гидрирована, 10. определяемый под номером 2 остаток, в котором от 1 вплоть до всех Н-атомов могут быть замещены фтором, 11. (С₂-C₆)-алкенил, 12. (С₃-C₈)-циклоалкенил, 13. (С₃-С₈)-циклоалкенил-(С₁-C₃)-алкил, 14. (С₃-C₈)-циклоалкил-(С₁-C₄)-алкил, 15. (C₆-C₁₀)-арил-(С₃-C₆)-алкенил, 16. (С₁-C₉)-гетарил-(С₃-C₆)-алкенил, 17. (С_3--C₆)-алкинил, 18. (С₆-C₁₀)-арил(С₃-C₆)-алкинил, 19. (C₁-C₉)-гетероарил-(С₃-C₆)-алкинил, 20. Остаток формулы , причем R (16) не может иметь значение, указанное в п.20.

Стереоцентры могут быть как в R-, так и в S-конфигурациии 21. R (16) R (17) вместе с несущим их N-атомом образуют гетероарил, который также частично или полностью может быть гидрирован.

R (18) 1. Водород, 2. (С₁-C₆)-алкил, 3. (С₃-C₈)-циклоалкил, 4. (С₆-С₁₂)-арил-(C₁-C₆)-алкил, преимущественно бензил, 5. фенил или 6. (C₁-C₉)-гетероарил; R (19) 1. водород, 2. (C₁-C₆)-алкил, 3. (С₃-C₈)-циклоалкил, 4. фенил или 5. бензил; R (20) 1. водород; 2. (С₁-C₆) алкил, 3. (С₃-C₈)-циклоалкил 4. фенил-(СН₂)_q-, 5. OR (19) 6. P (25) P (26) или R (21) означает циано, нитро или СО₂R (18); R (22) означает СО₂R (6) или CH₂CO₂R (6); R (23) означает водород, галоген, (С₁-C₄) алкил или (С₁-C₄)-алкоксил; R (24) означает водород, (С₁-C₄) алкил или фенил; R (25) и R (26) одинаковые или разные и означают: 1. водород, 2. (С₁-C₄)-алкил, 3. фенил, 4. бензил или 5. метилбензил; I означает NR (23), О или СН₂; В означает О, NR (18) или S; Т означает: 1. простую связь, 2. -СО- 3. -СН₂- 4. -О-, 5. -S-, 6. -NR (28)-, 7. -СО-NR (28)-, 8. -NR (28) -CO-, 9. -О-CH₂-, 10. -CH₂-О-, 11. -S-CH₂-, 12. -CH₂-S-, 13. -NH-CR (27) R (29)-, 14. -NR (28) -SO₂-, 15. -SO₂-NR (28)-, 16. -CR (27) R (29) -NH-, 17. -СН=CH-, 18. -CF=CF-, 19. -CH=CF, 20. -CF=CH-, 21. -CH₂-CH₂-, 22. -CF₂-CF₂, 23. -CH(OR) (6)-, 24. -CH(OCOR) (19))-, R (27) и R (29) одинаковые или разные и означают: водород, (С₁-C₅)-алкил, фенил, аллил или бензил; R (28) означает: водород, (С₁-C₆)-алкил, бензил или аллил; R (30) означает: 1. R (27) R (28), 2. уреидо, 3. тиоуреидо, 4. толуол-4-сульфонил или 5. бензолсульфониламино; R (31) и R (32) одинаковые или разные и означают (С₁-C₄)-алкил, или вместе (СН₂)_q; Q означает: СН₂, NH, O или S; n означает: целое число от 1 до 5; m означает: целое число от 0 до 3; о означает: целое число от 1 до 10; r означает нуль, 1 или 2; а также их физиологически совместимых солей.

Алкил, алкенил и алкинил могут быть линейными или разветвленными. Соответствующее относится и к производным от них остаткам, как алканоил или алкоксил.

Под циклоалкилом понимают также замещенные алкилом кольца. (C₆-C₁₂)-Арил это, например, фенил, нафтил, или бифенил, преимущественно фенил. Соответствующее имеет значение для производимых от них остатков, как ароил или аралкил.

Под (С₁-C₉) гетероарилом понимают, в особенности, остатки, которые производятся от фенила или нафтила, в которых одна или несколько СН-групп заменены N и/или в которых по меньшей мере две соседние СН-группы (при образовании пятичленного ароматического кольца) заменены S, NH или О. Далее также один или оба атома конденсационного участка бициклических остатков (как в индолизиниле) может быть N-атомом.

Это например, фуранил, тиенил, пирролил, имидазолил, пиразолил, триазолил, тетразолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пирадиазинил, индолил, индазолил, хинолил, ихозинолил, фталазинил, хиноксалинил, хиназолинил, циннолинил.

Под анеллированным гетеробициклом АН, от которого произведен остаток А, понимают, в частности, бициклическую систему с 8-10 атомами в кольце, из которых вплоть до 9 атомов кольца это С-атомы, причем два расположенных рядом друг с другом атома представляют собой общие составные части обоих колец. Одно или оба этих кольца формально производятся от бензола, в котором одна или несколько СН-групп заменены на N, O⁺ и S⁺ и/или в котором две соседние СН-группы [при образовании пятичленного ароматического кольца] заменены на S, NH или О.

"А" это, например, остаток бензотиофена, бензофурана, индола, изоиндола, индазола, бензимидазола, хинолина, изохинолина, фталазина, хиноксалина, хиназолина, циннолина, бензтиазола, бензтиазол-1,1-диоксида, кумарина, хромана, бензоксазола, бензизотиазола, бензодиазина бензтриазола, бензтриазина, бензоксазина имидазо-пиридина, имидазопиримидина, имидазопиразина, имидазо-пиридазина, имидазо-тиазола, пиразолопиридина, тиенопиридина и пирролипиримидина. Названный гетеробицикл АН может быть также частично или полностью гидрирован. Преимущественно однако кольцо АН остается ароматическим, причем бензанеллированный гетеробицикл АН является особенно предпочтительным.

В случае S-содержащих и/или частично насыщенных остатков бицикла, например, также может быть оксо-замещен, как это имеет место в остатке бенз-1,2,3-триазинона.

Связывание "А" осуществляет от изоциклической или гетероциклической части при о нулю через алкандиил-мостик L, а при q 1 через одинарную связь, к группе Под изо- или гетероциклом ХН₂, от которого производится моно- или бициклический остаток Х, понимают, например, остаток циклопентана, циклогексана, циклогептана, циклопентена, циклогексена, циклогептена, бензола, нафталина, фурана, тиофена, пиррола, пиридина, пиридазина, пиримидина, пиперидина, пиперазина, морфолина, индола, индазола, оксазола, изоаксазола, хинолина, изохинолина, бензтиофена, бензофурана, бензтиазола, бензоксазола, имидазопиридина, имидазопиримидина и фурапиридина. Галоген это фтор, хлор, бром и йод.

Под физиологически совместимыми солями соединений формулы 1 понимают как их органические, так и неорганические соли, как они описаны в Remington's Pharmaceuti cal Sciences, I. Auflage Seite 1418 (1985).

На основании физической и химической стабильности и растворимости для кислотных групп предпочтительными являются соли натрия, калия, кальция и аммония; для основных групп соли с соляной кислотой, серной кислотой, фосфорной кислотой, карбоновыми кислотами или сульфоновыми кислотами, такими как уксусная, лимонная, бензойная, малеиновая, фумаровая, винная, п-толуолсульфоновая кислоты.

Предпочтительными соединениями формулы II являются: в которой символы имеют следующее значение: L(1), L(2), L(3), и L(4): 1. -СН₂-, 2. -СН= 3. остаток, определяемый под номером 2, причем 1 или 2 метиновые группы замены азотом; предпочтительно L(4) N, R(1) 1. (С₁-C₁₀)-алкил, 2. (С₃-C₁₀)-алкенил 3. (С₃-C₁₀)-алкинил, 4. (С₃-C₈)-циклоалкил, 5. бензил или 6. бензил, который замещен, как описано выше; R (2) и R (3) одинаковые или разные и обозначают: 1. водород, 2. гидроксил, 3. галоген, 4. линейный или разветвленный (С₁-C₆)-алкильный остаток, незамещенный или замещенный одним или несколькими одинаковыми или разными заместителями из ряда: галоген, гидроксил, (С₁-C₄)-алкоксил, (С₁-C₄)-алкилтио, меркапто; 5. -СО₂R (6); Т означает простую связь, -0-, -CO-, NHCO- или -ОСН₂-, а остальные остатки и заместители определены, как указано выше.

особенно предпочтительными являются соединения формулы II, в которой R (1) означает (С₁-C₇)-алкил, (С₃-C₇)-алкенил или (С₃-C₇)-алкинил; R (12) и R (13) одинаковые или различные и означают водород и (С₁-C₄) алкил; R (14) означает: 1. (С₁-C₄) алкил, 2. (С₁-C₄)-алкоксил, 3. циано, 4. амино, 5. нитро, 6. фтор, хлор или бром, 7. (С₁-C₄)-гетероарил СН₂; 8. (С₁-C₄)-алканоилокси, 9. (С₁-С₄)-алканоил, 10. бензоил или 11. тетразолил; R (15) означает: 1. (С₁-C₄)-алкил, 2. (С₆-C₁₂)-арил, 3. (С₁-С₃)-алканоилоксил, 4. (C₁-C₄)-алкоксил, 5. (С₁-C₉)-гетероарил, преимущественно 5-тетразолил, 6. циано, 7. нитро, 8. гидрокси, 9. SO₃R (6), 10. хлор, бром, 11. СО₂R (6), 12. CO-NH-R (19), 13. СО-R (20), 14. SO₂-NR (18) -CO-NR (17) R (16), 15. SO₂-NR (18)-CO-O-R (17) или SO₂N (CO-OR) 17))₂ 16. СО-СНR (19) -CH₂H 17. (С₁-C₄) алкил СО₂Н, 18. Н-CO-NH-SO₂-CH₂-R (19), 23. R (14) c R (15) вместе -СО-NH-SO₂; L -CH₂-; R (18) водород; R (25) и R (26), независимо друг от друга, означают водород или (C₁-C₄)-алкил, а также их физиологически совместимые соли.

Изобретение касается также способа получения соединений формулы 1, который отличается тем, что соединения формулы III в которой R (1), R (2), R (3), R (4), R (5) и Х имеют вышеуказанные значения, алкилируют с помощью соединений формулы IV в которой L, q, R (12), R (13) и А имеют вышеуказанные значения, а U означает летучую группу, при необходимости временно введенные защитные группы снова отщепляют, а полученные соединения формулы 1 при необходимости переводят в их физиологически совместимые соли.

Пригодными летучими группами U являются предпочтительно нуклеофугные группы (см. Angew Chem. 7 (1960)), как галоген, о-толууолсульфонат, мезилат или трифлат.

Способы получения предстадий формулы III известны из патента США 4 880 8044, патента ФРГ 3 911 603, Европейских патентов: ЕР-А-399 731, ЕР-А-399 732, ЕР-А-400 835, ЕР-А-400 974, ЕР-А-415 886, ЕР-А-420 237, ЕР-А-425 921 и ЕР-А-434 038.

Для алкилирования соединений формулы III пригодны, например, соответствующие бензилгалогениды, бензилтозилаты, бензил-мезилаты или бензил-трифлаты или соответствующие алкилгалогениды, -тозилаты, -мелзиллаты или -трифлаты. Получение этих соединений осуществляется, само по себе, известным образом, например, путем галогенирования соответствующих метильных промежуточных соединений. Для этого используется преимущественно N-бромсукцинимид, см. например, J. Org, Chemk. 44, 4733 (1979) и Helv. Chim. Acta 62, 2661 (1979).

Синтез производных бензимидазола, бензитиофена, имидазо-пиридина и имидазо-пиримидина с СН₃-группой у ядра осуществляется согласно R.P.Dickson et al in y. Med. Chem. 29, 1937 (1986), E. Abinente en al, in y. Heterocuclic Chem. 26, 1875, (1989), A. Koubsock et al in y Org. Chem. 41, 3399 (1976) и согласно F. Santer et al in Mh Chem. 99, 715 (1968).

Бифенильные производные могут быть синтезированы, например, исходя из производных арилбороновой кислоты путем связывания с замещенными арилгалогенидами с помощью катализаторов переходных металлов, в частности, палладия. Соответствующие реакции описываются -R. B. Milleret al (Organometallics 1984, 3, 1261) или A. Zuzuki et al (Synthetic Commun 11 (7)- 513 (1981)).

Сульфонилуретановые производные формулы (I) могут быть получены из соответствующих сульфонамидов формулы (I) путем взаимодействия со сложными эфирами хлоругольной кислоты или путем взаимодействия с диметилдикарбонатом и основаниями, как, например, карбонат калия, в инертных растворителях при температурах вплоть до температуры кипения соответствующего растворителя.

Производные сульфонилмочевины (I) можно получать по выбору или из соответствующих сульфонамидов формулы (I) путем взаимодействия с изоцианатами или с 2,2,2-трихлорацетамидными производными пригодного амина, в инертных, высококипящих растворителях, как, например, диметилсульфоксид или из сульфонилуретанов формулы (I) путем воздействия соответствующего амина в инертном, высококипящем растворителе, как, например, толуол, при температурах вплоть до температуры кипения соответствующего растворителя.

Остаток сульфонамида можно получить, в случае необходимости, исходя из амино-группы, посредством перегруппировки Меервайна. Для этого гидрохлорид амина сначала диазотируют, а потом, в присутствии медного катализатора, вводят во взаимодействие с диоксидом серы в ледяной уксусной кислоте. Последующее воздействие аммиака приводит к сульфонамид-группе.

Алкилирование осуществляется в принципе известными способами аналогичным образом.

Имидазо-анналированные производные формулы III металлуруют, например, в присутствии основания. Предпочтительные основания это гидриды металлов формулы МН, как гидрид лития, натрия, или гидрид калия, например, в диметилформамиде или диметилсульфоксиде как растворителе, или алкоголяты металлов формулы МОR, причем R означает метил, этил, трет-бутил, и реакция осуществляется в соответствующем спирте, диметилформамиде или диметилсульфоксиде. Образованные таким образом соли имидазопроизводных растворяют в апротонном растворителе, как ДМФ или ДМСО, и разбавляют подходящим количеством алкилирующего реагента.

Альтернативную возможность для депротонирования имидазольных производных представляет собой, например, реакцию взаимодействия с карбонатом калия в ДМФ или DMCO.

Реакцию взаимодействия осуществляют при температурах ниже комнатной вплоть до температуры кипения реакционной смеси, преимущественно в пределах между +20^oС и температурой кипения реакционной смеси, в течение примерно от 1 до 10 ч.

Предложенные согласно изобретению соединения формулы 1 оказывают антагонистическое действие на рецепторы ангиотензина II и поэтому их можно применять для лечения гипертензии, зависимой от ангиотензина-II.

Возможности применения заключаются при лечении таких заболеваний, как сердечная недостаточность, кардио-протекция, инфаркт миокарда, гипертрофия сердца, артериосклероз, нефропатия, почечная недостаточность, а также сердечно-сосудистые заболевания мозга, как транзисторные ишемические приступы и кровоизлияние в мозг.

Ренин это протеолитический фермент из класса аспартилпротез, который как следствие различных стимулов (уменьшение объема, дефицит натрия, стимуляция В-рецепторов) окологломерулярными клетками почек выделяется в круг кровообращения. Там он отщепляет выделившийся из печени ангиотензлиногена дексапептил ангиолллтензина-1. Последний благодаря "превращающим ангиотензин ферментам" (АСЕ) переводится в агиотензин-II. Антиотензин II играет существенную роль при регуляции кровяного давления, так как он непосредственно повышает кровяное давление вследствие ангиоспазма. Дополнительно он стимулирует секрецию альдостерона из надпочечника и повышает таким образом через подавление выделения натрия внеклеточный объем жидкости, что в свою очередь, способствует повышению кровяного давления.

Пострецепторные действия это стимуляция фосфоинозитолового обмена (выделение Са²⁺), активация протеинкиназы С и способствование гормональным рецепторам, зависимым от АМР.

Сродство соединений формулы I к рецептору ангиотензина II можно определять путем измерения вытеснения ¹²⁵I-ангиотензина-II или ³H-ангиотензина-II рецепторов в зону гломерулозных мембран надпочечников крупного рогатого скота. Для этого препарированные мембраны суспендируют в буфере при рН 7,4. Для того, чтобы предотвратить деградацию радиолиганды во время инкубации добавляют апротинин, ингибитор цептидазы. Дополнительно применяют приблизительно 1400 срm изотопного индикатора с удельной активностью 74 ТБq (ммоль) продается фирмой "Amershan Buchler" и такое количество рецепторного протеина, который связывает 50% изотопного индикатора. Реакция начинается в результате добавления 50 мкл мембранной суспезии к смеси 100 мкл буфера + апротинин; 50 мкл буфера с ангиотензином-II или без него или рецепторного антагониста и 50 мкл изотопного индикатора. После инкубационного периода в 60 мин, при температуре 25^oС связанный и свободный радиолиганд отделяют путем фильтрационного анализа с помощью фильтров whatmann (R) GFIC на Скатрон^R (Skatron) накопителе клеток.

Неспецифические связывания предотвращаются путем обработки фильтров с помощью 0,3% полиэтиленимина, рН 10 (Sigma, N 3143). На основе измерения радиоактивности в гамма сцинтилляционном счетчике определяют интенсивность вытеснения радиолиганда рецептором. IC₅₀ величины, которые обозначают концентрацию ингибитора, с тем, чтобы вытеснить 50% лиганда, определяют согласно Сhem. et al. Theor. Biol, 59, 253 (1970). Для соединений формулы (I) они находятся в диапазоне 1х10^-4 1х10_-9М.

Альтернативно можно определить сродство соединений формулы I к рецептору ангистензина-II в результате измерения вытеснения ¹²⁵1-ангиотензина-II или ³Н-ангиотензина-II препарираций рецепторов из различных органов (печень, легкие, надпочечники, мозг, и т.д.).

Для этого препарированные мембраны суспендируют в инкубационном буфере (20 мМ Трис), содержащем 135 мМ NaCl, 10 мM KCl, 10 мМ Mg Сl₂, 5 мM глюкозы, 0,2% альбумина сыворотки крупного рогатого скота, а также ингибиторы протеазы РМSF 0,3 мM и бацитрацина 0,1 мM) и вместе с радиоактивно маркированным ангиотензином-II и различными концентрациями испытуемых соединений инкубируют 90 мин при температуре 25^oС. После этого связанный и свободный радио-лиганд разделяют в результате фильтрации через микростекловолокнистый фильтр (JF 51, Schleicher Schiill) на накопителе клеток (SKATRON).

Измерением связанной с рецептором радиоактивности на фильтрах посредством бета или гамма спектрометра определяют степень вытеснения радиолиганда рецептоа испытуемыми соединениями. Интенсивность вытеснения радиолиганда рецептора испытуемыми соединениями указывается через IC₅₀, т.е. концентрацию ингибитора, которая вытесняет 50% связанного радиолиганда рецептору. Расчет IC₅₀-величин осуществляется посредством РС-математического обеспечения (LIGAND, G. A.Mcpherson 1985, Elsinier-BiosoFT, 68 Hills Road, Cambridge CB 2ILA, UK). Измеренный для соединений формулы (I) IC₅₀ величины находятся в диапазоне 1х10^-5 до 1х10^-11 М.

Для определения антагонистического действия соединений формулы (I) ин виво их ингибирующий эффект на индуцированное ангиотензином-II повышение кровяного давления можно измерять на демиелинизированных Spragne Dawley - крысах (Mollegard, Danemark). Повышение кровяного давления измеряется на Аоvta саrotis. Внутривенное введение осуществляется в вену пениса. После препарирования животного и 20-минутного времени выдержки для стабилизации гемодинамических параметров осуществляют 3 следующие друг за другом инъекции 10, 30 и 100 нг ангиотензина-II в 0,1 мл водного раствора через интервалы в 5 мин. Соединения формулы (I) растворяют в дистиллированной воде, возможно при добавлении 10%-го этанола и/или оснований -(рН<10) или кислот (рН>3), и вводят в дозах 1-300 мкг/rq/ кг внутривенно или 5-100 мкг/кг интрадуоденально.

При интрадуоденальном введении инъекции ангиотензина-II осуществляют через 20, 40 и 60 мин, в то время как при внутривенном введении - осуществляется последовательно с интервалом через 10 мин. Соединения формулы (I) являются особенно эффективными в диапазоне 1-300 мкг/кг внутривенно или 5-300 мкг/кг интрадуоденально.

Изобретение относится также к фармацевтическому составу, состоящему из соединения формулы I и других биологически активных веществ, как, например, мочегонных средств или нестероидальных противовоспалительных биологически активных веществ. Соединения формулы (I) можно применять также и в качестве диагностики для ренин-ангиотензин-системы.

Фармацевтические препараты содержат эффективное количество активного вещества формулы (I) и возможные другие активные вещества вместе с неорганическим или органическим носителем, используемым в фармацевтических целях. Применение может осуществляться через нос, внутривенно, подкожно или перорально. Дозировка активного вещества зависит от вида теплокровного веса тела, возраста и от рода введения.

Фармацевтические препараты данного изобретения получают известными способами растворения, смешения, гранулирования или дражирования.

Для оральной формы применения активные соединения смешивают с обычными для этого добавками, как носители, стабилизаторы или инертные разбавители и посредством обычных методов перерабатывают в природные формы введения, такие как таблетки, драже, разъемные капсулы, водные спиртовые или масляные суспензии или водные, спиртовые или масляные растворы. В качестве инертных носителей можно применять, например, гуммиарабик, магнезию, карбонат магния, фосфат калия, лактозу, глюкозу, стеарилфумарат магния или крахмалы, особенно кукурузный крахмал. При этом можно осуществлять приготовление в виде сухого или влажного гранулята. В качестве масляных носителей или растворителей можно рассматривать, например, растительные или животные масла, такие как подсолнечное масло или рыбий жир.

Для подкожного и внутривенного применения активные соединения или их физиологически совместимые соли, желательно, вместе с обычными для этого веществами, такими как агенты растворения, эмульгаторы, или другие вспомогательные вещества, переводят в растворы, суспензии или эмульсии. В качестве растворителей принимают во внимание, например, воду, физиологический раствор поваренной соли или спирты, например, этанол, пропандиол или глицерин; наряду с этим также растворы сахара, такие как глюкоза или растворы маннита, или также смесь из различных названных растворителей.

Согласно вышеуказанному способу были определены, например, для соединений примеров 1, 2, 3, 15, 19, 27, 31 и 51, следующие IC₅₀ величины: П р и м е р IC₅₀/nM/ 1 78 2 65 3 149 15 0,8 19 0,74 27 1,1 31 0,48 51 1,8 Перечень сокращений: DCl десорбционно-химическая ионизация ДМФ N,N-диметилформамид ЕЕ атилацетат FAB Fast Atom Bombardment-бомбардировка быстрыми атомами h час (часы) Нер n-гептан Min минута (минуты) NBS N-бромсукцинимид RT комнатная температура Пример 1 2-н-Бутил-1-/2-карбокси-3-хлор-бензо/b/тиофен-6-ил/ метил/-1Н-бензимидазол-7-карбоновая кислота а) Амид 2-карбокси-6-нитро-бензойной кислоты 30 г (0,155 моль) ангидрида 3-нитрофталовой кислоты вносят порциями в 180 мл концентрированного раствора аммиака и полученный раствор нагревают при перемешивании в течение 45 мин. при температуре 100^oС. Выпаривают на ротационном испарителе, дважды перегоняют вместе с толуолом, а остаток высушивают в глубоком вакууме. Перемешивают его с этилацетатом, осадок бежевого цвета отсасывают и высушивают в вакууме над P₂O₅. Получают 31,8 г целевого соединения.

Температура плавления: 180^oС Rf /SiO₂, CH₂Cl₂/CH₃OH 1:1/ 0,3 MS/DCI/ 211 /M + J/ b) 2-Амино-3-нитро-бензойная кислота 31 г /0,147 моль/ соединения из примера 1а растворяют в 50 4 н натрового щелока и 100 мл воды, добавляют 150 мл раствора гипохлорида натрия /избыток по отношению к КI крахмальной бумаге/ и полученный раствор нагревают в течение 60 мин при температуре 100^oС. После окончания реакции охлаждают, разбавляют с помощью 250 мл насыщенного раствора Na₂CO₃- и 400 мл насыщенного раствора КH₂PO₄-, устанавливают рН-значение раствора 3 с помощью 4н НСl /концентрированной НСl и продукт экстрагируют трижды по 500 мл этилацетатом. После высушивания над MgSO₄, концентрирования и перемешивания с диизопропиловым эфиром получают 18 г целевого соединения.

Температура плавления:188 194^oС Rf /SiO₂, CH₂CI₂/CH₃OH 1:1/ 0,7 MS /DCI/ 183 /M+H/ c). Метиловый эфир 2-амино-3-нитро-1-бензойной кислоты 18 г /99 ммоль/ Соединения из примера 1b/ в 200 мл метанола вместе с 20 мл тионилхлорида перемешивают в течение 48 ч при температуре кипения с обратным холодильником. Реакционный раствор выпаривают в ротационном испарителе, остаток обрабатывают 400 мл насыщенного раствора Na₂CO₃, трижды экстрагируют этилацетатом, соединенные органические фазы промывают разбавленным раствором Na₂CO₄ и насыщенным раствором NaCl, высушивают над Na₂SO₄ и концентрируют. Хроматографический анализ над SiO₂ с помощью ЕЕ/Heр 9:1 и 7:33 дает 11,5 г целевого соединения. Температура плавления: 86-88^oС Rf /SiO₂, EE/Hep 1:1/ 0,5 Ms /DCI/ 197 /M + H/ d Метиловый эфир 2-/M-/н-пентаноил/амино/-3-нитро бензойной кислоты 7 г /35,5 ммоль/ соединения из примера 1 с/ в 50 мл хлорангидрида валериановой кислоты в течение 1 ч при 110^oС. Концентрируют досуха, остаток в эфире обрабатывают в течение 30 мин активированным углем, фильтруют, концентрируют и подвергают хроматографической очистке на SiO₂ посредством ЕЕ/Hep 2:8. Получают 5,8 г целевого соединения.

Температура плавления: 66-69^oС Rf/SiO₂, EE/Hep 1:1 0,4 Ms /DCI/ 281 /M + H/ e) 6-Бром-метил-3-хлор-2-метоксикарбонил-бензо/b/- тиофен 2,5 г /10,4 ммоль/ Х-хлор-2-метоксикарбонил-6-метилбензо/b/тиофена/ полученного согласно J, Org.Chem. 41, 3399 /1976/ кипятят с обратных холодильником в 150 мл хлорбензола с 1,87 NBS и 420 мг дибензоилпероксида в течение 5 ч. После отгонки хлорбензола в ротационном испарителе полученный остаток обрабатывают ЕЕ, ЕЕ-раствор промывают насыщенным раствором NаРСО_3-, 10%-ным раствором Na₂SO₃ и насыщенным раствором высушивают над Na₂SO₄ и концентрируют. Хроматография на SiO₂ с помощью ЕЕ/Нер 1:2 дает 2,28 г целевого соединения.

Температура плавления: 143 145^oС Rf /SiO₂/, EE/Неp 1:20/ 0,3 - MS /DCI/ 319, 321 /M+H/.

f) Метиловый эфир 2-/N-/н-пентаноил/-//3-хлор-2- метоксикарбонилбензо/b/-тиофен-6-ил/метил/ /амино-3-нитробензойной кислоты/ 800 мг /2,86 ммоль/ соединения из примера 1d/растворяют в 5 мл абс. ДМФ, смешивают с К₂СО₃ в количестве 395 мг и смесь перемешивают в течение 10 мин при комнатной температуре. Прикапывают раствор 913 мг соединения из примера 1е в 20 мл абс. ДМФ, и реакционный раствор перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. ДМФ удаляют затем в вакууме, остаток обрабатывают ЕЕ, ЕЕ-фазу промывают водой, разбавленным, насыщенным раствором NaHCO₃ и насыщенным раствором NaCl высушивают над Na₂SO₄ и концентрируют. Хроматография на SiO₂ с помощью ЕЕ/Нер 1:2 дает 860 мг титульного соединения.

Rf /SiO₂, EE/Hep 1:2 0,3 MS /FAB/ 519 /M + H/.

g) /Метиловый эфир 2-Н-бутил-1-//3-хлор-2-метоксикарбонилбензо/b /тиофен-6-ил/метил/-1Н-бензимидазол-7-карбоновой кислоты 450 мг /0,85 ммоль/ соединения из примера 1f/ гидрируют в 50 мл этанола в течение 1 ч в присутствии никеля Ренея. Катализатор отфильтровывают. Фильтрат концентрируют досуха, полученный остаток в 10 мл ЕЕ/изопропанол /1:1/ и 10 мл насыщенного НСl ЕЕ-раствора перемешивают в течение 30 мин при температуре 50^oС. После концентрирования и кристаллизации из метанола получают 190 мг целевого соединения.

Температура плавления: 167-170^oС (разложение) Rf /SiO₂, CH₂CI₂/ СН₃OH /NH₄OH 49/ 1 /0,1/ 0,3 MS /DCI/ 471 /M + H/ h) 2-H-Бутил-1-//2-карбокси-3-хлор-бензо/ b /тиофен-6-ил/ метил/-1Н-бензимидазол-7-карбоновая кислота 185 мг /0,39 ммоль/ соединения из примера 1g/ растворяют в 10 мл этанола, добавляют 1 мл Н₂O и 1 мл конц. NaOH, и полученный раствор перемешивают в течение 3ч при комнатной температуре. Этанол удаляют в вакууме, устанавливают рН водного раствора на 3 посредством ледяной уксусной кислоты, и выпавший осадок отсасывают. После сушки в высоком вакууме получают 100 мг целевого соединения в виде белых кристаллов. Температура плавления: > 260^oС.

Rf /SiO₂, EE/CH₃OH 2/1 0,18 Ms /FAB/ 443 /M + H/ Пример 2 2-Н-Бутил-1-//3-карбокси-2-фенил-имидазол/1,2-а/пиридин-7-ил/-метил/-1Н-бензимидазол-7-карбоновая кислота Этиловый эфир а) 2-Бензоил-2-бром-уксусной кислоты 25 мл (0,144 моль). Этилового эфира бензоилуксусной кислоты растворяют в 50 мл СCl₄, при температуре 5^oС прикапывают 8,5 мл брома, и раствор коричневого цвета перемешивают в течение 1 ч при 5^oС, в течение 3 ч при комнатной температуре и в течение 2 ч при температуре 60^oС. Осуществляют концентрирование досуха, остаток обрабатывают ЕЕ, ЕЕ-раствор промывают 10%-ным раствором Na₂SO₃ насыщенным раствором NaCI высушивают над MgSO₄, концентрируют и высушивают в высоком вакууме. Получают 38 г титульного соединения в виде масла красного цвета.

Rf /SiO₂, EE/Hep 1/6/ 0,28.

MS /DCI/ 271, 273 /M + H/.

b) Этиловый эфир 7-метил-2-фенил-имидазо /1,2-а/ пиридин-3-карбоновой кислоты 38 г /0,14 моль/ соединения из примера 2а/ и 15,2 г 2-амино-4-метил-пиридина перемешивают в этаноле в течение 8 ч при температуре кипения с обратным холодильником. Концентрируют досуха, остаток разбавляют насыщенным раствором Na₂CO₃, многократно экстрагируют с помощью ЕЕ, объединенные органические фазы промывают насыщенным раствором NaCl, высушивают над Na₂SO₄ и концентрируют. Хроматография на SiO₂ с ЕЕ/Hep 2:1 дает 12,2 г целевого соединения.

Rf /SiO₂, EE/Hep 2:1/ 0,3 MS /DCI) 281 /M + H/ c) Этиловый эфир 7-бромометил-2-фенил-имидазо/1,2-а/ пиридин-3-карбоновой кислоты 3 г /10,7 ммоль/ соединения из примера 2b бромируют с помощью 1,27 г NBS и 150 мг бензоил-пероксида в соответствии со способом, указанным в примере 1е. Получают 1,2 г целевого соединения.

Rf /SIO₂, EE/Hep 1/2 0,2 Ms /DCI/ 359, 361 /M + H/.

d) Метиловый эфир 2-/N-/n-пентаноил/-//3-этоксикарбонил-2-фенил-имидазо/1,2-а/-пиридин-7-ил /метил/амино-3-нитро-бензойной кислоты 300 мг /2,85 ммоль /соединения из примера 1d/, 1,03 г соединения из примера 2с) и 400 мг К₂CO₃ подвергают взаимодействию согласно способу, указанному в примере 1f). Получают 520 мг целевого соединения.

Rf /SiO₂; EE /Hep 1:1/ 0,2 MS/FAB/ 559 /M + H/ e) Mетиловый эфир 2-н-бутил-1-//3-этоксикарбонил-2-фенил-имидоазо/1,2-а/пиридин- 7-ил/-метил/-1Н-бензимидазол-7-карбоновой кислоты 400 мг /0,71 ммоль/ Соединения из примера 2d подвергают взаимодействию по способу, указанному в при